全 文 ：第 18 卷第 2 期
2000年 6 月
黄　渤　海　海　洋
JOURNAL OF OCEANOG RAPHY OF HUANGHAI &BOHAI SEAS
18(2)pp.56～ 60
June , 2000
罗氏海盘车组织中海星皂甙的
分布及活性研究
郭承华 , 　高学良 , 　吕建刚 , 　刘　迅
(烟台大学化学生物理工学院 , 烟台 264005)
摘　要　对采自黄海的罗氏海盘车多种组织进行了海星皂甙的提取与活性研究。 经理化实
验 、溶血试验 、紫外光谱和红外光谱分析鉴定证明 , 提取物为海星总皂甙。 罗氏海盘车的供试
组织内均含有海星总皂甙 ,各组织的溶血性能按以下顺序依次递减:体壁 、胃 、生殖腺和幽门盲
囊 ,这些组织的海星总皂甙产率分别为 0.153 8%, 0.303 8%, 0.023 9%和 0.416 0%。罗氏海
盘车海星总皂甙的熔点为 175°C ～ 178°C。从砂海星 、罗氏海盘车与海燕提取的海星总皂甙测
试结果比较可以看出 ,罗氏海盘车海星总皂甙的活性最高 ,海燕海星总皂甙的活性最低。
关键词　罗氏海盘车;海星总皂甙;分布;活性
中图分类号:PQ959.266　　文献标识码:A　　文章编号:1000-7199(2000)02-0056-05
罗氏海盘车(Asterias rollestoni Bell)、砂海星(Luidia quinaria Von Martens)、海燕
(Asterina pectini fera)是黄海常见和大量分布的 3种海星 ,许多研究者已对其资源开发 ,
营养成分 ,食用价值 ,海星皂甙的提取制备 ,化学结构鉴定和药理效应等进行了大量的研
究[ 1 ～ 8] 。而对黄海产罗氏海盘车各组织海星皂甙的分布研究未见报道 。为了在开发利
用海星资源方面提供理论依据 ,我们对分布在黄海海域的罗氏海盘车的各组织进行了海
星皂甙的提取制备及活性研究 ,并对从罗氏海盘车提取的海星总皂甙与从海燕 、砂海星中
提取的海星总皂甙进行了比较分析 。
1　材料与方法
1.1　材 料
罗氏海盘车 ,1998年 4月采自烟台潮下带 ,新鲜时洗净泥沙 ,解剖分离其胃 、体壁 、生
殖腺和幽门盲囊 ,并分别粉碎后备用。
砂海星 、海燕 ,1998年 1 ～ 2月采自烟台潮下带 ,新鲜时洗净 ,干燥 ,粉碎后备用。
1.2　设备仪器
实验中使用的仪器设备为 IR-810红外分光光度计 ,U -3400紫外可见近红外分光
收稿日期:1998-07-25　修订日期:2000-03-21
　基金项目:山东省教委资助课题(JOOH07)
　第一作者简介:郭承华 ,男 , 1963年出生 ,副教授 ,主要从事海洋无脊椎动物生理生化研究。
光度计 ,XT4-100X型显微熔点测定仪 。
1.3　海星皂甙的提取
对罗氏海盘车整体及胃 、生殖腺 、幽门盲囊和体壁 4种组织以及砂海星 、海燕分别用
改进的甲醇法[ 8]提取。以整体为例 ,海星皂甙的提取方法如下:
(1)称取400g 罗氏海盘车整体粉末 ,分别用 1 200 ,800 , 400ml甲醇搅拌提取 ,每次搅
拌 、提取 30min 。
(2)合并 3次提取液 ,用滤纸过滤到 3口瓶中 ,真空浓缩到 50m l。
(3)加 50ml蒸馏水(等体积)稀释 ,用 2倍体积的 50%甲醇饱和的苯脱酯(200m l苯加
入 20ml 50%甲醇)18h 。
(4)脱酯后的水层(下层)用 0.1mol/ L盐酸调 pH 值到 3.0(用 0.1mol/ L 的氢氧化钠
中和),用流动的自来水透析 6h 。
(5)透析液用 1/2体积的正丁醇(150ml正丁醇加 10m l水)提取 3次 。
(6)合并上层液 ,真空浓缩至一定体积 ,加 10倍体积的丙酮 ,待沉淀出现 ,离心沉淀挥
干 ,干燥至恒重后称重。亦可将沉淀溶于水中 ,在 4℃用蒸馏水透析过夜 ,冰冻干燥不可
透析的组分。
其它材料或供试组织中海星皂甙的提取方法与此法相同 ,根据材料质量确定各有机
溶剂的用量。
1.4　海星皂甙的分析鉴定
溶血实验参照 Fujita和 Nishimo to的方法[ 10]进行。首先配制等张力磷酸盐缓冲液及
