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六月青皂苷对免疫抑制小鼠免疫功能的影响



全 文 :doi:10. 3969 / j. issn. 1000-484X. 2013. 05. 007
①本文为广西科学研究与科技开发攻关项目(桂科攻 10124008-6,
桂科攻 0992003A-2) ,广西科技基础条件平台建设(12-97-20)
②通讯作者,E-mail:huangjianchun008@ 163. com
作者简介:汤小军(1978 年 -) ,男,硕士,讲师,主要从事免疫调节方
面研究,E-mail:tangxiaojun008@ 163. com,同时就职于广
西卫生职业技术学院,南宁 530021。
六月青皂苷对免疫抑制小鼠免疫功能的影响①
汤小军 黄建春② 梁 韬 黄仁彬 (广西医科大学药学院,南宁 530021)
中国图书分类号 R392 文献标识码 A 文章编号 1000-484X(2013)05-0486-05
[摘 要] 目的:研究六月青皂苷(Liuyueqing Saponins,LYQS)对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。方法:实验动物随机
分为 5 组:空白对照组、环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)模型组和 LYQS高、中、低剂量组。除空白对照组外,其它各组小鼠
于给药的第 2、4、6、8、10 天腹腔注射 CTX(0. 02 g·kg - 1·d - 1)造模。空白对照组和 CTX 模型组均用生理盐水(20
ml·kg -1·d -1)灌胃;LYQS高、中、低剂量 + CTX组用 LYQS[(1、0. 5、0. 25)g·kg -1·d - 1) ]灌胃,给药 10 天后,检测小鼠血
中红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、血小板(PLT)数量、血红蛋白(Hb)含量和 TNF-α、IFN-γ、TGF-β1、IL-2 含量;检测胸腺指数、
脾脏指数、脾淋巴细胞转化功能、腹腔巨噬细胞吞噬功能、NK细胞杀伤活性和血清 50% 溶血值(HC50) ;观察二硝基氟苯诱导
的迟发型超敏反应。结果:与 CTX模型组比较,LYQS各剂量组的胸腺指数明显提高;高剂量组的 WBC数量、耳肿胀度明显提
高;高、中剂量组的 RBC、Hb、IL-2、脾脏指数、HC50、脾淋巴细胞转化功能、巨噬细胞廓清指数和吞噬指数明显提高;高、中剂量
组的 TGF-β1明显降低。结论:LYQS能增强 CTX免疫抑制模型小鼠的特异性及非特异性免疫反应,提高其免疫功能。
[关键词] 六月青皂苷;免疫抑制;免疫功能
The effect of Liuyueqing Saponins on regulation of immune functions in immuno-
suppressive mice model
TANG Xiao-Jun,HUANG Jian-Chun,LIANG Tao,HUANG Ren-Bin. Pharmaceutical College,Guangxi Medical
University,Nanning 530021,China
[Abstract] Objective:To study the effect of Liuyueqing Saponins (LYQS)on regulation of immune functions in immunosup-
pressive mice model. Methods:The mice were divided into five groups randomly:normal mice group,cyclophosphamide (CTX)
group and high,medium,low-doses of LYQS groups. Except the normal group,other groups were intraperitoneal injection with CTX in
2,4,6,8,10 d. The normal mice and CTX groups were intragastric administration with NS(20 ml·kg -1·d -1). The high,medi-
um,low-doses of LYQS + CTX groups were intragastric administration with LYQS [(1,0. 5,0. 25)g·kg -1·d -1) ]for 10 d. The
blood cells were counted by hematology analyzer,the level of TNF-α,IFN-γ,TGF-β1 and IL-2 products in serum were measured. In-
dexs of thymus and spleen were calculated. Proliferated ability of lymphocyte,the phagocytosis ability of macrophage,50% serum he-
molysin concentration(HC50)were assayed. And the function of NK cells was detected with NK cells mediated cytotoxicity assay. The
delayed type hypersensitivity (DTH)was also observed. Results:Compare with the CTX group,indexs of thymus in the high,medi-
um,low-doses of LYQS groups were enhanced. WBC and ear swellings in the high-doses of LYQS group were enhanced. RBC,Hb,
IL-2,HC50,indexs of spleen,proliferated ability of lymphocyte and the phagocytosis ability of macrophage in the high,medium-doses
of LYQS groups were enhanced. TGF-β1 in the high,medium-doses of LYQS groups were reduced. Conclusion:LYQS can regulate
the specific and non-specific immune functions to enhance immune functions of immunosuppressive mice.
