全 文 ：北方园艺２０１２（１１）：１３７～１３９ ·植物保护·
第一作者简介：王晓峨（１９８０－），女，博士，讲师，现主要从事植物病
理方面的教学与科研工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｗａｎｇｘｅ＿ｃｈ＠１６３．ｃｏｍ。
基金项目：温州市农业科技计划资助项目（Ｎ２００９０００４）；浙江省教
育科学规划２０１１年度研究资助项目（ＳＣＧ３３２）。
收稿日期：２０１２－０２－２２
浙南山区茄子根结线虫种类鉴定
王 晓 峨１，２，吴 永 汉１，２
（１．温州科技职业学院，浙江 温州３２５００６；２．温州市农业科学院 生态环境研究所，浙江 温州３２５００６）
　　摘　要：采用根结线虫２龄幼虫形态特征测量、雌虫会阴花纹形态特征及分子生物学的鉴定
方法对浙南山区保护地茄子的根结线虫进行了种类鉴定。结果表明：浙南山区的茄子根结线虫
优势种群为南方根结线虫（Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅ　ｉｎｃｏｇｎｉｔａ）。
关键词：茄子；南方根结线虫；会阴花纹；ＩＴＳ序列；永嘉
中图分类号：Ｓ　４３６．４１２．２＋９　文献标识码：Ｂ　文章编号：１００１－０００９（２０１２）１１－０１３７－０３
　　根结线虫病（Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅ　ｓｐｐ．）是一类世界性病
害，其种类多、分布广、致病性强，其寄主植物多达３　０００
余种［１］，尤以茄科、葫芦科和十字花科等蔬菜受害严重，
其为害给农业生产带来了巨大的损失。因此，根结线虫
已成为国内外最为严重的植物病害之一。目前，国际上
报道的已知根结线虫有效种有８０多种［２］，但引起农作物
根结线虫病的线虫主要有４个常见种，即南方根结线虫
（Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅ　ｉｎｃｏｇｎｉｔａ）、北方根结线虫（Ｍ．ｈａｐｌａ）、
爪哇根结线虫（Ｍ．ｊａｖａｎｉｃａ）和花生根结线虫（Ｍ．
ａｒｅｎａｒｉａ），在农作物的损失中，它们造成的损失占到
９０％以上，在这４个种中又以南方根结线虫的发生面积
较大，危害蔬菜的种类最多，已成为危害蔬菜的优势
　　　
种群［３］。
１９９６年，永嘉县枫林、岩头和大若岩三镇８６．６７ｈｍ２
蔬菜生产基地（主栽茄子、苦瓜、辣椒、四季豆等蔬菜）被
温州市列入市级蔬菜后备基地，２００４年该县蔬菜年播种
面积突破６６７ｈｍ２［４］。据浙江省永嘉县农业局农业站统
计数据表明，近几年枫林大棚茄子年播种面积约
１５３．３ｈｍ２，茄子年总产量９　８０３．８ｔ、总产值２　２１９．６万
元。由于种植结构改变、砂壤土的种植环境等影响以及
对该病害缺乏适当的防范技术，使根结线虫病突破露地
限制成为枫林镇大棚茄子生产上的重要病害之一。
２００６～２００９年，对枫林镇大棚茄子根结线虫病进行连续
跟踪调查，发现根结线虫病的发生为害相当严重，平均
病情指数高达５１．２５、幅度为０～１００．０。由于茄子根结
线虫病发生日趋严重，已成为威胁枫林镇保护地茄子生
产的一大问题。为了进一步指导该线虫病的防治，现运
用形态学［５－６］及分子生物学技术［７］相结合的方法对永嘉
县茄子根结线虫进行了鉴定

。
Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　Ｔｒａｐｐｉｎｇ　Ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｏｆ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｃｏｎｔｒｏｌ　ｆｏｒ　Ｓｗｅｅｔ　Ｃｈｅｒｒｙ　Ｆｒｕｉｔ　Ｆｌｙ
ＷＥＩ　Ｘｉｎ－ｌｉｎｇ１，ＺＨＥＮＧ　Ｙｏｕ－ｑｉａｎｇ２，ＬＶ　Ｘｉｕ－ｌａｎ１，ＣＨＥＮ　Ｚｈｏｎｇ－ｇａｎｇ１，ＧＯＮＧ　Ｒｏｎｇ－ｇａｏ１，ＨＥ　Ｈａｏ１，ＷＡＮＧ　Ｊｉｎ１
（１．Ｓｉｃｈｕａｎ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａ’ａｎ，Ｓｉｃｈｕａｎ　６２５０１４；２．Ａｂａ　Ｐｒｅｆｅｃｔｕｒｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｑｉａｎｇ　Ａｕｔｏｎｏｍｏｕｓ
Ｐｒｅｆｅｃｔｕｒｅ　ｏｆ　Ａｂａ　Ｔｉｂｅｔａｎ，Ｓｉｃｈｕａｎ　６２４０００）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ｔｒａｐｐｉｎｇ　ｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｏｎ　ｓｗｅｅｔ　ｃｈｅｒｒｙ　ｆｒｕｉｔ　ｆｌｙ　ａｍｏｎｇ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ｔｒａｐｓ，ｓｅｘ　ｐｈｅｒｏｍｏｎｅｓ，ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ　ａｔ　ａｌｔｉｔｕｄｅｓ　ｏｆ
１　６００，１　８００ａｎｄ　２　０００ｍｉｎ　Ｗｅｎｃｈｕａｎ　ｗｅｒｅ　ｃｏｍｐａｒｅｄ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ　ｐｅａｋ　ｏｆ　ｆｒｕｉｔ　ｆｌｙ　ｗａｓ　ｉｎ　ｔｈｅ
ｌａｓｔ　ｄｅｃａｄｅ　ｏｆ　Ｍａｙ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｆｒｉｓｔ　ｄｅｃａｄｅ　ｏｆ　Ｊｕｎｅ，ａｎｄ　ｆｒｕｉｔ　ｆｌｉｅｓ　ａｃｃｏｕｎｔ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｇｒｅａｔｅｓｔ　ｎｕｍｂｅｒ　ａｔ　ａｌｔｉｔｕｄｅ　ｏｆ　１　８００ｍ，ｗｈｉｃｈ
ｔｈｅ　ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ　ｓｈｏｕｌｄ　ｂｅ　ｆｕｒｔｈｅｒ　ｅｎｈａｎｃｅｄ；ｔｈｅ　ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈｏｍｅｍａｄｅ　ｔｒａｐ　Ｃ（ｔｗｏ　ｃｒｏｓｓ　ｏｐｅｎｉｎｇｓ　ｏｆ　１．２ｃｍ　ｗｅｒｅ
ｃｕｔｔｅｄ　ｓｙｍｍｅｔｒｉｃａｌｙ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｍｉｄｄｌｅ　ｏｆ　ｐｌａｓｔｉｃ　ｂｏｔｔｌｅｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｌｕｒｅ　ｗａｓ　ａｂｓｏｒｂｅｎｔ　ｃｏｔｔｏｎ）＋９８％ｃｕｅｌｕｒｅ　ｏｆ　１．５ｍＬ＋１．０％
