全 文 ：注:与正常组相比，#P ＜ 0. 01;与 IＲ抵抗组相比，＊＊P ＜ 0. 01
图 2 不同浓度化合物 1 对胰岛素抵抗 HepG2 细胞 Akt磷
酸化水平的影响
Fig. 2 Effect of compound 1 with different concentrations
on the phosphorylation level of Akt of insulin resist-
ance HepG2 cells
参考文献:
［1］ 贺圣文，刘同善，尤 敏，等． 马齿苋对家兔实验性高脂血
症的防治作用［J］． 中草药，1997，28(4) :221-223．
［2］ 丁怀伟，姚佳琪，宋少江． 马齿苋的化学成分和药理活性
研究进展［J］． 沈阳药科大学学报，2008，25 (10) :
831-838．
［3］ Pan Y X，Zhou C X，Zhang S L，et al． Constituents from Ｒanun-
culus sieboldii Miq［J］． J Chin Pharm Sci，2004，13(2):92-96．
［4］ 张正付，边宝林，杨 健，等． 茉莉根化学成分的研究［J］．
中国中药杂志，2004，29(3):237-239．
［5］ 迟 祥，郭美丽，宋 慧，等． 鸡冠花种子的化学成分研究
［J］． 吉林农业大学学报，2010，32(6) :657-660．
［6］ 林连波，符小文，艾朝晖，等． 海南山苦茶叶的化学成分研
究 (I)［J］． 中国中药杂志，2006，31(6) :477-479．
［7］ 张 龙，周光雄，李 茜，等． 狭基线纹香茶菜的化学成分
［J］． 沈阳药科大学学报，2006，23(12):768-770．
［8］ 杨丽娟，羊晓东，李 良． 藏药云南兔耳草的化学成分研
究［J］． 中草药，2005，28(9):767-768．
［9］ 姚佳琪，孟 娜，宋少江，等． 马齿苋的化学成分［J］． 沈
阳药科大学学报，2007，24(12):727-753．
［10］ 刘雪润，陈 重，李笑然，等． 紫玉盘叶的化学成分研究
［J］． 中草药，2011，42(11) :2197-2199．
［11］ 向 兰，范国强，郑俊华，等． 窄叶大黄非蒽醌类成分研究
［J］． 中国中药杂志，2001，26(8):551-554．
［12］ 常 盛． PI3K /Akt信号通路与胰岛素抵抗的研究进展［J］．
中医药导报，2008，14(7) :113-115．
［13］ Liu J F，Ma Y，Wang Y，et al． Ｒeduction of lipid accumulation
in HepG2 cells by luteolin is associated with activation of AMPK
and mitigation of oxidative stress［J］． Phytother Ｒes，2011，25
(4) :588-596．
［14］ Zhang W Y，Lee J J，Kim I S，et al． 7-O-methylaromadendrin
stimulates glucose uptake and improves insulin resistance in vitro
［J］． Biol Pharm Bull，2010，33 (9) :1494-1499．
瘤果黑种草子中磷脂类成分的研究
李 静1， 刘玉明1* ， 刘庆华2， 李 微1
(1． 天津理工大学化学化工学院，天津 300384;2． 新疆维吾尔自治区药物研究所，新疆 乌鲁木齐
830004)
收稿日期:2014-03-13
基金项目:国家自然科学基金 (81073153);国家级大学生创新创业训练计划项目 (201210060001)
作者简介:李 静 (1990—) ，女，本科生。E-mail:82926871@ qq． com
* 通信作者:刘玉明，硕士生导师，主要从事天然药物化学的教研工作及现代中药研究。E-mail:coumarin@ tom． com
摘要:目的 研究维药瘤果黑种草子中磷脂类化学成分。方法 榨过油的瘤果黑种草子饼经 95%乙醇提取，去脂溶
性成分后，经 MPLC硅胶柱色谱进行分离纯化，根据理化性质和波谱分析鉴定化合物的结构。结果 从瘤果黑种草子
中分离鉴定了 5 个化合物，分别为异株五加甲苷 (1)、甘油 (2)、1-油酰-甘油-3-磷酰胆碱 (3)、甘油磷酰胆碱
(4)、O-(1-丙三醇基)-O-(2-胆碱基)二硫代磷酸酯 (5)。结论 化合物 3 ～ 5 首次从黑种草属植物分离得到，其
中化合物 5 为新化合物。
关键词:瘤果黑种草;磷脂类成分;结构鉴定
中图分类号:Ｒ284. 1 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2015)01-0128-04
