全 文 ：第３５卷第１期
２０１６年２月
中 国 海 洋 药 物
ＣＨＩＮＥＳＥ　ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＭＡＲＩＮＥ　ＤＲＵＧＳ
Ｖｏｌ．３５　Ｎｏ．１
Ｆｅｂｒｕａｒｙ，２０１６
罗氏海盘车（Ａｓｔｅｒｉａｓ　ｒｏｌｌｅｓｔｏｎｉ）中２种
生物碱的分离纯化及其抗肿瘤活性研究△
＊
宋龙，吕律，王远红，姜廷福，吕志华＊
（中国海洋大学海洋药物教育部重点实验室，医药学院，山东 青岛２６６００３）
摘　要：目的 从罗氏海盘车（Ａｓｔｅｒｉａｓ　ｒｏｌｌｅｓｔｏｎｉ）中分离鉴定生物碱类天然产物，并进行体外抗肿瘤活性评价。
方法 利用凝胶吸附树脂柱层析、硅胶薄层层析、硅胶柱层析、凝胶Ｓｅｐｈａｄｅｘ　ＬＨ－２０柱层析和高效液相色谱等
手段对化合物进行了分离纯化；运用 ＮＭＲ、ＭＳ等波谱方法并结合文献鉴定化合物的结构；采用ＳＲＢ、ＭＴＴ
法评价化合物的体外抗肿瘤活性。结果 从罗氏海盘车的乙醇提取物中分离鉴定了１个吲哚生物碱 Ｎ－（２－苯
乙基）－１Ｈ－吲哚－３－乙胺（１）和１个环二肽生物碱类化合物Ｆｅｌｕｔａｎｉｎｅ　Ａ（２）。化合物２对 ＭＧＣ８０３细胞的抑
制率为５３．９９％，具有一定的抗肿瘤活性。结论２个生物碱类化合物均为首次从罗氏海盘车中分离获得；化
合物１为首次分离到的天然产物，其核磁数据为首次报道；化合物２具有一定的抗肿瘤活性。
关键词：罗氏海盘车；生物碱；抗肿瘤活性；非核糖体肽
中图分类号：Ｒ９３１　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００２－３４６１（２０１６）０１－０５０－０５
Ｔｈｅ　ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｗｏ　ａｌｋａｌｏｉｄｓ　ｄｅｒｉｖｅｄ　ｆｒｏｍ
Ａｓｔｅｒｉａｓ　ｒｏｌｌｅｓｔｏｎｉ　ａｎｄ　ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｎ　ｔｈｅｉｒ　ａｎｔｉｔｕｍｏｒ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ
ＳＯＮＧ　Ｌｏｎｇ，ＬＶ　Ｌｖ，ＷＡＮＧ　Ｙｕａｎ－ｈｏｎｇ，ＪＩＡＮＧ　Ｔｉｎｇ－ｆｕ，ＬＶ　Ｚｈｉ－ｈｕａ＊
（Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｍａｒｉｎｅ　Ｄｒｕｇｓ，Ｍｉｎｉｓｔｒｙ　ｏｆ　Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ，Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　ａｎｄ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，
Ｏｃｅａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｃｈｉｎａ，Ｑｉｎｇｄａｏ　２６６００３，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｉｓｏｌａｔｅ　ａｎｄ　ｉｄｅｎｔｉｆｙ　ａｌｋａｌｏｉｄｓ　ｆｒｏｍ　Ａｓｔｅｒｉａｓ　ｒｏｌｌｅｓｔｏｎｉ　ａｎｄ　ｅｖａｌｕａｔｅ　ｔｈｅｉｒ　ａｎｔｉｔｕ－