ｔｒｉｃｈｌｏｒｆｏｎ（２００ｍＬ　ｍｉｘｅｄ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ｗｈｉｃｈ　ｉｎｃｌｕｄｅｄ　３．０％ ｂｒｏｗｎ　ｓｕｇａｒ，５．０％ ｗｈｉｔｅ　ｗｉｎｅ　ａｎｄ　１．０％ ａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ
ａｄｄｉｔｉｏｎａｌｙ，ｗａｓ　ｐｏｕｒｅｄ　ｉｎｔｏ　ｔｈｅ　ｔｒａｐ）ｈａｄ　ｔｈｅ　ｂｅｓｔ　ｔｒａｐｐｉｎｇ　ｅｆｉｃｉｅｎｃｙ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｓｗｅｅｔ　ｃｈｅｒｒｙ；Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ　ｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ（ｆｒｕｉｔｆｌｙ）；ａｌｔｉｔｕｄｅ；ｔｒａｐ；ｓｅｘ　ｐｈｅｒｏｍｏｎｅ；ｐｅｓｔｉｃｉｄｅ；ｔｒａｐｐｉｎｇ　ｅｆｉｃｉｅｎｃｙ
７３１
·植物保护· 北方园艺２０１２（１１）：１３７～１３９
１　材料与方法
１．１　试验材料
２００９年１２月至２０１０年７月，每隔１５ｄ采样１次，
在温州永嘉山区大棚茄子采集茄子根结线虫病病根及
周边土样。田块取样采取分区分棚、随机采样法。样品
采回后放入４℃冰箱待用。
１．２　试验方法
１．２．１　根结线虫的形态学鉴定　２龄幼虫的观察、测
量：挑取茄子根系根结上的卵块放入盛有无菌水的培养
皿中，置于光照培养箱中，２８℃孵化３ｄ，然后从卵块孵化
出的幼虫中挑取２０条２龄幼虫置于载玻片上，经酒精灯
热杀死处理，用凡士林封固定盖玻片４周后，在光学显
微镜下观察、拍照、测量及鉴定［８］。观察头部特征、尾部
特征等；根结线虫的测量值包括体长、最大体宽、口针
长、交合刺长、尾长、透明尾长等。雌虫会阴花纹的制作
观察：将带根结的病根洗净后放入盛有少量自来水的培
养皿中，置于解剖镜下，将雌虫剖出后移入滴有４５％乳
酸的载玻片上，用解剖刀切取雌虫的尾端，用挑针清除
其上附着物后移至另一滴有４５％乳酸的载玻片上清洗，
去除会阴以外的多余部分后移到另一载玻片上的甘油
滴中，加盖玻片，制成临时玻片［９］。用显微镜观察雌虫
会阴花纹，并照相。
１．２．２　根结线虫的分子鉴定　线虫ＤＮＡ的提取：ＤＮＡ
提取参照美国 Ｗｉｌｉａｍｓｏｎ等［１０］的方法稍作修改，采用提
取单条雌虫的ＤＮＡ。在干净的载玻片上滴加２０μＬ
ｄｄＨ２Ｏ，在体视显微镜下挑取单头根结线虫成熟雌虫放
入载玻片的水滴中，用挑针刺破，迅速吸取含尽量多的
线虫体内含物１０μＬ加入到盛有８μＬ　ＷＬＢ溶液 ［２．５
ｍｍｏｌ／Ｌ　ＤＴＴ、１．１２５吐温２０、０．０２５明胶、２．５倍ＰＣＲ缓
冲液（１２５ｍｍｏｌ／Ｌ　ＫＣｌ、２５ｍｍｏｌ／Ｌ　ｐＨ　８．３Ｔｒｉｓ－Ｃｌ、３．７５
ｍｍｏｌ／Ｌ　ＭｇＣｌ２）］的ＰＣＲ管中，再向管中加入２μＬ预冷
的蛋白酶Ｋ（ｌ　ｍｇ／ｍＬ），使总体积为２０μＬ，迅速将其放
入－７０℃并至少冷冻２０ｍｉｎ，然后将ＰＣＲ管置于６５℃
温育１ｈ，接着９５℃恒温１０ｍｉｎ，以变性蛋白酶Ｋ，最后
于１２　０００ｒ／ｍｉｎ离心１ｍｉｎ，取含 ＤＮＡ的上清液在
－２０℃下保存备用。ＰＣＲ扩增：采用Ｖｒａｉｎ设计的线虫
ｒＤＮＡ－ＩＴＳ区通用引物：ｒＤＮＡ１（５′－ＴＴＧ　ＡＴＴ　ＡＣＧ　ＴＣＣ
ＣＴＧ　ＣＣＣ　ＴＴＴ－３′）和ｒＤＮＡ２（ＴＴＴ　ＣＡＣ　ＴＣＧ　ＣＣＧ
ＴＴＡ　ＣＴＡ　ＡＧＧ－３’）［１１］。ＰＣＲ扩增采用２５μＬ反应体
系：１０×ＰＣＲ缓冲液２．５μＬ，ＭｇＣｌ２（２５ｍｍｏｌ／Ｌ）２μＬ，
