全 文 :程。同时该成分对小肠有较强的推进作用,可见该成分为千金
子中除千金子甾醇以外另一泻下主要成分。从两次肠推进率
实验结果可以看出,千金子生品小肠推进作用较强,不同含油
量的千金子霜均具有明显加快小肠蠕动的作用,但作用比生品
强度有所减弱,随着千金子霜含油量的降低,其肠蠕动作用逐
渐减慢,与霜中含油量呈现一定程度的线性关系。说明千金子
制霜炮制后泻下作用缓和,千金子霜含油量在 22%以下其小肠
蠕动作用明显减弱。
千金子与千金子霜给药量相当于临床 5 倍等效量的肠推进
作用与 30 倍等效量的药效学作用比较,并无明显的增强,提示
其增加肠蠕动的药效学作用与给药剂量的关系在某一范围内
成正相关,但当给药剂量提高到一定程度时,药效学作用并不
随给药剂量加大而增强。
结合千金二萜醇二乙酸苯甲酸酯对小鼠便秘模型各指标
的影响,可以推测千金子逐水消肿的主要作用机制可能是促进
小肠的蠕动,减少小肠对水分的吸收。其对排便潜伏期和便粒
总数没有明显影响,考虑可能其对大肠的作用不明显,主要作
用部位为小肠。
参考文献
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志,2000,12(1)∶ 1 ~ 4
生姜解半夏毒的研究—生姜汁对半夏毒针晶所致炎性反应的影响*
史闰均,吴 皓**,郁红礼,陈 琳
(南京中医药大学药学院 江苏省中药炮制重点实验室,南京 210029)
摘 要 目的:研究生姜汁对半夏毒针晶所致炎性反应的影响。方法:采用腹腔注射半夏毒针晶所致小鼠腹腔炎症模型,观
察生姜汁对小鼠毛细管通透性、腹腔渗出液的量、腹腔渗出液中蛋白质含量、白细胞数量和炎症介质 PGE2 含量的影响;采用半夏毒
针晶诱导大鼠足跖肿胀模型,观察生姜汁对大鼠足跖肿胀的作用。结果:生姜汁能显著抑制半夏毒针晶腹腔注射所致的小鼠毛细
管通透性增加,减少腹腔渗出液和白细胞数目,降低蛋白质和炎症介质 PGE2 的含量,也可减轻半夏毒针晶所致的大鼠足跖肿胀。
结论:生姜汁可显著抑制半夏毒针晶所致的炎症反应。
关键词 半夏;毒针晶;生姜;抗炎
半夏为天南星科植物半夏 Pinellia ternata(Thunb.)Breit.的
块茎,有毒。自古以来,因其味辛辣、麻舌而刺喉,具有戟人
咽的刺激性,被列为有毒中药。现代研究表明半夏毒性主要
表现为对皮肤、粘膜的刺激性毒性[1]。本课题组前期研究表明
半夏刺激性毒性成分为其含有的具有特殊晶型的 毒针
晶[2,3],毒针晶的毒性作用主要表现为由刺激性引起的炎症反
应,可使小鼠毛细管通透性增加,腹腔渗出液中炎症介质 PGE2
含量增加,也可引起家兔眼结膜严重肿胀[1]。传统中医理论认
为:半夏性畏生姜,用之以制其毒,功益彰。陶弘景《本草经
集注》中记载半夏毒,用生姜汁,煮干姜汁并解之。中医临床
上半夏中毒用生姜解毒。现代研究发现生姜具有抗炎镇痛作
用[4 ~ 6]。生姜对半夏的解毒作用是否与它在机体内拮抗半夏所
致炎性反应有关,现将相关结果报告如下。
1 材料与方法
1. 1 试验药物 生姜,购自南京农贸市场,经南京中医药大
学王春根教授鉴定为姜科植物姜 Zingiber officinale Roscoe.的新
鲜根茎。新鲜生姜,洗净,切薄片,榨汁,离心 5000rpm,取上清
液配成不同剂量的生姜汁。
半夏鲜品,采自江苏省泰州高港半夏 GAP 基地,经南京中
医药大学王春根教授鉴定为天南星科植物三叶半夏 Pinellia ter-