ｍｏｒ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｗｅｒｅ　ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ　ｂｙ　ＭＣＩ　ＧＥＬ　ＣＨＰ２０ｇｅｌ　ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ
ｒｅｓｉｎ，ＴＬＣ，ｓｉｌｉｃａ　ｇｅｌ　ｃｏｌｕｍｎ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，Ｓｅｐｈａｄｅｘ　ＬＨ－２０ｃｏｌｕｍｎ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ａｎｄ　ＨＰＬＣ．
Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ　ｂｙ　ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｉｃ　ａｎａｌｙｓｉｓ（ＮＭＲ，ＭＳ）ａｎｄ　ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｗｉｔｈ
ｌｉｔｅｒａｔｕｒｅ　ｄａｔａ．Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｗｅｒｅ　ｅｖａｌｕａｔｅｄ　ｂｙ　ＳＲＢ　ａｎｄ　ＭＴＴ　ｍｅｔｈｏｄｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｗｏ　ａｌｋａｌｏｉｄｓ
ｗｅｒｅ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ａｎｄ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ａｓ　Ｎ－（２－ｐｈｅｎｙｌｅｔｈｙｌ）－１Ｈ－Ｉｎｄｏｌｅ－３－ｅｔｈａｎａｍｉｎｅ（１）ａｎｄ　Ｆｅｌｕｔａｎｉｎｅ　Ａ （２）．
Ｃｏｍｐｏｕｎｄ　２　ｅｘｈｉｂｉｔｅｄ　ｐｏｔｅｎｔ　ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ａｇａｉｎｓｔ　ＭＧＣ８０３ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｏｆ　５３．９９％．
ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＩｔ＇ｓ　ｔｈｅ　ｆｉｒｓｔ　ｒｅｐｏｒｔ　ｆｏｒ　ｂｏｔｈ　ａｌｋａｌｏｉｄｓ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｆｒｏｍＡｓｔｅｒｉａｓ　ｒｏｌｌｅｓｔｏｎｉ．Ｃｏｍｐｏｕｎｄ１　ｗａｓ　ｆｉｒｓｔ
ｉｓｏｌａｔｅｄ　ａｓ　ｎａｔｕｒａｌ　ｐｒｏｄｕｃｔ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ＮＭＲ　ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｉｃ　ｄａｔａ　ｗａｓ　ｆｉｒｓｔ　ｒｅｐｏｒｔｅｄ．Ｃｏｍｐｏｕｎｄ　２　ｅｘｈｉｂｉｔｅｄ
