全 文 ：30 2013, Vol.34, No.24 食品科学 ※工艺技术
响应面法优化灰树花发酵全液多糖提取工艺及其
抗肿瘤活性
张桂春，刘玉静，解卫海，辛晓林，周菊华*
(鲁东大学生命科学学院，鲁东大学肿瘤免疫新技术研究中心，山东 烟台 264025)
摘 要：研究高效提取灰树花发酵全液多糖的工艺及其抗肿瘤活性。以新鲜的灰树花发酵全液为材料，采用不同溶
液pH值、微波功率、微波处理时间、热水浸提时间的单因素试验和响应面法优化微波辅助提取灰树花发酵全液多
糖工艺；通过建立荷瘤小鼠模型，对灰树花发酵全液多糖的抗肿瘤活性进行研究。结果表明：微波辅助提取灰树花
发酵全液多糖的最佳工艺条件为溶液pH7.0、微波功率570W、微波时间4.5min、热水浸提时间2h。此工艺条件下，
灰树花发酵全液多糖得率为7.19g/L，比优化前提取效率提高24.39%。体外抗肿瘤实验表明，灰树花发酵全液多糖
对小鼠S180肉瘤的抑制率为26.62%～63.01%，并可显著提高小鼠的胸腺指数和脾指数。
关键词：响应面法；灰树花；发酵全液；多糖；微波辅助提取；抗肿瘤
Optimization of Microwave-Assisted Extraction of Polysaccharides from the Fermentation Broth of Crifola frondosa
by Response Surface Methodology and Antitumor Activity of the Extracted Polysaccharides
ZHANG Gui-chun，LIU Yu-jing，XIE Wei-hai，XIN Xiao-lin，ZHOU Ju-hua*
(Institute for Tumor Immunology, College of Life Science, Ludong University, Yantai 264025, China)
Abstract：The microwave-assisted extraction of polysaccharides from the submerged fermentation broth of Grifola
frondosa and the anti-tumor activity of the extracted polysaccharides was evaluated in a tumor-bearing mouse model.
Different extractions parameters including solvent pH, microwave power, treatment time and extraction time were optimized
using response surface methodology. The optimum extraction conditions that provided maximum yield of polysaccharides
of 7.19 g/L, which was 24.39% higher than before the optimization were found as follows: solvent pH of 7.0, microwave
power of 570 W, treatment time of 4.5 min and hot water extraction time of 2 h. Furthermore, the extracted polysaccharides
not only had anti-tumor activity against mouse S180 sarcoma cells as indicated by its inhibition on the S180 sarcoma cell-
