全 文 ：析 , 该方法具有简单 、 快速 、 高效的特点 , 其
中在医药 , 尤其异构体分析方面的应用令人往
目。 总之 , M E C C还处于开发阶段 , 虽然色谱
理论巳得到阐述 , 时间窗的局限巳有方法加以
克服 , 但目前M E C C仪尚未普及与商品化 , 从
其柱效与高分辨的特点 , 应更好地适合于药物
的临床分析及其质 量控制 , 使M E c C法发挥更
大的作用 。
. 考 文 做
〔 1〕 T e r a b e S 等 : A o a l C h e m 19 8 4 , 5 6 : 1 1 1
〔 2 〕 T e r a b e S 等 : ib i d 1 9 8 5 , 5 7 : 8 3 4
〔 3 〕 S e P a n i a k M J 等 : i b i d z , 8 7, s 。 : 4 7 2
〔 4 〕 T e r a b e S 等 : J H R C C 19 8 6 , 9 : 6 6 6
〔 5 〕 B u r t o n D E 等 : J · C五r o m a t o g r S e i 1 9 8 7 , 2 5 :
5 14
〔 6 〕 o t s u k a K 等 : i b i d 1 9 8 T
〔 7 〕 B a l c h u n a s A T 等 : A n a l
14 6 6
2 5 : 3 5 0
C h
e m 19 8 7
,
5。 :
〔 8 〕 C o石e n 人 S 称 : i b i d l夕8 7 , 5份 : z DZ i
( 9 〕 B a l c b u n a s A T 娜 : i b i d 19 8 8 , 6 0 : 6 17
〔 10〕 o t s u k a K 等 . N i p p o n K a g a k u K a i s h i 19 8 6 -
9 5 0
〔 1 1〕 S e p a n i a k M J 等 : E d s . A C S S y m p o s i u m S e r i e s
1 9 87
一
3 4 2 : 14 2
〔 12 〕 T s o d a T 等 . J C h r o m a t o g r 29 8 2 , 2` 8 : 2峨l
〔 23 〕 W a l b r o e h l Y 等 : A n a l C h e m 29 8 6 , 5 5 : 4 7 9
〔 1 4〕 H u n t e r R J : Z e t a P o t e n t i a l i n C o l l o i d S e i e n e e
1 9 8 1
〔 1 5〕 Y a r m e h u k P 等 : J C h r o m a t o g r 10 5一, 2 8 5 : ` 7
〔 1 6〕 B u r t o n D E 等 : C五r o m a t o g r a p b i a 19 5 6 , , l : 5 8 5
〔 17〕 L o k a e s K D 等 : J H R C C z口8 5 , 8 : 4 0 7
〔 1 8〕 o t s u k a K 俘 : J Ch r o m a t o g r 29 5 5 , 3 5 2 : 2 1 9
〔 19 〕 T e r a b e S 等 : i b i d 1 9 85 , 3 3 2 : 2 11
〔 2 0〕 L i n d m a n B 薄 : T o P C u r r C h e m l , 8 0 , 8 7 : s
〔2 1〕 T s u d a T 等 : J C il r o m a t o g r z , 5 3 , 2 6` : 3 8 5
〔 2幻 R o w K H 等 . i b i d 20 8 7 , ` 0 9 : 29 3
〔2 3〕 o t s u k a K 等 : i b i d 19 8 5 , 3 4 8 : 3马
〔 2 4〕 B u r t o n D E 等 : J C h r o m a t o g r S e i 1 9吕6 , 2 4 : 3` 7