ｐｏｔｅｎｔ　ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ａｇａｉｎｓｔ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ａｓｔｅｒｉａｓ　ｒｏｌｌｅｓｔｏｎｉ；ａｌｋａｌｏｉｄ；ａｎｔｉｔｕｍｏｒ　ａｃｔｉｖｉｔｙ；ＮＲＰＳｓ
＊ △基金项目：山东省海洋经济创新发展区域示范项目（鲁财建指［２０１３］３６１号）资助
　作者简介：宋龙（１９８７－），男，硕士研究生，研究方向：药物分析。Ｅ－ｍａｉｌ：１３９６４８３１５８３＠１６３．ｃｏｍ
＊通讯作者：吕志华，女，教授。Ｔｅｌ：（０５３２）８２０３２０９６，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｖｚｈｉｈｕａ＠ｏｕｃ．ｅｄｕ．ｃｎ
　　收稿日期：２０１５－０５－２１
DOI:10.13400/j.cnki.cjmd.2016.01.007
１期 宋龙，等：罗氏海盘车（Ａｓｔｅｒｉａｓ　ｒｏｌｌｅｓｔｏｎｉ）中２种生物碱的分离纯化及其抗肿瘤活性研究 ５１　
　　罗氏海盘车（Ａｓｔｅｒｉａｓ　ｒｏｌｌｅｓｔｏｎｉ）属棘皮动物
门海星纲钳棘目海盘车科，在中国北方海域有大
量分布，为海洋常见大型无脊椎动物之一。罗氏
海盘车具有解毒散结、和胃止痛、治疗甲状腺肿大
等药效，《本草纲目》对其有较为详尽的描述，具有
较高药用价值［１］。近年来，罗氏海盘车中化学成
分及其生物活性日益引起国内外海洋天然产物研
究的关注，相关报道逐渐增多。研究表明，罗氏海
盘车的水溶性海星皂苷成分具有抗真菌［２］和抗肿
瘤活性［３］；罗氏海盘车中极性脑苷脂具有体内外
抗肿瘤作用和调节非酒精性脂肪肝和肝损伤的作
用［４－５］；利用罗氏海盘车制备的明胶代血浆在临床
上有一定的应用［６］；罗氏海盘车粗提物正丁醇部
位具有较强的α－葡萄糖苷酶抑制活性［７］。因而，
全面解析罗氏海盘车的化学组成、明确其发挥药
效的物质基础、深入挖掘其药用价值具有重要的
现实意义。本文首次从罗氏海盘车中分离得到１
个吲哚生物碱类化合物和１个环二肽生物碱类化
合物，分别鉴定为 Ｎ－（２－苯乙基）－１Ｈ－吲哚－３－乙胺
（１）和Ｆｅｌｕｔａｎｉｎｅ　Ａ（２）。并对其体外抗肿瘤活性
进行了初步研究。
１　材料与仪器
罗氏海盘车购自青岛市南山海鲜市场，经中
国海洋大学水产学院孔令峰老师鉴定为罗氏海盘
车（Ａｓｔｅｒｉａｓ　ｒｏｌｌｅｓｔｏｎｉ），标本保存于中国海洋大学
医药学院药物分析实验室；ＭＣＩ　ＧＥＬ　ＣＨＰ２０Ｐ凝
胶吸附树脂（日本三菱化学株式会社）；硅胶 Ｈ
（２００～４００目）（青岛海洋化工厂产品）；Ｓｅｐｈａｄｅｘ
ＬＨ－２０凝胶（通用电气医疗集团）；薄层色谱硅胶
预制板 （烟台市化学工业研究所）；ＺＯＮＲＡＮ
Ｂｏｎｄｙｓｉｌ　Ｃ１８柱（２５０ｍｍ×１０ｍｍ，１０μｍ）（淮安
智润科技有限公司）。
活性 测 试 采 用 Ｈｅｌｅ 细 胞、Ａ－５４９ 细 胞、
ＭＧＣ８０３细胞、Ｋ５６２细胞（中国科学院上海生科
院细胞资源中心）；三氯乙酸（阿拉丁试剂上海有
限公司）；胎牛血清（ＦＢＳ）（Ｈｙ－ｃｌｏｎｅ公司）；ＲＰ－
ＭＩ－１６４０培养基（Ｇｉｂｃｏｂｒｌ公司）；磺酰罗丹明 Ｂ
（ＳＲＢ）（Ｓｉｇｍａ公司）；ＭＴＴ细胞增殖及细胞毒性
检测试剂盒（上海博谷生物科技有限公司）；ＤＭ－
