全 文 ：UPLC-UV-MS指纹图谱，标定了 22 个峰，其中 12 个
峰共有且含量较高。由于茯苓药材成分复杂，而且
缺乏对照品，通过离子质谱图质荷比并参照相关文
献，初步归属了 16 个色谱峰。
利用软件生成对照谱法计算指纹图谱的相似
度，同时，利用 SPSS 16. 0 软件对不同的药材进行大
致归类。相似度和聚类分析的结果表明，茯苓皮类
药材品质较为稳定，不同产地间差异不大;茯苓块类
药材品质较不稳定，不同产地间具有差异性。
通过比较 16 个不同产地不同药用部位茯苓的
指纹图谱，其各峰相对保留时间的 RSD 均小于
0. 5%，表明各样品成分相似;而相对峰面积的 RSD
均大于 5%，且皮类药材与块类药材各共有成分的
相对质量分数差异较大，说明茯苓药材的质量受到
药用部位、药材产地等多因素影响。因此，尚需要采
集更多产地，更多不同部位的样品，进行归类、比较，
使质量控制更具科学性，并需要对其化学成分进行
深入研究，全面控制药材质量。
本实验建立了 16 min 内快速测定茯苓药材中
三萜类成分的 UPLC-UV-MS 指纹图谱的方法，该方
法快速，可操作性强，为控制和评价茯苓药材的整体
质量提供依据。
参 考 文 献
［1］国家药典委员会 . 中华人民共和国药典［S］. 一部 . 北
京:中国医药科技出版社，2010:224-225.
［2］仲兆金，刘浚 . 茯苓有效成分三萜的研究进展［J］. 中
成药，2001，23(1) :58-62.
［3］车爽，毕开顺 . 波长转换 RP-HPLC 法同时测定茯苓不
同部位中 5 种三萜含量［J］. 药学学报，2010，45(4) :
494-497.
［4］孙明珍，杨中林，张中朋，等 . 不同产地及不同药用部位
茯苓的比较研究［J］. 中成药，2004，26(5) :379-381.
［5］胡燕，王明亮，邱国福，等 . 高效液相色谱法测定茯苓皮
指纹图谱［J］. 分析科学学报，2006，22(6) :636-640.
［6］芦锰，贺海花，杨云，等 . 反相高效液相色谱法对茯苓饮
片指纹图谱的研究［J］. 时珍国医国药，2009，20(20) :
25-31.
［7］ 韩小娟，罗建光，陆园园，等 . HPLC-DAD-ESI-MSn 法鉴
定茯苓中的三萜成分［J］. 药学与临床研究，2009，17
(4) :290-293.
［8］于能江，郭继芬，赵毅民，等 . 高效液相色谱-二极管阵
列检测-质谱法鉴定茯苓中的三萜成分［J］. 分析化学，
2004，32(7) :866-870.
收稿日期:2012-10-29
基金项目:2009 年中医药行业科研专项(200907001-5) ;973 计划(2009CB522707)
作者简介:韩炜(1987-) ，女，在读硕士研究生，专业方向:中药新剂型为与新技术;Tel:010-64014411-2937，E-mail:hanwei_2807@ 126. com。
* 通讯作者:李慧，Tel:010-64014411-2957，E-mail:lihuiyiren@ 163. com。
赶黄草茎与叶 HPLC特征指纹图谱的比较
韩 炜1，张 红2，张志杰1，李 慧1*
(1. 中国中医科学院中药研究所，北京 100016;2. 扬子江药业集团北京海燕药业有限公司，北京 102206)
摘要 目的:建立并比较赶黄草茎、叶 HPLC 特征指纹图谱，为科学评价、有效控制其质量提供可靠方法和依
据。方法:用 HPLC法建立赶黄草茎、叶指纹图谱;采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统 A 版”对赶黄草茎、叶
指纹图谱进行分析，并分别生成 2 种部位的对照图谱;采用 SPSS 16. 0 对赶黄草茎、叶指纹图谱进行聚类分析。结
果:赶黄草的茎与叶 2 个入药部位的指纹图谱相似度较低，仅为 0. 340 ～ 0. 735;聚类分析将 8 个产地赶黄草茎聚为
一类，将 7 个产地赶黄草叶(四川万玉叶除外)聚为另一类。结论:赶黄草的茎与叶 2 个入药部位的指纹图谱差异
显著;8 个产地的赶黄草叶的指纹图谱相似度较高，可用于质量控制;建议结合赶黄草不同部位的药效及临床需求，
合理选择入药部位。
关键词 赶黄草;茎;叶;HPLC;指纹图谱
中图分类号:R282. 5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2013)03-0387-05
Comparison of HPLC Characteristic Fingerprints of Stems
and Leaves of Penthorum chinense
HAN Wei1，ZHANG Hong2，ZHANG Zhi-jie1，LI Hui1
(1. Institute of Chinese Materia Medica，China of Medical Sciences，Beijing 100016，China;2. Beijing Haiyan Parmaceutical Co.，Ltd.