上、下游引物各１．０μＬ，ｄＮＴＰ混合物（１０ｍｍｏｌ／Ｌ）
２．０μＬ，模板 ＤＮＡ　２．０μＬ，Ｔａｑ 酶０．２５μＬ，ｄｄＨ２Ｏ
１６．２５μＬ。ＰＣＲ反应程序为：９４℃预变性３ｍｉｎ，每循环
９４℃变性３０ｓ、５４℃退火４５ｓ、７２℃延伸２ｍｉｎ，共３５个循
环，最后７２℃延伸１０ｍｉｎ，于８℃保存。ＰＣＲ反应时设
置无ＤＮＡ模板做空白对照。扩增产物于１．０％的琼脂
糖凝胶（含ＥｔＢｒ）中在１２０Ｖ稳压下电泳检测，电泳缓冲
液为０．５×ＴＢＥ，电泳时间为４０ｍｉｎ，产物在凝胶成像系
统上观察并照相后，切下琼脂糖凝胶上的ＤＮＡ条带，用
ＤＮＡ纯化回收试剂盒进行ＤＮＡ回收纯化，获得的ＤＮＡ
由南京金斯瑞生工生物技术有限公司测序部完成测序。
２　结果与分析
２．１　根结线虫２龄幼虫形态测量值
将２０条２龄幼虫置于显微镜下观察，其形态如图１
所示。外形为线形，头冠前端平宽，口针纤细，尾部尖
细、平滑、有透明区。其体长（Ｌ）＝（３９３．４±１３．９）μｍ，即
３７８．０～４２８．０μｍ；最大体宽（Ｗ）＝（１３．９±０．５３）μｍ，即
１３．１～１５．０μｍ；口针长（ＳＴ）＝（１１．１±０．３１）μｍ，即
１０．７～１１．８μｍ；ＤＧＯ＝（２．４０±０．２１）μｍ，即２．１～２．８μｍ；
尾长（Ｔ）＝ （４８．７±２．３７）μｍ，即４５．０～５４．０μｍ；透明尾
长（ｈ）＝（１０．４５±０．９６）μｍ，即８．９～１２．３μｍ。该样品的
形态特征及主要形态测量值与文献描述的南方根结线
虫２龄幼虫基本一致。
图１　根结线虫２龄幼虫的形态学照片
Ｆｉｇ．１　Ｐｈｏｔｏｇｒａｐｈｓ　ｏｆ　ｓｅｃｏｎｄ　ｓｔａｇｅ　ｊｕｖｅｎｉｌｅｓ　ｏｆ
ｒｏｏｔ－ｋｎｏｔ　ｎｅｍａｔｏｄｅ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ
２．２　雌虫会阴花纹观察
雌虫会阴花纹是根结线虫形态学鉴定的重要特征。
将２０份根结线虫样品的会阴花纹在显微镜下观察，发
现它们具有一些共同的特征－背弓明显高而方，该背弓由
平滑至波浪形的线纹组成，一些线纹在侧面处分叉，但
是无明显的侧线，具有代表性的雌虫会阴花纹（图２）。
所取样品中没有其它常见根结线虫会阴花纹的特征。
根据Ｅｉｓｅｎｂａｃｋ等［５］的描述，从会阴花纹类型来看，采自
温州永嘉枫林的２０份根结线虫样品应属于南方根结
线虫。
图２　部分根结线虫雌虫样品的会阴花纹
Ｆｉｇ．２　Ｐｈｏｔｏｇｒａｐｈｓ　ｏｆ　ｐｅｒｉｎｅａｌ　ｐａｔｔｅｒｎ　ｏｆ　ｆｅｍａｌｅ　ｏｆ
ｒｏｏｔ－ｋｎｏｔ　ｎｅｍａｔｏｄｅ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ
２．３　ｒＤＮＡ－ＩＴＳ区的ＰＣＲ扩增结果
对根结线虫样品的ｒＤＮＡ的ＩＴＳ区进行ＰＣＲ扩增
８３１
北方园艺２０１２（１１）：１３７～１３９ ·植物保护·
后，用１．０％琼脂糖凝胶进行电泳检测，发现１３个线虫
样本均扩增出１条７６０ｂｐ左右的电泳条带（图３）。将根
结线虫样品的ｒＤＮＡ中的ＩＴＳ区域序列与ＧｅｎｅＢａｎｋ
（ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ）数据库进行Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ　Ｂｌａｓｔ
序列比对，结果表明所测全部序列与南方根结线虫ＩＴＳ
区序列完全同源。因此，该试验收集的根结线虫全部为
南方根结线虫。