[Key words] Liuyueqing Saponins;Immunosuppression;Immune functions
六月青系爵床科(Acanthaceae)植物肖鸡笼(顶
头马兰)Tarphochlamys affinis (Griff) Bremekhu
[Strobilanthes affinis (griff)Y. C. Tang]的干燥地
上部分,是一种广西民间草药。《本草拾遗》记载,
六月青能活血、凉血、疏肝泻湿、消肿止痛,主要用于
急慢性肝炎、黄疸等治疗[1]。前期研究发现,六月
青皂苷(Liuyueqing Saponins,LYQS)对小鼠免疫性
肝损伤具有明显的保护作用[2],六月青萃取物石油
醚部位、氯仿部位、乙酸乙酯部位、水饱和正丁醇部
位、60% 乙醇部位能提高环磷酰胺(Cyclophospha-
mide,CTX)所致免疫抑制小鼠的免疫功能[3]。本
实验用 CTX所致免疫抑制小鼠为模型,探讨 LYQS
·684· 中国免疫学杂志 2013 年第 29 卷
对免疫抑制小鼠的免疫功能影响。
1 材料与方法
1. 1 动物 健康昆明种小鼠,SPF级,雌雄各半,体
重(20 ± 2)g,由广西医科大学实验动物中心提供,
试验动物生产许可证:SCXKG 桂 2003-0003,试验动
物使用许可证:SYKG桂 2003-0005。
1. 2 药品和试剂 LYQS 由广西医科大学药理实
验室提取,经常规化学定性试验证实为皂苷类,纯
度为 84. 7%,临用前用生理盐水配制并稀释;CTX
注射液(江苏恒瑞医药股份有限公司) ;RPMI1640
培养基(美国 Gibco 公司) ;新生小牛血清(杭州四
季青生物工程材料有限公司) ;小鼠 TNF-α、IFN-γ、
TGF-β1、IL-2 ELISA 试剂盒(晶美生物工程有限公
司) ;K562 白血病细胞(长春生物制品研究所) ;D-
Hank’s、ConA(北京北方同正生物有限公司) ;MTT
(Amresco) ;DMSO(广州市新港化工有限公司) ;印
度墨汁(Wason公司)。
1. 3 仪器 酶标仪(Thermo Labsystems 公司) ;
Olympus倒置式生物显微镜(日本奥林巴司公司) ;
水套式二氧化碳培养箱(美国 SHELLAB) ;Sigma 台
式高速冷冻离心机(德国 Sigma) ;全自动血细胞分
析仪(上海维世康医用电子有限公司) ;分光光度计
(上海精密科学仪器有限公司)。
1. 4 实验动物分组及给药 75 只小鼠随机分成 5
组,每组 15 只。除空白对照组外,其它各组小鼠于
给药的第 2、4、6、8、10 天均按 0. 02 g·kg - 1·d - 1
腹腔注射 CTX造模。空白对照组和 CTX 模型组均
按 20 ml·kg -1·d -1生理盐水灌胃;LYQS 高剂量
(LYQSH,1 g·kg
-1·d -1)+ CTX 组;LYQS 中剂量
(LYQSM,0. 5 g·kg
- 1·d - 1)+ CTX组;LYQS低剂
量(LYQSL,0. 25 g·kg
- 1·d - 1)+ CTX 组。连续
灌胃给药 10 天,每天 1 次。
1. 5 对免疫抑制小鼠红细胞、白细胞、血小板数量
和血红蛋白含量的影响 第 11 天小鼠摘除眼球采
集全血 40 μl,全自动血细胞分析仪检测小鼠血中红
细胞(RBC)、白细胞(WBC)、血小板(PLT)数量和
血红蛋白(Hb)含量。
1. 6 对免疫抑制小鼠巨噬细胞吞噬功能和胸腺指
数、脾脏指数的影响 分组及给药同上,于末次给药
后 0. 5小时,于各鼠尾静脉注射经稀释的印度墨汁 5
μl /g,于 1分钟(t1)和 5分钟(t5)后,分别从眼眶静脉
取血20 μl,加到1 g /L Na2CO3溶液2 ml中摇匀,用分
光光度计在 680 nm 处测定 t1和 t5的吸光度值(A1,
A5) ,计算廓清指数 K。之后,将小鼠处死,取肝脏及
脾脏称质量,计算吞噬指数 α。廓清指数 K = (logA1 -