of Yangtze River Pharmaceutical Group，Beijing 102206，China)
·783·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 36 卷第 3 期 2013 年 3 月
DOI:10.13863/j.issn1001-4454.2013.03.008
Abstract Objective:To establish and compare the HPLC characteristic fingerprints of stems and leaves of Penthorum chinense for
its scientific evaluation and quality control. Methods:The HPLC fingerprints of the stems and leaves were established and analyzed with
Similarity Evaluation System for Chromatographic Fingerprint of Traditional Chinese Medicine (Version 2004A) ，and chromatograms of
stems and leaves were generated as the representative standard fingerprints. The cluster analyis was carried on by SPSS 16. 0. Results:
The similarity of HPLC characteristic fingerprints from the stems and leaves was only 0. 340 ～ 0. 735;Stems from 8 habitats were classi-
fied into one group and leaves from 7 habitats (except leaf from Sichuan Wanyu)were classified into another group. Conclusion:The
HPLC characteristic fingerprints from the stems and leaves are significant different，and the latter can be applied for quality control ow-
ing to high similarity;Making a reasonable choice of different parts depends on the pharmacodynamics and clinical demands.
Key words Penthorum chinense Pursh;Stem;Leaf;HPLC;Fingerprint
赶黄草为苗族治疗肝病的传统药物，被誉为
“神仙草”，多数学者认为其基源植物为虎耳草科扯
根菜属植物扯根菜 Penthorum chinense Pursh〔1〕。近
年来对赶黄草的活性成分及药理研究表明，赶黄草
可明显改善饮酒及药物引起的肝损伤，在治疗酒精
性肝损伤、慢性活动性肝炎、乙型肝炎及急性病毒性
肝炎方面疗效显著〔2〕。赶黄草的民间传统用药部
位是植株的地上部分，包括茎、叶、果实等，其中果实
部分量微少，茎与叶是其主要组成部分〔3〕;由于茎
部组织木质化严重，茎直径可达 0. 2 ～ 0. 8 cm，在商
品药材中所占比重较大，因此茎、叶部分质量的一致
性值得探讨〔4〕。为评价赶黄草茎、叶部位整体成分
的特征与差异，本研究对赶黄草茎、叶部位进行了
HPLC 特征指纹图谱研究，为进一步质量控制及资
源的合理开发提供依据。
1 仪器与试药
1. 1 仪器 Agilent 1200 型高效液相色谱仪，DAD
检测器;KQ-100B 型超声波清洗仪(昆山市超声仪
器有限公司)。
1. 2 试药 甲醇、磷酸、盐酸为分析纯，乙腈为色
谱纯，水为纯化水。槲皮素对照品(中国食品药品
检定研究院，批号:100081-200406)。
1. 3 药材 赶黄草药材分别采集于四川、江西、吉
林等 8 个产地，由中国中医科学院中药研究所生药
室李先端研究员鉴定，将每一产地的赶黄草分取茎、
