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木菠萝叶中水溶性黄酮苷的分离、鉴定和测定



全 文 :[17] Lin X,Zhou X,Wang F,et al. A new cytotoxic sesquiterpene
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木菠萝叶中水溶性黄酮苷的分离、鉴定和测定
潘小姣, 韦海红, 邓家刚* , 韦志英, 樊柳园
(广西中医药大学,广西 南宁 530200)
收稿日期:2015-08-30
基金项目:广西中药药效研究重点实验室 (省级)开发课题 (10-046-04-K9) ;广西中医药大学中药学博士点建设工程开发课题
(J13047) ;广西研究生教育创新计划资助项目 (YCSZ2014172)
作者简介:潘小姣 (1975—) ,女,教授,从事中药活性成分筛选及其质量标准研究。Tel: (0771)3137577,E-mail:pxjgx@ aliyun. com
* 通信作者:邓家刚 (1953—) ,男,教授,博士生导师,从事中药药性理论与药效筛选研究。E-mail:dengjg@ tom. com
摘要:目的 分离、鉴定木菠萝 Artocarpus heterophyllus Lam. 叶中的水溶性黄酮苷,并采用 HPLC 法测定其含有量。
方法 木菠萝叶极性部位浸膏通过大孔树脂、凝胶和制备液相色谱等方法进行分离纯化,波谱数据鉴定所得化合物的
结构。分析采用 Thermo Syncronis C18色谱柱 (250 mm × 4. 6 mm,5 μm) ;检测波长 338 nm;流动相乙腈-0. 1%磷酸
(19 ∶ 81) ;体积流量 1 mL /min;柱温 30 ℃。结果 从该植物中首次分离鉴定出一种水溶性黄酮苷—牡荆素木糖苷,
在 0. 537 7 ~ 10. 754 0 μg范围内线性关系良好 (r = 0. 999 4) ,平均回收率为 96. 24% (RSD = 0. 91%)。在 4 月份,其
含有量最低 (0. 605 5 mg /g) ,12 月份最高 (3. 591 2 mg /g) ,在成熟叶、嫩叶、黄色落叶中的含有量分别为 1. 743 1、
0. 324 5、4. 034 5 mg /g。结论 牡荆素木糖苷主要存在于木菠萝黄色落叶中。
关键词:木菠萝;叶;水溶性黄酮苷;牡荆素木糖苷;分离鉴定;HPLC
中图分类号:R284. 1 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2016)04-0863-06
doi:10. 3969 / j. issn. 1001-1528. 2016. 04. 031
Isolation,identification and determination of water-soluble flavonoid glycosides
in the leaves of Artocarpus heterophyllus
PAN Xiao-jiao, WEI Hai-hong, DENG Jia-gang* , WEI Zhi-ying, FAN Liu-yuan
(Guangxi University of Chinese Medicine,Nanning 530200,China)
ABSTRACT:AIM To isolate and identify the water-soluble flavonoid glycosides from the leaves of Artocarpus
heterophyllus Lam. and to determine their contents by HPLC. METHODS The polar fraction extract of leaves of
Artocarpus heterophyllus was isolated and purified by macroporous resin,Sephadex LH-20 gel and preparative HPLC
column. The structures of obtained compounds were identified by spectral data. The analysis was performed on
Thermo Syncronis C18 column (250 mm ×4. 6 mm,5 μm) ,detection wavelength was set at 338 nm,mobile phase
was acetonitrile-0. 1% phosphoric acid (19 ∶ 81) ,flow rate was 1 mL /min,and column temperature was main-
tained at 30 ℃ . RESULTS A water-soluble flavonoid glycoside,vitexin-2″-O-xyloside,was isolated and identi-
fied from this plant for the first time,which showed a good linear relationship within the range of 0. 537 7-
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10. 754 0 μg (r = 0. 999 4)with the average recovery of 96. 24% (RSD =0. 91%). The content of vitexin-2″-O-
xyloside was the lowest in April (0. 605 5 mg /g) ,which was the highest in December (3. 591 2 mg /g). In the
mature leaves,tender leaves and yellow deciduous leaves,the contents of this compound were 1. 743 1,0. 324 5
and 4. 034 5 mg /g,respectively. CONCLUSION Vitexin-2″-O-xyloside mainly exists in the yellow deciduous
leaves of A. heterophyllu.