derived tumor growth by 26.62%–63.01%, but also significantly increased both thymus index and spleen index in mice.
Key words：response surface methodology；Crifola frondosa；fermentation broth；polysaccharide；microwave-assisted
extraction；anti-tumor activity
中图分类号：R284.2 文献标志码：A 文章编号：1002-6630(2013)24-0030-06
doi:10.7506/spkx1002-6630-201324006
收稿日期：2012-09-28
基金项目：山东省“泰山学者”建设工程专项
作者简介：张桂春(1974—)，女，讲师，硕士，研究方向为微生物与发酵工程。E-mail：gczhshl@163.com
*通信作者：周菊华(1963—)，男，教授，博士，研究方向为肿瘤免疫。E-mail：juhua.zhou@gmail.com
灰树花属担子菌亚门，层菌纲，无隔担子菌亚纲，
非褶菌目，多孔菌属中的一种大型真菌。又名莲花菌、
舞茸、千佛菌、贝叶多孔菌等。灰树花是一种珍稀的食
药兼用菌，近年来大量的研究[1-5]表明，灰树花多糖具有
很好的抗HIV病毒、抗肿瘤、改善免疫系统功能、调节
血脂、血糖及胆固醇水平、降低血压等作用。
微波辅助提取(microwave-assisted extraction，MAE)
技术，简称微波提取技术，是利用微波场的热效应、生
物效应和“扰动”效应来加快物质的扩散及溶解，有效
地提高化合物的得率，具有受热均匀、快速、高效、安
全、节能等优点，广泛应用于天然化合物和生物活性成
分的提取[6-9]。微波辅助法提取灰树花多糖还未见报道。
近些年来，对灰树花多糖的提取工艺研究主要集中在胞
内多糖[10-12]。液体发酵中，胞外多糖的含量远远高于胞内
多糖[13-15]，因此，对发酵全液进行多糖提取工艺的优化具
有重要的理论意义及经济价值。在工艺优化上，多是在
单因素[11-12]或简单正交试验[16-19]的条件下获得的，而未建
立多糖得率与考察因素间关系的数学模型，从而对过程
※工艺技术 食品科学 2013, Vol.34, No.24 31
放大和优化生产的指导产生了局限性 。关于灰树花多糖
的抗肿瘤活性研究，多是对灰树花子实体及发酵菌丝体
胞内多糖的研究[11,18,20]，对于同时含有胞内胞外多糖的发
酵全液多糖的抗肿瘤活性研究还未见报道。因此，本实
验就微波辅助提取灰树花发酵全液多糖工艺及其抗肿瘤
活性进行了较为系统的探讨和研究，以期为其工艺路线
的改造以及工业化生产、应用提供一定的理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料、培养基与试剂
灰树花(Crifola frondosa)菌种 鲁东大学生命科学
学院。
实验动物：昆明种小白鼠(18～22g，雌性)，由山东
省天然药物研究中心。
培养基活化培养基：PDA培养基：马铃薯200g/L、
葡萄糖20g/L、琼脂20g/L，pH值自然；液体培养基：马
铃薯200g、葡萄糖20g、水1000mL，pH值自然。
S180实体瘤 山东省天然药物研究中心；环磷酰
胺(CY) 江苏恒瑞医药股份有限公司；浓硫酸、液体苯
酚、氢氧化钠、盐酸、95%乙醇、无水乙醇、丙酮、乙
醚均为分析纯。
1.2 仪器与设备
WFJ7200紫外-可见分光光度计 上海尤尼柯仪器
有限公司；TGL-16C离心机 上海安亭科学仪器厂；
LRH-250-G培养箱 广东省医疗器械厂；VS-1300L-U
超净工作台 苏净集团安泰公司；QYC-211全温空气摇
床 上海福玛试验设备有限公司；LDZX-30FBS高压灭
菌锅 上海申安医疗器械厂；MI-2270EGC微波炉 青
岛海尔公司；DK-S24型电热恒温水浴锅 上海精宏试