〔 25 〕 F u j i , a n s 等 . A n a l C h e m 19 8 7 , 5 9 : 2 1 7吕
构菌有效成分的化学及药理学研究进展
中国医学科学院药物研究所 曹培让 综述 王淑芳 审校
摘粤 构菌〔F I口二 , “ 艺官。 a r e忿u r` p e s ( e u r t . e x F r . ) s i n g . 〕是一种广泛栽培的食用高等担
子菌。 它含有多种有效成分 。 多糖类成分知线性 大分子多糖 E A。 , 及杂多糖 E A 。均能抑
制实.验肿瘤的生长 , 糖肤 E A . 的 口服及注封给药 , 均能恢复和增 强机体的免渡机能 , 药
理活性 优于芸芝糖肤 P s K , 活 性肤 中有细胞识别作用的凝集素 , 引起 兔血红 细胞凝集 ,
构菌素有效地抑制肿瘤生长 , 构菌毒素对艾氏腹水瘤有杀伤作用 , 引起心 电及血压改 变
等多种功能 。
免疫机能低下是老年人及癌症患者的普遍
现象 , 以艾滋病病毒导致的艾滋病 , 则使机体
免疫机能完全丧失 , 这成为一类引入注 目的疾
病 , 是世界各国医学界重视的内容之一 。 对于
这类疾病的医疗 , 除了传统经典药物外 , 天然
药物的筛选及研究工作巳是一个重要的组成部
分 , 中草药中如芸芝 、 香菇等高等担子菌有效
一 8 2 一
成分的研究是一个进展迅速的领域 。 近来 , 对
于构菌的研究非常活跃 , 已表 明它含有抗实验
肿瘤活性的多糖 , 免疫促进特性优于芸芝糖肤
P s K的糖肤「’ J , 细胞识别的凝集素及毒蛋白质
等 , 至今任何较详细研究过的真菌 , 都没有如
此丰富的有效成分 。 在传统中药中 , 构菌被用
于肝脏及肠 胃疾病的治疗 , 而且能使儿童增强
DOI : 10. 13220 /j . cnki . ji pr . 1989. 02. 007
智力 。 本文拟讨论构菌中免疫活性物质及抗肿
瘤成 分的化学及药理进展 。
多 糖
K am a s u k a 等 〔, , 3 ,以热水和碱水从构 菌 子
实体中提取到多搪 , 对小鼠肿瘤 S 一 1 80 有抑制
生长的作用 ; Y os ih o k a 等犷` ’对多糖进 行 了 分
离和纯化 , 得到四种大 分子 。 E A 3是同多糖 ,
E A 。 、 E A 。和 E A ,是杂多糖 , 其中 E A 。为糖肤 ,
均有抑瘤作用 。 多糖 E A尹 ,是由三 种 多 糖 组
成 : 即 E A 。 。 。、 E A 6 。。和 E A 。 , 。 , 而 E A 。 。。可分成
E A 。 。 `
、
E A 。 。 2和 E A 。 。 3 三种多糖 。 这儿种多搪
的单糖组成是一致的 , 即由葡萄糖 、 半乳糖 、
甘露糖 、 木糖和阿拉伯糖组成 , 其何仅是组成
单搪的摩尔比有差异 , 对肿瘤 S 一 1 80 的抑制作
用并不依赖于葡萄糖的含量 , 而是依赖于分子
量的大小 。 分子量越大 , 其抑瘤率越高 , 分子
量 越小 , 抑 瘤 率 越 低 。 如 E A B。 , 、 E A 。 。: 和
E A 。 。 3的分子量是依次减小 , 其抑瘤率亦 随 之
降低 , 分别为 8 5 . 0% , 5 9 . 0%和 3 0% 。
i k e k a w a
获6 〕研究了 E A 。 的化学结构 , 表 明
E A a是一种葡聚糖 , 具有日 (1 、 3) 型 糖 普 键
连接 , 是线性大 分子 , 业巳发现它 与 香 菇 多
糖 、 裂褶多搪和猪等多搪相似 〔 . ’ , 是一类免疫
促进剂 , 对免疫机能低下有效 。 且能够增强 T
细胞功能 , 激活淋巴细胞及吞噬细胞 , 促进抗
体产生 , 并能够诱导干扰素的产生 , 它对肿瘤
的抑制生长作用是通过恢复和提高整个机体的
免疫能力 。 s a n 。等〔, ’在研究多糖 E A 。对肿瘤抑
制作用时 , 发现 E A 3能使维生素 v B 。缺陷型 肿
瘤小鼠 5 一轻色胺释放量增加 。 E A 。多糖 (抑瘤
率 87 % ) 诱导的胺类变化是 【81 : 先释放组胺 ,
再释放 5 一轻色胺 。 V B . 的竞争抑制物氨基毗 哆
