全 文 ：第 35卷 第 6期 东　北　林　业　大　学　学　报 Vo .l 35 No. 6
2007年 6月 JOURNAL OF NORTHEAST FORESTRY UN IVERSITY Jun. 2007
分光光度法测定核桃楸树皮中胡桃醌的含量 1)
　　　　孙墨珑　袁海舰　　　　　宋湛谦　　　　　李淑君　宋子娟
(东北林业大学,哈尔滨 , 150040)　　(中国林业科学研究院林产化学工业研究所)　　　　　(东北林业大学)　　
　　摘　要　采用超声波辅助浸提法与减压蒸馏法提取核桃楸树皮中的胡桃醌 ,用分光光度法测定核桃楸树皮中
胡桃醌的含量 , 并利用 GC -M S联用技术对样品液的化学组成进行分析。研究结果表明:检测波长为 426 nm , 核桃
楸树皮中的胡桃醌含量为 0. 093 3%, 重复性良好;核桃楸树皮样品液在放置 10 h内稳定性良好;加样回收率为
99. 6%;GC -MS分析核桃楸树皮样品液中胡桃醌相对含量达到 96. 42%。
关键词　胡桃醌;核桃楸树皮;分光光度法
分类号　TQ351. 014
D eterm ination of Juglone in Bark ofJug lans mandshurica U sing Spec troscopy /SunM o long, Yuan H aijian(Northeast
Fo restry Unive rsity, H arbin 150040, P. R. China);Song Zhanqian( Institu te o f Chem ical Industry of Forest P roducts,
Ch inese Academy o f Fo re stry);L i Shujun, Song Z ijuan(Northeast Fo restry Un ive rsity) / /Journal of No rtheast Fo restry U-
niversity. - 2007, 35(6). - 37～ 38
Jug lonew as ex tracted from the ba rk of Juglans mandshurica M ax im. by u ltrason ic extraction m ethod and unde rpre s-
su re distilla tionm e thod. Jug lone conten tw as dete rm ined w ith UV spec tro scopy, and the chem ica l composition of liquid prod-
uctwas also ana lysed byGC-MS. Result show ed that the juglone conten t of ex tracted Jug lansmandshurica bark was 0. 0933 per-
cent a t 426 nm , and exhib ited good repetition. The produc t w ith an ave rage recovery o f 99. 6 percen t had good stab ility
w ith in 10 hours after ex traction. The re lative content of jug lone was 96. 42 percen t de te rm ined by GC-M S.
K ey words　 Jug lone;Juglansm and shurica ba rk;Spectroscopy
　　胡桃醌(5 -羟基 - 1, 4 -萘醌)是从核桃楸中提取分离
出来的一种萘醌类活性物质 , 具有明显的抑菌和抗癌作
用 [ 1] 。而对胡桃醌含量的测定大多采用高效液相色谱法 [ 2] 。
用高效液相色谱法测定胡桃醌含量时 ,虽然准确度高 , 但准备
工作复杂 , 操作时间较长 , 不适用于间断且频繁的测定工作。
而采用分光光度法定量测定胡桃醌含量 , 其即时性与简便性
受到研究者的关注 [ 3] 。
本研究以核桃楸树皮作为原料 , 采用超声波辅助浸提与