logA5)/(t5 - t1)= log(A1 /A5)/4,吞噬指数 α =体质量 /肝脾重 × K1/3。
取胸腺和脾脏,吸干表面血液,称重,计算胸腺指数和
脾指数,胸腺(脾脏)指数 = 胸腺(脾脏)重量(mg)/体重(g)。
1. 7 对免疫抑制小鼠 NK 细胞杀伤活性的影响[4]
分组及给药同上,取脾制备小鼠脾细胞悬液,调整
细胞浓度为 2 × 107ml - 1作为效应细胞。传代培养的
K562 细胞(细胞浓度为 1 × 106 ml - 1)作为靶细胞。
取靶细胞悬液 100 ml 加入 96 孔板(每组 3 个平行
孔) ,各孔再加入等体积的效应细胞。另设效应细
胞和靶细胞对照组。于 37℃ 5% CO2培养箱中杀伤
4 小时,加 MTT 试剂(5 mg /ml)20μl /孔,孵育 4 小
时,快速倒去培养液,加入 DMSO 100μl /孔,混匀,酶
标仪 570 nm测定 A值。NK细胞杀伤活性 = [1 - (实验组
A 值 -效应细胞 A值)/ 靶细胞 A值] × 100%。
1. 8 对免疫抑制小鼠迟发型超敏反应的作用 分
组及给药同上,第 1 天将鼠腹部去毛,范围为3 cm ×
3 cm,将 10 g /L二硝基氟苯(DNFB)均匀涂抹其上。
末次给药后 0. 5 小时,将 10 g /L DNFB 均匀涂抹于
小鼠右耳,攻击后 24 小时,脱颈椎处死小鼠,剪下左
右耳壳,用打孔器取下直径 8 mm 的耳片,称质量,
以左右耳片重量之差作为肿胀度。
1. 9 对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞转化功能的影
响[5] 分组及给药同上,处死小鼠后浸泡 75%乙醇
中 5 秒,无菌取出脾脏,用 D-Hank’s 洗 3 次,剪碎,
经 200 目不锈钢筛网过滤至离心管中,离心弃上清,
加 2 ml D-Hank’s,用小鼠淋巴细胞分离液分离出淋
巴层细胞,调整细胞浓度为 5 × 106 ml - 1,加入 96 孔
中,100 μl 细胞悬液 /孔,6 孔 /鼠,其中对照孔 3 孔:
加 RPMI1640 培养液 100 μl /孔;Con A 刺激孔 3 孔:
加 Con A(10 mg /L)溶液 100 μl /孔。于 37℃ 5%
CO2培养箱中孵育 68 小时后,加 MTT(5 mg /ml)溶
液 10 μl /孔,孵育 4 小时后,1 000 r /min 离心 10 分
钟,小心吸去上清,加 DMSO 150 μl /孔,振荡 10 分
钟,酶标仪 570 nm 测定 A 值,计算刺激指数(SI)。
SI = Con A刺激孔 A值 / 对照孔 A值。
1. 10 对免疫抑制小鼠血清溶血素的影响 小鼠分
组同上,除 CTX 外均灌胃给药,1 次 /天,连续 4 天。
给药第 1 日腹腔注射 20% SRBC 0. 2 ml /只进行免
疫,除正常对照组外各组在实验开始时尾静脉注射
CTX,连续 3 天。免疫后第 4 日摘眼球取血,分离血
清,将血清稀释 500 倍后取稀释血清 1 ml,分别加
入 5% SRBC 0. 5 ml,10%补体 1 ml,置于 37℃恒温
水浴中保温 30 分钟,移至冰浴中终止反应,离心取
上清液 1 ml加都氏试剂 3 ml,摇匀放置 10 分钟,酶
·784·汤小军等 六月青皂苷对免疫抑制小鼠免疫功能的影响 第 5 期
标仪 540 nm 测定 A 值,同时取 5% SRBC 0. 25 ml
加都氏试剂至 4 ml,540 nm测定 A值。血清半数溶血值
(HC50)=样品 A值 / SRBC半数溶血值 ×稀释倍数。
1. 11 对免疫抑制小鼠 TNF-α、IFN-γ、TGF-β1、IL-2
的影响 分组及给药同上,给药 10 天后,第 11 天眼
球取血,分离血清,参照 ELISA 试剂盒说明书操作,
酶标仪 450 nm 测定各孔 A 值。结果处理:标准品
和标本的 A值减去空白孔 A值。以 A值为纵坐标,
以标准品浓度为横坐标,绘制散点图,将各标准品所
