全 文 ：.科研简报
一 `
(女淦 舟 成质胜 徐准砰 究
北京中医学院中药化较
木文应用薄层层析的方法 , 对女金丹中的主要
药物结合薄层分光光度法ml 定了女金丹中水苏碱和
丹皮酚的含量 , 从而提出了较完善的质量标准 。
定 性 分 析
一 、 供试液的制备 : `
1
. 取样品。女金冉)` 丸 , 加适量硅藻土夯散 。
置沙氏提取器中 , 加入乙醚回流提取 7 h 。 乙醚提取
液浓缩至约 5垃 1, 供检丹皮用 。
2
. 取样品一丸 , 加适量硅藻土分散 。 置 沙 氏
提取器中 , 加入乙酸乙醋回流提取 h4 , 提取液浓缩
至为 5m l , 供检 肉桂用 。
3
. 取样品半丸 加适量硅藻土分散 。 置 具塞
三角瓶中 , 加入 20 m l无水乙醇冷溃 2化。 过滤 . 滤
浪 农缩近干 , 加 入 l m l 甲醇溶解残渣 , 供 检 查 黄
琴 、 白芍用 。
4
. 取样品 1 丸 , 加适量硅藻土分散 。 加 入浓
氨水 1 nI l 碱化 , 置沙氏提取器中 , 加氯仿回流提取
6 h
。 提取液回收氯仿至小体积 将其通过 lg 的小氧
化铝柱 , 用氯仿 2 , m t映脱 . 洗脱液浓缩侄约 Zm l,
供检元胡用 。
.5 取样品一丸 、 加适量硅藻土分散 。 置 沙 氏
抚取 器中, 加 入甲醇一甲酸 (巧 : 5) 的混合溶刊回流
捉取 6 h , 提取了份农缩至约 5 m l , 供检 当归 、 川芍用 。
6
, 取样品一丸 , 加适量硅藻 土分散 。 置 沙 民
提取器中 , 以下按文献 (中草药 1 9 8 7年第 2 期 12 页 )
上方法操作 制成样品液 、 供检益母草用 。
二 、 已知品对丽液的制备 :
1
. 取丹皮 、 肉桂 、 黄芬 、 元胡 、 当归 、 川芍 、
白芍 、 益母草各 1 9 , 按共试液制备项下方法制成相
应的原药材对照液 。
2
. 取丹皮酚 、 桂皮醛、 黄答试 、 延胡索乙素 、
阿魏酸 、 芍药试 、 益母草碱 、 水苏碱各适量 , 加入
适量相应的溶刊溶解 , 制成标准品对照液 。
三 、 空白对照液的制备 : 按照女金丹的处方 ,
从中除去被俭药材作为该药材的阴性对照液 . 如检
查益母草时 , 即以去益母草的女金丹样品作为阴性
对照 一 由于当归 、 川芍均含有阿魏酸 , 故需做去当
归 川苟的女金丹样品阴性对照液 。
四 、 展开剂系统 ( s ) :
1
. 环己烷一 乙峻乙醋一浓盐 酸 (1 5 : 3 : l d ) 。
4 2
唐 二致 王晓强 陆蕴如
2
. 石油醚 ( 6 0℃一 9 0℃ ) 一乙酸乙醋 ( 5 . 5 : 1 . 5 ) 。
3
. 乙酸乙醋一丁酮山 36 %酷酸一水 ( 10 : 7 : 5 : 3 ) 的
上层。 4 . 氯仿一甲醇 ( :8 1 ) 。 5 . 环己烷一丙酮 ( 7 :
3)
。
6
. 氯仿一苯一甲醇 ( 2 : 2 : 0 . 6) 。 7 . 乙酸乙酣
一冰酷酸一水 (1 2 : 3 : 5) 的上层 。 8 . 正丁醇一浓盐
酸一乙酸乙醋 ( 1 2 : 4 . 5 : 1 . 5 )
五 、 显色荆 ( O ) :
O 。
0 0 0
O O
口 口
户 2 3 而
· 了 · O
`
叮 ’ O
0 0 0
J 2 3 4 1 2 3 4
丹皮酚标准品
丹皮对照液
样品供试液一 1
去丹皮样品液
S
一 I D 一 1
桂皮醛标准品 1
肉桂对照液 2
样品供试液一 2 3
去肉桂样品液 . 4
S
一
Z D 一 2
黄琴试标准品
黄答对照液
样品供试液一3
去黄芬样品液
S
一 3 D 一 1
,且
Z
n舀孟1ō,ó自口J恤
下 一巨…币匡_…到乙二i , 芍药试标准品
2
. 白芍对照液
3
. 丹皮对照液
4 样品供试液一 3
5
. 去白芍 、月一皮样品液
S
一 4 D一 3
1
· 延胡索乙素
2
. 元胡对照液
样品供试液 一 4
去元胡样品浓
S 一 S D 一 4
1
. 阿魏酸标准品
2
. 当归对照液
3
. 川苟对照液
4
. 样品供试液一 5
5
. 去当归 、 川芍样品液
S一 6 D
一 5
标对试草芡诚草芝供6母邵赫瑞秘黔毓淤粼:一{燕漂藻氢…琶者胡索
0 O
草供母芡.形、剐6御撇-)4却脚椒妇翻7D.3对东试卜草孚
一。。
0 。 。 {一 一一一 一— _ _ J二一 ` ` : `生 卫
S
一 S D 一 4
1
.
