全 文 ：China Pharmacy 2011 Vol. 22 No. 39 中国药房 2011年第22卷第39期
环草石斛为兰科植物环草石斛 Dendrobium loddigesii
Rolfe.的新鲜或干燥茎，鲜用者采收后除去根及泥沙；干用者
采收后除去杂质，用开水略烫或烘软，再边搓边烘晒，至叶鞘
搓净，干燥[1]。多糖类成分是环草石斛中的一类有效成分，具
有抗肿瘤、增强免疫力的作用。笔者采用紫外-可见分光光度
法测定环草石斛中石斛多糖的含量，以为环草石斛的质量控
制提供依据。
1 仪器与试药
UV-2450型紫外-可见分光光度计、AUW120D型电子天
平、AUY220型电子天平（日本岛津公司）；HS10260D型超声波
清洗器（天津市恒奥科技发展有限公司，工作频率：40 kHz，功
率：40～100W）。
浓硫酸、苯酚、乙醇均为分析纯，水为蒸馏水；D-无水葡萄
糖对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110833-200503，供
含量测定用）；环草石斛采自贵州省兴义市环草石斛主产区，
经云南中医学院普春霞教授和杨耀文教授鉴定为真品，标本
存于贵州省兴义市吉仁堂药业公司。
2 方法与结果
2.1 溶液的制备
2.1.1 对照品溶液 精密称取105℃干燥至恒重的D-无水葡
萄糖对照品适量，加水制成每 1 mL含 0.104 4 mg的溶液，即
得。
2.1.2 供试品溶液 取本品粗粉 0.15 g，精密称定，置 250 mL
圆底烧瓶中，用 5.0 mL石油醚（60～90℃）回流提取 0.5 h，过
滤，残渣挥干溶剂后用 50 mL 80％乙醇回流提取 1 h，趁热过
滤，残渣用热80％乙醇洗涤3次，每次10 mL，残渣挥干溶剂后
用100 mL蒸馏水回流提取2次，每次1.5 h，残渣及烧瓶用热水
洗涤 3次，每次 10 mL，合并滤液及洗涤液，放冷，转移至 250
mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。
2.2 测定方法依据
以D-无水葡萄糖为对照品测定环草石斛中石斛多糖的含
量，用硫酸-苯酚显色法，在可见光区能获得稳定的特征吸收
峰。
2.3 检测波长的确定
分别对空白（水）显色前后样品、D-无水葡萄糖对照品溶
液显色前后样品、石斛多糖溶液显色前后样品，在紫外-可见分
光光度计上进行全波长扫描，扫描范围为 300～900 nm，得吸
收光谱，详见图1。
从图 1中可以看出，空白（水）显色前后样品、D-无水葡萄
糖对照品溶液显色前样品与石斛多糖溶液显色前样品没有明
显的吸收峰，而D-无水葡萄糖对照品溶液显色后样品与石斛
多糖溶液显色后样品在 490 nm波长处均有最大吸收，故选择
490 nm作为检测波长。
2.4 标准曲线的制备
紫外-可见分光光度法测定环草石斛中石斛多糖的含量Δ
陈 化 1＊，陈 竹 2，梁 斌 3，赵 俊 3，冯子坤 3（1.贵州兴义市人民医院，兴义市 562400；2.贵州省人民政府云
岩宾馆医务室，贵阳市 550004；3.贵州兴义市吉仁堂药业公司，兴义市 562400）
中图分类号 R284.1；R927.2 文献标识码 A 文章编号 1001-0408（2011）39-3690-03
摘 要 目的：建立测定环草石斛中石斛多糖含量的方法。方法：采用紫外-可见分光光度法，以D-无水葡萄糖为对照，检测波长
为490 nm。结果：D-无水葡萄糖的进样量在0～0.104 40 mg范围内与吸光度呈良好的线性关系（r＝0.999 7）；平均加样回收率为
98.09％，RSD＝1.62％（n＝6）。结论：本法操作简便、快捷、结果准确，可用于环草石斛中石斛多糖的含量测定。
关键词 环草石斛；石斛多糖；D-无水葡萄糖；紫外-可见分光光度法
Content Determination of Dendrobium Polysaccharides in Dendrobium loddigesii by UV-VIS Spectropho-
tometry
CHEN Hua（Xingyi Municipal People’s Hospital of Guizhou Province，Xingyi 562400，China）
CHEN Zhu（Infirmary of Yunyan Guest House of Guizhou Provincial People’s Government，Guiyang 550004，
China）
LIANG Bin，ZHAO Jun，FENG Zi-kun（Xingyi City Jirentang Herbal & Pharmaceutical Co.，Ltd. of Guizhou
Province，Xingyi 562400，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To establish a method for the content determination of dendrobium polysaccharides in Dendrobium
loddigesii. METHODS：UV-VIS spectrophotometry method was adopted. The spectrophotometry was used with D-glucosum anhydri-
cum as control. The detection wavelength was set at 490 nm. RESULTS：The linear range of D-glucosum anhydricum was 0～
0.104 40 mg（r＝0.999 7）with an average recovery of 98.09％（RSD＝1.62％，n＝6）. CONCLUSION：The method is simple，rapid
and accurate for the content determination of dendrobium polysaccharides in D. loddigesii .
