全 文 ：图 2　不同相对湿度下吸湿百分率
6　讨论
6. 1　由于本品的提取物量大 ,可加入辅料的量较少 , 为改善
该药粉的流动性和吸湿性 ,曾考虑将其制成颗粒 , 经过实验 ,
湿法制粒烘干后装胶囊 , 流动性和吸湿性均明显改善 , 但由
于颗粒间的空隙比较大 , 胶囊的装量仅能达到 0. 38 g /粒 , 这
样每日服用的胶囊数会增加 ,而采用提取物粉末加辅料直接
装胶囊的工艺 , 可简化工艺流程。
6. 2　筛选润滑剂实验中 , 国产微粉硅胶和进口气相微粉硅
胶对本品的助流效果相近 ,并且进口气相微粉硅胶在混合过
程中易结成小球 , 过 60目筛才能使其分散均匀 ,增加生产流
程。
6. 3　处方提取物加入筛选出的辅料 , 装胶囊 , 装量较设计装
量增加 , 可能是由于辅料改变了粉体的堆密度造成 ,但生产
中通过调节胶囊灌装机的填充杆高度 , 可使装量达到设计装
量。
6. 4　测定相对临界湿度实验 , 先根据文献 [ 3] 采用 54
H2 SO4、 48 H2 SO4、 44 H2 SO4 拟形成 29. 55 、 40. 52 、
48. 52 的相对湿度 , 经实验测定 , 3种浓度硫酸形成的相对
湿度相差不大 , 在 25 ～ 30 之间 , 因此采用文献 [ 4]中不同
盐的饱和水溶液得到不同的相对湿度 ,结果较理想。
6. 5　本产品在 10万级洁净区中生产 ,洁净区的温度控制在
18 ～ 24 °C ,相对湿度控制在 30 ～ 45 , 小于本品的临界相
对湿度 62 , 可保证产品质量。但由于本品的吸湿性很强 ,
因此在内包装中还需放入袋装干燥剂 , 内包装采用高密度聚
乙烯瓶 , 贮存条件应控制在阴凉干燥处 , 以保证产品质量。
在此包装下进行稳定性实验 ,结果满意。
参考文献:
[ 1] 　许济群.方剂学 [M ] .上海:上海科学技术出版社 , 1988, 99.
[ 2] 　李铜铃 ,贾玉蓉 ,魏　波. 不同辅料对中药冲剂吸湿性的影响
[ J] .华西药学杂志 , 1993, 8(3):80.
[ 3] 　刘中秋 ,周　华 ,苏子仁 ,等.生脉成骨胶囊制剂成型工艺研究
[ J] .中成药 , 1998, 20(4):2-4.
[ 4] 　丁志平 ,乔延江.不同粒径黄连粉体的吸湿性实验研究 [ J] .中
国实验方剂学杂志 , 2004, 10(3):5-7.
板蓝根和大青叶类药材腺苷含量的测定
郭　力 , 　梁恒兴 , 　赵　斌 , 　范时根
(成都中医药大学药学院 ,四川 成都 611730)
收稿日期:2005-01-21
作者简介:郭　力(1964～ ),男 ,成都中医药大学副教授 ,主要从事中药新药开发研究工作。 E-m ail:g li64@ tom. com。
关键词:腺苷;板蓝根;高效液相色谱法
摘要:目的:首次提出以腺苷作为板蓝根 、大青叶 、南板蓝根等药材及其制剂的质量控制指标 , 采用高效液相色谱法测定
了其腺苷含量。方法:采用 A lltim a C18色谱柱(5 μm , 150 mm ×4. 6 mm);流动相:甲醇-水 (8 ∶92);流速:1 mL /m in;柱
温:30 °C;检测波长:260 nm。 结果:该方法的线性范围为 0. 1712 ～ 0. 8560 μg。平均加样回收率为 97. 18 , RSD 为
1. 74 。结论:实验表明 , 该方法灵敏度高 、操作简便 、重现性好 、效率高。为全面评价此类药材和制剂质量提供了一个
可靠方法。
中图分类号:R284. 1　　　　　文献标识码:B　　　　　文章编号:1001-1528(2006)07-1064-02
　　板蓝根和大青叶是公认的具有抗病毒的有效中药 , 在临
床中广泛使用。尽管对它们已作了很多研究 ,但其有效成分
及其作用机理尚未有确切的结论 ,几十年来大青叶和板蓝根
药材及其制剂的质量监控一直未能解决。[ 1 , 2]文献报道中有
人主张它们的质量控制指标应选靛蓝 、靛玉红。但也有人认
为 “抗内毒素试验表明:靛蓝和靛玉红不具有抗内毒素活
性。” [ 3]而它们的水溶性成分却具有很强的抗病毒 、抗菌 、抗
内毒素 、增强机体免疫作用。目前含板蓝根和大青叶的制剂
多采用水作为提取溶剂 , 而靛蓝和靛玉红具有很强的脂溶
性 ,有人对水提取液的靛蓝 、靛玉红作了含量测定 , 结果发现
其提取率仅为 1. 5 ～ 3. 5 。此外 , 浓缩过程的损失率高达
92. 4 ;在通过提取 、浓缩 、醇沉 、收膏等操作后 ,其转移率仅
为3. 3 ～ 13 。[ 4, 5]
文献报道 ,板蓝根和大青叶中含有的水溶性成分腺苷 ,