nate(Thunb)Breit.的块茎。半夏毒针晶的提取分离:半夏鲜品
搅碎,加水研磨混悬后,按低速分级离心法,离心速度从
5000rpm逐级上升到 12000rpm,离心数次,每次 5 ~ 10 min,收
集离心液和沉淀,滤过,蒸馏水洗涤数次,分离得针晶和不含针
晶的沉淀粉末,真空干操。分离得到的针晶呈白色粉末状。阿
司匹林泡腾片,阿斯利康制药有限公司,批号 0810045。
1. 2 动物 ICR小鼠,雄性,体重 18 ~ 22g;SD大鼠,雄性,体
重 200 ~ 220g,均由上海斯莱克动物有限责任公司实验提供,合
格证 SCXK(沪)2007-0005。
1. 3 试剂 依文思蓝(Evans Blue) ,Sigma 进口分装,用生理
盐水配成 0. 5%的溶液;凯基 Braford蛋白含量检测试剂盒,南京
凯基生物科技发展有限公司;甲醇,江苏汉邦科技有限公司,色
谱纯。
1. 4 仪器 SPECTRA MAX 190 酶标仪(美国 AD公司)。SP-
24 中药药理与临床 2010;26(4)
* 基金项目:国家自然基金项目(NO. 30772785,NO. 30973939) ;国家十一五支持计划课题(NO. 2006BAI09B06 - 10) **通讯作者
754PC型紫外可见分光光度计(上海光谱仪器有限公司)。
YLS-7A足跖容器测定仪(山东省医学科学院设备站)。
1. 5 方法
1. 5. 1 生姜对半夏毒针晶致小鼠毛细血管通透性增加的影响
小鼠 50 只,随机分为 5 组,模型组、阳性对照组、生姜高、中、低
剂量组。各生姜组分别灌以 8、4、2g /kg 的生姜汁,阳性对照组
灌以 0. 25g /kg的阿司匹林生理盐水,模型组灌胃以生理盐水,
0. 2ml /10g,给药 5 天。最后一次给药 30min 后,尾静脉注射 0.
5%依文思兰溶液 0. 1ml /10g,各组随即腹腔注射 0. 1%半夏毒
针晶生理盐水混悬液 0. 1ml /10g。20min后处死动物,向腹腔内
注射 5. 0 ml生理盐水,轻揉腹部使其混合均匀。精密吸取腹腔
内溶液 4. 0ml于离心管中,加生理盐水至 l0. 0ml,3000 rpm离心
15min,取上清液,于 590nm处测定光密度(OD)。
1. 5. 2 生姜汁对半夏毒针晶致小鼠腹膜炎症的影响[7] 小鼠
50 只,同 2. 1 项下分组和灌胃给药。最后一次给药 30min 后,
各组小鼠腹腔注射 0. 1%半夏毒针晶生理盐水混悬液,0. 1ml /
10g。30min后处死,立即向每只小鼠腹腔注射生理盐水 10.
00ml,轻揉腹部使之混匀。在 5min内取出小鼠腹腔内全部溶液
置刻度离心管中,计算渗出液体积,并测定蛋白质含量、PGE2 及
白细胞计数。蛋白质含量用考马氏亮蓝法测定,白细胞数用试
管稀释法计数。PGE2 测定:精密吸取上述各离心腹腔液 0.
25ml,加入 0. 5 mol /L 氢氧化钾甲醇溶液 2 ml,摇匀,于 50℃水
浴异构化 20min,同法离心,上清液稀释至 5ml,分别以上述溶剂
加入步骤配制各组空白对照溶液,在 278nm 处测定光密度,以
OD值表示 PGE2 的含量。
1. 5. 3 生姜汁对半夏毒针晶致大鼠足肿胀的影响[9] 大鼠 40
只随机分为 5 组,模型组、阳性对照组、生姜高、中、低剂量组。
各生姜组分别灌以 8、4、2g /kg 的生姜汁,阳性对照组灌以 0.