图３　不同来源单条根结线虫ＤＮＡ经ＩＴＳ－ＰＣＲ
扩增的电泳图谱
Ｆｉｇ．３　Ａｍｐｌｉｆｉｅｄ　ＩＴＳ　ｒｅｇｉｏｎｓ　ｏｆ　ａｌ　ｒｏｏｔ－ｋｎｏｔ　ｎｅｍａｔｏｄｅ
ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ　ｕｓｅｄ　ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｓｔｕｄｙ
３　结论与讨论
根结线虫种类多，目前世界上已报道的根结线虫有
８０多种，其形态特征相似。对根结线虫进行分类鉴定
时，通常结合雌虫的会阴花纹与２龄幼虫的一些形态特
征来对根结线虫的种类做出正确的鉴定；但随着分子生
物学技术的发展，采用ＰＣＲ方法扩增线虫特异序列并在
ＤＮＡ水平上进行序列分析，为根结线虫的鉴定和分类
提供了有效、可靠的方法。该试验通过对样品２龄幼虫
的主要形态特征的测量、雌虫会阴花纹的观察和
ｒＤＮＡ－ＩＴＳ区序列的比对，发现几个方面的结果都与文
献报道的南方根结线虫相同，表明为害浙南山区茄子的
根结线虫均为南方根结线虫（Ｍ．ｉｎｃｏｇｎｉｔａ）。
对植物根结线虫的种类鉴定是研究和防治根结线
虫的基础。该试验首次对温州永嘉根结线虫病的病原
进行了系统的研究，明确了其发生种类为南方根结线
虫，结果为进一步研究其发生规律提供了依据，同时也
为温州地区植物根结线虫病综合防控技术体系建立与
运用提供借鉴。
　　南方根结线虫寄主范围广，分布区域也在不断扩
大。温州市常年温暖，很适合南方根结线虫的生长，由
其引发的根结线虫病已遍及温州地区多种蔬菜和瓜果
作物，并呈逐年加重的趋势。此外，由于作物种苗的集
约化供应，进一步加速了根结线虫的传播。因此对根结
线虫在温州其它地区的分布情况有必要作进一步调查
研究。
参考文献
［１］　武杨，郑经武，商晗武，等．根结线虫分类和鉴定途径及进展［Ｊ］．浙江
农业学报，２００５，１７（２）：１０６－１１０．
［２］　Ｓｃｈｍｉｔａｚ　Ｖ　Ｂ，Ｂｕｒｇｅｒｍｅｉｓｔｅｒ　Ｗ，Ｂｒａａｓｃｈ　Ｈ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｃｌａｓｓｉｆｉ－
ｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｅｎｔｒａｌ　Ｅｕｒｏｐｅａｎ　Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅ　ｃｈｕｗｏｏｄｉ　ａｎｄ　Ｍ．ｆａｌｌａｘｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ
ｎａｃｈｒｉｃｈｔｅｎｂｌ［Ｊ］．Ｄｅｕｔ　Ｐｆｌａｎｚｅｎｓｃｈｕｔｚｄ，１９９８，５０（１２）：３１０－３１７．
［３］　Ｍｅｄｉｎａ－Ｆｉｌｈｏ　Ｈ　Ｐ，Ｓｔｅｖｅｎｓ　Ｍ　Ａ．Ｔｏｍａｔｏ　ｂｒｅｅｄｉｎｇ　ｆｏｒ　ｎｅｍａｔｏｄｅ　ｒｅｓｉｓｔ－
ａｎｃｅ：ｓｕｒｖｅｙ　ｏｆ　ｒｅｓｉｓｔａｎｔ　ｖａｒｉｅｔｉｅｓ　ｆｏｒ　ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒａｌ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ａｎｄ　ｇｅｎｏｔｙｐｅ
ｏｆ　ａｃｉｄ　ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅｓ［Ｊ］．Ａｃｔａ　Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒａｅ，１９８０，１００：３８３－３９３．