KEY WORDS:Artocarpus heterophyllu Lam.;leaves;water-soluble flavonoid glycosides;vitexin-2″-O-xyloside;
isolation and identification;HPLC
木菠萝 Artocarpus heterophyllus Lam. 为桑科木
菠萝属植物,又称木波罗、菠萝蜜、树菠萝、蜜冬
瓜、牛肚子果等,我国引入该植物已有一千多年的
历史,目前在广西、广东、海南、云南和福建等南
方地区均有栽培。《本草纲目》记载,“菠萝蜜生
交趾南番诸国。内肉层叠如桔,食之味至甜美如
蜜,瓤韦,甘香微酸,止渴解烦,醒酒益气,令人
悦泽,核中仁,补中益气,令人不饥轻健。”木菠
萝果肉、果皮、种子和树叶都可入药[1],其中木
菠萝叶具有降血糖功效[2-3],含有黄酮类化合物,
但相关研究大多集中在查耳酮等脂溶性黄酮苷元,
鲜有对水溶性黄酮苷类化合物的报道[4-6]。前期课
题组发现,其极性部位具有良好的降血脂作用,而
且主要含有多糖和水溶性黄酮苷类化合物。本实验
旨在阐明木菠萝叶中主要水溶性黄酮苷类化合物的
结构,同时对其进行含有量测定,为充分开发和利
用其药用价值奠定基础。
1 仪器与试药
1. 1 仪器 LC-8A 半制备高效液相色谱仪 (日本
岛津公司) ;Bruker Avance Ⅲ-600 超导核磁共振波
谱仪 (德国 Bruker 公司) ;VG Autopec-3000 质谱
仪 (美国 Waters公司) ;TU-1901 双光束紫外可见
分光光度计 (北京普析通用仪器有限公司) ;安捷
伦 1260 型高效液相色谱仪,包括 G1311C 四元梯
度泵、G1329B 自 动 进 样 器、 G1316 柱 温 箱、
ELSEA蒸发光散射检测器、G1314B1260VWD 检测
器 (美国安捷伦公司) ;TGL-16G 离心机 (上海安
亭科学仪器厂) ;KQ5200B超声波清洗器 (昆山市
超声仪器有限公司) ;SQP 电子天平 (赛多利斯科
学仪器有限公司) ;101A-3E 电热鼓风干燥箱 (上
海实验仪器厂有限公司) ;粉碎机 (石家庄本辰机
电设备有限公司) ;优普 UPC-Ⅱ-10T 纯水仪 (四
川优普超纯科技有限公司)。
1. 2 试药 大孔吸附树脂 (南开大学化工厂) ;
Sephadex LH-20凝胶 (瑞典 Parmacia 公司)。甲醇、
乙腈为色谱纯 (成都市科龙化工试剂厂) ;其他试
剂均为分析纯。木菠萝叶于 2013 年 7 月 ~ 2014 年 6
月中旬采自广西中医药大学明秀校区药用植物园,
经广西中医药大学中药鉴定教研室田慧教授鉴定为
桑科木菠萝属植物木菠萝 Artocarpus heterophyllus
Lam. 的叶,而且其茎枝和果实也均采自该地。
2 方法与结果
2. 1 木菠萝叶中牡荆素木糖苷的分离与鉴定
2. 1. 1 提取与分离 取木菠萝叶粗粉 10 kg,加入
15 倍量 60%乙醇,加热回流提取 2 次,每次 2 h,
放冷,滤过,合并滤液,45 ℃下减压回收溶剂至
无醇味,4 ℃下静置 24 h,滤过,滤渣即为木菠萝
叶非极性部位浸膏 (1. 7 kg) ,而滤液于 45 ℃下减
压回收溶剂,得到木菠萝叶极性部位浸膏
(1. 3 kg)。取极性部位浸膏 1 000 g,加水溶解,
滤过,滤液用大孔吸附树脂柱进行分离,依次用纯
水、60%乙醇进行洗脱,其中 60%乙醇洗脱液减
压回收溶剂至无醇味,真空干燥,得到 60%乙醇
洗脱部位浸膏 (220 g)。取出 2 g,用适量水溶解,
葡聚糖凝胶柱进行分离,依次用纯水、10% ~ 95%
乙醇进行洗脱,其中 30%乙醇洗脱部位减压回收
溶剂后,反向高效液相制备色谱作进一步分离纯
化,采用菲罗门 C18色谱柱 (250 mm × 10 mm,
5 μm) ;流动相为乙腈 ∶ 水 (20 ∶ 80) ;检测波长
338 nm;柱温 25 ℃;体积流量 5 mL /min。通过反
复制备液相纯化,最终得到化合物 1 (80. 5 mg)。
2. 1. 2 结构鉴定 化合物 1 为黄色无定型粉末,
盐酸-镁粉反应呈阳性,易溶于水、甲醇、乙醇,
微溶于丙酮、乙酸乙酯,难溶于氯仿、石油醚。
mp:209 ~ 211 ℃,UV max:MeOH 215,249sh,
271,391sh,338 nm;MeOH + NaOMe 214,259sh,
280, 299sh, 330, 346sh, 394 nm; MeOH +