叶，粉碎过 2 号筛，作为试验样品。赶黄草茎、叶样
品来源及指纹图谱编号见表 1。
2 方法及结果
2. 1 色谱条件 Waters 液相色谱柱 Symmetry-
ShieldTM RP18 (3. 9 mm × 150 mm，5 μm) ，流动相:
乙腈(A)-0. 1%磷酸水溶液(B) ，按表 2 进行梯度洗
脱;柱温:30 ℃;流速:0. 8 mL /min;检测波长:310
nm;进样量:15 μL。
2. 2 对照品溶液的制备 精密称取槲皮素对照品
适量，加甲醇溶解并定容至刻度，制成 0. 5 mg /mL
的对照品溶液，备用。
表 1 赶黄草茎、叶样品来源及指纹图谱编号
编号 产地 茎指纹图谱编号
叶指纹
图谱编号
1 四川桂花罗江 S1 S9
2 江西庐山 S2 S10
3 四川民乐 S3 S11
4 四川石宝 S4 S12
5 四川双沙 S5 S13
6 四川双文 S6 S14
7 四川万玉 S7 S15
8 吉林延吉 S8 S16
表 2 赶黄草 HPLC梯度洗脱程序
时间 /min 流动相 A/% 流动相 B /%
0 ～ 15 10→20 90→80
15 ～ 25 20→22 80→78
25 ～ 35 22→24. 5 78→75. 5
35 ～ 37 24. 5→29 75. 5→71
37 ～ 41 29→31 71→69
41 ～ 76 31→38 69→62
2. 3 供试品溶液的制备 取样品 1. 5 g，精密称
定。加入 50%甲醇 50 mL，超声 45 min，放冷，用稀
50%甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，精密量取 5 mL
续滤液置 10 mL 量瓶中，加入稀盐酸 0. 5 mL，水解
一定时间后用 50%甲醇定容至刻度，摇匀，用 0. 22
μm微孔滤膜滤过，即得。
2. 4 方法学考察
2. 4. 1 精密度试验:取四川石宝赶黄草全草，按
“2. 3”项下方法制备供试品溶液，连续进样 5 次，每
次 15 μL。检测指纹图谱，各共有峰相对保留时间
RSD ＜3. 0%，各共有峰相对峰面积 RSD ＜ 3. 0%，表
明仪器精密度良好。
2. 4. 2 重复性试验:取四川石宝赶黄草全草 5 份，
按“2. 3”项下方法制备供试品溶液。进样 15 μL，检
测指纹图谱，各共有峰相对保留时间 RSD ＜ 3. 0%，
·883· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 36 卷第 3 期 2013 年 3 月
各共有峰相对峰面积 RSD ＜3. 0%，表明方法重复性
良好。
2. 4. 3 稳定性试验:取“2. 4. 1”项下的供试液，分
别于 0、3、6、9、12、24 h 测定 HPLC 色谱图。检测指
纹图谱，各共有峰相对保留时间 RSD ＜ 3. 0%，各共
有峰相对峰面积 RSD ＜ 3. 0%，表明供试品溶液在
24 h内稳定性良好。
2. 5 赶黄草茎、叶 2 个入药部位的对照指纹图谱
的生成 按“2. 3”项下方法分别制备 8 个产地赶黄
草茎、叶的供试品溶液，按“2. 1”项下的色谱条件进
行测定，采用国家药典委员会颁布的“中药色谱指
纹图谱相似度评价系统 2004A 版”对 8 个产地赶黄
草茎、叶 HPLC色谱图进行匹配，时间窗 0. 60，采用
中位数法生成对照图谱，结果见图 1、图 2。
2. 6 赶黄草茎、叶 2 个入药部位的对照指纹图谱
的比较及聚类分析
2. 6. 1 赶黄草茎、叶 2 个入药部位的对照指纹图
谱的比较:采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系
统 A 版”对茎、叶 2 个部位的对照指纹图谱进行匹
配，见图 3。每一产地赶黄草茎、叶部位之间的相似
度见表 3。
由图 3 及表 3 得知，赶黄草茎对照指纹图谱与
叶对照指纹图谱的差异较大，相似度在 0. 340 ～
0. 735 之间;其中四川民乐所产赶黄草茎、叶指纹图
谱之间的相似度最低。通过对 2 个部位对照指纹图
谱的匹配结果分析，推测导致茎与叶的相似度较低
的原因有二:第一，叶部位的特有峰多，且部分特有峰
峰面积很大。在 5 ～ 75 min 内，茎、叶特有峰分别为
1、11个，因此，叶的特有峰远多于茎。第二:茎、叶共