得散点进行线性拟合,求出线性方程。将各样品 A
值代入方程求出对应的浓度。
1. 12 数据分析 采用 SPSS13. 0 软件进行分析,实
验数据的结果以 x ± s表示,多组均数比较采用方差
分析,组间差异的显著性检验采用 LSD法。
2 结果
2. 1 对免疫抑制小鼠 RBC、WBC、PLT 数量和 Hb
含量的影响 从表 1 可以看出 CTX 模型组 WBC、
RBC和 Hb显著低于正常对照组(P < 0. 05) ,而高
剂量组能明显提高 CTX 降低的 WBC 水平(P <
0. 05) ,高、中剂量组能明显提高 CTX 降低的 RBC
和 Hb水平(P < 0. 05) ,呈剂量依赖性,而各组间的
PLT无明显差异。
2. 2 对免疫抑制小鼠巨噬细胞吞噬功能、胸腺指数
和脾脏指数的影响 从表 2 可以看出 CTX 模型组
巨噬细胞廓清指数 K、吞噬指数 α、胸腺指数和脾脏
指数显著低于正常对照组(P < 0. 05 或 P < 0. 01) ,
而各剂量组能明显提高 CTX 降低的胸腺指数(P <
0. 05) ,高、中剂量组能明显提高 CTX降低的巨噬细
胞廓清指数 K、吞噬指数 α和脾脏指数(P < 0. 05 或
P < 0. 01) ,呈剂量依赖性。
2. 3 对免疫抑制小鼠迟发型超敏反应、血清溶血
素、NK细胞杀伤活性和脾淋巴细胞转化功能的影
响 从表 3 可以看出 CTX 模型组耳肿胀度、HC50、
NK细胞活性和脾淋巴细胞转化功能显著低于正常
对照组(P < 0. 05 或 P < 0. 01) ,而高剂量组能明显
提高 CTX 降低的耳肿胀度(P < 0. 01) ,高、中剂量
组能明显提高 CTX降低的 HC50和脾淋巴细胞转化
功能(P < 0. 05) ,呈剂量依赖性,各给药组 NK 细胞
活性较 CTX模型组有所提高但均无统计学意义。
2. 4 对免疫抑制小鼠 TNF-α、IFN-γ、TGF-β1和 IL-2
的影响 从表 4 可以看出 CTX 模型组 TNF-α 和
IL-2 显著低于正常对照组(P < 0. 05) ,CTX 模型组
TGF-β1显著高于正常对照组(P < 0. 05) ,而高剂量
组能明显提高 CTX降低的 IL-2(P < 0. 05) ,高、中剂
量组能明显降低 CTX提高的 TGF-β1(P < 0. 05) ,呈
剂量依赖性,各给药组 TNF-α和 IFN-γ较 CTX模型
组均无统计学意义。
表 1 LYQS对免疫抑制小鼠 RBC、WBC、PLT和 Hb的影响(x ± s,n =15)
Tab. 1 Effect of LYQS on RBC,WBC,PLT and Hb in immunosuppressed mice(x ± s,n =15)
Groups Dose (g /kg) WBC(109 L -1) RBC(1012 L -1) Hb(g /L) PLT(109 L -1)
Normal — 7. 01 ± 1. 682) 10. 09 ± 2. 052) 103. 14 ± 25. 222) 296. 91 ± 64. 37
CTX 0. 02 5. 51 ± 2. 061) 8. 15 ± 1. 861) 80. 81 ± 20. 081) 259. 75 ± 50. 32
LYQSH + CTX 1 6. 95 ± 1. 742) 9. 82 ± 1. 972) 99. 31 ± 25. 782) 280. 87 ± 73. 73
LYQSM + CTX 0. 5 6. 04 ± 1. 53 10. 01 ± 2. 112) 97. 18 ± 22. 592) 266. 52 ± 67. 45
LYQSL + CTX 0. 25 6. 79 ± 1. 83 9. 01 ± 1. 88 90. 84 ± 20. 29 271. 64 ± 69. 77
Note:Compare with normal group,1)P < 0. 05;Compare with CTX group,2)P < 0. 05.