doi:10. 3969 / j． issn． 1001-1528. 2015. 01. 026
821
2015 年 1 月
第 37 卷 第 1 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
January 2015
Vol． 37 No． 1
Phosphatidic constituents in seeds of Nigella glandulifera
LI Jing1， LIU Yu-ming1* ， LIU Qing-hua2， LI Wei1
(1． Department of Pharmaceutical Engineering，Tianjin University of Technology，Tianjin 300384，China;2． Xinjiang Institute of Materia Medica，
rümuqi 830001，China)
ABSTＲACT:AIM To investigate the phosphatidic constituents in the seeds of Nigella glandulifera，a common
Uigur medicine． METHODS The crushed seeds of N． Glandulifera were extracted through 95% ethanol，defat-
ted，isolated and repeatedly purified on MPLC silica gel column． Obtained components were identified and structur-
ally elucidated by means of physio-chemical constants and spectral analyses． ＲESULTS Five constituents were i-
dentified as sieboldianoside A (1)，glycerol (2) ，1-oleoyl-2-lyso-sn-glycero-3-phosphatidylcholine (3) ，2-lyso-
sn-glycero-3-phosphatidylcholine (4) ，O-(1-glyceryl)-O-(2-N，N，N-trimethyl-ethylaminic)- phosphorodi-
thioate (5)． CONCLUTION The compound 3，4 and 5 are obtained from the plants of genus Nigella for the
first time，and compound 5 is a new one．
KEY WOＲDS:Nigella glandulifera;phosphatidic constituents;structural identification
瘤果黑种草 Nigella glandulifera Freyn et Sint．
为毛茛科黑种草属植物，主产新疆，瘤果黑种草子
作为维药收入 1977 年至今各版 《中国药典》，功
效为利尿、活血、解毒、通乳;还可乌发、抗衰
老。现代药理研究发现，瘤果黑种草子提取物及其
化学成分具有抗肿瘤的活性［1-2］。目前已从该植物
中分离得到多个化学成分［3-9］。本课题组为了寻找
其中水溶性且具有生物活性的天然产物，以进一步
了解该植物的药效物质基础，对该植物种子水溶性
部位进行了深入细致的化学成分研究，从中分离得
到了 5 个化学成分，化合物 3、4 和 5 为磷脂类化
合物，且为首次从该属植物中分离得到，其中化合
物 5 为新化合物。
1 仪器与材料
Bruker Avance III 400 MHz 型核磁共振仪;
Finnigan Surveyor LC-LCQ Advantage Max型质谱仪;
Bruker micrOTOF-Q II 型高分辨质谱仪;Elementar
Vario EL cube型元素分析仪;北京泰克仪器有限公
司生产的 X-4 型显微熔点仪;瑞士 BUCHI 公司生
产的 C-605 型中压制备系统。色谱用硅胶 (100 ～
200 目，硅胶 H)为青岛海洋化工厂产品。所用试
剂均为分析纯。瘤果黑种草子于 2011 年 2 月购于
新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市，经新疆维吾尔自治
区药物研究所刘庆华研究员鉴定为 Nigella glandu-
lifera Freyn et Sint． 的种子。
2 提取与分离