NaOAc 219,252sh,279,326sh,365 nm。ESI-MS
m / z:563[M-H]-。1H-NMR、13 C-NMR 数据见表 1,
与文献 [7]报道基本一致,故鉴定为牡荆素-2″-
O-木糖苷 (vitexin-2″-O-xylosiden) ,简称牡荆素木
糖苷,化学结构见图 1。
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表 1 化合物 1 的1 3C-NMR和1H-NMR数据 (DMSO-d6,500 MHz)
Tab. 1 13C-NMR and 1H-NMR data of compound 1 (DMSO-d6,500 MHz)
位置 文献 δC 实验 δC 实验 δH 文献 δH
2 162. 45 163. 41
3 101. 76 102. 01 6. 49(1H,s) 6. 87(1H,s)
4 180. 53 181. 64
5 160. 43 160. 76 13. 04(1H,s) 13. 23(1H,s)
6 100. 13 97. 66 5. 86(1H,s) 6. 32(1H,s)
7 161. 56 162. 29
8 104. 24 103. 27
9 157. 08 156. 19
10 101. 68 103. 37
1 121. 68 121. 54
2 128. 43 128. 46 7. 91(2H,d,J = 8. 6 Hz,H-2,H-6) 8. 11(2H,d,J = 8. 8 Hz,H-2,H-6)
3 116. 26 115. 51 6. 84(2H,d,J = 8. 6 Hz,H-3,H-5) 6. 99(2H,d,J = 8. 8 Hz,H-3,H-5)
4 161. 56 160. 16
5 116. 08 115. 51 6. 84(2H,d,J = 8. 6 Hz,H-3,H-5) 6. 99(2H,d,J = 8. 8 Hz,H-3,H-5)
6 127. 86 128. 46 7. 91(2H,d,J = 8. 6 Hz,H-2,H-6) 8. 11(2H,d,J = 8. 8 Hz,H-2,H-6)
1″ 71. 85 71. 08 4. 89(1H,d,J = 10. 2 Hz) 4. 76(1H,d,J = 10. 0 Hz)
2″ 81. 54 81. 33
3″ 78. 49 77. 86
4″ 70. 59 69. 67 4. 11 ~ 2. 80(6H,H-2″ ~ 6″,overlapped) 4. 10 ~ 2. 31(6H,H-2″ ~ 6″,overlapped)
5″ 80. 59 80. 39
6″ 61. 33 60. 50
1 105. 32 105. 33 4. 10(1H,d,J = 11. 0 Hz) 3. 87(1H,d,J = 11. 5 Hz)
2 73. 54 73. 20
3 75. 80 75. 39
4 69. 51 68. 88 3. 98 ~ 2. 80(5H,H-2~ 5,overlapped) 4. 10 ~ 2. 31(5H,H-2~ 5,overlapped)
5 65. 33 65. 02
图 1 牡荆素木糖苷的化学结构
Fig. 1 Chemical structure of vitexin-2″-O-xyloside
2. 2 牡荆素木糖苷的纯度检测
2. 2. 1 供试品溶液的制备 取牡荆素木糖苷
13. 4 mg,甲醇定容至 2 mL,配成 6. 7 mg /mL供试
品溶液,离心 10 min (13 000 r /min) ,取上清液,
即得。
2. 2. 2 色谱条件 Thermo Syncronis C18色谱柱
(250 mm ×4. 6 mm,5 μm) ;流动相为乙腈-0. 1%
磷酸 (20 ∶ 80) ;蒸发温度为 90 ℃;雾化温度为
50 ℃;体积流量为 1. 6 mL /min;进样量为 4 μL。
2. 2. 3 检测方法和结果 将“2. 2. 1”项下供试品
溶液在“2. 2. 2”项色谱条件下平行检测 3 次,计算
供试品中牡荆素木糖苷的峰面积。结果,甲醇空白
溶剂对纯度检查无干扰,3 次峰面积均大于 98%
(RSD =0. 53%) ,平均值达到 98. 6%,见图 2。
1. 牡荆素木糖苷
1. vitexin-2″-O-xyloside
图 2 牡荆素木糖苷的 HPLC色谱图
Fig. 2 HPLC chromatogram of vitexin-2″-O-xyloside
2. 3 牡荆素木糖苷的含有量测定
