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a e o l o gF an dTo
x i co l口 g夕 19 9 1F e b ; 5(l )
龙牙穗木总贰的抗炎作用 ’
周重楚 孙晓波 刘 威 高洪波 师海波 王桂英 2杨竟平
(吉林省中医中药研究院中药所药理室 , 长春 1300 21 )
提要 龙 牙格木 总武 ( A s) 显著抑制 大 鼠 角叉 莱
胶 、 甲醛 、 热 烫 、 P G E Z 和组胺一性足肿胀 。 衬 制霉菌
素 、 5一H T 引起 大 鼠足肿胀有一 定抑制作 用 。 抑制 巴
豆 油 气囊肿渗 出和 肉茅组 织增生 , 抑制 P G E Z 、 组
胺 、 5一 H T 引起的毛细血管通透性增加 。 抑制 白细 胞
游走 , 并能提高清除 自由基 的能 力 。 其抗炎作 用不依
籁 于垂体一肾上腺皮质系统 , 但时肾上 腺皮质有一 定
刺激作 用 。
关键词 龙 牙袍木总武 ; 炎症 ; 抗炎剂
龙牙惚木 伙 r a lia e za ta (M i q ) s e em ) 系五加科
惚木属乔木 , 我国东北蕴藏量很大 , 它有祛风除湿等
功效 , 民间用于治疗风湿性腰腿痛 、 关节炎 、 · 肾炎等
病 〔 ’〕 。 其抗炎作用未见报道 , 我们对其抗炎作用进
行了研究。
0
.
5℃ 。 恒温水浴中 5 m in 造成热烫性足肿胀 川 。 按
A r r i g o n i一 M a r t e l li 法 , 将制霉菌素溶于 N , N 一二甲
基乙酞胺磷酸缓冲液 ( 3 : 7 ) 中 ( 30 0 00 0 I U / m l ) ,
左足注射上述溶剂 , 右足注射溶有制霉菌素的溶液 ,
造成制霉菌素性足肿胀 〔 3 , 。 用窄带尺测量左右足躁
关节及 足蹿圆周和之差作为肿胀程度 。 按 R o b er t
法 〔 4〕 , 用乙醚麻醉大鼠 , 于背部皮下注射 20 m l空
气 , 然后注人 1% 巴豆油 1 m l , 将大鼠背部朝下 , 转
动大鼠使巴豆油均匀分布 。 48 h 抽出空气 , 造成巴豆
油气囊肿 。 白细胞游走按 w ar ne 法 (5) 进行 。 参照文
献测渗出物中 P G E 含量 〔6 , 和组胺含量 印 , 按安替比
林 比色法测 酸性磷酸酶含量 〔“ 〕 , 肝组织 中丙 二醛
(M D A ) 含量用硫代巴 比妥酸 ( T B A ) 反应物显色法
测定 〔9 , 。 仿 N e ls o n 法 〔` 0 , 测过氧化氢酶 (C A T ) 活
性 。 用化学发光法 川 , 测血清中超氧化物歧化酶
(S O D ) 活性 。
用 t 测验进行两组均数差的显著性检验 。
材料与 方 法
动物 W is t a r 和杂种大鼠 , 体重 17 5士 S D 15
;g 昆明种小鼠 , 体重 20 土 S D 1 5 9 , 早忿不拘 , 本院
和中国医科院实验动物饲养场提供 。
药 品 龙 牙穗木 总 贰 ( T o t a l a r a lo s i d e s o f
A ar il a e la at
,
A s) 为灰黄色粉末 , 易溶于水 , 不易潮
解 , 含量 80 ~ 85 % , 延吉制药二厂提供 , 临用时以蒸
馏水配成所需浓度之溶液 。 ig 给药 , 对照组 ig 同体积
蒸馏水 。
角叉菜胶系辽宁省药物所提供 , PG E : 由白求恩
医科大学新药研究室提供 。 组胺 、 5一 H T 、 邻苯二甲
醛 ( O P T ) , 瑞 士 lF u k a 厂 出 品 ; 制 霉 菌 素
(m yc os at it n)
, 上海信谊药厂 ; 十二烷基磺酸钠 , 上海
白鹤化工厂产品 ; 硫代巴比妥酸 , 北京化工厂产品。
方法 于大鼠右后足蹄腔膜下分别注人下列致
炎剂致炎 ; l% 角叉菜胶 、 p G E Z (20 0 # g / m l) 、 0 . 2 % 组
织胺 、 .0 0 2 % 5一 H T 0 . 1 m l , 参照中村秀雄法将大鼠右
后足 爪 以 长 毛和 绒毛 明显分 界处 为线浸 于 50 士
1 9 89 年 8 月 3 日收稿 19 89 年 1 1 月 2 7 日修回
`本文曾于 19 86 年在北京召开的国际传统药和现代药
理讨论会 卜小组报告 .