验设备有限公司；FA2004电子天平 上海越平科学仪
器有限公司；JYX-LZ旋转蒸发仪 上海矩源机械设备
有限公司；FD-1A-50冷冻干燥机 河南兄弟仪器设备有
限公司。
1.3 方法
1.3.1 菌种活化
将配制好的种子培养基于121℃条件下灭菌30min后
倒平板，冷却备用。在无菌条件下接种，然后在26℃恒
温箱中培养，将保存母种活化，菌丝长满平板后备用。
1.3.2 液体培养
1级摇瓶培养：将制备好的液体培养基分装于500mL
三角瓶中，装量为每瓶200mL。在超净工作台上，每
个三角瓶中接种4～5块面积约0.3cm2的菌种块，25℃、
160r/min培养6d。2级摇瓶培养：取1级摇瓶发酵液6mL接
种于2级摇瓶中，培养5d。
1.3.3 多糖微波辅助提取工艺
工艺流程：
ਁ䞥ޘ⏢ė㓴㓷ᦓ⺾ė࣐≤〰䟺ė䈳pH值ėᗞ⌒༴⨶
Ę
⍻ ᙫ ㌆ ĕ ᇊ ᇩ ĕ ਆ └ ⏢ ĕ ᣭ └ ĕ ✝ ≤ ⎨ ᨀ
Ę
҉䞷⊹᷀ė䶉㖞12hė⍻䘈৏㌆
操作方法：用组织捣碎机将灰树花发酵全液组织捣
碎，取这样的发酵全液1mL，按料水比1:20(g/mL)的比例
稀释后，调节pH值，然后用微波处理破碎细胞，恒温水
浴加热浸提，将提取液过滤并洗涤，合并滤液并定容至
50mL，测定总糖。然后取5mL滤液，按1:3(V/V)的比例加
入乙醇醇析，静置12h，取上清液测还原糖含量[21]。
1.3.4 多糖含量的测定
还原糖及总糖的测定用苯酚-硫酸法[22]。多糖含量按
式(1)计算：
多糖含量/(g/L)=总糖含量/(g/L)－还原糖含量/(g/L) (1)
1.3.5 多糖的纯化
按照优化后的灰树花发酵全液多糖的提取工艺，对
灰树花发酵全液进行组织捣碎、加水稀释、微波处理、
热水浸提、过滤取滤液，然后在滤液中加入Sevag试剂去
除蛋白[23]，得脱蛋白的多糖提取液。将这样的提取液浓
缩、醇沉、抽滤，沉淀分别用95%乙醇、无水乙醇、丙
酮、乙醚洗涤3次，冷冻干燥，得灰树花发酵全液多糖粉
末。苯酚-硫酸法测得多糖含量78.35%。
1.3.6 灰树花发酵全液多糖的抗肿瘤实验
将实验动物随机分为5组：阴性对照组(生理盐水组)、
阳性对照组(环磷酰胺20mg/(kg·d))、灰树花发酵全液多
糖低剂量组(100mg/(kg·d))、中剂量组(500mg/(kg·d))、
高剂量组(900mg/(kg·d))。灌胃给药，每日1次，每次给药
量0.5mL。在给药第15天，右前肢腋下接种5×106CFU/mL
S180瘤株0.1mL，继续灌胃10d后停药。停药24h后颈椎脱
臼致死，剥取瘤块、脾脏、胸腺，按式(2)计算肿瘤抑制
率，参考文献[24]计算胸腺指数(mg/g，胸腺质量与体质
量比值)、脾指数(mg/100g，脾质量与体质量比值)。
肿瘤抑制率/%=(对照组平均瘤质量－给药组平均瘤
质量)/对照组平均瘤质量×100 (2)
1.3.7 试验设计
1.3.7.1 单因素试验
考察pH值、微波功率、微波时间、热水浸提时间4个
因素，在各自5个水平下的多糖得率，具体参数见表1。
溶液pH值对多糖得率的影响：在微波功率420W、
微波时间4min、热水浸提时间2h的条件下，考察溶液pH
值对灰树花发酵全液多糖得率的影响。微波功率对多糖
得率的影响：在pH7、微波时间4min、热水浸提时间2h
的条件下，考察微波功率对灰树花发酵全液多糖得率的
32 2013, Vol.34, No.24 食品科学 ※工艺技术
影响。微波时间对多糖得率的影响：在pH7、微波功率
560W、热水浸提时间2h的条件下，考察微波时间对灰树
花发酵全液多糖得率的影响。热水浸提时间对多糖得率的
影响：在pH7、微波功率560W、微波时间4min的条件下，
考察热水浸提时间对灰树花发酵全液多糖得率的影响。
表 1 单因素试验因素及水平
Table 1 Factors and levels of single factor experiment
水平
因素
