全 文 ：China Pharmacy 2012Vol.23No.43 中国药房 2012年第23卷第43期
[ 5] Deepak M，Handa SS. Antiinflammatory activity and ch-
emical composition of extracts of Verbena officinalis[J].
Phytother Res，2000，14（6）：463.
[ 6] Hernández NE，Tereschuk ML，Abdala LR. Antimicrobi-
al activity of flavonoids in medicinal plants from Tafí del
Valle（Tucumán，Argentina）[J]. J Ethnopharmacol，2000，
73（1-2）：317.
[7] Delaveau P，Lallouette P，Tessier AM. Stimulation of the
phagocytic activity of R.E.S. by plant extracts[J]. Planta
Med，1980，40（1）：49.
[8] 桂承会，唐人九.马鞭草镇咳有效成分的研究[J].中药通
报，1985，10（10）：35.
[9] 江苏新医学院. 中药大辞典（上册）[M]. 上海：上海人民
出版社，1977：303.
[10] 张 涛，李 万，阮金兰.马鞭草化学成分对大鼠离体子
宫平滑肌条作用的研究[J].中国中医药科技，2001，8
（5）：313.
[11] Teborg D，Junior P. Iridoid glucosides from Penstemon
nitidus[J]. Planta Med，1991，57（2）：184.
[12] 张 涛，阮金兰，吕子敏.马鞭草环烯醚萜苷类成分的研
究[J].中草药，2000，31（10）：721.
[13] 刘宏飞，苏显英，彭 博，等. 阿昔洛韦在大鼠胃肠道吸
收的研究[J].中国新药杂志，2006，15（18）：1561.
[14] 王 娟，宋洪涛，周 欣，等. 西罗莫司大鼠在体肠吸收
动力学研究[J].中国药房，2009，20（1）：27.
（收稿日期：2012-01-06修回日期：2012-05-24）
Δ 江苏省中医药局科技项目（LZ09086）；江苏大学学生科研立项
项目（Y09A092）
＊硕士研究生。研究方向：中药活性成分分析。 E-mail：
wangqqmyself@sina.com
# 通讯作者：教授，博士研究生导师。研究方向：中药活性成分分
析与新药研发。电话：0511-88791564。E-mail：zhenouyang@ujs.edu.
cn
茅苍术水提液及其不同极性部位对幽门螺杆菌的体外抑制作用研究Δ
王庆庆1＊，庞 谦2，赵 明1，王文兵3，欧阳臻1#，吴 娜2（1.江苏大学药学院，江苏 镇江 212013；2.江苏大学京
江学院，江苏 镇江 212013；3.江苏大学生命科学研究院，江苏 镇江 212013）
中图分类号 R285；R97 文献标志码 A 文章编号 1001- 408（2012）43-4042-03
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2012.43.04
摘 要 目的：研究茅苍术水提液及其不同极性部位对幽门螺杆菌的体外抑制作用。方法：采用加热回流提取法制得茅苍术的水
提液，再采用有机溶剂萃取法将茅苍术的水提液分为石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水4个不同极性部位。采用浊度法检测茅苍术
水提液及其不同极性部位对幽门螺杆菌的抑制作用。结果：茅苍术水提液及其石油醚、乙酸乙酯、正丁醇部位均有抑菌作用，并且
随着药物浓度的增大，对幽门螺杆菌的抑制作用也增强；水部位没有抑菌作用。同一浓度下各部位抑菌效果强弱顺序为石油醚部
位＞乙酸乙酯部位＞正丁醇部位。结论：茅苍术水提液中石油醚部位的抑菌效果最好，提示茅苍术中对幽门螺杆菌作用的有效成
分存在于水提液中的低极性部位。本研究结果可为进一步对茅苍术药效成分的研究提供理论依据。
关键词 茅苍术；水提液；不同极性部位；幽门螺杆菌；体外抑菌试验
Study on the Inhibitory Effects of Aqueous Extracts and Its Different Polarity Parts of Atractylodes lancea
on Helicobacter Pylori in Vitro
WANG Qing-qing，ZHAO Ming，OUYANG Zhen（School of Pharmacy，Jiangsu University，Jiangsu Zhenjiang
212013，China）
PANG Qian，WU Na（Jingjiang College，Jiangsu University，Jiangsu Zhenjiang 212013，China）
WANG Wen-bing（Institute of Life Science，Jiangsu University，Jiangsu Zhenjiang 212013，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To investigate the inhibitory effect of aqueous extracts and its different polarity parts of Atractylodes
lancea on Helicobacter pylori（H pylori）in vitro. METHODS：Water extract was obtained by heat refluxing extraction，and extracts
were divided into 4polarities of solvents such as petroleum ether，ethyl acetate，butyl alcohol and aqueous part. The inhibitory ef-
fect of aqueous extracts and its different polarity parts of A. lancea on H pylori was observed by nephelometry. RESULTS：Except
for aqueous part，the aqueous extracts and its petroleum ether，ethyl acetate，butyl alcohol parts of A. lancea could inhibit the
growth of H pylori and the inhibitory effect was enhanced with the increase of extract concentration. The inhibitory effect of these
parts were petroleum ether＞ethyl acetate＞butyl alcohol. CONCLUSION：The petroleum ether part shows relatively strong inhibito-
ry effect，and low polarity part of aqueous extracts of A. lancea can effectively inhibits H pylor. The study further provides experi-
mental basis for the active component study.