ＳＯ（国药集团化学试剂有限公司）；醋酸（阿拉丁试
剂上海有限公司）；Ｒｒｉｓ（阿拉丁试剂上海有限公
司）；双蒸水（自制）。提取分离用乙醇、乙酸乙酯、
石油醚、正丁醇、甲醇、二氯甲烷、甲醇均为化学纯
产品，重蒸后使用，液相色谱甲醇为色谱纯。
Ｗａｔｅｒｓ　１５２５高效液相色谱仪（美国 Ｗａｔｅｒｓ
公司）；ＬＣ－６ＡＤ 高效液相色谱仪（日本Ｓｈｉｍａｄｚｕ
公司）；ＥＹＥＬＡ旋转蒸发仪（日本东京理化公司）；
离心机ＧＬ－２１Ｍ（湘仪离心机仪器有限公司）；ＫＱ－
２５０Ｅ型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公
司）；ＬＴＱ　Ｏｒｂｉｔｒａｐ　ＸＬ质谱仪（美国Ｔｈｅｒｍｏ　Ｓｃｉ－
ｅｎｔｉｆｉｃ公司）；Ｊｅｏｌ　ＪＮＭ－ＥＣＰ　５００超导核磁共振波
谱仪（日本电子株式会社）；二氧化碳培养箱
（ＭＣＯ１７５ＳＡＮＹＯ公司）；Ｍｕｌｔｉｓｋａｎ　ＦＣ型酶标
仪（赛默飞世尔上海仪器有限公司）。
２　实验方法
２．１　提取、分离和纯化
鲜罗氏海盘车（０．５６ｋｇ）洗净后剪碎，匀浆机
破碎后，用９５％乙醇超声提取５次，每次３０ｍｉｎ。
提取液经纱布过滤，滤液经８　０００ｒ／ｍｉｎ离心，低温
减压浓缩得粗浸膏３８．７６ｇ。取粗浸膏，用水分散
得悬浮液，依次用等量石油醚、乙酸乙酯、正丁醇
萃取，分别获得相应的萃取物。取正丁醇萃取物
７．６ｇ，经凝胶吸附树脂柱层析、正相硅胶柱层析、
Ｓｅｐｈａｄｅｘ　ＬＨ－２０凝胶柱层析制得样品Ⅰ（１．３５４ｇ）和
样品Ⅱ（１．４２２ｇ）。样品Ⅰ经半制备高效液相色谱
（甲醇∶水＝４０∶６０，２ｍＬ·ｍｉｎ－１，检测波长
３１０ｎｍ）制得化合物１（２．８ｍｇ，ｔＲ１５．０ｍｉｎ）；样品
Ⅱ经半制备高效液相色谱（甲醇∶水＝４７∶５３，２
ｍＬ·ｍｉｎ－１，检测波长为２１０ｎｍ）制得化合物２
（２．４ｍｇ，ｔＲ１８．２５ｍｉｎ）。
２．２　核磁共振波谱分析
将样品用氘代 ＤＭＳＯ 溶解，进行１　Ｈ （５００
ＭＨｚ）谱和１３Ｃ（１２５ＭＨｚ）谱分析。
２．３　质谱分析
质谱条件：电喷雾（ＥＳＩ）正离子模式；喷雾电
压：３ＫＶ；管状透镜电压：８０Ｖ；鞘气压力：８ｂａｒ；
毛细管温度：２７５℃；毛细管电压：４３Ｖ；扫描模
式：一级质谱在Ｏｒｂｉｔｒａｐ里扫描，扫描范围２００～
２０００Ｄａ，质量分辨率 Ｒ＝３０　０００；二级质谱在
ＬＴＱ里用ＣＩＤ碰撞模式完成，标准化碰撞能量为
３０％，质量分辨率Ｒ＝７５００。
２．４　体外抗肿瘤活性测定
５２　 中　国　海　洋　药　物 ３５卷
用ＳＲＢ法测定化合物１和２对 Ｈｅｌａ细胞、
Ａ－５４９细胞和 ＭＧＣ８０３细胞的抗肿瘤活性，用
ＭＴＴ法测定化合物１和２对Ｋ５６２细胞的抗肿瘤
活性［８］。
３　实验结果
３．１　化合物的结构鉴定
化合物１：白色无定型粉末，ＥＳＩ－ＭＳ在ｍ／ｚ
２６５处给出［Ｍ＋Ｈ］＋分子离子峰，结合１　Ｈ－ＮＭＲ、
１３Ｃ－ＮＭＲ及 ＤＥＰＴ谱推测分子式为 Ｃ１８Ｈ２０Ｎ２。
１３Ｃ　ＮＭＲ、ＤＥＰＴ 和 ＨＳＱＣ谱给出４个亚甲基
（δＣ／Ｈ２３．５／２．９９、３３．４／２．８８、３９．８／３．００、４０．６／
３．０２），１０个芳香次甲基（δＣ１１２．０、１１８．５、１１８．９、
１２１．６、１２３．８、１２７．１、１２９．０×２、１２９．１×２），４个芳
香季炭（δ１０９．０、１２７．２、１３６．７、１３７．９）和１个活泼