2. 3. 1 药材前处理 将不同月份采集的木菠萝叶
(每份样品都包括随机采集的嫩叶和成熟叶)自然
晒干,粉碎后过 80 目筛,得到 12 批木菠萝叶粉
末,置于干燥器中备用。
取同一月份 (1 月份)采集的木菠萝嫩叶、成
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熟叶、黄色落叶,自然晒干,粉碎后过 80 目筛,
得到 3 批成熟度不同的木菠萝叶粉末,置于干燥器
中备用。
将木菠萝茎枝和果实中的种子、果肉、果皮切
片后置于鼓风干燥机中,50 ℃下烘干,粉碎后过
80 目筛,得到茎枝、果皮和种子的粉末。然后,
将果肉用剪刀剪成细小颗粒,置于鼓风干燥机中,
50 ℃下烘干,得到果肉的细颗粒物。上述样品均
置于干燥器中备用。
2. 3. 2 供试品溶液的制备 精密称取不同月份、
成熟度的木菠萝叶粉末,木菠萝茎枝、果皮和种子
粉末,木菠萝果肉细颗粒各 2. 00 g,置于 50 mL具
塞锥形瓶中,精密加入 30%甲醇溶液 20 mL,称定
质量,浸泡 30 min,室温下超声 (功率 250 W、频
率 50 kHz)40 min 后取出,放冷,30%甲醇溶液
补足减失质量,过滤,续滤液离心 10 min (13 000
r /min) ,取上清液,即得。
2. 3. 3 色谱条件 Thermo Syncronis C18色谱柱
(250 mm ×4. 6 mm,5 μm) ;流动相乙腈-0. 1%磷
酸 (19 ∶ 81) ;检测波长 338 nm;体积流量
1 mL /min;柱温 30 ℃;进样量 20 μL。
2. 3. 4 对照品溶液的配制 精密称取牡荆素木糖
苷对照品 10. 754 6 mg,置于 2 mL量瓶中,30%甲
醇溶液定容,配制成 5. 377 3 mg /mL 对照品母液,
即得。
2. 3. 5 线性关系 精密量取 “2. 3. 4”项下牡荆
素木糖苷对照品母液 1 mL,置于 10 mL 量瓶中,
30%甲醇溶液定容,配制成 0. 537 7 mg /mL对照品
溶液。精密吸取 1、3、6、9、12、15、20 μL,在
“2. 3. 3”项色谱条件下分别进样检测,以牡荆素
木糖苷的峰面积为纵坐标 (Y) ,进样量为横坐标
(X)绘制标准曲线,得到回归方程 Y = 857. 96X -
14. 405 (r = 0. 999 4) ,表明牡荆素木糖苷在
0. 537 7 ~ 10. 754 0 μg范围内线性关系良好。
2. 3. 6 精密度试验 精密吸取牡荆素木糖苷对照
品溶液 (0. 166 4 mg /mL)20 μL,在 “2. 3. 3”项
色谱条件下检测,重复进样 6 次。结果,牡荆素木
糖苷峰面积 RSD为 0. 37%,表明仪器精密度良好。
2. 3. 7 检测限及定量限 精密吸取 0. 166 4 mg /mL
对照品溶液 1 mL,稀释成相应的倍数,在
“2. 3. 3”项色谱条件下检测。结果,对照品峰与
仪器噪音峰的峰高之比约为 10 ∶ 1 时,定量限为
0. 004 2 μg;对照品峰与仪器噪音峰的峰高之比约
为 3 ∶ 1 时,检测限为 0. 001 4 μg。
2. 3. 8 稳定性试验 精密称取 1 月份木菠萝叶粉
末 2. 00 g,按 “2. 3. 2”项下方法制备供试品溶
液,分别于 0、4、8、12、16、24 h 在 “2. 3. 3”
项色谱条件下检测。结果,牡荆素木糖苷峰面积
RSD为 0. 82%,表明供试品溶液在 24 h内稳定。
2. 3. 9 重复性试验 精密称取 4 月份木菠萝叶粉
末 6 份,每份 2. 00 g,按 “2. 3. 2”项下方法制备
供试品溶液,在 “2. 3. 3”项色谱条件下检测。结
果,牡荆素木糖苷峰面积 RSD 为 1. 99%,表明该
方法重复性良好。
2. 3. 10 加样回收率试验 精密称取含有量已知的
4月份木菠萝叶粉末 6 份,每份 1. 00 g,分别置于
50 mL具塞锥形瓶中。另取牡荆素木糖苷对照品适
量,30%甲醇制成 0. 607 6 mg /mL 对照品溶液。每
份样品分别精密加入上述对照品溶液 1 mL 和 30%
甲醇溶液 19 mL,按“2. 3. 2”项下方法制备供试品
溶液,在“2. 3. 3”项色谱条件下检测,计算回收
率,结果见表 2。由表可知,该方法的回收率良好。
表 2 加样回收率试验结果 (n =6)
Tab. 2 Results of recovery tests (n =6)
编号
称样量 /
g
原有量 /
mg
加入量 /
mg