4 % 兰氯化铁乙醇液 。 2 . 2 , J一二硝基苯 腆
试荆。 3 . 10 %硫酸乙醇液 , 喷后于 1 0 5℃ 烘烤 2~ 3
m谊 。 4 . 改良碘化秘钾显色剂 。 5 . 三氯化铁一铁
氰化钾显色 .tlJ 。
冲 成 演
六 层析与结果:
取硅胶G 预制板( 青岛海洋化工厂出品) 。 分 别
以样品液和相应对照液 2一1 0 川 点样 , 彭相应的展 -
开剂展开 , 展距 10 一 1 c5 口 , 以相应显色剂 显色 ,
结果见图 1一 8 。
定 量 分 析
一 、 仪器和试药 :
薄层扫弓位仪 : 岛津 C S一 9 10 型 (带 DM 一 6 型积分
仪 ) 。 硅胶 G 预制板 (青岛海洋化工厂 ) 。 丹皮酚 、 水
苏碱经测定为纯品 。 女金丹为北京同仁堂出品 。
二 、 丹皮酚的含 , 测定 :
1
. 仪器参数 : 测定 波 长 又S二 5 3O n m , 参比波
长之R = 7 2 o n rn , 反射法锯齿扫描 , 扫描速度为 20 m m
/ 。 in , 纸速为 20 m m / m in , 狭 缝 1 . 25 m m x l . 25
m m
,
C H = 1
,
S X = 3
。
2
. 标准曲线 : 精密称取丹皮 酚 5 . o m g , 置 于
5 m l 容量瓶中 , 加 入氯仿溶解并稀释至刻度 。 用定
量毛细管准确吸取 2、 4、 6 、 8 、 10 川点在同一块硅胶 G
板上 , 用 S 一 1上行展开 1 c0 m 。 挥尽展开剂 , 均匀喷
以 D 一 1 显色后 . 立即用一块同样大小的洁净玻璃板
盖上 , 四周密封即可测定 。 以点样旦为横座标 、 面
积积分值为纵座标做图 , 得到一条过原点的直线 。 `
线性范围 : 1升g一 9产g 。 回归方程为 : y 二 0 . 16 8 o x +
0
.
0 4 2 0 0
, r = 0
.
9 9 9 9
。
3
, 精密度试验 : 在同一块薄层板上点七 个 相
同量的女金丹样品点 。 以下按标准曲线项下方法操
作 。 七个点的面积积分 值 平 均 值 又 = 0 . 67 , S 二 =
0
.
0 8 1
,
C V = 1
.
21 %
, 故可应用随行标准品法进行
样品测定 。
4
. 空白群药加纯品回收率试验 : 精密称取 适
量丹皮酚标准品 , 加入到适量按处方配制的丹皮阴
性群药中 。 置于沙氏提取器中 , 加入乙醚回流提取
至提尽丹皮酚 (约 6 hr ) 。 40 ℃ 回收乙醚近干 , 残留
物加氯仿溶解并定量转移到 5 m l 容量 瓶 中 , 加 氛
仿至刻度即为样品液 。 精密吸取此样品液 5川 , 同时-
随行一定量的标准溶液 , 点于同一块硅胶 G板上 ,
依上法展开 , 显色及测定 。 平均回收率为98 . 92 % 。
5
. 样品测定 : 取女金丹一丸 , 精密 称定 , 刀日
适量硅藻土分散。 置沙 氏提取器中 , 以下按回收率
试验项下方法操作 , 结果见下表 。
8 5 12 2 3 7 8 6 0 1 2 0云 . 一 } 8 6 1 2 2 1 4 8 7 0 2 2 15样品重量 ( g )
含 量 (终 )
`乙劫烹黛二经上 动二
一」止兰二{三一 卜一旦二星卫里卫一 }些二旦丝生 卜李婴牛 ,一气瑞漏巡兰 }止二里十品拱竺 }
一生竺塑址 }望二卫二竺匕卜二兰型三 - }.里卫丝吐
1 0
.