取榨过油的黑种草子饼 18 kg，经 95%乙醇水
溶液回流提取 2 次，50%乙醇水溶液回流提取 2
次，水回流提取 2 次，每次 3 h，合并提取液，减
压浓缩得到总浸膏 2 630 g。将所得浸膏分散于 3
倍体积的温水中，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁
醇萃取，回收溶剂得石油醚部分 840 g、乙酸乙酯
部分 80 g和正丁醇部分 560 g。剩余水层浓缩得到
1 100 g，将此水部分经硅胶柱层析，以二氯甲烷-
甲醇 (10 ∶ 1 ～ 0 ∶ 1)梯度洗脱，经 TLC检测合并，
得到 15 份流份。其中第 8 份流份经硅胶柱色谱分
离，以二氯甲烷-甲醇-水 (12 ∶ 4 ∶ 0. 5)洗脱，得
化合物 1 (1. 5 g);第 10 份流份经多次硅胶柱色
谱分离，以二氯甲烷-甲醇-水 (7 ∶ 3 ∶ 0. 5)反复
硅胶柱色谱，得化合物 2 (2. 2 g)和化合物 3 (83
mg) ;第 12 份流份经反复 MPLC 硅胶柱分离，以
纯甲醇洗脱，得化合物 4 (116 mg)和化合物 5
(19 mg)。
3 结构鉴定
化合物 1:白色粉末，mp 248 ～ 250 ℃，［α］25D
－ 23. 1 (c = 0. 50，MeOH)． Libermann -Burchard反
应阳性，Molish 反应阳性，薄层酸水解后 TLC 显
示有葡萄糖、阿拉伯糖、木糖和鼠李糖。HＲ-ESI-
MS (positive mode)m/z 1 375. 646 0 ［M + Na］+
(calcd 1 375. 651 0 for C64 H10 4O30 Na)．
1H-NMＲ
(C5D5N) δ: 0. 85、 0. 87、 0. 96、 1. 10、 1. 14、
1. 17 (各 3H，s，6 × Me) ，1. 53 (3H，d，J = 6. 2
Hz，Me of Ｒha in 3-O-Glycosyl moiety) ，1. 68 (3H，
d，J = 6. 2 Hz，Me of Ｒha in 28-O-Glycosyl moiety) ，
4. 98 (lH，d，J = 7. 8 Hz，Glc H-l) ，5. 05 (lH，d，
J = 6. 7 Hz，Ara H-l) ，5. 34 (1H，d，J = 7. 6 Hz，
Xyl 1-H) ，5. 38 (1H，br s，12-H) ，5. 84 (1H，s，1-
H of Ｒha in 28-O-Glycosyl moiety) ，6. 23 (lH，d，
921
2015 年 1 月
第 37 卷 第 1 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
January 2015
Vol． 37 No． 1
J = 8. 0 Hz，ester Glc H-l) ，6. 35 (lH，s，1-H of Ｒha
in 3-O-Glycosyl moiety)。13 C-NMＲ (C5D5N) δ:
176. 7 (C-28) ，144. 2 (C-13) ，123. 0 (C-12) ，
107. 5 (Xyl-1) ，104. 9 (Glc-1) ，104. 7 (Ara-1) ，
102. 8 (Ｒha-1 in 28-O-Glycosyl moiety) ，101. 3
(Ｒha-1) ，95. 7 (ester Glc-1) ，82. 9 (Ｒha-3) ，81. 2
(C-3) ，78. 7 (Glc-4) ，78. 5 (ester Glc-3) ，78. 4
(Xyl-3) ，78. 1 (ester Glc-5) ，77. 2 (Glc-5) ，76. 6
(Glc-3) ，75. 7 (Ara-2) ，75. 4 (Xyl-2 and Glc-2) ，
75. 1 (Ara-3) ，74. 1 (Ｒha-4 in 28-O-Glycosyl moie-
ty) ，74. 0 (ester Glc-2) ，73. 0 (Ｒha-4) ，72. 8
(Ｒha-3 in 28-O-Glycosyl moiety) ，72. 6 (Ｒha-2 in
28-O-Glycosyl moiety) ，72. 0 (Ｒha-2) ，71. 2 (Xyl-
4) ，70. 9 (ester Glc-4) ，70. 4 (Ｒha-5 in 28-O-Glyco-
syl moiety) ，69. 8 (Ｒha-5) ，69. 7 (Ara-4) ，69. 3
(ester Glc-6) ，67. 4 (Xyl-5) ，66. 2 (Ara-5) ，64. 1
(C-23) ，61. 4 (Glc-6) ，48. 3 (C-9) ，47. 7 (C-5) ，