的吲哚氮氢信号（δＨ１１．０）。１　Ｈ－１　Ｈ　ＣＯＳＹ谱中Ｈ－
４／Ｈ－５／Ｈ－６／Ｈ－７和 Ｈ２－１０／Ｈ２－１１之间的相关以
及 ＨＭＢＣ谱中 Ｈ－２（δＨ７．２２）到Ｃ－８，Ｃ－９，Ｃ－１０和
Ｃ－３的相关确定了吲哚乙胺的结构片段。Ｈ－１６／
Ｈ－１７／Ｈ－１８／Ｈ－１９／Ｈ－２０ 和 Ｈ２－１３／Ｈ２－１４ 的 １　Ｈ－
１　Ｈ　ＣＯＳＹ相关以及 Ｈ２－１４（δＨ２．８８）到Ｃ－１５和Ｃ－
１６／２０的 ＨＭＢＣ相关确定了苯乙基片段。ＨＭＢＣ
谱中 Ｈ２－１３（δＨ３．０２）和Ｃ－１１（δＣ３９．８）以及 Ｈ２－１１
（δＨ３．００）和Ｃ－１３（δＣ４０．６）的相关确定了吲哚乙
胺－苯乙基的连接关系。因此，化合物１被鉴定为
Ｎ－（２－苯乙基）－１Ｈ－吲哚－３－乙胺，这是１个新天然
产物，其核磁数据为首次报道。其 ＮＭＲ数据如
下：１　Ｈ－ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）：δ１１．０
（１Ｈ，ｂｒ　ｓ，１－ＮＨ），７．５４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８，Ｈ－
７），７．３０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８，Ｈ－４），７．２２（１Ｈ，
ｂｒｓ，Ｈ－２），７．０６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．８，Ｈ－５），６．９８
（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．８，Ｈ－６），７．１８－７．２６（１Ｈ，ｍ，
Ｈ－１６／２０），７．１８－７．２６（１Ｈ，ｍ，Ｈ－１７／１９），７．１８－
７．２６（１Ｈ，ｍ，Ｈ－１８），３．０２（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８，Ｈ－
１３），３．００（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４，Ｈ－１１），２．９９（２Ｈ，
ｔ，Ｊ＝７．４，Ｈ－１０），２．８８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８，Ｈ－
１４）．１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）：δ１３７．９
（ｑＣ，Ｃ－１５），１３６．７（ｑＣ，Ｃ－９），１２９．１（ＣＨ，Ｃ－
１７／１９），１２９．０（ＣＨ，Ｃ－１６／２０），１２７．２（ｑＣ，Ｃ－８），
１２７．１（ＣＨ，Ｃ－１８），１２３．８（ＣＨ，Ｃ－２），１２１．６（ＣＨ，
Ｃ－５），１１８．９（ＣＨ，Ｃ－６），１１８．５（ＣＨ，Ｃ－７），１１２．０
（ＣＨ，Ｃ－４），１０９．０（ｑＣ，Ｃ－３），４０．６（ＣＨ２，Ｃ－
１３），３９．８（ＣＨ２，Ｃ－１１），３３．４（ＣＨ２，Ｃ－１４），２３．５
（ＣＨ２，Ｃ－１０）。
化合物２：白色无定型粉末，ＥＳＩ－ＭＳ在ｍ／ｚ
３７３ 处 给 出 ［Ｍ ＋ Ｈ］＋ 分 子 离 子 峰，结 合
１　Ｈ－ＮＭＲ、１３　Ｃ－ＮＭＲ 及 ＤＥＰＴ 谱推测分子式为
Ｃ２２Ｈ２０Ｎ４Ｏ２。１　Ｈ－ＮＭＲ、１３Ｃ　ＮＭＲ 、ＤＥＰＴ 和
