全 文 ：花旗松和小干松的核型观察
一 、 名词解释
1
.染色体组型 (K r a y o一 typ e )。 一个个
体或者一个组群所特有的染色体组的类型 。 染
色体组型是根据有丝分裂中期的染色体数 目和
形态确定的 。
2
.染色体组型图 (Id i ogr am )。 根据染色
体的形态特征描绘的模式图 。
3
.着丝点 (Cen tr om r e e )。 有丝分裂和减
数分裂时纺睡丝在染色体上的着生部位 。
4
.着丝点的位置 。
中间着丝点 (M e ta e en tri e )。 着丝点大致
位于染色体的中部。
亚中间着丝点 (S u bm e tan e e tri c )。 着丝点
到染色体的顶端一边较另一边近些 , 即染色体
的一个臂较另一个臂长些 。
近端着丝点 ( A e r o e e n t r i e ) 。 着丝点很靠
近染色体的某一端 , 所以染色体的一臂很短而
另一臂很长 。
二 、 染色体组型分析
1
. 根尖收集
( 1 ) 发芽前先把花旗松和小干松的种子
放在自来水中浸抱 24 小时。
( 2 ) 用 ( J a e o b s o n ) 发芽器进行发芽 , 白
天 2 5 “ e ( 12小时 ) , 夜晚 1 5 “ e ( 1 2小时 ) 。 一
般种 子在 7一 10 天 (取决于种源 ) 就能发芽 。
( 3 ) 当胚根长达 5 一 15 毫米时 , 把发芽
的种子取 出来 。
2
. 根尖堆备
( 1 ) 预处理 。 下面的几个预处理 , 是用
来促进染色体内部结构的分化和使染色体更适
合于特殊研究的 :
秋水仙碱处理 。 秋水仙碱能破坏纺捶丝的
形成 , 因而中期板将不能均匀地取向 , 以及由
于秋水仙碱能使染色体收缩 , 所以染色体的计
数将要容易些 。 固定前先把切下的 根 尖 放在
0
.
1%秋水仙碱水溶液中 , 在室温下浸 3 小时 。
冷冻处理 。 能使染色体缩短 。 把刚切下的
根尖放在盛有清水的小瓶内 , 而后把小瓶再放
进冰箱冷冻一个晚上 , 温度保持在 10 一 4 Oc 之
间。
8
一经基哇琳处理 。 能使染色体缩短 。 把切
下的根尖放在 0 . 3克 /升的 8一经基哇 琳 水 溶 液
( 0
.
3克的 8一翔基哇琳溶于 1 升的 温 和蒸馏水
中 ) 中处理 2 4一 3 6小时 , 温度为 1 0一 1 5 O e 。 这
样处理后着丝点的结构会明显些 , 以及异染色
质与常染色质的区分也会明显起来 。
秋水仙碱与冷冻结合起来处理对花旗松根
尖的染色体来说效果更好 。
( 2 ) 固定 。 把材料于室温下放入 I户 a r ,。 e r
氏固定液中固定之 ( 3 :1 酒精 : 冰醋酸 ) 。
花旗松要固定 24 小时 , 小干松固定 1 一 遭
小时 , 而后盛于 70 %的酒精中 , 放在冰箱中贮
藏之 。 固定的作用为 :
①保护组织和细胞 , 防止腐败和 自溶 。
②提高细胞的染色性能 。
③使细胞和组织能经受以 后 各 过 程 (离
析 、 冲洗 、 包埋等等 ) , 而不致受到损坏 。
④提高细胞成分的折射率 , 使原来不易看
到的细胞成分能分辨出来 。
对染色体的研究来说 , 固定将会增进染色
体结构的 (形态学的 ) 可见度 - -一沉积染色质
和提高染色体的嗜碱性。
( 3 ) 离析。 离析前和离析后胚根都得用
蒸馏水冲洗三次 。 按如下步骤准备 :
把固定过的材料装入盛有 I N 盐酸的小瓶
中 , 在 6 o o c 下离析 12 分钟 。 试验表明酸至少要
预热 10 分钟 , 离析的时间和温度必 须 严 格 掌
握 , ` 离析时瓶口可用塞子稍稍塞紧 。
I N 盐酸是用蒸馏水将比重为 1 . 1 8的盐酸
8 2
.
5毫升稀释到 1 升时的浓度 , I N 的盐酸亦
DOI : 10. 13456 /j . cnki . l ykt . 1980. 05. 017
2
.把染色体分成等长的1 0个单 位 长度
后 , 着丝点的位置与相应染色 体 的 关 系 (见
图 ) 。
/ /
产少尸}
}卜 / 产
/ /石 .
l红/ /J
/ 叮 l
!L/
/ 夕
/ 了.
差数 O
臂比 1 . 0
2
。
5 5
.
0
。
7 3
。
0
7
。
5 10
7
。
O C, ,
表 2
. 一些染色体组型的例子 (见表 2 )
几种树种的染色体组型
属 或 种 m 】s m和 s t
12G26597属松
叶 松
钱 松
衫旗杉
松落金花黄云冷
可用 10 %容积的溶液来代替。
( 4 ) 染色 。 在洁净的载玻片上 , 滴上一
, 滴改 良的卡宝品红 ( e a r b o l F u e h s i n )溶液 , 而
后把选定的材料 (长约 1 一 2 毫米的根尖 ) 放
人液滴内染色 。 盖上盖玻片 。
染液的配制方法如下 :
①卡宝品红 ( C a r r 和 W a l k e r , 1 9 6 1 ) 。
(
a
)原液 A 。 3 克的碱性品红溶于 1 0 毫
升的 7 0%的酒精溶液 (可以无限期地保存 ) 。
( b )原液 B 。 取原液 A 10 毫升加进 90 毫升
的 5 %的苯酚蒸馏水溶液 (限 于 两 星 期内使
用 ) 。
, (
。
)卡宝品红染色液 。 4 5毫升的厚液 B加
6毫升冰醋酸和 5 、 6毫升 37 %的甲醛液 。
②改良卡宝品红 。 2一 10 毫升的卡宝品红
染色液加 90 一 98 毫升 45 %醋酸和 1 . 8克的山梨
搪醉。
对细胞核染色采用陈熟的改 良卡宝品红比
新配的要好些 , 所以用前至少要把改良卡宝品
红在室温下搁置两星期 。 在室温下贮藏两年的
染色液是稳定的 , 没有看到沉淀和退色现象。
( 5 ) 压片和观察 。 压片可用铅笔顶端的
橡皮块压之 。 在显微镜下观察时 , 假如染色体
还不够分散 , 再在盖片上敲打直到染色体分散
为止 。
三 、 附录
1
. 着丝点的位 置 与 相 应染色体的名称
(见表 1 )
衰 1 染色体着丝点的位 t 及名称
着丝点位置 ! 臂比 } 染 色 体 名 称
严格的中间
中 间
亚 中 间
亚 末 端
末 端
严格的末端
中间着丝点的染色体
3
。
0
7
。
0
亚中间着丝点的染色体
亚末端着丝点的染色体
近端着丝点的染色体
末端着丝点的染色体
张培果摘译 自 o u t l i n 。 o f L e e t u r e , a n d
L a b o r a t o r i e s o f F o r e s t r y 3 0 2
( F
o r e s t G e n e t i e s ) 19 7 7 / 29 7 5
,
U n i v e r s i t y o f B r i t i s h C o l u m b i a
,
C a n a d a
,
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.
5 1一 5 7。
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