全 文 ：遗传 HE RE D飞1 一A S ( Bo i ji ng ) (1 ) : 2 0一 21 1 9 85
虎斑游蛇染色体组型的研究` ’
刁福山 2)娄和林 胡建楠 杨菊倩 鞠兴兰
(辽宁大学生物系 , 沈阳 )
研究各种蛇的染色体数目 、 组型 、 带型及
其相互之间的关系 , 对于探讨蛇的分类及其演
化均有一定意义 。 关于蛇类染色体的 研 究 自
hT
a t e h e r ( 1 9 2 2 ) 首先报道后 , 相继 N a k a mu r a
( 1 9 2 7
、
1 92 8
、
1 9 2 9
、
1 9 3 5 )
、
B h
a t n a g
e r
( 1 9 6 0 )
、
M a n or e ( 1 9 6 2 )
、
B e , a k ( 1 9 6 3
、
1 9 6 4
、
19 6 5
、
1 9 6 6 、
1 9 6 5
、 2 9 6 9 )
、 x t o h ( 2 9夕。 ) 、 B ie k h a m ( 19 7 6 )等对
游蛇科 ( C o lu b r i da e ) 、 眼镜蛇科 ( E l a p id a e ) 、 海
蛇科 ( H dy or 灿 i id a e )、 蛙科 ( V ip i r i d a e ) 等科的部
分蛇类的染色都有所报道 。 但国内只近年有所
报道 , 研究不多〔, ,2 31。 关于虎斑游蛇 (N “ 了厅二
石g ` , 口 za介 ar z打 ( B e r t h o l d ) ] 染色体的研究未见
报道。 为此我们对虎斑游蛇的染色体组型作了
研究和分析 , 现将研究方法与结果报道如下 。
甲醇与冰醋酸 ( 3 : l) 固定液固定 30 分钟 。 重复
固定 3次 , 最后用空气干燥法制片 。 l : 10 的
G i e m
s a 液 ( p H 7 . 2 ) 染色 3 0 分钟 。
染色体标本制成后 , 在油镜下计数 1 0 个
以上完整的 、 分散良好清晰的中期分裂相检杳
二倍体染色体数目 。 再选取 20 个优良的中期
分裂相照相放大 。 参照 D e vn er 体制测量方法 ,
进行染色体配对和组型分析 。
结 果 与 分 析
根据骨髓细胞中期和精母细胞减数分裂终
变期观察确认虎斑游蛇染色体 2 , ~ 40 (见表
l)
。 其中 19 对为常染色 体 , l 对 为 性 染 色
表 1 染色体橄 目分布
材 料 与 方 法
本工作所用的虎斑游蛇 , 采自吉林盘石地
区 、辽宁省朝阳地区 , 共 9 条 ( 斗? , 5了 ) 。
取材前 12 一 14 小时 , 按体重 4 毫克 /公斤
的剂量于腹腔内注射秋水仙素溶液 。 所用材料
为骨髓和辜丸精细管 。 处死后迅速截取 1 . 5一
2
.
0 厘米脊椎骨 2一 3段 , 剔净肌肉 ,用预温 2 5℃
的 2 . 2外 柠檬酸钠水溶液冲取骨髓细胞 。 取细
胞 悬 液 , 再 用 25 ℃ 蒸馏 水 稀 释 3一 4 倍 , 在
25 ℃ 条件下低渗 30 分钟 ;将攀丸置于 2 . 2 多 柠
檬酸钠水溶液中迅速剪 破 、 撕 开 精 细 管 , 用
2
.
2外 柠檬酸钠水溶液洗涤去脂 2一 3 次 。 将精
细管移人 0 . 5务柠檬酸钠溶液中剪碎 ,取细胞悬
液 , 25 ℃ 下低渗 3 0 分钟 。
低渗处理后的骨髓细胞和 精 细 管 里 的 细
胞 ,离心 ( 1 , 0 0 转 /分 , 10 分钟 ) , 弃上清液 , 用
竺竺燮望一}兰 {二 {兰{兰}竺{兰 }兰 {兰J
一土
细胞数 1 5 } ` 1 5 1 2 1” { ’ l ” 12 }`性
体 。 虎斑游蛇的染色体明显地分为大 染 色 体
( M
a e r o e h r o m
o so m 。 ) 与微小染色体 ( M ie r o e h r o -
m o
s o m e ) 两种类型 , 属于两型核型 ( B sm o d a l
k a r y o t y ep s )
, 前者为 s 对 ,后者为 1 2 对 。 虎斑
游蛇这种两型核型情况与报道的大多数爬行动
物和鸟类是一致的 〔已 ,5 ;ol 第 l一 7 对及性染色
体为大染色体 , 按着丝点指数可分为中部着丝
点染色体 ( M ) 和端部着丝点染色体 ( T )两种类
型 ( 见表 2 及图 1 、 2 ) 。 微小染色体在有丝分裂
D
r ` o 石“ 了为 a 刀 e t ` 不 . : s r L一d i e , o n t h e K a r y o r y l、 c , o f
N
a t , ; x t , g犷 1。 。 l。 ; 。 , 。 l , s ( B e r t h o ld )
1) 高光伟 、 马 芳 、张二宾 、 姜 军 、李 玲和王 矩等同
志参加部分工作 。
2 ) 现在北京衣学院工作 。
DOI : 10. 16288 /j . yczz. 1985. 01. 009
衰 2虎斑游蛇大染色体长度 3 个 .傲变动范日
侧串食班处扣曦
编号 组别 相对长度 臂比 (长 /短 )着丝点指数 类型
1 A 2 4
.