20g /kg的阿司匹林生理盐水,模型组灌胃以生理盐水,1. 0ml /
100g,给药 5 天。最后一次给药前,在各鼠右后足踝关节处作标
记,按足容积测定法测定各鼠足容积两次,取平均值作为各鼠
给药前正常足容积。给药后 30min,各组每只大鼠右后足部皮
下注射 0. 2%半夏毒针晶生理盐水混悬液 0. 1ml /只。分别于致
炎后 0. 5、1、2、3、4、5h同法测定右后足容积,计算各大鼠致炎前
后右后足容积变化值,以肿胀度判定针晶的致炎效应。肿胀度
(ml)=致炎后大鼠右足体积 -正常时大鼠右足体积
2 结果
2. 1 生姜对半夏毒针晶致小鼠毛细血管通透性增加的影响
生姜汁可显著抑制半夏毒针晶所致小鼠腹腔毛细血管通透
性的增加,减少渗出,其中以 8g /kg 姜汁灌胃作用较强,与模型
组比较具有极显著差异(P < 0. 01)。阿司匹林组与模型组比较
有显著性差异(P < 0. 01) ,表明阿司匹林也可拮抗半夏毒针晶
所致的小鼠毛细管通透性增加,见表 1。
表 1 生姜对半夏毒针晶造成的毛细管通透性影响(珋x ± s,n = 10)
组别 剂量(g /kg) OD
半夏毒针晶组 0. 403 ± 0. 027
阿司匹林组 0. 25 0. 261 ± 0. 037**
生姜高剂量组 8. 00 0. 306 ± 0. 068**
生姜中剂量组 4. 00 0. 348 ± 0. 064*
生姜低剂量组 2. 00 0. 353 ± 0. 052*
与毒针晶组比较,* P < 0. 05,**P < 0. 01(下同)
2. 2 生姜汁对半夏毒针晶致小鼠腹膜炎症的影响 生姜
高、中、低剂量组均能显著地抑制半夏毒针晶所致的小鼠腹腔急
性炎症渗出和白细胞游走,减少渗出液中的蛋白含量,也可降低
渗出液中炎症介质 PGE2 的释放,并呈现出相应的量效关系,表
明生姜汁对半夏毒针晶造成的腹腔急性炎症有较强的抑制作
用。阿司匹林组与模型组比较有显著性差异(P < 0. 01) ,表明
阿司匹林也可拮抗半夏毒针晶所致的腹腔炎,见表 2。
表 2 生姜汁对半夏毒针晶致小鼠腹膜炎的影响(珋x ± s,n = 10)
组别
剂量
(g /kg)
渗出液
(ml)
WBC
(× 1010个 /L)
蛋白质
(g /L)
OD
(PGE2)
半夏毒针晶 0. 91 ± 0. 04 0. 69 ± 0. 17 0. 249 ± 0. 010 0. 413 ± 0. 030
阿司匹林 0. 25 0. 81 ± 0. 06** 0. 46 ± 0. 10** 0. 199 ± 0. 023** 0. 318 ± 0. 023**
生姜 8. 00 0. 80 ± 0. 05** 0. 51 ± 0. 17* 0. 175 ± 0. 034** 0. 349 ± 0. 045*
生姜 4. 00 0. 82 ± 0. 04** 0. 52 ± 0. 14* 0. 180 ± 0. 042** 0. 350 ± 0. 037*
生姜 2. 00 0. 85 ± 0. 06** 0. 61 ± 0. 16 0. 204 ± 0. 044* 0. 406 ± 0. 038*
2. 3 生姜汁对半夏毒针晶致大鼠足肿胀的影响 生姜高、中
剂量组在大鼠右足皮下注射半夏毒针晶后 1 ~ 5h,可显著拮抗
半夏毒针晶所致的足肿胀。阿司匹林组与模型组比较有极显著
差异(P < 0. 01) ,说明阿司匹林也可拮抗半夏毒针晶所致的足
肿胀,见表 3。
表 3 生姜汁对半夏毒针晶致大鼠足跖肿胀的影响(珋x ± s,n = 8)
组别
剂量
(g /kg)
正常足容积
(ml)
致炎后足肿胀度(ml)
0. 5h 1h 2h 3h 4h 5h
半夏毒针晶 1. 524 ± 0. 048 0. 574 ± 0. 096 0. 650 ± 0. 112 0. 677 ± 0. 108 0. 553 ± 0. 0127 0. 459 ± 0. 094 0. 466 ± 0. 084
阿司匹林 0. 20 1. 525 ± 0. 078 0. 340 ± 0. 098** 0. 387 ± 0. 095** 0. 419 ± 0. 113** 0. 264 ± 0. 096** 0. 222 ± 0. 082** 0. 227 ± 0. 124**
生姜 8. 00 1. 561 ± 0. 064 0. 471 ± 0. 013 0. 479 ± 0. 109* 0. 474 ± 0. 085** 0. 385 ± 0. 152* 0. 312 ± 0. 154* 0. 279 ± 0. 110**
生姜 4. 00 1. 521 ± 0. 065 0. 567 ± 0. 142 0. 536 ± 0. 077* 0. 521 ± 0. 060* 0. 412 ± 0. 069* 0. 399 ± 0. 150 0. 314 ± 0. 146*
生姜 2. 00 1. 543 ± 0. 092 0. 572 ± 0. 093 0. 618 ± 0. 064 0. 631 ± 0. 132 0. 535 ± 0. 156 0. 454 ± 0. 107 0. 428 ± 0. 104
3 讨论
炎症是具有血管系统的活体组织对各种损伤因子的刺激所
发生的一种以防御反应为主的基本病理过程。当发生炎症时,
局部组织变质、渗出和增生,出现红、肿、热、痛和功能障碍为特
征的病理性反应。急性炎症时机体对于损伤因子的立即和早期
反应,主要以血流动力学改变、血管通透性增高和白细胞渗出为
特征,比如组织肿胀,毛细血管扩张,通透性增加,富含蛋白质的