醇 ( 3 一 a m i n o p y r i d o x o l ) 也能抑 制 肿 瘤 生 长
(抑制率 87 % ) , 而胺 的释放量明显降 低 , E A 3
与氨基毗哆醇的共同作用 , 抑制率达的% , 胺
释放增加 , 现已知抗肿瘤多糖能够使补体 C 3钝
化 , 使 c 3 。 增加 , C 。 .促进肥大细胞释放组胺 ,
组胺促使 c A M P 形成 , 导致体液 5一经 色胺 产
生 t g ’ , 因此认为多糖引起的胺类变化仅是其抗
肿瘤作用的一个中间过程 , 与氨基毗哆醇的作
用机理是不一致的 。
M u k u m o t a等〔’ 。」从构菌子实休中 分 离 到
一种异多搪 , 分子量为 95 0 0 0 , 具有 a l( , 6)
连接的半乳糖主链 , 含有甘露糖分枝及岩藻搪
的末端 , 其药理作用未见报道 。 作者从构菌子
实体分离到一种异多糖 , 主要 由葡萄糖组成 ,
含有甘露糖及岩藻糖 , 分子量为 4 7 0 0 0 0 , 对肿
瘤 S 一 180 有抑制作用 。 李强等 `川也分离到抑制
肿瘤 S 一 1 8。生长的多糖 。
糖 肤
E A 。是一种糖肤 , 含蛋 白质 30 % , 由 16 种
氨基酸组成 (见附表 ) , 多糖 由五种单糖组成 ,
即葡萄糖 、 半乳糖 、 甘露枪 、 阿拉 伯 糖 和 木
附裹 构菌中橄若政的组成
一一一一一一一一一一一下厂一飞厂
成 分 丽五E A 6 凝 。 素 构菌 t 构臼毒素
赖 组 徽 5 。 6 1 7 。 7 5 7 . 8 4
组 拭 成 1 4。 9 0 5 0 。 6 4
精 氮 成 1 2。 6 3 。 8 1 4 2。 10
色 氮 酸 O 一 1 5 。 80
天冬虹酸 3 0。 8 1 9 。 7 3 7 8 。 9 3
苏 虹 映 17 。 8 1 6 。 7 2 0 1 1。 8 2
丝 氮 艘 10 。 7 1 0 。 7 1 2 9 。 7 2
谷 氛 酸 2 7 。 0 1 1。 6 1 8 8 。 0 0
捕 氛 酸 7 。 6 7 。 8 19 4 。 1 0
甘 组 成 2 3。 0 1 2。 7 22 8。 1 5
丙 氮 酸 2 6。 6 7。 5 34 4 。 0 2
撷 氨 胶 18 。 7 1 4 。 2 5 6。 8 8
异壳氮 酸 1 1 。 9 9 。 5 6 4 。 0 2
亮 抓 酸 1 9。 8 1 0 。 4 9 5 。 7 2
璐 氛 破 1 7 。 2 1 1 。 5 4 3 。 8 8
苯丙氮酸 9 。 7 8 。 0 8 3。 1 0
肮 氮 酸 0 0 3 0
蛋 抵 胶 1。 0 0 0 0
一 阳 一
糖 。 O h ku ma 等〔`幻结合肿瘤冷冻术 ( F D T ) 研
究 E A 。抑制肿瘤生长的作用 。 发现多糖 E A 3和
糖肤 E A . 能抑制小鼠实体瘤 s 一 1 8 0生长 , 对腹
水型肿瘤 S 一 1 80 也有类似的作用 , 能大大延长
小鼠的寿命 。 E A 3和 E A 。没有细 胞 毒 作 用 ,
E A :多糖只能通过注射有效 , 而搪 肚 E A .则 口
服及注射均有效 , 表明 E A 。中的肤部分有一种
保护或识别作用 。 E A 。能增强由 F D T 引起的特
异免疫反应 , F D T与 E A 。的共同作用使小鼠具
有抗 s 一 180 实体瘤作用 , 同时也能抑制爱氏腹
水瘤的作用 , 因此 , E A 。 能够增强 对肿瘤的特
异免疫反应和移植免 疫 作用 ( t r a n s p一a n t a t i o n
j m m u n i t y )
。
o at ig ir 等 〔” 的研究表明 , 糖肤 E A .能够增
强 ,\J 鼠白血病 L: : : 。疫苗 ( o A 一 e o n A 一 L: : , 。 ) 的
作用 , 与芸芝糖肤 P S K 有相似的免疫增 强 活
性 , 其药理活性受用药时间 、 剂量及用药次数
的影响 。 G A 一 C O n A 一 L : : : 。能诱导对肿瘤的特异
免疫作用 , E A . 能增强这种作用 , 但不能取 代