5 2土 1 .3 1 1 . 06士 0 . 07 4 8 .5 9士 1 .5 6M
2A 1 6
.
17 土 0 .1 81 . 0 8土 0 . 0 9呼 8 . 0 4土 1 . 92M
3 人 l斗 .7 0士 0 .1 61 .17土 0 .1 1 4 6。 07土 2。 1 5 M
呼 A 9.5 2士 0。 6 91 . 0 6土 0 .5 0 4 8 .7 6土 1 . 2 0M
5 B1 2
。
4 9士 0 .3 1 8 .1 4士 0 .17 47 .1 1土3 .月 2 T
6 B5
.
1 0土 0 . 4 9T
7 B 4
.
4 4士 0 .5 2 T
1 2 2
.
75士 0 .7 9M
W (13
.
26) T
卜一 -A `一一闷 卜 ~ B . .刁染色休编号
染色体类型 :5 0 . 0一 3 7 .5 .· M (具中部着丝点 ) ;37 .5一
5 2
.
0.” s M (具亚 中部粉丝点 ) ;5 2 . 0一 1 2 .5 .· s T (具亚
端部着丝点 ) ;1 2 .5一 0 . 0.” T (其端部若丝点 ) .
圈 1 虎斑游蛇大染色休摸式图
性染色体 :雌性蛇为 ZW型 , 雄性蛇为
2 2 型 。 z 染色体为中部着丝点染色体 。 相对长赓鑫狐联“ 舜。一 ~
护一锻嘟势磷墓翻 镶瀚l嘟蟋徽 喇麟李磷 银曝嘟曝肇嫌 今豁熟肇 称 释赘勿吕— C一 19典、麟Z
的中期呈颗粒状 , 着丝点位
置不明显。 这种按其形态
特征的排列 ,顺理成章地分
为 3 组 , 即 A组为中部着丝
点染色体 ( M ) , B组为端
部着丝点染色体 ( T ) , c 组
为微小染色体。 每组染色
体按相对长度大小 顺 序排
列编号 。 现将各组染色体
特征简述如下 :
A 组染色体 l( 一 4 ) :
本组为中部着丝点 染 色 体
( M )
, 第 1 号为最大的一对
染色体 , 容易区分 。 第 2 、第
3 号染色体显著小 于 第 1
染色体 , 两者长度相差亦较
明显 , 尤其第 3 号染色体短 图 2
臂远端具有随体 ,容易与其它染色体相区别 。第
4 号染色体是本组中最小的典型中着丝点染色
体。
B 组染色体 ( 5一 7 ) : 本组为端部着丝点染
色体 ( T ) 。 第 , 号染色体为本组最大的一对亦
在其臂的远端具有随体。 第 6 、 第 7号长度相
近 , 较难区别。
c 组染色体 ( 8一 19 ) : 为一组微小染色体 。
在有丝分裂中期及减数分裂的终变期多为颗粒
状 , 着丝点的位置虽难确定 ,但可根据形态大小
排列成对 。
虎斑游蛇〔罕)骨漪细胞染色体及其组型
度为 1 2 . 75 士 0 . 9 7 , 略小于第 , 号染色体。 w染
色体为端着丝点染色体 ,相对长度为 13 . 26 , 与
第 , 号染色体长度相近 , 两者同为端着丝点染
色体 ,易于混淆 ,但第 , 染色体臂远端具随体是
区别 w染色体的重要标志 。
根据本文研究的结果 ,虎斑游蛇 2 , ~ 初 ,
属两型核型 ;在雌性 ,性染色体为 z w 型 , 在雄
性 ,性染色体为 2 2 型 。 两型核型和性染色体
的特点与鸟类染色体相似 , 从种群发生和进化
上看 , 为鸟类与蛇类亲缘关系的研究提供了细
胞分类学上的证据 。 (参考文献见第 29 页 )
龙 , 再与人体外周血淋巴细胞培养 , 观察 sC E
率 , 以此来推测此种酶的活性 。 结果发现 (表
2 )
,
sc E 率升高与烟凝结物注射的剂量 有 关 。
也就类似于人体 , 吸烟越多 , 体内烟凝结物积聚
亦多 , 生成致癌致突变的有害物如苯并 〔: 〕 龙
也就越多。 同时诱导人 S一 9 组份中酶的活性
也就增高 ,对人体的危害性也就越大 。 此外 ,有
人已证实 ,吸烟与 S C E 率升高也有明显的正相
关 l,J 。 充分说明吸烟与肺癌发生有密切 相 关 ,
这不能不引起人们的重视。
表 2 不同荆且烟策结物诱导的 S 一 , 组份代脚笨井 〔a ] 花后 , 对人体 S C E 率的形响
烟凝结物 5 一9 组份 观察细胞数 S C E I细胞上 5 . 乙 单加苯并 〔aJ 龙 单加 s 一 9 组份
( m g l 日 /动物 ) ( 料 l /瓶 ) (个 ) 与各组比较 与各组比较
10 0 5 2 5 1 8
.