47. 1 (C-17) ，46. 3 (C-19) ，43. 7 (C-4) ，42. 2 (C-
14) ，41. 7 (C-18) ，40. 0 (C-8) ，39. 1 (C-1) ，37. 0
(C-10) ，34. 1 (C-21) ，33. 2 (C-29) ，32. 8 (C-
22) ，32. 6 (C-7) ，30. 8 (C-20) ，28. 4 (C-15) ，
26. 4 (C-2) ，26. 2 (C-27) ，23. 9 (C-11) ，23. 8 (C-
30) ，23. 4 (C-16) ，18. 6 (Ｒha-6) ，18. 5 (Ｒha-6 in
28-O-Glycosyl moiety) ，18. 2 (C-6) ，17. 6 (C-26) ，
16. 3 (C-25) ，14. 2 (C-24)。根据以上理化性质及
光谱数据，对照文献 ［10］，鉴定化合物 1 为异株
五加甲苷。
化合物 2:无色黏稠液体。1H-NMＲ (D2O)δ :
3. 56 (2H，dd，J = 6. 5，11. 7 Hz，H-1A，3A) ，3. 65
(2H，dd，J = 4. 3，11. 7 Hz，H-1B，3B) ，3. 78
(1H，m，H-2)． 13C-NMＲ (D2O)δ:62. 5 (C-1，
3) ，72. 1 (C-2)。根据以上理化性质及光谱数据，
对照文献 ［11］，鉴定化合物 2 为甘油。
化合物 3:无色黏稠液体。ESI-MS，m/z (posi-
tive mode):104. 1［C5H13NO +H，胆碱基］
+，184. 2，
342. 5，368. 5 ［M-C11 H22 + H］
+，522. 5 ［M + H］+，
544. 5 ［M + Na］+，560. 5 ［M + K］+ ． 1H-NMＲ
(CD3OD)δ:0. 89 (3H，t，J = 6. 4 Hz，18-CH3) ，
1. 27 (20H，br s，H-4 to H-7，and H-12 to H-17) ，
1. 59 (2H，br s，H-3) ，2. 01 (4H，br s，H-8 and H-
11) ，2. 34 (2H，t，J = 7. 4 Hz，H-2) ，3. 21 (9H，
s，3 × -NCH3) ，3. 63 (2H，like-t，H-5) ，3. 89 (2H，
m，H-3) ，3. 96 (1H，m，H-2) ，4. 09 (1H，dd，J =
6. 1，11. 3 Hz，H-1A) ，4. 16 (1H，dd，J =4. 5，11. 3
Hz，H-1B) ，4. 29 (2H，br s，H-4) ，5. 33 (2H，m，H-
9 and H-10)． 13C-NMＲ (CD3OD) :δ:64. 8 (s，C-
1) ，68. 5 (d，J C -P = 7. 5 Hz，C-2) ，66. 4 (d，J C -P =
5. 8 Hz，C-3)，59. 0 (d，J C -P = 5. 0 Hz，C-4) ，66. 1
(m，C-5) ，53. 3 (t，J C -N = 3. 7 Hz，3 × -NCH3) ，
173. 9 (C-1) ，33. 5 (C-2) ，24. 6 (C-3) ，28. 8-29. 4
(C-4 to C-7，and C-12 to C-15) ，26. 7 (C-8 and C-
11) ，129. 5 (C-9) ，129. 4 (C-10) ，31. 6 (C-16) ，
22. 3 (C-17) ，13. 0 (C-18)。根据以上理化性质及
光谱数据，对照文献 ［12］，鉴定化合物 3 为 1-油
酰-甘油-3-磷酰胆碱。
化合物 4:无色黏稠液体。ESI-MS，m/z (positive
mode):104. 2［C5H13NO +H，胆碱基］
+，258. 3［M +
H］+，280. 2 ［M + Na］+，361. 2，515. 4 ［2M + H］+，
537. 4［2M +Na］+，618. 3［2M + C5H13NO + H，即 2M
+胆碱基 + H］+，772. 3 ［3M + H］+，794. 3 ［3M +
Na］+， 810. 4 ［3M + K］+。 HＲ-ESI-MS， m/z:
280. 093 4 ［M + Na］+ (C8H20 PNO6Na，280. 092 6)。
1H-NMＲ (CD3OD)δ:3. 22 (9H，s，3 ×-NCH3)，3. 54
(1H，dd，J = 5. 6，11. 4 Hz，H-1A)，3. 59 (1H，dd，
J =5. 4，11. 4 Hz，H-1B)，3. 64(2H，like-t，H-5)，3. 76