pH 微波功率/W 微波时间/min 热水浸提时间/h
1 5 140 2 0.5
2 6 280 3 1.0
3 7 420 4 1.5
4 8 560 5 2.0
5 9 700 6 2.5
1.3.7.2 响应面法试验设计
选择单因素试验中对多糖得率有显著影响的因素，
根据Box-Behnken试验设计原理，综合单因素试验结果，
选取微波功率(X1)、微波时间(X2)、热水浸提时间(X3)3个
因素进行响应面试验[25]，试验因素及水平见表2。
表 2 Box-Behnken试验设计因素及水平
Table 2 Factors and levels used in Box-Behnken experimental design
因素 水平－1 0 1
X1微波功率/W 420 560 700
X2微波时间/min 3 4 5
X3热水浸提时间/h 1.5 2.0 2.5
2 结果与分析
2.1 单因素试验
2.1.1 pH值对发灰树花酵全液多糖得率的影响
1
2
3
4
5
6
7
5 6 7 8 9
pH
໮
㊪
ᕫ
⥛
/ (g
/ L
)
图 1 pH值对多糖得率的影响
Fig.1 Effect of solvent pH on the yield of polysaccharides
如图1所示，在pH5～7之间，随着pH值的上升，发
酵全液多糖得率也逐渐上升。当pH值达到7时，多糖的得
率最高，为5.78g/L；pH值继续升高时，其多糖得率反而
有所减少。pH值对多糖得率的影响不显著(P＞0.05)，从
单因素试验结果看，pH7.0为灰树花发酵全液多糖提取的
最佳pH值。
2.1.2 微波功率对灰树花发酵全液多糖得率的影响
1
2
3
4
5
6
7
8
140 280 420 560 700
ᖂ⊶ࡳ⥛/W
໮
㊪
ᕫ
⥛
/ (g
/ L
)
图 2 微波功率对多糖得率的影响
Fig.2 Effect of microwave power on the yield of polysaccharides
由图2可知，在140～560W之间，多糖得率随微波功
率的增加而不断增加，在560W时达到最大值，为6.88g/L，
560W后随微波功率的增加得率呈下降趋势。这可能是
因为在微波功率较低时，电场强度较小，分子运动不剧
烈，且对细胞膜的破坏作用也较小，多糖得率不高；随
着功率的增加，电场强度增强，分子运动变得剧烈，升
温加快，细胞膜的破坏程度也加大，因此，多糖得率随
着微波功率的增强而升高。但当功率过大时，微波对细
胞膜的破碎作用达到了一定的限度，对胞内物质的选择
加热性能差异也随着功率的增大而减小，一些可溶性杂
质的溶出增加，致使多糖的得率下降。微波功率对多糖
得率的影响显著(P＜0.05)。根据单因素试验结果，微波
功率560W为灰树花发酵全液多糖提取的最佳功率。
2.1.3 微波时间对灰树花发酵全液多糖得率的影响
1
2
3
4
5
6
7
8
9
2 3 4 5 6
ᖂ⊶ᯊ䯈/min
໮
㊪
ᕫ
⥛
/ (g
/ L
)
图 3 微波时间对多糖得率的影响
Fig.3 Effect of microwave treatment time on the yield of polysaccharides
由图3可知，在2～4min期间，多糖得率随微波时间
延长而增加，在4min时达到其最大值，为6.89g/L，在
4～6min期间，多糖得率随微波时间延长而减少。这可能
是因为微波不仅具有快速而均匀的加热功能，还可因促
使材料的细胞膜破裂而加快多糖分子对基体的渗透与溶
解，使多糖快速地释放出来，所以得率随微波时间的延
长而上升。时间继续延长，多糖的扩散作用会减慢并逐
渐达到一个平衡，而且一些多糖的结构会被破坏，反而
使多糖的得率下降。微波处理时间对多糖得率的影响显
著(P＜0.05)。根据单因素试验结果，微波时间4min为多
糖提取的最佳时间。
※工艺技术 食品科学 2013, Vol.34, No.24 33