2士 1 . 2 6 < 0 . 0 0 1 < 0 , 0 0 1
r单加 S一 , 对照 1 0 2 5 1 9 . 2士 0 . 9 3 < 0。 0 0 1 < 0。 0 01
3 0 2 5 2 0
.
2土 1 . 2 7 < 0。 0 0 1 < 0 . 0 0 1
5 0 2 5 1 2
.
8士 0 . 7 7 < 0。 0 0 1
8 0 5 2 5 1 1
.
3士 0 . 7 5 < 0。 0 0 1 < 0。 0 5
单加 s一 9 对照 1 0 2 5 1 3 . 5士 1 . 1 8 < 0 . 0 0 1 < 0 . 0Q5
3 0 2 5 1 4
.
2士 1 . 2 5 < 0 . 0 0 1 < D . 0 05
5 0 2 5 9
.
3士 0 . 7 5 < 0。 0 0 5
40 5 2 5 1 0
.
3土 0 . 5 9 < 0。 0 0 1 < 0。 05
单加 s一 9 对照 1 0 2 5 12 .斗土 0 . 8 8 < 0. 00 1 < 0。 0 1
3 0 2 5 1弓. 4士 0。 9 2 < G. 0 0 2 > 0。 2 0
50 2 5 8
.
8士 0 . 9 1 > 0 . 10
单加苯并 「aJ 花 6拜 g /瓶 2 5 6。 9士 0 . 6 6
{; }
[ 3 1
[今 ]
[ 5 1
今 考 文 献
蔡有余等 : 1 9 8 1。 中华医学杂志 , 6 ( 1 1) : 6 8呼一6 87 0
蔡有余等 : 19 8 3。 中国医学科学院学报 , 5臼 ) : 161 一
16斗。
K i et
,
L
.
D
.
e t al
.
: 1 9科 . PN 才5 . , 7 1: 斗1 5 9 .
M u r ht y, P
.
B
.
: 1 97 9
. 衬“耐招 G亡月“ , 52 : 3朽一
3 45
.
W ir g h
t , A
.
5
.
: 1980
。
M . 绍红 o . R ` 5 . , 7 5 : 2 15 。
图 1 烟凝结物 10 川 g 组的一个细胞 ,
s既 频率有 12 次
(上接第 21 页 )
t 1 1 刁福山等 : 19 8 0。 江宁省动物学会会刊 , 1 ( 1 ): 14 7一
1呼9 0
[忍1 吴美锡: 19 80。 福建师大学报 , ( 1) : 75一 80。
[ 3 ] 曲韵分等 : 19 8 1。 动物学报 , 2 7 ( 3) : 2 1 8一 2 2 7。
t 盛〕 赖户武司等: 19 6 5。 [日〕动物学雄 蓄 , 7 4 ( 4) : 2 4 1一
2呼4 0
t s ] B改止 , M . L . et 吐 . : 197 1 , 197 3 , 19乃 . 乙施即形。份“ 月对“ : ils 气 山即无活绍月 ,沙双`户才心“ 幼 d B i月毛
〔 6 〕 B e` a k , W . et al . : 1963 . A , . N曲t。护司介才, 97 : 2 , 3一
V ol
.
1
,
2
, 〕 B改U n , H e i del be r g , N即 Y o r k .
[ 7 ] Be 弓ak , W . et aL : 1969 { 洲鳃 亡月ext cs, & 24 7一 262 ·
2 5 6
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[ 8 ] I t曲 , M . e t 公 . : 197 0 . J召P口移 . J . G朗`幼“ , 45 (2 ) :
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o h n
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W
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B
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et 公 . : 197 6 . 月`印 e t o lo名ica 子 92 ( 4 ) :
39 , e 39
.