2延吉制药厂 ; 3 白求恩 味科大学
结 果
对正常大鼠多种急性足肿胀模型和去肾上腺大鼠
角叉菜胶性足肿胀的影响 按表 1 分组致炎与给
药 , 结果表明 19 A s 23 4 m g / k g ( l / 5 L D S。 ) 及 1 17
m g / k g ( 1 / 10 L 5D 0) 可显著抑制角叉菜胶性足肿
胀 , 对去肾上腺大鼠角叉菜胶 、 组胺 、 PG E : 性足肿
胀亦有明显抑制作用 。 对 5一 H T 性足肿胀也有一定抑
制作用 。 显著抑制热烫性足肿胀 。 在 4 , 24 h 显著抑
制制霉菌素性足肿胀 。 在 2 , 6 h 有一定抑制作用但不
显著 。
对制霉菌素性足肿胀渗出物中酸性磷酸酶含 t 的
影响 将上述制霉菌素性足肿胀大鼠于致炎后 24 h
处死 , 剪下肿胀足爪 , 剥皮放人 2 m l 生理盐水中浸泡
20 m in
, 离心取上清液 , 按前述方法测酸性磷酸酶含
量 。 对照组为 14 .0 土 S D 1 . 2 I U % , 给药组为 .7 0 士 1 . 0
I U %
, 两组比较差异显著 (P < .0 0 01 ) 。
取大鼠分对照 、 A s 组 , 每组 6 只 , 同法用 2 . 5%
甲醛 0 . 1 m l致炎 。 致炎前 l h 和致炎后每天 19 A s 1 17
m g / k g
,
l h 后测足肿胀度 , 连续 s d , d s 处死大
鼠 , 称取每鼠肾上腺 、 胸腺重量 。 结果表明 A s 可显
著抑制甲醛引起的大鼠足肿胀 , 肾上腺重量明显高于
对照组 , 但对胸腺无明显影响 。
花 一
目 Il
中国药理学与毒理学杂志 199 1 年 2 月 ; 5 ( l ) 3 1
T a b 1
.
E n免c t o f a r a l o sid e o n so e d e m a o f r a t 城n d p a win d uc e d b yPh lo gi s廿c a g e n t s
P h lo g i st i e
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D o sC
(m g / k g )
P e r im e te r o f
r a t h in d p a w(m m )
G r o uP
2 h 4 h 6h 24 h
C a r r a g e e n in
H i st a m i l e
5一H T
C
o n t r o l
A r a lo sid e s
A ra lo sid e s
C o n t r o l
A r a l o sid e s
八 C o n t r o l
△A r a lo sid e s
C o n t r o l
A r a l o sid e s
C o n t r o l
A r a l o sid e s
C o n t r o l
A r a l o sid e s
C o n t r o l
A t a l0 S id e s
C o n t r o l
A r a l o sid e s
2 3 4
1 17
13
.
7 士 3 0
3
.
0 士 3 . 2 *
2 滩 士 1 . 7 * * *
5 9
10
,
5土 2 . 6
7 2 士2 . 1
19
.
8 士 1 . 5
10
.
0 士 5 . 0 *
11
,
2 土 4 6
1 9
.
8 士 2 . 6
15
.
6 士 0 . 6
l 0
1 17
16
一
6 土 2 . 5
12
.
1士 2 . 5 草 *
l 0
1 17
6
.
2 士 1 6
3
.
7 士 0 . 5 * *
2 4
.
5 士 3 . 3
1 1
.
2 士 5 . 0 中 *
9 2 士 6 . 2 * 出
2 1
.
3 士 3 . 3
18
.
2 士 2 . 7
3 2
.
4 士 4 . 0
2 4 7 士 2 , 4 幽 布 琦
2
.