它 。 不同于免疫修饰剂凝 集素c o n A , E A 。也不
具有促细胞分裂作用 。 当 P s K 和E A . 分别在 25 0
m g /k g 和 4 Om g / k g时 , E A 。增强肿瘤特异免疫
性的能力优于P s K , 其小鼠存活时间的平均增
长值 ( I L S ) p S K为 5 9 . 2 % , 而 E A 。为 5 3 . 1% 。
显然 , E A ,较之 巳应用于临床的 抗 肿 瘤 药 物
P S K
, 其所用量少 , 而作用强 。
E A . 对体浓免疫具有促 进 作用 仁, s] 。 肿瘤
引起 S R B C I g M 形成细胞 ( p F C ) 减少 , 当 口
服一0 0 m g / k g剂量时 , s 一 25 0肿瘤小鼠 P F e 比正
常小鼠增加 80 % , 而 E A .对正常小鼠并没有作
用 。 表明 E A 6恢复和增强 P F C的活性 , 并增强
抗休 gI M 的产生 。 E A 。也能增强 T细胞的活性 ,
并激活淋巴细胞的转化 , 但不能促使产生淋巴
细胞 。 以碳粒廓清实验发现 , E A 。对宿主外 周
网状淋巴细胞系统没有什么作用 , 不能增强单
核巨噬细胞的吞噬能力 , 这与芸芝多糖 、 获等
多糖等是不一致的 。
来源于真菌细胞的大分子物质 多糖 及 糖
一 8 4 一
肤 , 携带着其特有的信息 , 易于与遭受肿瘤细
胞作用的细胞识别 , 恢复和增强机体对肿瘤的
识别作用 。 o at ig ir 等认为糖肤 E A 。 同烷基 化
剂一样抑制宿主的免疫抑制活性 , 增强机体的
肿瘤特异免疫能力 , 修复受损的免疫机能 , 增
强机体的免疫监视作用 , 从而抑制肿瘤生长 ,
并最终消除肿瘤细胞 。
活 性 肤
凝集素 ( F V A ) T s u d a 等〔 , ` ’以磷酸 缓 冲
液提取到构菌子实 体 凝 集 素 , 其 分 子 量 为
20 0 0
, 由两个亚基组成 : 亚基 F v A 一 L能使兔
血红细胞凝集和促有丝 分裂活 性 , 分 子 量 为
1 2 。。。 , 亚基 F V A 一 S不具血凝活性 , 分子量为
8 0 0 0
。 该凝集素不含枪类 , 由 1 4种氨纂酸组成
(见附表 ) , 单糖对它没有凝血抑制活性 , 其结
合底物可能是糖类复合物 , 这与它在细胞表面
的识别高度专一性相依赖 , 推测 亚 基 F v A 一 S
首先与细胞识别 , 然后亚基 F v A 一 L 行使其 功
育色。
构菌素 ( f l a m m u l i n ) w a t a n a b e等「’ “ , 从
构菌子实体中以冷水提 取 , 经 ( N H .) : 5 0 . 沉
淀及凝胶柱层析 , 得到一种碱性蛋白质 , 其沉
降系数为 2 . 5 5 , 分子量 2 3 0 0 0 , 含有 1 7 种氨基
酸 (见附表 ) 。 构菌素的小鼠L D 。 。为 2 5 m g / k g
(静注 ) , 它能抑制艾氏腹水瘤和 s 一 1 80 的生长 ,
对 Y os hi od a 肉瘤也有一定的抑制作 用 , 对细
菌如大肠杆菌则没有抑制作用 。
构菌蛋 白原 ( p r o r l a m sn ) xk e k a 认 a等 r ’ . ’从
发酵 培 养菌 丝体中 , 热水提取 , 离子交换柱
纯化 , 得到一种酸性蛋白质 。 这是一电泳纯物
质 , 等电点 P l是 3 . 8 士 0 . 2 , 分子量为 7 3 。。。士
4 0 0。 , 含有 9。%的蛋白质和少于 10 %的碳水化
合物 。 蛋白质中主要是甘氨酸 、 天冬氨酸 、 丙
氨酸 、 亮氨酸和谷氨酸组成 , 糖类部分由葡萄
糖 、 半乳糖及甘露糖组成 。 该构菌蛋白原给小
鼠口服 , 对黑素肿瘤 B 一 16 和腺癌一 75 5有极显
著延长小鼠存活时间作用 , 与丝裂霉素作用相
似 , 无丝裂霉素的副作用及细胞 毒 性 。 对 S -
1 8 0的实体瘤 、 腹水瘤 、 白 血 病 L川 。 、 M e t h
A 纤维肉瘤则无显著效果 。
构菌毒素 ( f l a o m u t o x i n ) L i n 仁’ 7 ’ 分离到