(1H，m，H-2)，3. 86 (1H，m，H-3A)，3. 91 (1H，m，
H-3B)，4. 29 (2H，br s，H-4)。
13C-NMＲ (CD3OD):δC
62. 4 (s，C-1)，71. 1 (d，J C-P = 7. 6 Hz，C-2)，66. 5
(d，J C-P = 5. 8 Hz，C-3)，59. 0 (d，J C-P = 5. 0 Hz，C-
4)，66. 0 (m，C-5)，53. 3 (t，J C-N = 3. 7 Hz，3 ×-
NCH3)。以上理化性质及光谱数据与文献 ［13］分析
一致，鉴定化合物 4为甘油磷酰胆碱。
化合物 5:无色黏稠液体。ESI-MS，m/z (正离
子模式):579. 1［2M +H］+ ． HＲ-ESI-MS (正离子模
式)m/z 579. 123 0［2M + H］+ (calcd 579. 123 2 for
C16H41 N2O8P2S4)． Anal． calcd． for C8H20 NO4PS2
(%) :C = 33. 15;H = 7. 13;N = 4. 83;S = 22. 12;
O = 22. 08，Found:C = 33. 42;H = 7. 28;N = 4. 67;
S = 21. 85;O = 22. 19. 1H-NMＲ (CD3OD)δ:3. 22
(9H，s，3 × -NCH3) ，3. 49 (2H，m，H-5) ，3. 56
(1H，dd，J = 5. 6，11. 4 Hz，H-1A) ，3. 63 (1H，dd，
J =5. 2，11. 4 Hz，H-1B) ，3. 76 (1H，m，H-2) ，3. 89
(1H，m，H-3A) ，3. 91 (1H，m，H-3B) ，4. 01 (2H，
m，H-4)． 13C-NMＲ (CD3OD)δ:62. 5 (s，C-1) ，
71. 4 (d，J C -P = 6. 7 Hz，C-2) ，65. 8 (d，J C -P = 5. 4
Hz，C-3) ，55. 7 (d，J C -P = 0. 8 Hz，C-4) ，67. 7 (m，
C-5) ，53. 3 (t，J C -N = 3. 8 Hz，3 × -NCH3)。根据氢
031
2015 年 1 月
第 37 卷 第 1 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
January 2015
Vol． 37 No． 1
谱、碳谱、ESI-MS谱、HＲ-ESI-MS 谱和元素分析综
合判断，其相对分子质量为 289，分子式为 C8H20
NO4PS2。化合物 5和上述化合物 4 的核磁共振图谱
相似，DEPT谱显示两者都有 1 个次甲基、4 个亚甲
基和 3个甲基，且同样受到磷核和季氮核的偶合裂
分，由此推断化合物 5 也为磷酰胆碱类化合物。将
上述化合物 5 的氢谱和碳谱数据与化合物 4 的相应
数据比较后发现，两者的丙三醇基片段部分和胆碱
基片段部分化学位移极为相近，化合物 5 的 C3 和
(或)C4 位的氢谱和碳谱数据没有出现显著的高场
位移，提示化合物 5 中两硫原子不与此两片段相连
接，故只能与磷原子直接相连。通过以上分析，结
合1H-1H COSY、HSQC、HMBC 和 NOESY谱进一步
确证，鉴定化合物 5的结构为 O-(1-丙三醇基)-O-
(2-胆碱基)二硫代磷酸酯。
参考文献:
［1］ 中华本草编委会． 中华本草:第三册［M］． 上海:上海科
学技术出版社，1999:236-237．
［2］ Tian Z，Liu Y M，Chen S B，et al． Cytotoxicity of two triterpe-
noids from Nigella glandulifera［J］． Molecules，2006，11(9) :
693-699．
［3］ 郝海峰，任丽娟，陈玉武． 黑种草子化学成分研究［J］． 药
学学报，1996，31(9) :689-694．
［4］ Liu Y M，Yang J S，Liu Q H． A new alkaloid and its artificial
derivative with indazole ring from Nigella glandulifera ［J］．
Chem Pharm Bull，2004，52(4) :454-455．
［5］ 刘玉明，杨峻山，刘庆华． 瘤果黑种草子化学成分的研究
［J］． 中国中药杂志，2005，30(13) :980-983．
［6］ Liu Y M，Liu Q H，Chen B Q． A new flavonol glycoside from
the seeds of Nigella glandulifera［J］． Nat Pro Ｒes，2011，25