表 2 LYQS对免疫抑制小鼠巨噬细胞吞噬功能、胸腺指数和脾脏指数的影响(x ± s,n =15)
Tab. 2 Effect of LYQS on the phagocytosis ability of macrophage and immune organs in immunosuppressed mice(x ± s,
n =15)
Groups Dose(g /kg) K α Indexes of thymus (mg /g) Indexes of spleen (mg /g)
Normal — 0. 0313 ± 0. 01164) 4. 89 ± 0. 934) 3. 43 ± 0. 634) 6. 18 ± 1. 403)
CTX 0. 02 0. 0209 ± 0. 00842) 3. 88 ± 0. 732) 2. 59 ± 0. 692) 4. 84 ± 1. 271)
LYQSH + CTX 1 0. 0339 ± 0. 01354) 4. 71 ± 0. 814) 3. 19 ± 0. 873) 6. 01 ± 1. 433)
LYQSM + CTX 0. 5 0. 0298 ± 0. 00953) 4. 58 ± 0. 743) 3. 22 ± 0. 793) 6. 04 ± 1. 513)
LYQSL + CTX 0. 25 0. 0276 ± 0. 0103 4. 36 ± 0. 59 3. 15 ± 0. 743) 5. 66 ± 1. 23
Note:Compare with normal group,1)P < 0. 05,2)P < 0. 01;Compare with CTX group,3)P < 0. 05,4)P < 0. 01.
·884· 中国免疫学杂志 2013 年第 29 卷
表 3 LYQS对小鼠迟发型超敏反应、HC50、NK细胞活性和脾淋巴细胞转化功能的影响(x ± s,n =15)
Tab. 3 Effect of LYQS on Ear swellings,HC50,NK activity,SI in immunosuppressed mice(x ± s,n =15)
Groups Dose (g / kg) Ear swellings (mg) HC50 NK activity (%) SI
Normal — 2. 5 ± 0. 63) 179. 5 ± 36. 53) 57. 8 ± 9. 83) 2. 33 ± 0. 674)
CTX 0. 02 2. 0 ± 0. 41) 153. 6 ± 31. 71) 48. 6 ± 8. 61) 1. 59 ± 0. 542)
LYQSH + CTX 1 2. 5 ± 0. 44) 188. 5 ± 41. 13) 55. 6 ± 10. 1 2. 24 ± 0. 903)
LYQSM + CTX 0. 5 2. 3 ± 0. 5 180. 7 ± 37. 43) 55. 4 ± 9. 8 2. 18 ± 0. 823)
LYQSL + CTX 0. 25 2. 2 ± 0. 5 165. 3 ± 34. 7 54. 8 ± 9. 2 1. 90 ± 0. 69
Note:Compare with normal group,1)P < 0. 05,2)P < 0. 01;Compare with CTX group,3)P < 0. 05,4)P < 0. 01.
表 4 LYQS对免疫抑制小鼠血清 TNF-α、IFN-γ、TGF-β1和 IL-2 含量的影响(x ± s,n =15)
Tab. 4 Effect of LYQS on serum TNF-α,IFN-γ,TGF-β1,IL-2 productions in immunosuppressed mice(x ± s,n =15)
Groups Dose (g /kg) TNF-α(pg /ml) IFN-γ(pg /ml) TGF-β1(ng /ml) IL-2(pg /ml)
Normal — 55. 96 ± 8. 722) 41. 3 ± 10. 1 1. 62 ± 0. 222) 163. 87 ± 47. 552)
CTX 0. 02 48. 41 ± 9. 841) 34. 7 ± 9. 2 1. 87 ± 0. 311) 118. 66 ± 43. 851)
LYQSH + CTX 1 51. 31 ± 8. 04 35. 1 ± 8. 6 1. 66 ± 0. 242) 157. 45 ± 52. 962)
LYQSM + CTX 0. 5 51. 40 ± 9. 61 33. 4 ± 8. 2 1. 65 ± 0. 212) 150. 10 ± 51. 65
LYQSL + CTX 0. 25 49. 87 ± 7. 72 34. 1 ± 8. 3 1. 77 ± 0. 23 141. 04 ± 30. 09
Note:Compare with normal group,1)P < 0. 05;Compare with CTX group,2)P < 0. 05.