2.1.4 热水浸提时间对灰树花发酵全液多糖得率的影响
1
2
3
4
5
6
7
8
0.5 1.0 1.5 2.0 2.5
✝≤⎨ᨀᰦ䰤/h
ཊ
㌆
ᗇ
⦷
/ (g
/ L
)
图 4 热水浸提时间对多糖得率的影响
Fig.4 Effect of hot water extraction time on the yield of polysaccharides
由图4可知，在0.5～2.0h内，多糖得率随热水浸提
时间的延长而呈明显增加，在2.0～2.5h内，多糖得率随
时间的延长而降低，热水浸提时间2h多糖得率最高，为
7.02g/L。这表明，目标产物的浸出过程与时间是密切相
关的，时间过短，则产物溶解不充分，但是时间过长，
又会引起目的产物结构的变化进而会使得率下降。热水
浸提时间对多糖得率的影响显著(P＜0.05)。根据单因素
试验结果，热水浸提2h为多糖提取的最佳时间。
2.2 响应面法优化灰树花发酵全液多糖提取工艺
2.2.1 模型建立和显著性检验
根据单因素试验结果，以微波功率(X1)、微波时间
(X2)、热水浸提时间(X3)3个因素为自变量，以灰树花发酵
全液多糖得率为响应值，利用Box-Behnken试验方案，进
行三因素三水平的响应面分析试验[26-28]。试验设计及结果
见表3。
表 3 Box-Behnken试验设计及结果
Table 3 Box-Behnken experimental design and results
试验号 X1 X2 X3 Y多糖得率/(g/L)
1 －1 －1 0 4.77
2 1 －1 0 5.03
3 －1 1 0 6.24
4 1 1 0 6.45
5 －1 0 －1 6.11
6 1 0 －1 6.23
7 －1 0 1 5.97
8 1 0 1 6.24
9 0 －1 －1 5.36
10 0 1 －1 6.62
11 0 －1 1 4.95
12 0 1 1 6.48
13 0 0 0 7.24
14 0 0 0 7.01
15 0 0 0 6.95
利用Design Expert 7.0.1.0软件对数据进行2次多元
回归拟合，得到灰树花发酵全液多糖得率(Y)对编码自
变量：微波功率(X1)、微波时间(X2)、热水浸提时间(X3)
之间的2次多项回归方程为：Y＝7.07＋0.11X1＋0.71X2－
0.085X3－0.012X1X2＋0.038X1X3＋0.068X2X3－0.58X12－
0.86X2
2－0.35X32，由该方程可以看出，因素X1、X2对Y值
的影响较大。为验证该模型的可行性，对其进行方差分
析见表4，可信度分析见表5。
表 4 方差分析表
Table 4 Analysis of variance for the fitted regression model
方差来源 自由度 平方和 均方差 F值 P值
回归模型 9 8.17 0.910 63.978 0.0001
X1 1 0.092 0.092 6.5130 0.0411
X2 1 4.030 4.03 284.13 ＜0.0001
X3 1 0.058 0.0585 4.077 0.0996
X1X2 1 6.250×10－4 6.250×10－4 0.0445 0.8421
X1X3 1 5.625×10－3 5.625×10－3 0.4281 0.5566
X2X3 1 0.0182 0.018 1.280 0.3085
X1
2 1 1.242 1.242 87.398 0.0002
X2
2 1 2.760 2.760 194.463 ＜0.0001
X3
2 1 0.450 0.450 31.7923 0.0024
残差 5 0.0710 0.0142
失拟项 3 0.0242 8.033×10－3 0.3475 0.8021
纯误差 2 0.0471 0.0231
总离差 14 8.2410
注：P＜0.05，影响显著；P＜0.01，影响极显著；P＞0.05，影响不显着。