测得量 /
mg
回收率 /
%
平均回收
率 /%
RSD /
%
1 1. 062 5 0. 643 3 0. 607 6 1. 223 8 95. 53
2 1. 059 5 0. 641 5 0. 607 6 1. 227 0 96. 36
3 1. 035 3 0. 626 9 0. 607 6 1. 216 4 97. 03 96. 24 0. 91
4 1. 083 6 0. 656 1 0. 607 6 1. 233 5 95. 03
5 1. 052 9 0. 637 5 0. 607 6 1. 229 1 97. 36
6 1. 015 3 0. 614 8 0. 607 6 1. 199 0 96. 15
2. 3. 11 样品含有量的测定 按 “2. 3. 2”项下方
法制备供试品溶液,在 “2. 3. 3”项色谱条件下检
测,结果见表 3 和图 3。
表 3 不同样品中牡荆素木糖苷的含有量 (n =2)
Tab. 3 Contents of vitexin-2″-O-xyloside in different sam-
ples (n =2)
样品
含有量 /
(mg·g - 1) 样品
含有量 /
(mg·g - 1)
1 月 1. 127 4 嫩叶(1 月) 0. 324 5
2 月 0. 706 6 老叶(1 月) 1. 743 1
3 月 0. 847 3 黄色落叶(1 月) 4. 034 5
4 月 0. 605 5 种子 —
5 月 1. 665 2 果皮 —
6 月 1. 743 2 果肉 —
7 月 1. 612 9 茎枝 —
8 月 1. 930 7
9 月 2. 212 9
10 月 2. 513 4
11 月 3. 377 3
12 月 3. 591 2
注:“—”表示未检测到牡荆素木糖苷
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1. 牡荆素木糖苷
1. vitexin-2″-O-xyloside
图 3 HPLC色谱图
Fig. 3 HPLC chromatograms
3 讨论
牡荆素木糖苷是二糖黄酮碳苷,为首次从木菠
萝叶及桑科植物中分离得到的化合物。前期课题组
发现,木菠萝叶极性部位具有良好的降血脂活性,
而牡荆素木糖苷是其中主要的黄酮苷类化合物,故
可能是降血脂活性成分之一。鉴于大部分黄酮碳苷
都具有良好的药理活性[8-10],对该化合物的药理活
性还亟待一步深入研究和开发利用。
在 1 ~ 12 月份的木菠萝叶中,牡荆素木糖苷的
含有量在 0. 605 5 ~ 3. 591 2 mg /g 之间,其中 4 月
份最低,而 12 月份最高,随着月份增加有上升趋
势,在 12 月份时比 4 月份增加了约 5 倍。在对同
一月份 (1 月份)分别采集的嫩叶、成熟叶、黄色
落叶进行含有量测定时,发现叶子生长时间越长,
该化合物含有量越大,而且在黄色落叶中含有量最
高,可能是因为其中的糖类、果胶类等营养成分流
失,导致牡荆素木糖苷被高度富集所致。而且,一
年中的 2 ~ 4 月份是春季,木菠萝树上的嫩叶偏多,
成熟叶偏少,这也从另一个侧面解释了这几个月木
菠萝叶中牡荆素木糖苷含有量较低的现象。另外,
木菠萝的茎枝、果皮、果肉、种子中均未检测到该
化合物。由此可见,牡荆素木糖苷主要分布在木菠
萝叶,尤其是老叶和落叶中,这也和银杏叶、荔枝
叶等叶类药材中黄酮的合成积累过程相似[11-13]。
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小茴香及其盐制品中挥发性成分的差异
于卉娟1,2, 江振作1,2, 杨 帆1,2, 王跃飞1,2*
(1. 天津市现代中药重点实验室,天津中医药大学,天津 300193;2. 中药新药研发中心,天津国际生物
医药联合研究院,天津 300457)
收稿日期:2015-07-30
基金项目:国家科技基础性工作专项 (2014FY111100)
作者简介:于卉娟 (1988—) ,女,硕士生,研究方向为中药化学。E-mail:yuhuijuan@ 163. com
* 通信作者:王跃飞 (1980—) ,男,博士,副研究员,硕士生导师,研究方向为中药药效物质基础及质量控制。E-mail:Wangyuefei
_ 2006@ hotmail. com
摘要:目的 研究小茴香 (fennel)及其盐制品中挥发性成分的差异。方法 顶空气相色谱-质谱 (HS-GC /MS)法鉴
定挥发性成分,顶空气相色谱 (HS-GC)法测定其相对含有量,EZinfo软件对这些成分进行分析。结果 小茴香中鉴