有峰的峰面积差异显著。其中，2 个部位的共有峰 33
号峰(21. 05 min) ，35 号峰(23. 94 min) ，39 号峰
(26. 84 min) ，43 号峰(31. 40 min) ，63 号峰(59. 75
min) ，69 号峰(71. 78 min)的峰面积 RSD 均大于
80%。
图 1 赶黄草茎 HPLC特征指纹图谱
1. 槲皮素
注:R为对照指纹图谱，S1 ～ S8 分别为 8 个产地赶黄草茎的指纹图谱
图 2 赶黄草叶 HPLC特征指纹图谱
1. 槲皮素
注:R为对照指纹图谱，S9 ～ S16 分别为 8 个产地赶黄草叶的指纹图谱
·983·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 36 卷第 3 期 2013 年 3 月
图 3 赶黄草茎、叶对照指纹图谱匹配图
1. 槲皮素
表 3 8 个产地的赶黄草茎与叶指纹图谱的相似度
编号 1 2 3 4 5 6 7 8
茎与叶 0. 735 0. 695 0. 340 0. 603 0. 536 0. 519 0. 455 0. 623
2. 6. 2 赶黄草茎、叶指纹图谱的聚类分析:本研究
将 8 个产地赶黄草茎指纹图谱的共有峰与叶的共有
峰峰面积标准化后组成 16 × 50 阶原始数据矩阵，运
用 SPSS 16. 0 软件对其进行聚类分析，采用 Hierar-
chical cluster层次聚类，利用组间连接法和欧氏距离
平方(squared Euclidean)作为样品的测度。其中，样
品 S1 ～ S8 分别为 8 个产地赶黄草的茎，样品 S9 ～
S16 分别为 8 个产地赶黄草的叶。聚类结果表明，
除 S15 四川万玉叶外，其余 7 个产地赶黄草叶可聚
为一类，8 个产地的赶黄草茎可聚为另一类。聚类
分析结果见图 4。
图 4 8 个产地赶黄草茎与叶指纹图谱聚类分析图
3 讨论
提取工艺是影响药材指纹图谱建立的重要因素
之一，本研究以槲皮素转移率为评价指标，取样品
1. 5 g，采用超声提取法考察乙酸乙酯、50%和 20%
甲醇为提取溶剂，25、50、75 mL 的溶剂用量和 30、
45、60 min的超声时间 3 个因素的影响。实验结果
表明采用 50%甲醇 50 mL，超声 45 min，槲皮素转移
率最高，且 HPLC色谱峰较多。
本研究考察了乙腈-磷酸水溶液和甲醇-磷酸水
溶液 2个流动相系统，并考察了不同的洗脱梯度，发
现以乙腈-0. 1%磷酸水溶液系统梯度洗脱时，色谱峰
形最佳，主要色谱峰的分离度较好，基线较平稳，故最
终选择其作为流动相系统。在对供试品溶液进行了
全波长扫描分析时，发现在 310 nm 处色谱峰信号强
烈，各色谱峰分布均匀，且多数色谱峰的峰形及分离
度较好，因此选择 310 nm作为赶黄草药材的检测波
长。
对同一药材不同入药部位分别进行 HPLC 指纹
图谱的研究，在现有文献报道中较少见。本研究对
赶黄草的茎、叶 HPLC指纹图谱进行了比较，结果表
明，叶部位的特有峰远多于茎，对于二者共有峰而
言，叶共有峰的峰面积多数比茎大;赶黄草茎与叶指
纹图谱的聚类分析结果与相似度结果较为吻合，即
赶黄草茎、叶 HPLC 指纹图谱差异显著，茎、叶部位
药效是否也具有差异性有待进一步研究。聚类结果
中，四川万玉叶与其余 7 产地叶之间较大的差异，由
赶黄草叶指纹图谱(图 2)推测，应为四川万玉叶多数
色谱峰峰面积明显小于其余 7个产地赶黄草叶所致。
不同产地赶黄草茎的相似度低，叶指纹图谱的
相似度均较高，赶黄草叶指纹图谱可反映其相应部
位整体成分特征，其对照指纹图谱可作为赶黄草叶
质量控制标准之一，这将有利于促进该药材及其中
·093· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 36 卷第 3 期 2013 年 3 月
成药的生产和产品质量的提高。
参 考 文 献
［1］中国科学院植物研究所 . 中国高等植物属检索表［M］.
北京:北京科学出版社，1979:205.
［2］胡杨洋，王胜鹏，陈锐娥，等 . 赶黄草的药学研究和应用
［J］.中国药理与临床，2012，28(3) :136-140.
［3］欧丽兰，庄元春，朱烨，等 . 赶黄草叶的生药鉴定［J］.
中药材，2010，33(4) :536-538.
［4］朱烨，庄元春，欧丽兰，等 . 赶黄草茎的生药鉴定［J］.