(14) :1334-1338．
［7］ Feng Y，Liu Y M，Liu Q H，et al． Nigelactone，new phthalide
glucoside from the seeds Nigella glandulifera［J］． Heterocycles，
2012，85(12) :3015-3019．
［8］ Liu Y M，Sun L，Liu Q H，et al． Dolabellane-type diterpene
alkaloids from Nigella glandulifera ［J］． Biochem Syst Ecol，
2013，49:43-46．
［9］ Liu Y M，Jiang Y H，Liu Q H，et al． Indazole-type alkaloids
from the seeds of Nigella glandulifera ［J］． Phytochem Lett，
2013，6(4) :556-559．
［10］ Sawada H，Miyakoshi M，Isoda S，et al． Saponins from leaves
of Acanthopanax sieboldianus［J］． Phytochemistry，1993，34
(4) :1117-1121．
［11］ 刘玉明，梁光义，徐必学． 苗族药马蹄金化学成分的研究
［J］． 天然产物研究与开发，2003，15(1):15-17．
［12］ Leaon F，Boven M V，Witte P，et al． Isolation and identifica-
tion of molecular species of phosphatidylcholine and lysophos-
phatidylcholine from Jojoba Seed Meal［J］． J Agric Food Chem，
2004，52(5) :1207-1211．
［13］ Xu F G，Zou L，Lin Q S，et al． Use of liquid chromatography /
tandem mass spectrometry and online databases for identification
of phosphocholines and lysophosphatidylcholines in human red
blood cells［J］． Ｒapid Commun Mass Spectrom，2009，23
(19) :3243-3254．
达原饮解热作用研究及 UPLC-Q-TOF /MS分析
任慧玲1， 严 彪1， 梁之桃2， 赵中振2， 董 燕1， 张 健1*
(1． 苏州大学药学院，江苏 苏州 215123;2． 香港浸会大学中医药学院，中国 香港 999077)
收稿日期:2014-01-16
基金项目:江苏省优势学科项目资助 (2011)
作者简介:任慧玲 (1991—)，女，硕士生。Tel:15295673203，E-mail:renhuiling91@ 163． com
* 通信作者:张 健 (1975—)，女，博士，副教授，从事天然药物活性研究。Tel:13814875226，E-mail:jianzhang@ suda． edu． cn
摘要:目的 研究达原饮对 LPS诱导的大鼠发热模型的解热作用及其机制，采用 UPLC /Q-TOF-MS 法分析达原饮乙醇
提取物中的化学成分。方法 大鼠腹腔注射脂多糖 (LPS)建立发热模型，药物处理后连续监测体温 8 h，观察大鼠体
温变化;运用酶联免疫试剂盒检测血清 IL-6、TNF-α水平，MPO试剂盒检测肝组织 MPO活性。采用 UPLC /Q-TOF-MS
法，分析达原饮乙醇提取物的化学成分。结果 达原饮对 LPS引起的大鼠发热具有明显的解热作用，显著降低血清中
TNF-α、IL-6 水平及肝组织中的 MPO活性。正离子模式下检测出达原饮乙醇提取物中 48 个化合物。结论 达原饮具
有显著的解热作用，其作用机制与降低血清中 IL-6、TNF-α 水平，降低肝组织中 MPO 活性有关。通过 UPLC /Q-TOF-
MS分析，达原饮的主要化学成分为黄酮、皂苷、生物碱和有机酸类化合物。
关键词:达原饮;解热;脂多糖 (LPS);UPLC /Q-TOF-MS
中图分类号:Ｒ284. 1 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2015)01-0131-07
131
2015 年 1 月
第 37 卷 第 1 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
January 2015
Vol． 37 No． 1