KEY WORDS Atractylodes lancea；Aqueous extract；Different polarity parts；Helicobacter pylori；Bacteriostatic test in vitro
􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂
··4042
中国药房 2012年第23卷第43期 China Pharmacy 2012Vol.23No.43
幽门螺杆菌（Helicobacter Pylori，Hp）与人类慢性胃炎、消
化性溃疡、胃黏膜相关性淋巴组织（MALT）淋巴瘤和胃癌的发
生密切相关[1]。目前西医治疗Hp常采用2种以上抗菌药，并联
合使用抑酸药或铋剂，不仅不良反应大、服用剂量大，而且易
产生耐药性[2]，故采用中药和天然药物防治Hp感染成为了一
个新的治疗途径[3～7]。
茅苍术为菊科植物茅苍术 Atractylodes lancea（Thunb.）
DC.的干燥根茎，具有抗炎、抗菌、抗肿瘤、抗溃疡的作用[8]。本
试验研究茅苍术水提液及其不同极性部位的抗Hp作用，以筛
选茅苍术抗Hp的活性部位，筛选新的抗Hp药物，为我省道地
药材茅苍术的开发利用提供理论依据。
1 仪器与材料
1.1 仪器
722型分光光度计（上海菁华科技仪器有限公司）；R-200
型旋转蒸发仪（瑞士Buchi公司）；HH系列数显恒温水浴锅（郑
州佳创仪器设备有限公司）。
1.2 试药
茅苍术采挖于江苏省句容茅山地区，经江苏大学药学院
欧阳臻教授鉴定为真品。甲硝唑片（扬州市星斗药业有限公
司，批号：32020575，规格：0.2g/片）；哥伦比亚琼脂、厌氧培养
罐、微需氧环境发生袋（德国Merck公司）；无菌羊血（金坛市欣
迪科技有限公司）；选择性抗生素（上海基伟生物科技有限公
司）；石油醚、乙酸乙酯、正丁醇（分析纯，国药集团化学试剂有
限公司）。
1.3 菌株
Hp菌株从江苏大学附属医院内镜室活检标本分离培养获
得。取江苏大学附属医院行消化系内窥镜检查患者的胃窦黏
膜（距幽门5cm内）活检组织标本，病理证实为胃癌，将活检新
鲜组织用接种环均匀涂于固体琼脂培养基上，微需氧环境、
37℃下培养，约72h后收集细菌。经观察菌落、细菌形态、尿
素酶、氧化酶和过氧化氢酶等一系列生化试验鉴定为 Hp 阳
性。
2 方法
2.1 供试溶液的制备
2.1.1 茅苍术水提液的制备 称取一定量的茅苍术药材粉
末，加入10倍体积水，加热回流提取2h，放冷，滤过，滤渣再加
10倍体积水，回流提取2h，滤过，合并滤液，于60℃下减压浓
缩至生药含量为1g·mL－1，即得茅苍术水提液。
将茅苍术水提液制备成生药含量分别为0.125、0.25、0.5、
1g·mL－1的供试药液（分别为茅苍术水提液①、②、③、④组），
贮藏，备用。
2.1.2 茅苍术水提液不同极性部位的制备 将茅苍术水提液
转入分液漏斗中，加入相同体积的石油醚，轻轻振摇，静置，待
溶液完全分层后放出下层水溶液，收集石油醚部分；下层水溶
液用同法再萃取3次；合并4次石油醚萃取液，在40℃下减压
浓缩回收石油醚，浓缩液干燥后即为茅苍术水提液的石油醚
部位。石油醚萃取后的剩余水溶液按上述方法再依次用乙酸
乙酯、正丁醇萃取，乙酸乙酯萃取液在40℃下减压浓缩，正丁
醇和剩余水溶液在60℃下减压浓缩，将浓缩液干燥即得乙酸
乙酯部位、正丁醇部位以及剩余水部位。茅苍术水提液不同
溶剂萃取部位浸膏得率见表1。
表1 茅苍术水提液不同溶剂萃取部位浸膏得率
Tab 1 Yield of different polarity parts of aqueous extract of
A. lancea
萃取部位
石油醚部位
乙酸乙酯部位
正丁醇部位
水部位
生药/g
20
20
20
20
浸膏重/mg
3.4
15.9
180.9
8 581.7
出膏率/％
0.017
0.080
0.900
42.900
将茅苍术水提液的石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部
位、剩余水部位的浸膏溶解于蒸馏水中，并按生药含量制备成
浓度为1.25、2.5、5、10g·mL－1的供试药液（分别为石油醚部
位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、水部位的①、②、③、④组），贮
藏，备用。
2.1.3 阳性药液的制备 取甲硝唑片1片，研成细粉，溶于1
mL蒸馏水中，制备成浓度为0.2g·mL－1的甲硝唑溶液。