KEY WORDS Dendrobium loddigesii；Dendrobium polysaccharides；D-glucosum anhydricum；UV-VIS spectrophotometry
Δ国家科技支撑计划子课题（2006BAI06A11-11）
＊副主任药师，执业药师。研究方向：医院药学与药物研发。电
话：0859-3520567。E-mail：18908597099＠189.cn
··3690
中国药房 2011年第22卷第39期 China Pharmacy 2011 Vol. 22 No. 39
精密量取对照品溶液0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL，分别
置10 mL具塞试管中，加水至2.0 mL，加5％苯酚溶液1.0 mL，
摇匀，迅速加入浓硫酸 5.0 mL，放置 5 min，置沸水浴加热 20
min，取出，立即置冰水浴中冷却 2 min后取出，室温放置 10
min（硫酸-苯酚显色法）；另以2.0 mL蒸馏水同法操作，作空白
对照。照紫外-可见分光光度法 [2]在 490 nm波长处测定吸光
度。以吸光度（A）为纵坐标，进样量（c）为横坐标，制备标准曲
线，得回归方程为A＝5.175 79c+0.005 73（r＝0.999 7，n＝7）。
结果表明，D-无水葡萄糖的进样量在0～0.104 40 mg范围内与
吸光度呈良好的线性关系。
2.5 样品测定方法
精密量取供试品溶液1 mL，置于10 mL干燥具塞试管中，
照“2.4”项下方法自“加水至 2.0 mL”起依法测定吸光度，从标
准曲线上读出供试品溶液中所含D-无水葡萄糖的重量（mg），
计算，即得。
2.6 精密度试验
取同一样品适量，显色后重复测定 6次吸光度。结果，
RSD＝1.48％（n＝6），表明该方法精密度良好。
2.7 稳定性试验
取同一供试品溶液适量，显色后分别于 0、10、20、30、40、
50、60 min测定吸光度。结果，RSD＝0.32％（n＝7），表明供试
品溶液在60 min内稳定性良好。
2.8 重复性试验
取同一环草石斛药材粉末适量，照“2.1.2”项下方法平行
制备 6份供试品溶液，照上述方法测定石斛多糖含量。结果，
平均含量为10.11％，RSD＝1.56％（n＝6），表明该方法重复性
良好。
2.9 加样回收率试验
取已知含量（10.11％）的同一环草石斛药材粉末 6份，每
份约0.10 g，精密称定，照“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，分
别精密加入D-无水葡萄糖对照品溶液（1.032 6 mg·mL-1）10
mL，加水至刻度，摇匀，照上述方法测定石斛多糖含量，计算加
样回收率，结果见表1。
表1 加样回收率试验结果（n＝6）
Tab 1 Results of recovery test（n＝6）
编号
1
2
3
4
5
6
称样量
/g
0.105 1
0.101 9
0.103 7
0.104 2
0.099 8
0.107 4
样品含量
/mg
10.625 6
10.302 1
10.484 1
10.534 6
10.089 8
10.858 1
加入量
/mg
10.326 0
10.326 0
10.326 0
10.326 0
10.326 0
10.326 0
测得量
/mg
20.718 5
20.751 3
20.473 1
20.564 7
20.217 2
20.943 1
回收率
/％
97.74
101.19
96.74
97.13
98.08
97.67
x
/％
98.09
RSD
/％
1.62
2.10 样品含量测定
取 14批环草石斛药材粉末各适量，分别照“2.1.2”项下方
法制备供试品溶液，照上述方法测定样品中石斛多糖的含量，
结果见表2。
表2 样品中石斛多糖含量测定结果
Tab 2 Results of content determination of dendrobium poly-
saccharide