ＨＳＱＣ谱中显示有１１个碳信号和９个氢信号，其
中包括５个芳香次甲基（δＣ／Ｈ１１１．８／７．０４、１１８．７／
７．５５、１１８．８／７．０４、１２１．３／６．９５、１２４．５／７．２０）、３个
芳香季碳（δＣ１０８．２、１２７．７、１３６．８）以及１个活泼
的氢 （δＨ １０．９５），Ｈ－４／Ｈ－５／Ｈ－６／Ｈ－７ 之 间 的
１　Ｈ－１　Ｈ　ＣＯＳＹ相关信号以及 Ｈ－４（δＨ７．３２）到Ｃ－９
（δＣ１３６．８）和Ｃ－３（δＣ１０８．２）、Ｈ－７到Ｃ－８和 Ｈ－２
（δＨ７．２０）到Ｃ－８和Ｃ－９间 ＨＭＢＣ相关信号确定
了３／３＇位取代的吲哚环片段。剩余的碳氢信号包
括１个ｓｐ３杂化的次甲基（δＣ／Ｈ５５．２／３．４４）、１个亚
甲基（δＣ／Ｈ２７．６／２．９６，３．２８）和１个酰胺羰基（δＣ
１６３．４）。Ｈ２－１０（δＨ３．２８）和 Ｈ－１１（δＨ３．４４）之间
的１　Ｈ－１　Ｈ　ＣＯＳＹ 相关信号和 Ｈ２－１０到 Ｃ－１２（δＣ
１６３．４）、Ｃ－３（δＣ１０８．２）和 Ｃ－８（δＣ１２７．７）的关键
ＨＭＢＣ信号给出吲哚环－亚甲基－次甲基－酰胺羰基
的连接关系。根据分子式以及将波谱数据与文献
仔细对比［９］，鉴定化合物２为（３Ｒ，６Ｓ）－３，６－二
（（１Ｈ－吲哚－３－基）甲基）？－２，５－哌嗪二酮（Ｆｅｌｕｔａ－
ｎｉｎｅ　Ａ）。其 ＮＭＲ 数据如下：１　Ｈ－ＮＭＲ （５００
ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）：δ１０．９５ （１Ｈ，ｂｒｓ，１／１′－
ＮＨ），７．５５ （１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０，Ｈ－７／７′），７．３２
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０，Ｈ－４／４′），７．２０（１Ｈ，ｂｒｓ，２／
２′），７．０４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．０，８．０，Ｈ－６／６′），６．９５
（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．０，８．０，Ｈ－５／５′），３．４４（１Ｈ，
ｄｄ，Ｊ＝３．６，７．８，Ｈ－１１／１１′），３．２８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ
＝１４．４，３．６，Ｈ－１０／１０′ｂ），２．９６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
１４．４，７．８，Ｈ－１０／１０′ａ）．１３Ｃ－ＮＭＲ （１２５ＭＨｚ，
ＤＭＳＯ－ｄ６）：δ１６３．４ （ｑＣ，Ｃ－１２／１２′），１３６．８
（ｑＣ，Ｃ－９／９′），１２７．７（ｑＣ，Ｃ－８／８′），１２４．５（ＣＨ，
Ｃ－２／２′），１２１．３（ＣＨ，Ｃ－５／５′），１１８．８（ＣＨ，Ｃ－６／
６′），１１８．７（ＣＨ，Ｃ－７／７′），１１１．８（ＣＨ，Ｃ－４／４′），
１０８．２（ｑＣ，Ｃ－３／３′），５５．２（ＣＨ，Ｃ－１１／１１′），２７．６
（ＣＨ２，Ｃ－１０／１０′）。
化合物１和２的结构见图１。
１期 宋龙，等：罗氏海盘车（Ａｓｔｅｒｉａｓ　ｒｏｌｌｅｓｔｏｎｉ）中２种生物碱的分离纯化及其抗肿瘤活性研究 ５３　