具有抗炎作用 [ 5 , 6] ,与板蓝根和大青叶的功能主治一致。但
目前尚未有板蓝根和大青叶中腺苷含量测定的相关报道。
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腺苷的含量测定方法有薄层扫描法 、薄层-紫外法 、紫外分光
光度法及高效液相色谱法等。高效液相色谱法具有简便 、快
速 、灵敏 、重现性好等特点。通过试验 , 建立了腺苷含量测定
的高效液相色谱法 , 为板兰根 、大青叶及其制剂的质量控制
提供了较为实用的检测方法。
1　仪器与试药
HP1100 高效液相色谱仪 (G1310A IsoPump;G1314A
DAD检测器;Chem station数据处理软件 ), 梅特勒-托利多
AE240电子天平 , 腺苷对照品 (中国药品生物制品检定所提
供 , 批号:879-200001), DL-360超声波清洗器(宁波市石浦
海天电子仪器厂)。
甲醇为色谱纯 , 水为重蒸馏水 , 其它试剂均为分析纯。
板蓝根 、大青叶 、南板蓝根 、青黛药材均购于四川省中药材公
司 , 经鉴定 ,均符合《中国药典》相关规定;板蓝根注射液(山
西晋新双鹤药业责任公司生产 ,批号为:200303267)。
2　色谱条件
色谱柱:A lltim a C18(5 μm , 150 mm ×4. 6 mm);流动相:
甲醇-水(8 ∶92);流速:1 mL /m in;柱温:30 °C;检测波长:
260 nm 进样量:10 μL。
3　试验方法
3. 1　测定波长的选择　用二极管阵列检测器对腺苷标准品
溶液进行扫描 , 扫描范围为 200 ～ 400 nm , 结果发现腺苷在
260 nm处有一最大吸收(见图 1), 故选择 260 nm 作为测定
波长。
图 1　腺苷波长扫描图
3. 2　标准曲线的制备　精密称取腺苷对照品10. 7 mg, 置 25
m L量瓶中 , 加甲醇溶解并稀释至刻度 , 摇匀 , 作为对照品贮
备液。再分别精密量取对照品贮备液 1, 2, 3, 4, 5 m L置 25
m L量瓶中 , 用 30 甲醇溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ,分别吸取
10 μL注入液相色谱仪 ,记录色谱图 ,测定峰面积值 , 并以峰
面积值 (A)对进 样量 (C)进 行回归 , 得 回归 方程:
A=3 001. 8C -15. 006, r=0. 999 6。 试验结果表明:进样量
在0. 171 2 ～ 0. 856 0μg范围内 , 腺苷的峰面积值与进样量
有良好的线性关系。
3. 3　供试品溶液的制备
3. 3. 1　药材供试品溶液的制备　取各药材粉末 1 ～ 2 g, 精
密称定 ,置具塞锥形瓶中 ,精密加入 30 甲醇 25 mL, 称定重
量 ,超声处理 45 m in,取出 , 放冷 ,再称定重量 , 用 30 甲醇补
足减失的重量 ,摇匀 , 滤过 ,即得。
3. 3. 2　板蓝根注射液供试品溶液的制备　精密吸取板蓝根
注射液 1. 0 mL, 置 5 mL量瓶中 ,用 30 甲醇稀释并定容至
刻度 ,摇匀 , 即得。
3. 4　精密度试验　取同一板蓝根样品供试液 , 重复进样 5
次 ,测定腺苷的峰面积值 。 RSD 为 0. 91 (n =5)。
3. 5　稳定性考察　取同一板蓝根样品供试液 , 分别于第 0,
2, 4, 6, 8 h进样 , 记录峰面积值 , 结果表明在 8 h内 , 腺苷峰
面积值无明显变化 , RSD 为 1. 45 (n =5)。
3. 6　重复性考察　取同一批板蓝根样品 , 按 “供试品溶液制
备”项下操作 , 进样测定 ,记录腺苷峰面积值 , 并进行计算 , 结
果 RSD 为1. 34 (n =5)。
3. 7　回收率试验　取已知含量的板蓝根粗粉 6份 , 分别精
密加入对照品溶液 ,按 “供试品溶液制备”项下操作 , 进样测
定 ,记录峰面积值 , 计算回收率均在 95 ～ 105 之间 ,
RSD 为1. 74 , 平均回收率为97. 18 。
4　样品测定
取板蓝根 、大青叶 、南板蓝根 、青黛的供试品溶液和对照
品溶液各 10 μl, 分别进样 , 用外标一点法计算含量 , 色谱图
见图 2, 结果见表 1。
图 2　腺苷含量测定高效液相色谱图
A对照品　 B板蓝根 　 C大青叶
D南板蓝根　 E青黛　 F板蓝根注射液　 1腺苷
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表 1　 四种药材腺苷含量测定结果(n=3)
药材名称 腺苷含量
板蓝根(RD IXISATDIS) 0. 033