编号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
样品来源
贵州兴义市
贵州贞丰县
贵州安龙县
贵州兴义则戎乡
贵州兴义清水河镇
贵州兴义万屯镇
阴坡样品（人工栽培）
阳坡无遮阴样品（人工栽培）
阳坡树下自然遮阴样品（人工栽培）
阳坡人工遮阴样品（人工栽培）
广西
贵州镇宁县
云南文山州
越南
采收时间
2007.4
2007.7
2007.4
2007.7
2007.5
2008.4
2008.6
2008.6
2008.6
2008.6
2007.7
2008.6
2008.7
2007.4
石斛多糖含量/％
14.51
14.03
14.13
9.16
12.57
11.43
15.61
6.71
6.50
6.89
6.69
12.88
5.34
11.49
备注
野生
野生
野生
野生
野生
野生
3年生
3年生
3年生
3年生
野生
野生
野生
野生
3 讨论
2010年版《中国药典》（一部）石斛的质量标准中无含量测
定项[2]，环草石斛的含量测定方法也未见报道。以石斛多糖作
为含量测定指标，有利于全面评价环草石斛药用部位的质
量。因此，本试验对环草石斛样品采用石油醚（60～90℃）脱
脂，80％乙醇除去醇溶性糖等，经热水提取水溶性活性成分石
斛多糖[3～5]，应用紫外-可见分光光度法进行含量测定。结果证
明，该方法简便、快速、准确、灵敏度高、专属性强。
本试验对 14批环草石斛药材样品进行含量测定，得到石
斛多糖的含量范围为 5.34％～15.61％，据此研究结果建议制
定环草石斛中石斛多糖的含量标准为本品按干燥品计算，含
石斛多糖以无水葡萄糖（C6H12O6）计，不得少于6.0％。
参考文献
[ 1 ] 国家药典委员会编.中华人民共和国药典（一部）[S].2000
年版.北京：化学工业出版社，2000：70.
[ 2 ] 国家药典委员会编.中华人民共和国药典（一部）[S].2010
年版.北京：中国医药科技出版社，2010：附录30、85.
[ 3 ] 孙卓然，刘 圆，李晓云，等.石斛不同种、不同药用部位
中多糖含量测定[J].时珍国医国药，2009，20（8）：1 886.
0.681
0.600
0.400
0.200
0.000
－0.117300 400 600 800 900 nm
Abs
图1 吸收光谱图
A.显色前的空白样品（水）；B.经硫酸-苯酚显色后的空白样品（水）；C.
显色前的D-葡萄糖对照品溶液；D.经硫酸-苯酚显色后的D-葡萄糖对
照品溶液；E.显色前的石斛多糖溶液；F.经硫酸-苯酚显色后的石斛多
糖溶液
Fig 1 Absorption spectrum
A.blank sample before color developing（water）；B. blank sample after
color developed by phenol-sulphate acid（water）；C. D-glucosum anhy-
dricum control before color developing；D. D-glucosum anhydricum con-
trol after color developed by phenol-sulphate acid；E. dendrobium poly-
saccharide solution before color developing；F. dendrobium polysaccha-
ride solution after developed by phenol-sulphate acid
D
F
C
B
A
E
··3691
China Pharmacy 2011 Vol. 22 No. 39 中国药房 2011年第22卷第39期
[ 4 ] 范俊安，王继生，张 艳，等.铁皮石斛组培品与野生品 的形态组织学和多糖含量比较研究[J].中国中药杂志，
2005，30（21）：1 648.
[ 5 ] 黄民权，黄步汉，蔡体育，等.铁皮石解多糖的提取、分离
和分析[J].中草药，1994，25（3）：128.