定出 18 个挥发性成分,而其盐制品中鉴定出 16 个。其中,反式茴香脑、爱草脑、L-葑酮和 D-柠檬烯是小茴香及其盐
制品的主要成分,小茴香中这 4 种成分的相对含有量分别为 (68. 71 ± 5. 08)%、(10. 90 ± 4. 23)%、(7. 63 ± 1. 18)%、
(6. 13 ± 1. 87)%、而盐制品中分别为 (51. 30 ± 10. 14)%、(10. 09 ± 7. 95)%、(7. 76 ± 7. 22)%、(17. 78 ± 1. 99)%、
结论 盐制后,小茴香中反式茴香脑相对含有量下降,而 D-柠檬烯上升。
关键词:小茴香;盐制品;挥发性成分;HS-GC /MS;HS-GC
中图分类号:R284. 1 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2016)04-0868-05
doi:10. 3969 / j. issn. 1001-1528. 2016. 04. 032
Difference of volatile constituents in fennel and its salted product
YU Hui-juan1,2, JIANG Zhen-zuo1,2, YANG Fan1,2, WANG Yue-fei1,2*
(1. Tianjin Municipal Key Laboratory of Modern Chinese Medicine,Tianjin University of Traditional Chinese Medicine,Tianjin 300193,China;2. Re-
search and Development Center of TCM,Tianjin International Joint Academy of Biotechnology and Medicine,Tianjin 300457,China)
ABSTRACT:AIM To study the difference of volatile constituents in fennel and its salted product. METHODS
Headspace gas chromatography-mass spectrometry (HS-GC /MS)was used for the identification of volatile con-
stituents. Headspace gas chromatography (HS-GC)was employed to determine their relative contents. Then these
constituents were analyzed by EZinfo software. RESULTS Eighteen and sixteen volatile constituents were identi-
fied in fennel and its salted product,respectively. Among them,trans-anethole,estragole,L-fenchone and D-li-
monen were main constituents. The relative contents of these four constituents in fennel were (68. 71 ± 5. 08)%,
(10. 90 ± 4. 23)%,(7. 63 ± 1. 18)% and (6. 13 ± 1. 87)% ,while those in its salted product were (51. 30 ±
10. 14)%,(10. 09 ± 7. 95)%,(7. 76 ± 7. 22)% and (17. 78 ± 1. 99)%,respectively. CONCLUSION After
being processed with salt,the relative content of trans-anethole in fennel decreases,whlie that of D-limonen increa-
ses.
KEY WORDS:fennel;salted product;volatile constituents;HS-GC /MS;HS-GC
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