制备兔血液悬浮液 , 然后分别精确称取干燥后的待检样品 ,逐渐加入缓冲液并定容至
100ml(即为所检生药的百分数 ,P 值)。取洁净的小试管 10 支 ,按 0.05ml的递增量依次
加入 0.3 ～ 0.7ml检液 ,然后每管分别补加相应量的缓冲液 ,使各试管内的体积均为 1ml。
边振荡边加入 1ml兔血液悬浮液 ,使各管体积达到 2ml。加完后轻摇 15min以使其完全
混合(摇动过程中避免产生泡沫),置室温下(15℃20℃)静置 。按照同样的方法 ,向对照试
验溶液中加入兔血液悬浮液进行测定。结果的读数以完全溶血(显微镜下检测)到部分溶
血表示 ,用最后一支完全溶血的试管内检品的稀释浓度计算溶血指数 HI (Hemoly tic In-
dex),计算公式如下:
HI = V
P/100 ×S
其中:V ———试管内的总量(ml);P ———检液中的生药百分数(%);S ———所用检液量
(ml)。
同时以标准皂甙的溶血指数作参考对照 。海星皂甙的含量以每克试样溶血指数表
示。
572 期　　　　　　　　　郭承华:罗氏海盘车组织中海星皂甙的分布及活性研究　　　　　　　　　
2　结果
2.1　罗氏海盘车各组织海星皂甙产率 、含量和溶血指数及每克组织的溶血指数
用甲醇法提取的罗氏海盘车各组织海星皂甙产率 、含量和溶血指数及每克组织的溶
血指数及每克组织的溶血指数分别列于表 1和表 2 。
表 1　罗氏海盘车各组织海星皂甙提取物的产率＊
Table 1　Yield of crude asterosaponin in the tissues
of Asterias rollestoni Bell
＊
组织 材料总重(g)
皂甙提取
物总量(g)产率(%)
各组织总
皂甙提取
物占整体
总皂甙提
取物的百
分比(%)
胃 32 0.097 2 0.303 8 3.510
生殖腺 312 0.074 4 0.023 9 2.687
幽门盲囊 249 1.035 9 0.416 0 37.405
体壁 101 6 1.561 9 0.153 8 56.398
　　＊表中结果为两次实验的平均值。
表 2　罗氏海盘车各组织皂甙提取物的溶血指数＊
Table 2　The H.I.of the crude asterosaponin from
the tissues of Asterias rollestoni Bell＊
组织 溶解试样(g)
每克皂甙
溶血指数
总溶血
指数
各组织总
溶血指数
占整体总
溶血指数
的百分比
(%)
胃 0.097 2 2 939 286 22.734
生殖腺 0.171 2 2 921 500 39.746
幽门盲囊 2.290 1 0 0 0
体壁 0.132 0 3 573 472 37.520
　　＊表中结果为两次实验的平均值 ,标准皂甙的每克
试样溶血指数。
2.2　整体砂海星 、海燕 、罗氏海盘车中提取皂甙的产率及溶血指数
用甲醇法从整体砂海星 、海燕 、罗氏海盘车中提取皂甙的产率及溶血指数分别列于表
3和表 4。
表 3　砂海星 、海燕和罗氏海盘车中皂甙
提取物的产率
Table 3　Yield of crude asterosaponin from
Luidia quinaria Von Martens , Asterina
pectinifera and Asterias rellestoni Bell
种类 材料重量(g) 海星皂甙(g) 产率(%)
砂海星 22.6 0.063 3 0.280 1
海燕 40.6 0.209 9 0.517 0
罗氏海盘车 400.0 0.304 5 0.070 0
2.3　海星皂甙的理化性质
表 4　砂海星 、海燕 、和罗氏海盘车海星皂甙的
溶血指数＊
Table 4　 The H.I.of asterosaponin from
Luidia quinaria Von Martens , Asterina
pectinifera and Asterias rellestoni Bell＊
种 类 溶解试样(g) 总溶血指数 每克皂甙溶血指数