0 10 4 ’ o · 0 1 03 } o
·
o 1 J g ] o J犯些l
0
.
0 10 4
三 、 水苏喊的含通测定 : 醇回流提取至提尽水苏碱 (约 7h) 。 提取液浓缩至无
1
. 仪煞参数 : 测定波民几S 二 5 25n m , 参比波长 醇味 , 加 入 15 m l o . I N H CI 溶解 , 抽滤 。 用少 显 0 . 1
,’i R = 70 0n m , 反射法锯齿扫描 , 其余条件同丹皮酚 。 N H CI 洗涤残渣及滤纸。 合并滤液及洗涤液 , 加入
2
. 标准 曲线 : 止清密称取水苏碱标准品 s m g 置 饱和需氏盐溶液 15 m l置冰箱放置 hl r , 用 G 4玻璃漏
于 5m l容 且瓶中 , 加入 95 % 乙醇溶解并稀释至 刻 斗过滤 。 沉淀用少童冰水洗涤后 , 加适量丙酮溶解 。
度 。 准确吸取此标准溶液 2 、 4 、 6 、 8 、 1。川点在同一块 丙酮液中加入适量的 A g Z S O ` 饱和溶液至不再产生
硅胶 G 板上 , 用 S一 8上行展开 1 c5 m 。 挥尽展开剂 , 沉淀 。 自然过滤 。 滤纸和沉淀用少量 70 %乙醇洗涤几
均匀喷以 D 一 4显色剂 。 呈现色点后 , 用洁净的同样 次 , 合并滤液及洗涤液约 l m l , 然后加入与 A g Z S O J
大小的玻璃板盖上 , 四周密封 , 按上述条件测定 。 溶液等 当量的 10 % B a以 2 溶液 , 再将其全部转移到
标准曲线回归方程为 : y = 0 . 0 6 2 7 8 x 一 。 . 0 5 8。。 , 相 小活性炭氧化铝柱中 (0 . 2 9颗粒活性炭与 0 . 2 9脱色
关系数 : r = 0 . 9 9 9 9 ,线性范围 : 2# g一 1 0 # g 。 活性炭混和为上层 。 1 9 1 0 0一 2 0 0 目氧化铝为下层 ,
3
. 精密度试验 : 在同一块薄层板上精密 点 七 分别装 入直径 o . sc m 、 长 sc m 的小层析柱中 ) , 用 70 %
个相同量 的女金丹样品点 , 依上述方法展开 、 显色 乙醇 35 m l洗脱 。 洗脱液浓缩近干 , 用 195 写 乙醇定量
及测定 。 一匕个点面积积分值平;均 值 交 二 。 . 17 35 , S x 转移,至 5m l 容量瓶中 , 依标准曲线项下方 法展开 、
= 0
.
0 3 2 1
,
C V 二 1
.
85 %
。 故可应用随行标准品法 显色及测定 。 平均回收率为 95 . 92 % 。
进行样品测定 。 5 . 样品测定 : 取女金丹二丸 , 精密 称 定 , 加
4
. 空 日群药加纯品回收率试验 : 精密称 取 适 入适量硅藻土分散 。 置于沙氏提取器中 , 以下按回
量的水苏碱标准品 , 加入到适量的按处方配制的益 收率试验项下方法操作。 根据随行标准品量计算样
母草阴性群药中。 置于沙氏提取器内 , 加入 95 % 乙 品含量 。 结果见下表 。
- - 砚 巴一长犷一丁 ~ 一一一丽顶泛葱丽尸一一一一「 厂一一一丽面丽蔺一一一 一 ! -一厄乙止之闷 一丫一一 8于碗比 _二二样品重
含 量 多一』进怠鬓乙一
}` 竺卫丝巴一 le Z二三兰旦Z一 - }竺2 竺乙 }上三些生 -
}- 上 ,旦2兰生二二巴』些兰一卜卫卫兰生 」`旦二些塑生
1 0
.
0 1 2 9 ! 0
.
0 2 1 4 _ _
1 . 8 8 年 第 8 期 4 8