中药材，2010，33(9) :1399-1403.
宽叶金粟兰的性状及显微鉴别
王雪芹1，陈吉炎1* ，李 聪2，赵祖兴3
(1. 湖北医药学院附属太和医院，湖北 十堰 442000;2. 湖北医药学院附属东风公司总医院，湖北 十堰
442000;3. 贵州益佰制药股份有限公司，贵州 贵阳 552000)
摘要 目的:对宽叶金粟兰的性状及显微特征进行鉴定。方法:采用生药性状、显微鉴别的方法。结果:金
粟兰科植物宽叶金粟兰 Chloranthes henryi Hemsl. 的根、根茎、茎的保护组织为表皮;根的皮层中有分泌道散在，初
生木质部六原型;根茎皮层有石细胞散在，髓部薄壁细胞含草酸钙方晶;茎中束间纤维将多个维管束连接成环;叶
主脉中的 2 个维管束排列呈倒“八”字形。结论:上述特征可为宽叶金粟兰的鉴别和质量标准的拟定提供参考。
关键词 宽叶金粟兰;显微特征;鉴别
中图分类号:R282. 5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2013)03-0391-04
Macroscopic and Microscopic Identification of Chloranthus henryi
WANG Xue-qin1，CHEN Ji-yan1，LI Cong2，ZHAO Zu-xing3
(1. Taihe Hospital Affiliated with the Hebei Medical College，Shiyan 442000，China;2. Dongfeng Company Hospital Affiliated with the
Hubei Medical College，Shiyan 442000，China;3. Guizhou Yibai Pharmaceutical Company，Guiyang 552000，China)
Abstract Objective:To identify the macroscopic and microscopic characteristics of Chloranthus henryi and provide a basis for es-
tablishing its quality standard. Methods: The plants were identified by original plant，macroscopic and microscopic
identification. Results:The radical vascular bundle of Chloranthus henryi was primary xylem tetrarch. The secretory canals dispersed in
cortex. The vascular bundle in rhizome was amphivasal bundle，stone cell scattered in cortex，and there were solitary crystals in the core
parenchyma cell. Several vascular bundles in caudex were connected like a circel by interfascicular fibers. Meanwhile，two vascular
bundles lay in main vein，like a converse Chinese letter eight. Conclusion:This paper reports the microscopic characteristics of Chloran-
thus henryi. It provides a basis for the quality standard of Chloranthus henryi.
Key words Chloranthus henryi Hemsl.;Microscopic characteristic;Identification
收稿日期:2012-08-22
基金项目:湖北省教育厅重点科研项目(2012330)
作者简介:王雪芹(1987-) ，女，在读硕士研究生，专业方向:中药鉴定与质量控制;E-mail:W04160043@ yahoo. com. cn。
* 通讯作者:陈吉炎，Tel:0719-8801148，E-mail:jiyanchen@ sohu. com。
宽叶金粟兰为金粟兰科植物宽叶金粟兰 Chlo-
ranthus henryi Hemsl. 的根、根茎或全草，俗称大四
块瓦、马尾七、一扫光，有毒〔1〕。具有祛风除湿、活
血散瘀的功效。用于治疗风寒咳嗽、风湿疼痛、月经
不调等症〔2〕。主要化学成分为萜类、香豆素类、甾
体及甾体皂苷〔3〕。本实验对宽叶金粟兰的性状与
显微特征进行研究，以期为拟定药材质量标准和进
一步开发利用提供参考。
1 实验材料
宽叶金粟兰样品采自武当山八仙观七里沟，经
湖北医药学院附属太和医院陈吉炎教授鉴定为金粟
兰科植物宽叶金粟兰 Chloranthus henryi Hemsl. 的
全草。
2 药材性状
根茎呈结节状圆柱形，弯曲，直径 0. 2 ～ 0. 7
cm，表面棕褐色至棕黑色;根茎顶端残留茎残基，周
围着生多数支根。根直径 0. 1 ～ 0. 2 cm，质硬而脆，
易折断。茎单生或数个基生，表面有 4 条明显的纵
棱。叶 4 枚，对生;完整的叶片展开后呈卵圆形或长
椭圆形，长 8 ～ 20 cm，宽 5 ～ 11 cm，先端渐尖，边缘
·193·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 36 卷第 3 期 2013 年 3 月