6 士 0 . 5
0名士 0 4 中 * *
l 0
1 17
1 5 4 士 1 . 1
10
.
7 士 1 8
7
.
4 士 1 . 2
5
.
7 士 1 . 6
P G E Z
1 17
阮a l d
1 17
2 2 9 士 1 9
16
,
8 士 3 . 1 审 .
M y c o s t a t in
1 17
4月 士 1 1
2
,
8士 1 . 3 二
2 2
.
3士 1 . 6
16名士 2 , 4 卒 中
10
.
5 士2 . 9
8
.
4 士2 . 1
2 1
.
7 士 3 . 7
8
.
6 士 4 .4 出 *
6
.
6 士 3 ` 8 中 伟
19
.
3 士 4 . 9
16
.
2 士 4 . 4
3 0
.
0 士 4 . 7
2 1
.
7 士 3 . 1 褚 片 章
3
.
5士 1 . 1
1
.
5 士 0 8 * *
10
.
2 士 1 .0
8
.
1士 1 . 6 率 率
4
.
1士 0 . 6
1
.
8 士 1 . 2 二 幽
2 5
,
1士 1 . 9
1 9
.
3 土 2 . 8 * *
15
.
3士 1 . 8
1 1 3 士 2 . 1 南 申
3
.
3 士 0 . 7
1
.
0 士 0 . 9 穿 产 率
2 4 7 士 2 0
2 1 8 士 l ` 0 率
2 0
.
0 士 2 . 3
17
.
6 士 3 . 5
1 2
.
4 士 3 . 5
7
.
1士 2 0二
△ a d r e n a l e e t o m i z e d . 又 士 s n , ’ p < o , 0 5 , ” p < o乃 l , “ ` p < o乃0 1 , e o m p a r e d w i th e o n t r o l .
T a b 2
.
E fe
c t o f a r a lo is d e s o n o e d em a o f r a t h i n d Pa w i n du e e d b y of rm
a ld e h y d e
G r o u P
D o s e
(m g / k g )
P e r im
e t e r o f r a t h in d P a w (m m )
5 d1 d Z d 3 d 4 d
A d r e n a l
(m g / k g )
T h y m u s
( g / k g )
C o n t r o l
A r a lo s id e s 1 17
5
.
7 士 1 5 6 . 3士 1 . 4 4 . 7 士 0 . 8
3
.
7 士 0 . 5 卒 幸 3 . 7 士 l , 2 * 中 2 . 3 士 1 . 0 * *
3 2 士0 . 8
2
.
0 士 0 . 9 .
2 3 士 0 . 8
1 2 士 0 , 8 *
2 2
.
7 士 3 . 7
2 8 7 士 3 9 率
1
.
2 4 士 0 . 2 0
1
.
2 6 士 0 . 19
A r a lo s id e s 19 d a ily fo r s d
,
if r s t d o s e w a s g i v e n 1 h b e fo r e th e i nj
e e t io n o f 2
.
5% fo r m a ld e h y d e 0
.
1 m l
, a n d th e in t e n s it y o f e d e m a
w a s m e a s u r e d 1 h a ft e r 19 a r a lo s i d e s
. 又 士 S n , n = 6 , ` p < o乃5 , ” p < 0 0 1 , c o m p a r e d w i th e o n t r o l .
T a b 3
.
E fe
e t o f a r a l o is d e s o n th e i n c r e a se o f v a sc u l a r 碑mr e a b i li t y i n d u c e d b y Ph l o g is t ie a g e n t s
I l d e X G r o
u P H is t a m in e P G E Z 5一 H T
(9)0一A r e a o f e o l o u r e d
s k i n (m m
Z
)
17 7 士 4 4
4 2 士 13 *
( 1 0 )
( 5 )
14 6 士 4 5
B lu e in t e n s i ty
(A
6一。 n m
)
C
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A r a lo s l d e s
C o n t r o l
A r a lo si d e s
0
.
14 士 0 . 0 4
0
.
0 8 士 0 . 0 2 中
( 10 )
* ’
( 5)
9 5士 30 南
0
.
3 5士 0 . 10
0 1 5士 0 . 0 4 * * .
8 4 士 2 7
56 士 2 6 申
0
一
2 4 士 0 . 0 4
0
.