（收稿日期：2010-10-05 修回日期：2011-04-14）
不同产地仙茅药材的HPLC指纹图谱研究Δ
马 鹏 1，2＊，李隆云 1，2 #，喻 强 1，卫莹芳 3，钟国跃 1，2（1.重庆市中药研究院，重庆市 400065；2.重庆市中药良种
选育与评价工程技术研究中心，重庆市 400065；3.成都中医药大学药学院，成都市 610075）
中图分类号 R284.1；R927 文献标识码 A 文章编号 1001-0408（2011）39-3692-03
摘 要 目的：建立仙茅药材的指纹图谱，并比较不同产地仙茅指纹图谱的差异，为科学评价仙茅的质量提供参考依据。方法：采
用高效液相色谱法。色谱柱为Diama（钻石）C18（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为甲醇-0.1％乙酸水溶液（梯度洗脱），检测波长
为285 nm，柱温为30℃，流速为1 mL·min-1，洗脱时间为80 min。结果：指纹图谱研究的各项参数均符合有关规定。仙茅不同产
地17批药材中有14批的指纹图谱相似度较高，有13个共有峰，各共有峰之间的分离度较好。结论：仙茅指纹图谱的特征性及专
属性强，可用于仙茅药材的质量控制；不同产地仙茅的化学组成存在一定差异，固定产地来源对保障仙茅药材质量的稳定性有着
重要意义。
关键词 产地；仙茅；高效液相色谱法；指纹图谱
Studies on HPLC Fingerprints of Curculigo orchioides from Different Regions
MA Peng，LI Long-yun，YU Qiang，ZHONG Guo-yue（Chongqing Academy of Chinese Materia Medica，
Chongqing 400065，China）
MA Peng，LI Long-yun，ZHONG Guo-yue（Chongqing Engineering Research Center for Fine Variety Breeding
Techniques of Chinese Materia Medica，Chongqing 400065，China）
WEI Ying-fang（School of Pharmacy，Chengdu University of TCM，Chengdu 610075，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To establish the fingerprints of Curculigo orchioides，and to compare the difference of fingerprints of
C. orchioides so as to provide scientific basis for quality evaluation of C. orchioides. METHODS：HPLC method was adopted. The
separation was performed on Diama C18 column（250 mm×4.6 mm，5 μm）with mobile phase consisted of methanol-0.1％ acetic ac-
id（gradient elution）at the flow rate of 1 mL·min-1. The UV detection wavelength was set at 285 nm，column temperature was
30 ℃ and the elution time was 80 min. RESULTS：The parameters of fingerprints were up to the standards. The chromatographic
profiles of 14 batches of samples in total 17 batches were very similar. There were 13 common peaks and each peak in the finger-
print was well separated under the chromatographic condition above. CONCLUSION：The fingerprints of C. orchioides are high in-
dividual and specific，and it can be applied for quality control of C. orchioides. C. orchioides from different habitats have difference
in chemical constituents，so selection of material habitat is very important for quality control of C. orchioides.
KEY WORDS Regions；Curculigo orchioides；HPLC；Fingerprints
Δ国家“十五”科技攻关计划课题（2001BA701A32）
＊助理研究员。研究方向：中药材质量评价。电话：023-
89029062。E-mail：pm3132@163.com
#通讯作者：研究员，博士。研究方向：中药材栽培技术、品种选育
及药材质量评价。电话：023-89029118。E-mail：Lilongyun8@163.com
􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂
仙茅是石蒜科仙茅属植物仙茅 Curculigo orchioides
Gaertn.的干燥根茎，属常用中药。近年来，国内、外关于仙茅
的化学成分研究颇多，计有环菠萝蜜烷型三萜皂苷、酚及酚
苷、木脂素及木脂素苷、黄酮、桉烷类衍生物和甜味蛋白等。
生物活性研究显示，仙茅属植物具有调节免疫、抗氧化、保肝、
保护心血管系统、改善味觉及抗骨质疏松等作用[1]。而仙茅药
材则具有补肾阳、强筋骨、祛寒湿等功效，临床用于治疗阳痿
精冷、筋骨萎软、腰膝冷痹、阳虚冷泻等证[2]。
仙茅在全国范围内均有分布，不同产地的仙茅品质各
异。色谱指纹图谱技术从药材整体图谱入手，选择特征峰，构
成该药材特有的色谱指纹图谱全貌，可以为药材质量的分析
与控制提供全面可靠的依据。因此，笔者在资源调查的基础
上，对不同产地仙茅药材进行了高效液相色谱（HPLC）指纹图
谱研究，以期进一步完善仙茅的质量标准，并为合理评价和使
用仙茅提供科学依据。
1 仪器与试药
2695 Separations ModuLe HPLC仪、2996二极管阵列检测
器、Empower化学工作站（美国Waters公司）；AEG-45SM电子
天平（日本岛津公司）。
甲醇、乙腈为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯；
··3692