减压蒸馏等方法提取胡桃醌 , 采用分光光度法测定胡桃醌的
含量 , 考察核桃楸树皮样品液的稳定性与加样回收率 , 并利用
GC -MS联用技术对样品液的化学组成进行分析。
1　材料与方法
核桃楸树皮采自东北林业大学帽儿山实验林场;样品经
阴干 、粉碎后 ,筛取 40～ 60目待用;胡桃醌标准品为美国 SIG-
MA公司生产 , 其它化学试剂均为分析纯。
仪器有 TU - 1900双光束紫外可见分光光度计 , 美国 Ag i-
len t公司生产的 6890N -5973 inert GC -MS, JY92 -Ⅱ D型超
声波细胞粉碎机 , RE - 52A旋转蒸发器。
精确配制胡桃醌标准甲醇溶液质量浓度为 0. 051 7、
1. 293、5. 173、10. 350和 15. 520 mg /L;用紫外可见分光光度
计 , 在 200 ～ 550 nm范围内进行光谱扫描;选择检测波长 , 并
读取其在检测波长处的吸光度;最后绘制吸光度(A)与胡桃
醌质量浓度(c)的标准曲线 ,得出回归方程。
1)黑龙江省自然科学基金资助项目 (C2004 - 28)和哈尔滨市留
学回国人员基金项目(2005AFL X J 005)。
第一作者简介:孙墨珑 ,女 , 1961年 5月生 ,东北林业大学理学
院 ,教授。
收稿日期:2006年 6月 10日。
责任编辑:潘　华。
　　准确称取核桃楸树皮 2 g, 加入 200 mL含水溶剂 , 超声波
震荡 10 m in;然后将物料在 50℃下减压蒸馏 , 定容至 1 000
mL, 得到样品液。按照胡桃醌标准溶液的测定方法测定样品
液的吸光度。根据标准曲线回归方程计算样品液的质量浓
度 ,进而计算出核桃楸树皮中胡桃醌的含量。
分别扫描已放置 0、 1、 3、5、10、 24、48、 96 h的样品液在检
测波长处的吸光度 , 考察样品的稳定性。在 10 mL已知质量
浓度为 1. 894 mg /L的样品液中分别加入质量浓度为 5. 173
mg /L的标准溶液 1. 0、1. 5、 2. 0 mL。按照胡桃醌标准溶液的
测定方法测定吸光度 , 考察样品的加样回收率。
采用美国 Ag ilent公司生产的 6890N -5973 inert GC -M S
对样品液的化学组成进行分析。色谱条件为 DB - 17MS型毛
细管色谱柱 , 柱长 30m ,内径 0. 25mm ,膜厚 0. 25m;气化室温
度 260℃,载气为氦气 , 柱流量 1 mL /m in, 进样量 1 L, 分流比
为 30∶1;起始温度 60 ℃,以 20℃ /m in升温至 200℃, 再以 5
℃ /m in升温至 280℃,保留 5 m in;GC -M S接口温度 290℃。
质谱条件为电离源 EI电子能量 70 eV, 离子源温度 230℃;扫
描范围为 15 ～ 260 amu(原子质量单位)[ 4] 。
2　结果与分析
2. 1　检测波长的选择与标准曲线
胡桃醌标准样品溶液的紫外可见光谱如图 1所示。对胡
桃醌的结构进行分析 , 分子中苯环与一个羰基共轭 ,所以应在
251 nm与 335 nm处产生吸收峰 ,但由于 α位羟基的影响 , 在
335 nm处的吸收峰红移至 426 nm处 ,而此处的吸收峰最能反
映胡桃醌的结构特征 , 且峰形平缓 ,波长有波动时吸光度值变
化不大 , 可以降低系统误差 ,所以选择 426 nm处为检测波长。
根据胡桃醌标准曲线数据线性回归得出胡桃醌质量浓度
(c)与吸光度(A)的回归方程为 c=10. 60A -0. 000 1, r=0. 999, 在
质量浓度为 0. 051 7 ～ 15. 520 0 mg /L范围内线性关系良好。
2. 2　样品的稳定性
核桃楸树皮样品液放置不同时间的紫外可见光下光谱变
化如图 1所示。核桃楸树皮样品液放置 10 h内光谱形状与
胡桃醌标准样品溶液相似 ,吸光度值相对标准偏差为 0. 8%,
稳定性良好;放置 24 h后 426 nm处吸收降低 , 345 nm处吸收
增加 , 形成一个新的吸收峰;放置 96 h后 426 nm 处吸收峰消
失。由此可见 , 胡桃醌含量的测定选择提取后 10 h内进行。