1 1士 0 04 申 . `
(9)一()
Ph lo g i s t i
c a g e n t s w e r e inj e
e t e d in t r a d e r m
a lly 1 h a ft e r 19 a r a lo s id e s 1 17 m g / k g
.
E v a n s b l
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( l%
,
4 m l / k g ) w a
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jn tr a v e n o u s ly im m
e d ia t e l y a ft e r id Ph lo g i s t ie a g e n t a n d r a t s w e r e d e e a p i t a t e d 2 0 m i n la t e r
. 又 士 S D , ( ) = n , ’ p < 0 . 0 5 ,
. 申
p < 0
,
0 1
,
e o m p a r e d w i th e o n t r o l
.
Ch n i
e s e Jo u r n a l of Ph
a
rm
a e o lo g 厂 an d To xc io log J
夕 199 1 F e b; 5 ( 1)
对大鼠巴豆油气囊肿的影响 大鼠于致炎后 19
A s 117 m g / k g
, 每天一次 , 连续 7 d , d 7 处死大
鼠 。 对照组 (n = 7) 囊内渗出液与肉芽组织湿重 , 分
别为 6 . 6 士 SD 1 . 4 m l 与 3 . 5 士 SD 0 . 6 9 , 给药 组
(
n = 6 ) 分别为 4 . 6 土 1 . 6 m l 与 1 . 9 士 0 . 7 9 , 表明 A s 显
著抑制大鼠巴豆油气囊肿的渗出 (p < .0 0 5) 和肉芽组
织增生 (P < 0 . 00 1 ) 。
对毛细血管通透性的影响 按表 3 分组 , ig A s
后 l h 于大鼠背部两侧分别 id 0 . 0 5 m l 组胺 20 0 拜g ,
p G E Z 2 5 拜g , 5一H T 20 群g , 立即 i v l% E v a n s 蓝 4 m l /
k g
,
20 m in 后断头处死大鼠 , 剥皮测着色皮斑面积及其
丙酮生理盐水 ( 7 : 3) 浸出液中蓝色深度 (A 6 1。 。 m )。
表 3 结果表 明 , A s 显著抑制组胺 、 P G E : 和
5一 H T 引起的毛细血管通透性增加 。
对 大鼠急 性胸膜炎渗出与 白细胞游走 的影响
ig A s l l7 m g / k g l h 后 , 乙醚麻醉大鼠 , 往胸腔
注射 0 . 5% 角叉菜胶 .0 4 m l / 只致炎 , 6 h 后测胸腔内
渗出液体积及白细胞总数 , 对照组 (n = 6) 分别为
0
.
6 1士 SD 0 . 2 1 m l 与 (2 8 士 S n g ) x 10 6 , 给药 组
(n = s ) 分别为 0 . 25 土 0 . 0 6 m l 与 (1 1士 s ) x 10 6 , 差异
显著 (p < .0 01 ) 。 表明 A s 显著抑制大鼠角叉菜胶性
胸膜炎的渗出与白细胞游走 。
对炎症渗出物中 P G E 含 t 的影响 角叉菜胶
引起大鼠足肿胀 4 h 后 , 剪下肿胀足爪 , 剥皮放人 3
m l 生理盐水中浸泡 10 m in 取出足爪 , 离心取上清液按
文献 〔 ’ 〕 方 法 提取 并 用 7 50 型紫外分 光光 度 计
(A Z s o
n m
) 测 P G E 含量 。 对照组 (n = 6 ) 为 8 3 . 6士 S D S ,
5
.
5 料g / g 给药组 (n = 6) 为 4 5 . 9士 S n 0 . 9 召g / g (p <
.0 001 ) 表明 A s 可显著减少炎症组织中 P G E 含量 。
对右旋糖醉性肿胀足中组胺含 , 的影响 取大
鼠 , 分成对照 (n = 8 ) 与 A s 组 ( n = 6 ) , 19 A s 1 17
m g / kg 后 l h 用 3% 右旋糖醉 0 . 1 m l致炎 , l h 后同
法剪下右后足爪 , 剥皮后 , 置 2 m l生理盐水中浸泡
30 m in 取 1 . 6 m l 上清液按组胺荧光法提取并测定组胺
含量 。 对照组 为 1 . 0 2士 S D 0 . 03 并g / m l , A s 组 为
0
.
