全 文 ：素过敏反应的研究获得了 2001年国家科学技术进步二等奖 。
金少鸿研究员自 1984年开始从事合理使用抗生素的社会公益性研究工作 ,在国家政府部门的支持和同
事们共同努力下组建了世界卫生组织认可的国家细菌耐药性监测中心 ,研制出了用于细菌耐药性监测用的
标准化纸片 ,并与世界卫生组织合作先后在北京地区和以及 8个省市及区县级医院建立了耐药性监测网点。
近年来由于多种用于人类治疗的抗生素被用于家畜 、水产养殖和植物栽培业中的预防 、以及生长促进剂而广
泛使用 ,为保护人类的健康资源 ,金少鸿研究员与农业部合作共同开展人畜共患菌的耐药性监测 ,填补了我
国食用动物细菌耐药性监测的空白 。他与国外建立了长期的合作关系 ,利用外资培养我国的科技人员 ,他工
作严谨 ,为人谦和具有良好的学风道德 。
赶黄草中黄酮提取方法的研究
汪洪武1 ,任启生2 ,冯长根1 ,宋新荣2 ,刘艳清3(1.北京理工大学新医药研究与开发中心 ,北京 100081;2.北京江中药物研究所 , 北
京 100050;3.肇庆学院轻化系 ,广东肇庆 526061)
中图分类号:R284.2 文献标识码:B 文章编号:1001-2494(2002)07-0551-01
作者简介:汪洪武 ,男 ,博士研究生
　　赶黄草为虎耳草科(Saxifragaceae)扯根菜属(Pentho-
rum)多年生草本植物。本实验采用超声浸提和水浴浸提两
种方法从赶黄草叶中提取黄酮类化合物 , 获得最佳提取条
件 ,为生产提供了一定的实验依据。
1　仪器 、试剂及材料
Cintra 10 型紫外分光光度仪(澳大利亚 GBC 公司),
TP250型超声波仪[天鹏电子技术(北京)有限公司] 。芦丁
(北京化学试剂公司 ,生化试剂), 其它试剂均为分析纯。 赶
黄草采自四川泸州地区 , 经四川省中药研究所鉴定 , 干燥后
粉碎备用。
2　黄酮含量测定及计算
2.1　芦丁标准液配制　精确称量芦丁(120℃干燥至恒重)
18.8 mg ,于 100 mL烧杯中 , 以 60% EtOH 溶解 ,定容于 100
m L量瓶中 , 浓度为 0.188 g·L -1。
2.2　标准曲线的测定　分别取芦丁标准液 0.0 , 0.5 , 1.0 ,
2.0 , 3.0 , 4.0 mL 于 6 只 10 mL 量瓶中 , 加入 60% EtOH 使
成 5.0 mL。加 5% NaNO2 0.3 m L , 摇匀 , 放置 6 min;再加
10%Al(NO3)3 0.3 m L ,摇匀 , 放置 6 min;加 4.0 mL 1.0 mol
·L-1 NaOH , 稀释至 10.0 mL , 摇匀 ,放置 10 ～ 15 min , 在λ=
510 nm 处测定吸光度 A , 测得结果如下:当浓度为0.009 4 ,
0.018 8 , 0.037 6 , 0.056 4 , 0.075 2 g·L-1时 ,吸光度 A 分别
为 0.122 2 , 0.239 4 , 0.480 2 , 0.690 7 , 0.961 9。以吸光度 A
为纵坐标 , 浓度 c为横坐标 , 绘制标准吸收曲线 。用最小二
乘法经线性回归 , 得芦丁浓度(c)与吸光度(A)的关系曲线
的回归方程式:A =12.611 c+0.000 8 , r=0.999 5。
3　实验步骤
通过预实验 , 选定水浴 、超声方法各条件。 按正交表
L9(34)安排三因素三水平正交实验:水浴法选定乙醇浓度
(A , 60%, 70%, 80%, 依次为水平 1 , 2 , 3 , 下同)、温度(B , 40 ,
60 , 80℃)、浸渍时间(C , 1 , 2 , 3 h)进行试验;超声法选定乙醇
浓度(D , 60%, 70%, 80%)、液固比(E , 20∶1 , 30∶1 , 40∶1)和超
声时间(F , 20 , 40 , 60 min)进行试验。取浸提液 0.1 mL 于 10
mL量瓶中 , 按“2”项测定吸光度并计算黄酮含量。
4　结果与讨论
4.1　最佳条件的选择　根据正交实验与数据处理可知 , 水
浴法与超声法测定的总黄酮浓度总和分别为:1 554.7 和
1 925.4 μg·mL-1 。方差为 A:3220.4 , B:8969.3 , C:2969.0 ,
D:1508.7 , E:40794.1 , F:10281.7。显著性检测发现 , F 值
为 , A:1.05 , B:3.02 , C:1;D:1 , E:27.04 , F:6.81。 ①水浴法:
水浴温度是显著性因素 ,从数据的直观分析和方差分析以及
显著性检验可知 ,三种因素对提取结果影响大小依次为 B>
A>C , 其最佳组合为 A1B3C3 , 即最佳提取条件为 60%乙醇于
80℃水浴提取 3 h , 所得黄酮类物质的浸出率最高。 ②超声
法:液固比的影响最显著 , 时间也是一个显著性因素。从数
据的直观分析和方差分析以及显著性检验表明 , 三种因素对
浸提结果影响大小依次为 E>F>D , 其最佳组合为 D2E1F 2 ,
即超声方法用 20 倍原料重的 70%乙醇超声 40 min , 黄酮类
物质浸出率最高。
4.2　水浴与超声方法中 , 影响黄酮类物质提取的主要条件
基本相同 ,但超声条件下提取效果优于水浴。
4.3　超声次数扩展实验　以样品作两次超声提取 , 第一次
超声处理即有 95%得率(以超声 40 min 两次 , 并多次浸滤所
得含量 ,多次平行结果作为总含量), 可见第二次超声作用较
小 ,可以超声 40 min代替。
4.4　不同部位黄酮含量测定　以超声最佳条件对赶黄草不
同部位进行了比较 , 其中根中黄酮含量为 3.5%%, 茎中为
3.7%%,叶子含量为 4.1%%。可见叶中黄酮类物质含量最
高。 (收稿日期:2002-03-13)
·551·中国药学杂志 2002年 7月第 37卷第 7期　　　　　　　　　　　　　 Chin Pharm J , 2002 July , Vol.37 No.7