3 讨论
中药提取物具有双向调节作用,能够使机体异
常的免疫状态恢复正常,而对正常的免疫功能无明
显影响。皂苷由皂苷元和糖、糖醛酸或其他有机酸
所组成,通过作用于机体的免疫器官、免疫分子和
T、B 淋巴细胞等发挥免疫调节作用,具有增强机体
的免疫功能而发挥抗病毒、抗肿瘤等功效[6]。环磷
酰胺所致免疫低下小鼠是研究药物免疫调节作用较
为理想的动物模型[7]。目前 LYQS对免疫功能的影
响尚未见报道,本实验用 CTX制备免疫功能低下小
鼠模型,观察 LYQS 对免疫功能低下模型小鼠的
影响。
胸腺和脾脏均为免疫器官,是淋巴细胞分化、成
熟和产生免疫应答的场所,胸腺系数和脾脏系数是
衡量机体免疫功能的重要指标[8]。在免疫功能低
下时胸腺、脾脏萎缩,体积变小。本实验结果显示各
剂量 LYQS能明显提高 CTX 降低的胸腺指数,高、
中剂量能明显提高 CTX 降低的脾脏指数,提示高、
中剂量 LYQS 对 CTX 抑制的免疫器官有一定的保
护和促进恢复正常的作用。
脾淋巴细胞体外转化代表着机体的细胞免疫功
能,因此测定小鼠淋巴细胞体外转化功能是研究细
胞免疫功能的重要手段[8]。迟发性变态反应是 T
细胞介导的细胞免疫应答。本研究显示高、中剂量
LYQS能提高免疫低下小鼠脾淋巴细胞转化率,高
剂量 LYQS 能增强免疫低下小鼠的迟发型超敏反
应,提示高剂量 LYQS 能提高免疫低下小鼠的细胞
免疫功能。高、中剂量 LYQS 能显著增加血清溶血
素抗体生成,提示高、中剂量 LYQS 可提高免疫低下
小鼠的体液免疫功能。巨噬细胞具有吞噬细胞、诱
发特异性免疫应答、参与免疫调节等多种作用,其吞
噬指数是反映机体非特异性免疫功能的指标[9]。
本研究显示高、中剂量 LYQS 能明显提高免疫低下
小鼠廓清指数 K值及吞噬指数 α 值,使其恢复至正
常水平,提示高、中剂量 LYQS可活化巨噬细胞从而
增强其吞噬能力,对免疫低下小鼠的非特异性免疫
功能有一定的恢复作用。
RBC具有识别、粘附、杀伤抗原,清除免疫复合
物及参与机体免疫调控等作用,是机体免疫系统的
重要组成部分。实验结果证明,高剂量 LYQS 能明
显提高 CTX降低的 WBC 水平,高、中剂量 LYQS 能
明显提高 CTX降低的 RBC和 Hb水平,提示高剂量
LYQS能促进免疫细胞生成的作用。
IL-2 作用于免疫细胞和细胞因子,能调节 B 淋
巴细胞、单核巨噬细胞、NK 细胞的功能,促进抗体
和细胞因子产生[10]。TGF-β1能抑制所有淋巴细胞
的增殖及功能,并能抑制巨噬细胞激活,TGF-β1 可
能是免疫系统关闭的信号[11]。本实验结果显示高
(下转第 494 页)
·984·汤小军等 六月青皂苷对免疫抑制小鼠免疫功能的影响 第 5 期
用可使其逐渐接近于正常人 CD4 + CD25 + T 细胞水
平但却达不到正常人的水平。通过实验我们认为由
于 CD4 + CD25 +调节性 T 细胞(Treg)的下调使得对
自身反应性 T 细胞的控制出现异常而出现机体免
疫系统功能异常而导致自身免疫性疾病的发生,骨
髓MSCs对 ITP患者 T淋巴细胞 CD4 + CD25 + T细胞
的显著上调作用提示:MSCs可能是通过诱导并增强
CD4 + CD25 +调节性 T 细胞(Treg)的免疫调控作用
而发挥免疫调节作用的。
4 参考文献
1 Sakakura M,Wada H,Tawara I,Nobori T et al. Reduced Cd4(+)
Cd25(+)T cells in patients with idiopathic thrombocytopenic purpu-
ra[J]. Thromb Res,2007;120(2) :187-193.
2 虞积仁.特发性血小板减少性紫癜[A]. 见:张之南,沈悌主编.
血液病诊断及疗效标准[M]. 第 3 版. 北京:科学技术版社,
2007:172-176.