图１　化合物１和２的化学结构
Ｆｉｇ．１　Ｔｈｅ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ　ｏｆ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　１　ａｎｄ　２
３．２　体外抗肿瘤活性
化合物２在浓度为５０μｍｏｌ·Ｌ
－１对 ＭＧＣ８０３
细胞的抑制率为５３．９９％，具有一定的抗肿瘤活
性；化合物１对 ＭＧＣ８０３细胞无明显抑制活性。
化合物１和２对Ａ－５４９细胞、Ｈｅｌａ细胞、Ｋ５６２细
胞无明显抑制活性（见表１）。
表１　化合物１、２对 ＭＧＣ８０３、Ａ－５４９、Ｈｅｌａ、Ｋ５６２细胞的抑制作用
Ｔａｂｌｅ　１　Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　１　ａｎｄ　２　ｏｎ　ＭＧＣ８０３，Ａ－５４９，ＨｅＬａ　ａｎｄ　Ｋ５６２ｃｅｌｓ
化合物 浓度／μｍｏｌ·Ｌ
－１
抑制率／％
ＭＧＣ８０３细胞 Ａ－５４９细胞 Ｈｅｌａ细胞 Ｋ５６２细胞
阿霉素 ０．５　 ８２．８８　 ５１．５６　 ７０．７１　 ４７．６０
１　 ５０　 ８．６７ －１．０８ －１．７１　 ４．０２
２　 ５０　 ５３．９９　 ５．６３ －５．１３ －４．２０
４　讨论
多棘罗氏海盘车在中国海域分布广泛，产量
丰富，作为一味传统中药却尚未得到深入开发。
特别是２００６年以来，中国北方沿海地区罗氏海盘
车数量急剧增多。罗氏海盘车主要集中在崂山、
胶州湾、唐岛湾和胶南海域，大量的摄食鲍鱼、菲
律宾蛤仔、扇贝等养殖经济贝类，给贝类养殖业造
成巨大的经济损失［１０］，尤其是在进行贝类增殖放
流时，渔民常因为受到来自罗氏海盘车的危害而
损失惨重［１１］。在民间，罗氏海盘车被用来治疗胃
溃疡、癫痫、腹泻、中耳炎等疾病，说明其具有较高
的药用价值。本实验从多棘罗氏海盘车中首次得
到２个生物碱类化合物，分别鉴定为 Ｎ－（２－苯乙
基）－１Ｈ－吲哚－３－乙胺（１）和Ｆｅｌｕｔａｎｉｎｅ　Ａ（２）。
化合物１为首次分离到的天然产物，其核磁数
据为首次报道；Ｆｅｌｕｔａｎｉｎｅ　Ａ对 ＭＧＣ８０３细胞具
有一定的抑制活性，为罗氏海盘车的开发利用提
供了参考。Ｆｅｌｕｔａｎｉｎｅ　Ａ 是 １ 种非核糖体肽
（ＮＰＲＳ），文献报导其具有抗菌活性［１２］，在生物体
内经非核糖体肽酶催化合成［１３］，而已发现的非核
糖体肽多存在于细菌［１４］、蓝细菌［１５］、放线菌［１６］和
真菌［１７］等微生物中，非核糖体肽在无脊椎动物和
脊椎动物中极少被发现。有文献报道在果蝇［１８］和
小鼠［１９］中也发现了非核糖体肽。本文首次从罗氏
海盘车中分离提取得到非核糖体肽 Ｆｅｌｕｔａｎｉｎｅ
Ａ，为进一步从罗氏海盘车中分离尚未被发现的具
有生物活性的结构复杂、种类繁多的天然产物具
有指导意义。
参考文献
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５４　 中　国　海　洋　药　物 ３５卷
［８］　谭卫东，金红，罗弟祥，等．抗肿瘤药物筛选中 ＭＴＴ法和
ＳＲＢ法的比较［Ｊ］．天然产物研究与开发，１９９９，１１（３）：１７－
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