2.2 菌悬液的制备
将受试菌在 Hp 血平板上传种3次，以保证其纯度及活
力。将培养72h 的菌株用 PBS 洗下后制成 PBS 菌悬液，于
600nm波长处测定吸光度（OD）值，菌悬液浓度稀释至1×108
cfu·mL－1。
2.3 抑菌试验
分别取10μL各组供试药液，以及10μL1×108cfu·mL－1的
菌悬液，混匀后均匀涂布于Hp血平板上。设置空白对照，即
加入10μL菌悬液和10μL PBS，在血平板上均匀涂开。阳性
药液同法涂布血平板。
将涂布好的血平板放入厌氧培养罐中，罐内放入微需氧
环境发生袋，于37℃微需氧培养（5％O2、10％CO2、85％N2）。
培养 72h 后，将每个血平板上的菌株用 PBS 洗下，制成菌悬
液，每组均稀释相同倍数至适当的浓度，采用比浊法[6]，用紫外
分光光度仪于600nm波长处测定OD值，记录抑制细菌生长的
情况。试验重复3次，取平均值。抑菌率＝（1－OD药物/OD空白对照）/
100％。
2.4 统计学方法
试验数据采用 SPSS 16.0软件进行处理，数据以x±s 表
示，计算半数抑菌浓度（MIC50）、90％抑菌浓度（MIC90），采用 t
检验作差异性分析。P＜0.05为差异有统计学意义。
3 结果
3.1 茅苍术水提液对Hp的抑制作用
茅苍术水提液对Hp具有一定的抑制作用，随着浓度增大
抑制作用明显增强，但水提液抑菌效果略低于甲硝唑溶液。茅
苍术水提液③组MIC50、MIC90分别为1.17、6.07g·mL－1。茅苍术
水提液对Hp的抑制作用见表2。
表 2 茅苍术水提液对Hp的抑制作用（x±s，n＝3）
Tab 2 Inhibitory effect of A. lancea on Hp（x±s，n＝3）
组别
空白对照组
甲硝唑组
茅苍术水提液①组
茅苍术水提液②组
茅苍术水提液③组
茅苍术水提液④组
浓度/g·mL－1
-
0.2
0.125
0.25
0.5
1
OD 值
0.683±0.056 1
0.253±0.034 6＊
0.676±0.035 3
0.575±0.069 8＊
0.492±0.020 8＊
0.398±0.045 6＊
抑制率/％
-
62.90
1.02
15.80
27.90
41.70
MIC 50/g·mL－1
1.17
MIC 90/g·mL－1
6.07
与空白对照组比较：＊P＜0.01
vs.blank control group：＊P＜0.01
··4043
China Pharmacy 2012Vol.23No.43 中国药房 2012年第23卷第43期
3.2 茅苍术不同极性部位对Hp的抑制作用
茅苍术水提液的4个不同极性部位对Hp的抑制作用差异
较大：石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位具有较好的抑
菌作用，并且随着浓度的增大抑制作用明显增强；水部位基本
没有抑菌作用。不同极性部位的抑菌作用大小顺序依次为：
石油醚部位＞乙酸乙酯部位＞正丁醇部位。经 t检验，石油醚
部位抑菌作用显著大于乙酸乙酯部位和正丁醇部位，乙酸乙
酯部位显著大于正丁醇部位（P＜0.01）。石油醚部位③组的
MIC50、MIC90分别为2.88、15.00g·mL－1；乙酸乙酯部位③组的
MIC50、MIC90分别为5.20、24.00g·mL－1；正丁醇部位③组的
MIC50、MIC90分别为7.46、37.00g·mL－1。茅苍术水提液不同极
性部位对Hp的抑制作用见表3。
表3 茅苍术水提液不同极性部位对Hp的抑制作用（x±s，
n＝3）
Tab 3 Inhibitory effect of different polarity parts of ague-
ous extract of A. lancea on Hp（x±s，n＝3）
组别
空白对照组
甲硝唑组
石油醚部位①组
石油醚部位②组
石油醚部位③组
石油醚部位④组
乙酸乙酯部位①组
乙酸乙酯部位②组
乙酸乙酯部位③组
乙酸乙酯部位④组
正丁醇部位①组
正丁醇部位②组
正丁醇部位③组
正丁醇部位④组
水部位①组
水部位②组
水部位③组
水部位④组
浓度/g·mL－1
-
0.2
1.25
2.5
5
10
1.25
2.5
5
10
1.25
2.5
5
10
1.25
2.5
5
10
OD 值
0.683±0.056 1
0.253±0.034 6＊
0.516±0.043 6＊
0.353±0.056 1＊
0.256±0.058 0＊
0.115±0.067 4＊
0.614±0.048 1