9 3士 0 . 02 群g / m l ( p < 0 . 00 1 ) 表明 A s 可明显减少炎
症组织中组胺含量 。
对脂质过氧化产物一丙二醛 (M D )A 含 t 、 过氧化
氢酶及血清中超氧化物歧化酶活力的影响 取小鼠
20 只分成对照组与给药组 , 每组 10 只 , ig A s l l7
m g / k g 每天 l 次 , 连续 s d , d s 给药后 l h 禁食 s
h
,
19 4 5% 乙醇 15 m l / k g , 12 h 后断头处死小鼠 , 剖
取肝脏制备 10 % 肝匀浆 , 测肝组织中 M D A 含量 。 另
取小鼠 20 只 , 分组与给药同上 , 末次给药后 l h 起饥
饿 2 4 h 后 , 断头处死小鼠 , 测肝匀浆中过氧化氢酶活
性 。 再取大鼠 16 只 , 分组给药同上 , 每组 8 只 , 末
次给药 l h 后断头取血测血清 S O D 活性。
T a b 4
.
E ll沁C t o f a r a l o is d es o n e o n t e n t o f m妞10 n 一
d i a ld e h y de
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x i d e dism
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G r o u P
M D A
(m m o l / g )
C A T
(m m
o l / L )
SO D
( I U / m l)
C o n t r o l o石 2 士 0 . 10 4乃士 1 6
A r a l o s id e 0 3 4 士 0乃 6 * , 审 6 4 士 1 . 1 卒 巾 甲
3 2 3 士 1 3 1
5 2 8 士 19 2 申 诊
A r a lo s id
e s 1 1 7 m g / k g ig d a ily of r s d
. 又 士 SD , n = 8一 1 0 ,
* ’
p < 0
.
0 1
, ” ’ p < o刀0 1 , e o m p a r e d w i th e o n t r o l .
结果表明 , A s 显著减少乙醇中毒小鼠肝组织中
M D A 含量 。 明显提高小鼠肝组织中过氧化氢酶活性
及大鼠血清中 S O D 活力 。
讨 论
结果表明 , A s 明显抑制角叉菜胶 、 甲醛 、 热烫 、
制霉菌素 、 组胺 、 P G E : 和 5一 H T 等引起的大鼠足肿
胀 , 对 P G E Z 、 组胺和 5一 H T 引起的血管通透性增
加 , 对巴豆油气囊肿渗出、 肉芽组织增生和白细胞游
走均有显著的抑制作用 , 说明 A s 有明显 的抗炎作
用 。 A s 明显抑制热烫性足肿胀表明其对激肤 , 特别是
缓激肤的形成及其致炎活性有抑制作用 山 。 A s 抑制
制霉菌素性足肿胀减少其渗出物中酸性磷酸酶含量 ,
表明其有稳定溶酶体膜作用 〔3 , 。 A s显著抑制脂质过
氧化产物 M D A 产生 , 提高 C A T 活性和 S O D 活性 ,
表明其有很强的清除自由基的作用 , 从而防止了自由 、
基引起的 gI G 改变和 gI G 的抗原性 , 防止变性的 gl G
与类风湿因子形成免疫复合物 〔” 〕 , 因此清除自由基
也是其抗炎重要机理之一 。 A s 明显抑制 P G E 和组胺
的合成或释放 。 P G E 和 组胺是重 要的炎症介质 。
R o b in s o n 报道 〔’ “ , , PG s 特别是 E 类 PG s 在免疫调
节中起重要作用 , PG E 能选择性地抑制抑制性 T 细
胞 ( T s) 功能 , 从而使 T s 细胞失去了对辅助性 T 细
胞 ( T H ) 和 B 细胞功能的抑制 , 导致 B 细胞功能亢
进 , 分泌过多的抗体 (如类凤湿因子等 ) , 这也是形
成自身免疫的重要原因 。 故 A s 抑制 P G E 产生也是其
治疗风湿类风湿性关节炎及 自身免疫性疾病的重要机
理之一 。
A s 对去肾上腺大鼠角叉菜胶性足肿胀仍有明显抑
制作用 , 但连续给药 s d , 使肾上腺增大。 这说明 A s
的抗炎作用不依赖于垂体一肾上腺皮质系统 , 但对肾
上腺皮质有一定刺激作用 。
目
心之
中国药理学与毒理学杂志 19 91 年 2 月; 5( l) 33
综上所述 , A s 对非免疫性炎症有显著的抑制作
用 , 抗炎作用不依赖于垂体一肾上腺皮质系统 , 对炎
症过程中许多环节均有影响 。 且对肾上腺皮质也有一
定的刺激作用 。
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a lP y o f d e e o m P o s j t io n o f
h y d r o g e n P e r o x i d e b y c a t a las e a t 2 5℃ (w i th m o l a r e x t in c一
t io n e o e if
c ie n t s o f H 2 0 : s o lu t io n s in th e U V )
.