图 1　核桃楸树皮样品液与胡桃醌标准溶液的紫外可见光谱
2. 3　样品的加样回收率
在核桃楸树皮样品液为 1 0mL , 样品中胡桃醌含量为
1. 894μg时 ,其加样回收率数据如表 1所示。 6次平均加样
回收率为 99. 6%, 相对标准偏差为 1. 15%, 说明分光光度法
测定胡桃醌的含量结果准确。
表 1　样品的加样回收率
加入胡桃醌
标准品量 /μg
胡桃醌测
得量 /μg
加样回
收率%
平均加样
回收率%
相对标准
偏差%
5. 173 5. 058 97. 8 99. 6 1. 15
5. 173 5. 099 98. 6
7. 759 7. 821 100. 8
7. 759 7. 766 100. 1
10. 350 10. 350 100. 0
10. 350 10. 380 100. 3
2. 4　胡桃醌质量分数的测定
胡桃醌质量分数如表 2所示。核桃楸树皮中胡桃醌平均
质量分数为 0. 093 3%, 5次测定相对标准偏差为 0. 123%, 说
明分光光度法测定胡桃醌质量分数的重复性良好。
表 2　树皮中胡桃醌质量分数的测定
样品 /
g
A
c /
m g L -1
胡桃醌质
量分数%
平均质量
分数%
相对标准
偏差%
2. 0031 0. 175 3 1. 858 0. 092 8 0. 0933 0. 123
2. 0050 0. 178 7 1. 894 0. 094 5
2. 0020 0. 176 2 1. 867 0. 093 3
2. 0045 0. 173 1 1. 834 0. 091 5
2. 0061 0. 178 6 1. 892 0. 094 4
2. 5　样品的化学组分分析
对核桃楸树皮样品液进行 GC -MS分析 , 共分离出 3个
化合物 , 其总离子流色谱图如图 2所示。
图 2　产物的总离子流色谱
成分分析是根据美国 N ist02GC -M S联用所得质谱信息
数据库检索与标准谱图对照分析 ,化合物的定量按峰面积归
一化法计算 , 得出各成分相对质量分数 ,结果如表 3所示。
表 3　GC -M S分析产物的化学组成
化合物 保留时间 /m in
相对分
子质量 化学式
质量分
数%
相似
度%
1, 4 -萘醌 25. 18 158 C10H 6O2 0. 70 97
5 -羟基 - 1, 4 -萘醌 27. 56 174 C10H 6O3 96. 42 97
7 -甲氧基 - 1 -四氢萘酮 30. 04 176 C11H 12O2 2. 88 79
　　由图 2及表 3可以看出 , 核桃楸树皮样品液中主要成分
为胡桃醌(5 -羟基 - 1, 4 -萘醌), 相对量达到 96. 42%;另
外 , 1, 4 -萘醌相对量为 0. 70%, 7 -甲氧基 - 1 -四氢萘酮相
对量为 2. 88%。
3　结论
超声波辅助浸提法与减压蒸馏法提取核桃楸树皮中的胡
桃醌 ,采用分光光度法测定核桃楸树皮中胡桃醌的含量 ,并利
用 GC -MS联用技术对样品液的化学组成进行分析。研究结
果表明:检测波长为 426 nm, 核桃楸树皮中的胡桃醌含量为
0. 093 3%,重复性良好;核桃楸树皮样品液放置 10 h内稳定
性良好;加样回收率为 99. 6%;GC -M S分析样品液中胡桃醌
相对含量达到 96. 42%。分光光度法测定胡桃醌的含量结果
准确 ,方法简单易行。
参　考　文　献
[ 1] 　许绍惠 ,许泓.胡桃属植物毒性成分及其应用 [ J] . 沈阳农业大
学学报 , 1990, 21(2):167 - 170.
[ 2] 　孙墨珑 , 宋湛谦 ,方桂珍.胡桃楸总黄酮及胡桃醌含量的测定
[ J] .林产化学与工业 , 2006, 26(2):93 - 95.
[ 3] 　范芳芳 ,刘泽蒲 ,陈文 ,等.紫外分光光度法测定新疆紫草中总
萘醌的含量 [ J] . 石河子大学学报:自然科学版, 2004, 22(5):
425 -426.
[ 4] 　王淑萍 ,孟祥颖 ,齐晓丽 ,等. 核桃楸皮挥发油化学成分分析
[ J] .分析化学 , 2005, 33(7):961 -964.
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