由表4可知，F模型= 63.978＞F0.01(9,5)=10.15，P=0.0001，
表明该模型极其显著。灰树花发酵全液多糖得率F失拟=
0.3475＜F0.05(3,2)=19.96，失拟项P=0.8021＞0.05，表明失拟
不显著。模型1次项微波时间X2(P＜0.0001)对多糖得率的
影响极显著、微波功率X1(P=0.0411)影响显著；2次项均
极显著；交互相X1X2、X2X3、X1X3不显著。
表 5 可信度分析
Table 5 Analysis of the reliability of the predictive model
标准偏差/(g/L) 均值/(g/L) 变异系数/% PRESS R2 R2Adj R
2
Pred 信噪比
0.12 6.11 1.95 0.49 0.9914 0.9759 0.9404 23.379
由表5可知，R2Adj为0.9759，表明该模型拟合程度良
好，试验误差较小，因此响应面法优化灰树花发酵全液多
糖的提取条件是可行的。本试验中变异系数为1.95%，说明
试验操作可信。综上所述，回归方程为灰树花发酵全液多
糖微波辅助提取工艺提供了一个合适的模型。
2.2.2 响应面分析
对微波功率(X1)、微波时间(X2)、热水浸提时间(X3)3
因素两两作交互作用分析，对其作响应面图和等高线
图，见图5。
7.30
6.65
6.00
5.35
4.70
1.0
0.5
0.0
ˉ0.5
ˉ1.0 ˉ1.0
ˉ0.5
0.0
0.5
1.0
Y/
(g
/L
)
X
2 X 1
34 2013, Vol.34, No.24 食品科学 ※工艺技术
1.0
0.5
0.0
ˉ0.5
ˉ1.0
ˉ1.0 ˉ0.5 0.0 0.5 1.0
Y/(g/L)
X 2
X1
3
6.81274
6.40869
6.00464
5.19655 5.6006 5.19655
a.微波功率和微波时间
7.30
6.95
6.60
6.25
5.90
1.0
0.5
0.0
ˉ0.5
ˉ1.0 ˉ1.0
ˉ0.5
0.0
0.5
1.0
Y/
(g
/L
)
X
3 X 1
1.0
0.5
0.0
ˉ0.5
ˉ1.0
ˉ1.0 ˉ0.5 0.0 0.5 1.0
Y/(g/L)
X 3
X1
3
6.29708
6.68667
6.49188
6.49188
6.88146 6.49188
b.微波功率和热水浸提时间
7.3
6.7
6.1
5.5
4.9
1.0
0.5
0.0
ˉ0.5
ˉ1.0 ˉ1.0
ˉ0.5
0.0
0.5
1.0
Y/
(g
/L
)
X
3 X 2
1.0
0.5
0.0
ˉ0.5
ˉ1.0
ˉ1.0 ˉ0.5 0.0 0.5 1.0
Y/(g/L)
X 3
X2
3
5.36077
6.84386
5.73155
6.1022
6.84386
6.47309
c.微波时间和热水浸提时间
图 5 响应面法立体分析图和相应等高线图
Fig.5 3-D Response surface and contour plots showing the effects of
three extraction parameters on the yield of polysaccharides
从响应面图可以直观地看出各因素对响应值的影
响，曲线越陡，表示该因素对响应值的影响越大，曲线
越平滑，表示该因素对响应值的影响越小。由图5可知，
3因素对多糖得率的影响大小依次为：微波时间＞微波功
率＞热水浸提时间，且3因素对多糖得率的影响均为抛物
线形，说明随着微波功率的增大、微波时间和热水浸提
时间的延长，多糖得率呈先升高后降低的趋势，因此提
取工艺中合适的水平可以使多糖的得率达到做高。
从等高线图可以直观地看出各因素间交互作用的大
小，越接近圆形，表示两因素的交互作用越小，越接近
椭圆形，表示两因素的交互作用越大。交互作用的大小
为：微波时间和热水浸提时间＞微波功率和热水浸提时
间＞微波功率和微波时间。