0.496±0.086 7＊
0.320±0.082 3＊
0.220±0.015 9＊
0.643±0.043 3
0.555±0.010 6＊
0.375±0.037 6＊
0.312±0.041 6＊
0.678±0.046 7
0.705±0.037 6
0.715±0.046 3
0.738±0.040 4
抑制率/％
-
62.90
24.50
48.30
65.60
83.20
10.10
27.40
53.10
67.80
5.86
18.70
45.10
54.30
0.73
-3.22
-4.68
-8.05
MIC 50/g·mL－1
2.88
5.20
7.46
MIC 90/g·mL－1
15.00
24.00
37.00
与空白对照组比较：＊P＜0.01
vs.blank control group：＊P＜0.01
4 讨论
本研究采用比浊法[9]测量菌液浓度，于600nm波长处测定
菌液的吸光度，该方法简单、快速、准确度高。本课题组前期
对茅苍术挥发性成分进行了深入研究，对茅苍术水提物的研
究也有一定基础[10，11]。由于中药一般使用水煎剂，所以本试验
研究了茅苍术水提液对的抑制作用；测定MIC50、MIC90时选取
的是各提取部位的中间浓度为代表。试验结果证明，茅苍术
水提液对具有抑制作用，可为茅苍术的开发利用提供理论基
础。
为寻找茅苍术水提液的有效物质基础，本研究还比较了
茅苍术水提液不同极性部位对Hp的生长抑制作用。在石油
醚、乙酸乙酯、正丁醇和水4个不同极性部位中，石油醚、乙酸
乙酯和正丁醇部位具有一定的抑菌作用，而水部位没有抑菌
作用。因此，茅苍术具有抑菌作用的主要活性部位为极性较
小的部位，即石油醚和乙酸乙酯部位，此结论可为今后对茅苍
术抑制幽门螺杆菌有效成分进行分离、鉴定奠定基础。一直
以来，对茅苍术挥发性成分的研究较为深入，而非挥发性成分
研究较少，进一步研究茅苍术水提液的化学成分，将为茅苍术
的深入研究与开发利用提供依据。
参考文献
[1] 范学工，夏华向.幽门螺杆菌感染·基础与临床[M].长沙：
湖南科技出版社，1997：98.
[2] 周殿元，陈 烨.幽门螺杆菌感染的药物治疗新进展[J].
世界华人消化杂志，2005，13（2）：157.
[3] 胡 伟，代 薇，杨宇梅，等.石榴皮对幽门螺杆菌的体外
抑菌实验研究[J].现代消化及介入诊疗，2006，11（1）：6.
[4] 戴小军，刘延庆，陈红菊，等.野艾组分对幽门螺杆菌的体
外抑菌作用 [J].世界华人消化杂志，2006，14（11）：
1115.
[ 5] Israel Castillo-Juáreza，Violeta González，Héctor Jaime-
Aguilar. Anti-Helicaobacrer pylori activity of plants used
in Mexican traditional medicine for gastrointestinal disor-
ders[J]. J Ethnopharmacol，2009，122（ ）：402.
[ 6] Wang YC，Huang TL. Anti-Helicobacter pylori activity of
Plumbago zeylanica L.[J]. FEMS Immunol Med Microbi-
ol，2005，43（3）：407.
[ 7] Ustün，Ozcelik O，Akyóön，et al. Flavonoids with anti-
helicobacter pylori activity from Cistus laurifolius leaves
[J]. J Ethnopharmacol，2006，108（3）：457.
[8] 欧阳臻，江涛涛，缪亚东，等.苍术的化学成分、道地性和
药理活性研究进展[J].时珍国医国药，2006，17（10）：
1936.
[9] 熊海燕，王为国，王存文，等. 介绍测量菌液浓度的一种
方法[J]. 四川食品与发酵，2003，4：45.
[10] 欧阳臻，杨 凌.茅苍术挥发油GC-MS指纹图谱研究[J].
药学学报，2007，42（9）：968.
[11] 欧阳臻，杨 凌，宿树兰，等. 超临界CO2萃取-气相色谱-
质谱联用分析茅苍术挥发性成分[J].药物分析杂志，
2007，27（9）：1333.
（收稿日期：2011-12-09修回日期：2012-04-27）
《中国药房》杂志——《中国科学引文数据库》（CSCD）来源期刊，欢迎投稿、订阅
··4044