A n a l
B i o e h e用 1 9 7 2 ; 4 9 : 4 7 4
1 1 M is r a H P
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·
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B io hP y
s 19 7 7 ; 1 8 1 : 3 0 8
12 W i
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,
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e a l a c t iv i t y
.
B i o c h lm B i
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13 R o b in s o n D R
,
L e v i n e L
.
P r o s t a g la n d i n c o n e e n t r a t io n s
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s e a se s
.
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Y o r k
:
R a v e n 19 7 4 ; 2 2 3一 2 2 8
A n it 一 i n fl a m m a t o r y e fe c t o f a r a lo s i d e s
Z H O U C h o n g一 C h u , SU N X i a o 一 B o , L IU W e i , G A O H o n g一 B o , SH I H a i一 B o ,
W A N G G u i一Y i n g , Y A N G J i n -g iP n g
(D印 r p h a r阴a e o l o g , , , nI s t i r u re of hC in e s e M a t e r ia M e idc a , A e a de 柳 of 7 ’r a id t i o n a l M e idc in e a n d
对 d te r故 五了亡dl’c a of J ilin rP o v ln e e , hC a雌 c h u n 130 02 1)
A B S T R A C T A r a lo s i d e s w a s e x t ar e te d fr o m th e
b a r k o f s t em a n d r o o t o f A r a lia e al ra (M iq ) S e e m
.
W e
ha ve
s t u d i ed t h e a n ri一i n fl a m m a t o r y e fe e t o f
a r a lo s id e s
.
I t suP P
r e s s e d s i g n i if e a n t ly t h e s w e l li n g o f r a t h i n d
Pa w i n d u e e d by e a r r a g e e n i n in b o t h in t a e t a n d
a d r e n a le e t o m i z e d r a t s
,
th e s w e ll in g in d u e e d by P G E Z
,
hi s ta m i n e
,
5一H T , fo mr a ld e h y d e a n d m y e o s t a ti n a n d
ht e s c a l d o e d em a in d u e e d by s e a ld i n g r a t
` 5 h in d p a w
.
A r a lo s i d e s h a d m a r k e d i n hi b i t o r y e fe
c t o n th e i n c r e a s
-
s e d P e mr
e a b il it y o f e a Pi l la r ie s e a u s e d b y id P G E Z
,
h is t a m in e
,
5一 H T , o n t h e P r o life r a ti o n o f g r a n u la ti o n
a n d e x u d a t i o n o f a i r g r a n u lo m a i n d u e e d by e r o t o n 0 11
a n d o n th e le u k o e y ti e m i g r a t o yr er s P o n s e
·
T h e e o n te n t o f P G E Z
,
h i s t a m i n e a n d a c i d
Ph o s P h a ta s e i n th e i n fl a m m a t o yr e x u d a t e fo mr
e d b y
e a r r a g e e n in
,
d e x t r a n a n d m y e o s t a t in w a s d e e r e a s e d
m a r k e d ly b y 19 a r a l o s i de s
.
T h e e x t r a e t d e e r e a s e d o b v i
-
o u s ly t h e e o n te n t o f m a lo n d ia ld e h y de (M D A ) i n
h e P a t ie t is s u e o f i n t o x i c a te d m i e e i n d u e e d b y a le o h o l
a n d i n c r e a s e d n o t i e e a b ly th e a e t iv i yt o f e a t a l a s e (C A T )
in h e P a t i e ti s s u e o f m i e e a n d s u Pe r o x i d e d i sm u t a s e
(S O D ) i n s e r u m o f r a t s
.
K EY W O R D S a r a lo s i d e s ; i n fl a m m a t i o n
; a n t i一in -
fl a m m a t o r y a g e n t