渗出液积聚,中性粒细胞趋化、游走及炎症介质 PGE2 释放。本
文采用半夏毒针晶作为致炎剂造成的炎症模型,结果表明毒针
晶确实可以导致炎症所产生的一系列反应,也进一步说明半夏
中的针晶是半夏的主要毒性成分。
本文实验结果表明,生姜灌胃给药能明显减轻半夏毒针晶
所致的炎症反应,口服生姜汁能显著抑制毒针晶所致的小鼠毛
34中药药理与临床 2010;26(4)
细管通透性增加,减少富含蛋白的炎症渗出和白细胞数目,降低
炎症介质 PGE2,且这种拮抗作用呈剂量依赖性。同时,生姜还
能减轻半夏毒针晶所致的大鼠足肿胀的程度。说明生姜确实可
以降低因服用半夏而导致的一些毒副作用。实验将阿司匹林作
为阳性对照,结果阿司匹林也能明显降低半夏毒针晶所致的炎
症反应,表明阿司匹林作为解热镇痛抗炎药具有确切的抗炎作
用,也可进一步说明半夏毒针晶确实能导致刺激性炎症反应。
实验中各模型半夏毒针晶致炎剂量的确定,采用半夏毒针
晶的量-毒曲线和时-效曲线进行考察,结果小鼠毛细管通透性模
型和小鼠腹膜炎模型,选择 0. 1%半夏毒针晶剂量;大鼠足跖肿
胀模型,选择 0. 2%半夏毒针晶剂量。
本课题组前期研究表明生姜不能破坏半夏中的毒性成分,
单用生姜炮制半夏不能解除半夏药材本身的毒性。本文的实验
结果表明生姜可降低半夏中毒后的机体毒性反应,可以为中医
中半夏毒,用生姜汁,煮干姜汁并解之的理论提供依据。
中医临床生姜解半夏中毒的用量 30g,相当于小鼠灌胃剂量
4. 0g /kg和大鼠灌胃剂量 2. 7g /kg。从实验结果看,此剂量对半
夏毒针晶引起的炎症反应均具有较好的抑制作用,能降低毛细
血管通透性,减少炎症介质的合成与释放,降低炎症组织水肿。
说明中医临床应用半夏中毒时用一定剂量的生姜解毒具有科学
性。
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The research of ginger detoxification to Pinellia ternate———anti-inflammatory effect
of ginger on inflammation induced by raphides in pinellia ternate
Shi Runjun,Wu Hao* ,Yu Hongli,Chen Lin
(Pharmacology College of Nanjing University of Chinese Medicine,Jiangsu Key Laboratory of Chinese Medicine Processin,Nanjing 210029)
Objective:To investigate into the anti-inflammatory effect of ginger on inflammation induced by raphides of Pinellia ternate. Method:
The mouse peritonitis model induced by the raphides induced was applied to investigate the anti-inflammatory effects of ginger by detecting the
capillary permeability,volume of exudates,quantity of leukocytes,the protein content and the releases of inflammatory mediators PGE2 in the
exudates;toe swelling of rat induced by the raphides was used to determine the swelling extent. Result:The ginger exhibited comparable an-
ti-inflammatory effects in terms of the inhibitions on the exudation and leukocytes efflux,the releases of inflammatory mediator(PGE2)and
the production of protein and the ginger inhibited penetration of capillary vessel in mice and toe swelling of rat induced by the raphides. Con-
clude:The ginger has significant inhibitory action on the inflammation induced by raphides of Pinellia ternate.
Key words Pinellia ternate;Ginger;raphides;proinflammatory
太白米不同提取部位对血瘀大鼠血栓形成及家兔血小板聚集的影响
王 斌1,李 敏1,侯建平1* ,孙建宁2
(1 陕西中医学院,咸阳 712046,2 北京中医药大学,北京 100121)
摘 要 目的:观察太白米不同提取部位对血栓形成及血小板聚集的影响。方法:采用皮下注射 0. 1%盐酸肾上腺素复合冰
水浴造成大鼠血瘀模型,按 Chandler体外法形成大鼠体外血栓,测定太百米不同组分对血栓长度、湿重的影响;应用 Born 氏比浊法
44 中药药理与临床 2010;26(4)
* 通讯作者