大青叶(FOLIUM ISAT IDIS) 0. 045
南板蓝根(RH IZOMA ET RAD IX BAPHCACANTH IS
CUS IAE) 0. 073
青黛( INDIGO NATURALIS) 无
板蓝根注射液(每 mL含生药 0. 5 g) 0. 14 m g /m L
5　讨论
5. 1　《中国药典》中冬虫夏草腺苷含量测定采用磷酸缓冲盐
溶液作为流动相 , 流动相配制复杂 , 而且对色谱柱的损害较
大。而本实验采用甲醇-水系统作为流动相 , 有机相占用比
例仅 8 ,对色谱柱损害很小 , 并能够达到满意的分离效果 ,
腺苷和样品中的其它组分可达到基线分离 ,分离度大于 1. 5;
以腺苷峰计算 , 理论褡板数(N)为 5 000以上 , 拖尾因子(T)
在 0. 95 ～ 1. 05之间。
5. 2　测定的几种药材中 , 以南板蓝根腺苷含量最高 , 大青叶
次之 , 而青黛几乎不含腺苷。青黛制备方法是采收马蓝 、蓼
蓝或菘蓝的叶或茎叶 ,置缸中 , 加清水浸 2 ～ 3 d, 至叶腐烂 、
茎脱皮时 , 将茎枝捞出 , 加入石灰 , 充分搅拌 , 至浸液由深绿
色转为紫红色时 , 捞出液面泡沫 , 至烈日下晒干 , 即得 , 故青
黛制备中是取用的水不溶性部分 , 而腺苷是水溶性成分 , 故
青黛中几乎不含腺苷 。
5. 3　采用本实验方法对板蓝根注射液中腺苷作了测定 (见
图 2F),结果发现其腺苷含量为 0. 14 m g /m L, 表明腺苷可作
为其指标性成分 ,以控制其质量。
5. 4　本实验首次对板蓝根和大青叶类药材中腺苷含量作了
测定 , 提出了以腺苷含量作为此类药材的指标性成分 , 为此
类药材和制剂的质量控制提供一个新的思路。
参考文献:
[ 1] 　张润珍,张玉文.板蓝根的研究进展 [ J] .中草药, 2000, 31(6):
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玉红含量测定及其部分成分的抗内毒素作用 [ J] .药学实践杂
志 , 2000, 18(5):347.
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蓝根的鉴定[ J] .分析化学研究简报 , 2002, (7):849-852.
复方五仁醇胶囊入血成分分析及制剂中相关成分含量测定
窦志华 1 , 　丁安伟 1* , 　王陆军2 , 　罗　琳 3 , 　张　兵 2 , 　施　忠 2
(1.南京中医药大学 ,江苏 南京 210029;2.南通市第三人民医院 ,江苏 南通 226006;3.南通大学 ,江苏南通
226006)
收稿日期:2005-10-31
基金项目:江苏省中医药局中医药科学技术研究专项课题(编号 H 05173);江苏省南通市社会发展科技计划项目(编号 S4006)
作者简介:窦志华(1966～ ),男 ,江苏南通人 ,副主任中药师 ,博士研究生 ,主要从事中药炮制与复方研究工作。
*通讯作者:丁安伟 ,教授 ,博士生导师 ,电话:025-51997178, E-m ail:daw@ nju tcm. edu. cn
关键词:复方五仁醇胶囊;含药血清;入血成分;分析;含量测定
中图分类号:R927. 2　　　　　文献标识码:B　　　　　文章编号:1001-1528(2006)07-1066-02
　　目前 , 多数中药制剂是以测定一个或几个体外成分的含
量为质量控制指标 , 是否是药效的代表性成分尚待商榷。中
药虽成分众多 , 但只有那些被消化吸收进入血液的成分或其
代谢产物才有产生药效的可能 ,中药药效成分研究应该以服
用药物后的血清(即含药血清)为入手点 [ 1] ,中药及其制剂
质量控制指标也应该以真正能够被吸收入血的成分为对
象 [ 2] 。
复方五仁醇胶囊由五味子 、柴胡 、叶下珠 、三七 4味药组
成 ,其中五味子为君药 , 是一种治疗急慢性肝炎的科研制
剂 [ 3] ,该制剂组方简单 , 疗效确切。先期发表的论文建立了
该制剂中五味子乙素的含量测定方法 [ 4] ,此次我们选定其为
对象 ,进行以含药血清成分分析为指导制订质量控制标准的
尝试。
1　实验材料
1. 1　仪器
Agilen t 1100 Se rie s高效液相色谱仪 (G1311A Qua te rnary
Pump, G1379A Degasse r, G1313A Autosamp le r, G1314A Varia-
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