［４］　盛定建．永嘉县绿色食品基地发展规划的探讨［Ｊ］．上海农业科技，
２００４（４）：１０－１１．
［５］　Ｅｉｓｅｎｂａｃｋ　Ｊ　Ｄ．Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｓ　ｕｓｅｆｕｌ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ
ｆｏｕｒ　ｍｏｓｔ　ｃｏｍｍｏｎ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ｏｆ　ｒｏｏｔ－ｋｎｏｔ　ｎｅｍａｔｏｄｅｓ（Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅ　ｓｐｐ．）［Ａ］．
ＳＡＳＳＥＲ　Ｊ　Ｎ，Ｃａｒｔｅｒ　Ｃ　Ｃ．Ａｎ　ａｄｖａｎｃｅｄ　ｔｒｅａｔｉｓｅ　ｏｎ　Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅ（ＶｏｌⅠ）：Ｂｉｏｌｏｇｙ
ａｎｄ　Ｃｏｎｔｒｏｌ．Ｒａｌｅｒｇｈ，Ｎｏｒｔｈ　Ｃａｒｏｌｉｎａ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｇｒａｐｈｉｃｓ，１９８５：９５－１１２．
［６］　Ｅｉｓｅｎｂａｃｋ　Ｊ　Ｄ，Ｈｉｒｓｃｈｍａｎｎ　Ｈ．Ｒｏｏｔ－ｋｎｏｔ　ｎｅｍａｔｏｄｅｓ：Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅ
ｓｐｅｃｉｅｓ　ａｎｄ　ｒａｃｅｓ［Ｍ］／／Ｎｉｃｋｌｅ　Ｗ　Ｒ．Ｍａｎｕａｌ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｎｅｍａｔｏｌｏｇｙ．
Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ：Ｍａｒｃｅｌ　Ｄｅｋｋｅｒ，１９９１：１９１－２７４．
［７］　魏学军，杨文香，刘大群，等．植物根结线虫分子鉴定研究进展［Ｊ］．中
国农学通报，２００６，２２（８）：４０１－４０４．
［８］　刘维志．植物线虫学研究技术［Ｍ］．沈阳：辽宁科学技术出版社，
１９９５：２００－２０２．
［９］　冯志新．植物线虫学［Ｍ］．北京：中国农业出版社，２００１：１０１－１０２．
［１０］Ｗｉｌｉａｍｓｏｎ　Ｖ　Ｍ，Ｃａｓｗｅｌ　Ｃｈｅｎ　Ｅ　Ｐ，Ｗｅ　Ｓｔｅｒ－Ｄａｈｌ　Ｂ　Ｂ，ｅｔ　ａ１．Ａ　ＰＣＲ
ａｓｓａｙ　ｔｏ　ｉｄｅｎｔｉｆｙ　ａｎｄ　ｄｉｓｔｉｎｇｕｉｓｈ　ｓｉｎｇｌｅ　ｊｕｖｅｎｉｌｅ　ｏｆ　Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅ　ｈａｐｌａａｎｄ　Ｍ．
ｃｈｉｔｗｏｏｄｉ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｎｅｍａｔｏｌｏｇｙ，１９９７，２９（１）：９－１５．
［１１］Ｖｒａｉｎ　Ｔ　Ｃ，Ｗａｋａｒｃｈｕｋ　Ｄ　Ａ　Ｌｅｖｅｓｑｕｅ　Ｃ　Ａ，ｅｔ　ａｌ．Ｉｎｔｒａｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｒＤＮＡ
ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎ　ｆｒａｇｅｍｅｎｔ　ｌｅｎｇｔｈ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｘｉｐｈｉｎｅｍａ　ａｍｅｒｉｃａｎｕｍ
ｇｒｏｕｐ［Ｊ］．Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ　ａｎｄ　Ａｐｐｌｉｅｄ　Ｎｅｍａｔｏｌｏｇｙ，１９９２，１５：５６３－５７３．
（致谢：该试验过程中得到了浙江大学生物技术研究所
植物病理实验室郑经武教授的大力帮助，在此表示衷心
的感谢。）
Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｒｏｏｔ－ｋｎｏｔ　Ｎｅｍａｔｏｄｅ　ｏｎ　Ｓｏｌａｎｕｍ　ｍｅｌｏｎｇｅｎａ　Ｌ．ｉｎ
Ｓｏｕｔｈｅｒｎ　Ｍｏｕｎｔａｉｎ　Ａｒｅａ　ｏｆ　Ｚｈｅｊｉａｎｇ
ＷＡＮＧ　Ｘｉａｏ－ｅ１，２，ＷＵ　Ｙｏｎｇ－ｈａｎ１，２
（１．Ｗｅｎｚｈｏｕ　Ｖｏｃａｔｉｏｎａｌ　Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｗｅｎｚｈｏｕ，Ｚｈｅｊｉａｎｇ　３２５００６；２．Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｅｃｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ，Ｗｅｎｚｈｏｕ
Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｗｅｎｚｈｏｕ，Ｚｈｅｊｉａｎｇ　３２５００６）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ　ｏｒｄｅｒ　ｔｏ　ａｓｃｅｒｔａｉｎ　ｔｈｅ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｒｏｏｔ－ｋｎｏｔ　ｎｅｍａｔｏｄｅｓ，ｓａｍｐｌｅｓ　ｏｆ　ｒｏｏｔ－ｋｎｏｔ　ｎｅｍａｔｏｄｅ　ｏｎ　Ｓｏｌａｎｕｍ
ｍｅｌｏｎｇｅｎａ　Ｌ．ｗｅｒｅ　ｃｏｌｅｃｔｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｇｒｅｅｎｈｏｕｓｅ　ｐｌａｎｔｅｄ　ｆｒｏｍ　Ｙｏｎｇｊｉａ　Ｆｅｎｇｌｉｎ．Ｔｈｅ　ｐｅｒｉｎｅａｌ　ｐａｔｔｅｒｎ　ｏｆ　ｆｅｍａｌｅ　ａｎｄ　ｔｈｅ
ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ＩＴＳ　ｒｅｇｉｏｎ　ｏｆ　ｎｅｍａｔｏｄｅ　ｗｅｒｅ　ａｐｐｌｉｅｄ　ｆｏｒ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ａｌ　ｓａｍｐｌｅｓ　ｏｆ　ｒｏｏｔ
ｋｎｏｔ　ｎｅｍａｔｏｄｅ　ｂｅｌｏｎｇ　ｔｏ　Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅ　ｉｎｃｏｇｎｉｔａ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｓｏｌａｎｕｍ　ｍｅｌｏｎｇｅｎａ　Ｌ．；Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅ　ｉｎｃｏｇｎｉｔａ；ｐｅｒｉｎｅａｌ　ｐａｔｔｅｒｎ；ＩＴＳ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ；Ｙｏｎｇｊｉａ
９３１