砂海星 0.063 3 333 5 266
海燕 0.045 4 841 4 005
罗氏海盘车 0.125 2 1 333 10 650
＊表中结果为 2次实验的平均值 ,标准皂甙的每克试样
溶血指数为 26 543。
从罗氏海盘车各组织中提取的海星皂甙色泽不一。由幽门盲囊中提取的呈褐色 ,由
58　　　　　　　　　　　　　　　　黄　渤　海　海　洋　　　　　　　　　　　　　　　　18 卷
生殖腺中提取的呈淡黄色 ,由胃中提取的呈鹅黄色 。由砂海星中提取的海星皂甙呈淡黄
色 ,由海燕中提取的海星皂甙呈浅绿色 。用冰冻干燥法处理的产品呈粉末状 ,极易吸水潮
解;用丙酮挥干处理的产品呈粘稠状。震荡各组织中提取的海星皂甙水溶液时 ,均产生持
久的泡沫反应 ,并且溶于甲醇 、水 、含水乙醇 ,不溶于苯 、醚 、丙酮等有机溶剂。经检测 ,所
提取罗氏海盘车海星皂甙的熔点 175 ～ 178℃。红外光谱分析 ,样品与标准品在 3 450 ,
1 650 ,1 060/cm处有相似的吸收峰;其水溶液在 224nm处有弱的紫外特征吸收峰(图 1),
与郭承华[ 8]和 Hashimoto Y[ 11]的结果吻合。
图 1　紫外吸收光谱
a.标准皂甙
b.罗氏海盘车海星总皂甙样品
Fig.1　The ultraviolet spectrum
a.standard saponin
b.sample of crude asterosaponin
f rom Asterias rollestoni
3　讨论
由上述结果可知 ,罗氏海盘车的所有组织均含有海星皂
甙 ,但在各组织中的分布与活性不相同 。生殖腺中提取的海
星总皂甙含量虽低 ,但总溶血指数最高(溶血指数是表示皂
甙活性的特征性指标),这说明生殖腺的皂甙提取物活性最
高 ,这可能与 4月是罗氏海盘车的繁殖高峰季节有关 ,因为
在繁殖高峰季节生殖腺特别发达 。此外 ,除了因生长期不同
而有差异外 ,组织中溶血指数的高低与提取物中杂质含量的
多少也有一定关系。由体壁提取的海星总皂甙质量最大 ,且
每克试样溶血指数最高 ,这说明体壁的单位活性最高。海星
皂甙主要集中在体壁组织中。如果将罗氏海盘车的生殖腺
等内脏作为美味食品加以利用 ,而将废弃的体壁用来提取海
星皂甙 ,不仅可变废为宝 ,而且可获得较高的经济效益 。从
罗氏海盘车的胃中提取的海星皂甙体积小 ,密度大 ,总溶血
指数较生殖腺和体壁的为最低 ,利用价值不大。而从幽门盲
囊中提取的海星皂甙 ,虽然与从生殖腺中提取的相当 ,但因
其几乎没有溶血活性且极易潮解 ,因此利用价值最低。
根据上述结果 ,由于从生殖腺中提取的海星皂甙密度小 ,活性高;从体壁中提取的海
星皂甙质量多 ,密度大 ,因此我们认为 ,在生产中从罗氏海盘车提取海星皂甙时 ,除利用整
体提取外 ,作为废弃组织的利用 ,建议利用体壁 。由表 3 、4可以看出 ,罗氏海盘车 、砂海
星 、海燕 3种海星的海星皂甙产率及活性不同 。罗氏海盘车中提取的海星皂甙产率较低 ,
但活性很高。因此在海星皂甙的提取方面 ,罗氏海盘车仍有着相当重要的价值 。
致谢:本工作得到烟台大学化学生物理工学院荆济荣 、鞠宝 、赵岩 、林彩玲老师的大力协助 , 特此致
谢。
参　考　文　献
1　郭承华.海星资源开发利用[ J] .生物学通报 , 1989 , 11:7
2　徐均望.海星生殖腺的营养与食用研究[ J] .大连水产学院学报 , 1991 , 6(1):29～ 33
3　李华 , 曹启超 , 张天民 , 等.海星类动物的应用研究———罗氏海盘车壳部分化学成分的研究[ J] .中国海洋药物 ,
1994 , 13(4):10～ 11
592 期　　　　　　　　　郭承华:罗氏海盘车组织中海星皂甙的分布及活性研究　　　　　　　　　
4　曹启超 ,李华 ,张天民 ,等.海星类动物的应用研究———罗氏海盘车生殖腺中无机元素及氨基酸分析[ J] .中国海洋
药物 , 1995 , 14(1):7～ 9
5　李华 ,郝宏 ,曹启超 ,等.海星类动物的应用研究———罗氏海盘车对小鼠壮阳作用的观察[ J] .中国海洋药物 , 1995 ,
14(2):26～ 29