3 Sakaguchi S. Naturally arising CD4 + regulatory T cells for immuno-
logic self-tolerance and negative control of immune responses[J].
Annu Rev Immunol,2004;22:531-562.
4 Von Boehmer H. Mechanisms of suppression by suppressor T cells
[J]. Nat Immunol,2005;6(4) :338-344.
5 Sakakura M,Wada H,Tawara I et al. Reduced CD4 + CD25 + T
cells in patients with idiopathic thrombocytopenic purpura[J].
Thromb Res,2007;120(2) :187-193.
6 Aggarwal S,Pittenger M F. Human mesenchymal stem cells modulate
allogeneic immune cell responses[J]. Blood,2005;105 (4) :
1815-1822.
7 Aboul-Fotoh Lel-M,Abdel Raheem M M,El-Deen M A et al. Role of
CD4 + CD25 + T cells in children with idiopathic thrombocytopenic
purpura[J]. J Pediatr Hematol Oncol,2011;33(2) :81-85.
8 Di Ianni M,Del Papa B,De Ioanni M et al. Mesenchymal cells re-
cruit and regulate T regulatory cells[J]. Exp Hematol,2008;36
(3) :309-318.
9 Choi Y S,Jeong J A,Lim D S. Mesenchymal stem cell-mediated im-
mature dendritic cells induce regulatory T cell-based immunosuppres-
sive effect[J]. Immunol Invest,2012;41(2) :214-229.
[收稿 2012-08-27 修回 2013-01-18]
(编辑 张晓舟)
(上接第 489 页)
剂量 LYQS能明显增高免疫抑制小鼠血清 IL-2 含
量,高、中剂量 LYQS 明显降低 CTX提高的 TGF-β1,
说明高剂量 LYQS在一定程度上可使 CTX抑制细胞
因子的合成发生逆转,增强机体的免疫功能。
综上所述,LYQS 对 CTX 免疫抑制模型小鼠的
免疫功能影响呈剂量依赖性,其中高剂量(1 g·
kg -1·d -1)LYQS可作用于免疫系统的多个环节,对
免疫低下小鼠的非特异性免疫、细胞免疫和体液免
疫均有一定增强作用,逆转因 CTX 而造成的免疫低
下状态。
4 参考文献
1 耿传信,韩淑红,徐 辉. 中药活性成份抗肿瘤研究进展[J].中
华实用中西医杂志,2004;4(17) :1057-1058.
2 林 兴,黄权芳,张士军 et al. 六月青皂苷对小鼠免疫性肝损伤
的保护作用[J] .中国实验方剂学杂志,2010;16(15) :117-119.
3 莫国艳,黄仁彬,林 军 et al. 六月青萃取物对免疫抑制小鼠的
影响[J].医药导报,2007;26(11) :1264-1266.
4 何金生,李瑞珠,宗廷益. MTT还原法检测 NK 细胞活性的方法
学研究[J].中国免疫学杂志,1996;12 (6) :356-358.
5 柳忠辉,吕昌龙. 免疫学常用实验技术[M]. 北京:科学出版社,
2002:111-112.
6 Wang W,Zhao Y,Rayburn E R et al. In vitro anti-cancer activity
and structure-activity relationships of natural products isolated from
fruits of Panax ginseng[J]. Cancer Chemother Pharmacol,2007;59
(5) :589-601.
7 Motoyoshi Y,Kaminoda K,Saitoh O et al. Different mechanisms for
anti-tumor effects of low-and high-dose cyclophosphamide[J]. Oncol
Rep,2006;16(1) :141-146.
8 王丽君,姜 虹. 龙牙楤木多糖抗肿瘤活性及对荷瘤小鼠免疫功
能的影响[J].中国免疫学杂志,2011;27(2) :130-134.
9 王玉凤,凤良元,鄢顺琴 et al. 楮实子对环磷酰胺致免疫功能低
下小鼠免疫功能的影响[J]. 中华中医药学刊,2008;26(5) :
1023-1025.
10 Smith A J,Humphries S E. Cytokine and cytokine receptor gene
polymorphisms and their functionality[J]. Cytokine Growth Factor
Rev,2009;20(1) :43-59.
11 龚非力.医学免疫学[M]. 北京:科学出版社,2003:86-86.
[收稿 2012-11-10 修回 2013-01-05]
(编辑 倪 鹏)
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·494· 中国免疫学杂志 2013 年第 29 卷