对回归方程求导，并令其等于0，可以得到曲面的最
大点，即3个主要因素的最佳水平值，转换后得到提取的
最佳条件为微波功率572.01W、微波时间4.41min、热水
浸提时间1.96h，在此优化条件下，灰树花发酵全液多糖
的得率的预测值为7.22g/L。
2.2.3 验证实验
为了验证模型的可预测性，同时考虑实际操作的
便利，将工艺条件修正为：微波功率570W、微波时间
4.5min、热水浸提时间2h，对模型所得到的最佳工艺条
件进行检验和验证。实际测得灰树花发酵全液多糖得率
7.19g/L，与理论值相比，相对误差为0.42%，说明该方程
与实际情况拟合较好。因此，采用响应面分析法优化得
到的微波辅助提取灰树花发酵全液多糖条件参数准确可
靠，可用于实际操作。优化后的多糖得率与优化前得率
5.78g/L相比，提取效率提高了24.39%。
2.3 灰树花发酵全液多糖的抗肿瘤作用
表 6 灰树花发酵全液多糖对小鼠S180肉瘤的抑制作用和
免疫器官质量的影响
Table 6 Anti-tumor activity of the polysaccharides extracted from the
fermentation broth of Crifola frondosa on S180 tumor-bearing mice and
effect on the weight of immune organs
组别 剂量/(mg/(kg·d))
动物数/只 抑瘤率/% 胸腺指数/(mg/g) 脾指数/(mg/100g)始 终
阴性对照组 15 11 1.37±0.24 5.14±0.42
阳性对照组 20 15 15 17.362.62 2.05±0.20# 6.42±0.58#
低剂量组 100 15 13 26.622.92 1.51±0.09 5.23±0.41
中剂量组 500 15 15 55.776.40** 2.17±0.23# 6.86±0.60#
高剂量组 900 15 14 63.016.78*** 2.89±0.18## 7.51±0.69##
注：**.与阳性对照组相比，差异显著(P＜0.01)；***.与阳性对照组相比，
差异极显著(P＜0.001)；#.与阴性对照组相比，差异显著(P＜0.05) ；##. 与
阴性对照组相比，差异极显著(P＜0.01)。
从表6可以看出，3个剂量给药组的瘤质量均低于
阴性及阳性对照组，抑瘤率分别为26.62%、55.77%、
63.01%，且抑瘤率与给药剂量呈正相关，中剂量组与阳
性对照组差异显著(P＜0.01)，高剂量组与阳性对照组差
※工艺技术 食品科学 2013, Vol.34, No.24 35
异极显著(P＜0.001)。显示灰树花发酵全液多糖对荷S180
小鼠肿瘤的生长具有显著的抑制作用。
从表6还可以看出，与阴性对照组相比，低剂量组能够
提高小鼠的胸腺指数与脾指数，但与阴性对照组相比差异
不显著，低剂量组小鼠的胸腺指数与脾指数均低于阳性对
照组；中剂量组与高剂量组胸腺指数与脾指数均高于阳性
对照组，中剂量组与阴性对照组相比差异显著(P＜0.05)，
高剂量组与阴性对照组相比差异极显著(P＜0.01)。显示灰
树花发酵全液多糖能增强荷瘤小鼠的免疫功能，且与给
药剂量呈正相关。
3 结 论
灰树花发酵全液多糖微波辅助提取的最佳工艺条
件为溶液pH7.0、热水浸提时间2h、微波功率570W、微
波时间4.5min，在此条件下多糖得率为7.19g/L。结果证
明，采用响应面分析法优化灰树花发酵全液多糖的微波
辅助提取工艺条件准确可靠，具有很高的应用价值。灰
树花发酵全液多糖具有明显的抗肿瘤活性，对小鼠S180
肉瘤的抑制率为26.62%～63.01%，并可显著提高小鼠的
胸腺指数和脾指数。灰树花发酵全液多糖具有一定的抗
肿瘤作用，可作为潜在的天然抗肿瘤药物来源。
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