6　曹士宁 ,梅懋华 ,等.罗氏海盘车总皂甙对大白鼠实验性胃溃疡的愈合作用[ J] .海洋药物杂志 , 1982 , 1(4):21～ 22
7　王唯玮.海星的生理 、药理活性物质[ J] .中国海洋药物 , 1986 , 5(4):46～ 57
8　郭承华 ,刘传琳 ,张传钦 ,等.砂海星海星皂甙的制备[ J] .中国海洋药物 , 1997 , 16(1):36～ 39
9　郭承华 ,张芳 ,刘迅等.黄海产海燕海星皂甙的制备[ J] .海洋通报 , 2000 , 19(2):93～ 96
10　Fujita M , Nishimoto K.On the biological of Japanese senega[ J] .J Pharm Soc Japan , 1952 , 72:1 645～ 1 646
11　Hashimoto Y , Yasumoto T.Confi rmation of saponin as a toxic principle of starf ish[ J] .Bu ll Jap Soc Fish.1960 , 26
(11):1 132
Distribution and Activity of Asterosaponin
in the Body of Asterias rollestoni Bell
GUO Chenghua , 　GAO Xueliang , 　 LU Jian gang , 　 LIU Xun
Scientific and Technological College of Chemistry and Biology , Yantai University , Yantai 264005 , China
(Received July 25 , 1998;revised March 2 , 2000)
Abstract:The various tissues of Asterias rollestoni Bell collected in April of 1998 of the coast
of Yantai were t reated by ex traction with methanol.Data from physical and chemical tests ,
hemoly tic test , ultraviolet spect rum and infrared spect rum analy ses show ed that the ext racts
w ere asterosaponin.The contents of asterosaponin in the tissues w ere different , the recovery
of to tal asterosaponin in the body w all , stomach , gonad and pylo ric sac were respectively
0.153 8%, 0.303 8%,0.023 9% and 0.416 0%.Its melting point w as 175 ～ 178℃.The
asterosaponins f rom Luidia quinaria Von M artens , Asterina pectini fera and Asterias
rollestoni Bell were compared in our test.The results showed that the activity of asteros-
aponin f rom Asterias rollestoni Bell w as the highest and that f rom Asterina pectini fera the
lowest.
Key words:Asterias rollestoni Bell;total asterosaponin;dist ribution;activity
60　　　　　　　　　　　　　　　　黄　渤　海　海　洋　　　　　　　　　　　　　　　　18 卷