的构菌毒素 , 分子员为 2公0 0 0 , 由两个相同 的
亚基组成 ,等电点 PI 为 4 . 2 , 蛋白质 由1 6种氨基
_欲组成 (见附表 ) 。 构菌毒素经热处理即 可除
去其毒性 ,腹腔注射小鼠的 L D S。为 2 . 4 5m 。 / k g 。
容能使人的 0 型红血细胞溶解 ; 对动物心电有
移响 , 以 o . 25 m g / k g 剂量作用下 , 引起心电图
中T波倒置及抑制 S T段 ; 引起血压迅速下降 ,
抑制艾氏腹水瘤细胞呼吸 , 使其细胞肿胀 , 最
终导致细胞破裂 。 这可能由构菌毒素作用于膜
上通道蛋白 , 一 引起膜结构变化而遭受破坏 。
I ke g o w a等` ,吕 ,用发酵培 养的 构菌菌丝体 ,
努离到两种活性物质 , 即 多肤 P D F 和 P R F 糖
肤 , 分子童为 6 0 0 0~ 3 0 0 0 0 , 等电点 P l 3 . 8 ,
P R F 中含糖量为 40 % , 这两类 分子均表现 免
咬佐剂活性 , 能够抑制 S 一 1 80 的生长 , 几乎没
有毒性 , P R F 和 P o R 的 L D S。均大于 7 . 5 9 / k g
( Iv )
, 口服 L n 。。 大于 2 0 9 / k g , 此 物 质 与
糖肤 E A . 、 构菌素和构菌蛋 白原的 化 学 结 构
以及生物合成关系 , 至今还不 清 楚 。 胡德 群
等〔`。 ’ 也从构菌子实体中水提取糖 肤 , 对 肿 瘤
s 一 180 有抑制活性。
种有效成分 , 其 E A a萄聚 糖— 日 (1 , 3) 葡聚糖能促进免度递质白介素 IL 一 1 , IL 一 2 的升
高 , 可用于艾滋病的治疗 , 但多糖仅能注射给
药才有效 , 而其糖肤 E A e兼备葡聚糖功能 , 口
服及注射均有效 , 具有一定的应用价值 。 此类
高等担子菌易于发酵培养和栽培生产 , 是天然
药物生产的一个极重要的来源 , 对其广泛的应
用 , 尚待进一步研究 。
致谢 : 本文曾得到朱秀媛教授审校
今 考 文 欲
〔 l 〕 o t a g i r i K 等 : J P h a r m
〔 2 〕 K a m a s u k a T 等 : G a
〔 3 〕 Ik e k a w a T 一等 : C a
D y
n 1 9 3 3
,
6 : 9 8
1 9 6 8
,
5 9 : 4 4 3
,
P
.仙. ,07仆R19
、引
:
n c e r C h e m o t五e r
P a r t 1 1 9 7 3
,
5 7 ( l ) : 8 5
〔 4 〕 Y o s h i o k a Y 等 : C h e m
2 1 ( 8 ) : 1 7 7 2
〔 5 〕 Ik e k a w a T 等 : J P h a r m
〔 6 〕 张罗修 : 国外医学药学分册
P五a r m B u l l
D y n
19 8 7
19 8 2
,
5
〔 7 〕 S孕皿 o M 等 . C h e也 P h a r m B u l l l公73
2 0 9 0
13 6
2 1 ( 9 ) :
结 语
高等真菌有效成分对免疫机能低下的促进
并对实验肿瘤的抑制作用 , 是一个 复 杂的 过
程 , 尚不明确其机理 , 它不同于经 典 医 疗 药
物 , 特别如多糖 和储 i)1{ , 不具毒副作用 , 选择
性较强 , 能促进机体免疫机能 , 是一类理想的
治疗老年性疾病的药物 。 而且 , 如构菌含有多
〔 8 〕 I k e k a w a T 芍 : i b i d 19 7 5 , 2 3 ( g ) : 2 1 4 8
〔 9 〕 候健存 : 《免疚扩: 理学 的分子与细胞荃础 , p 28 , 科学出版
社 , ! 9 8 4
〔 1 0〕 M u k u m o t a T 等 . C a r b o h y d r R e s 1 9 7了, 5。 :
6 14
〔 1 1〕 李 强等 : 药用真茵 19 8 8 , 7 : 2 9
〔 1 2 ) O h k u m a T 等 : J P h a r m D 了n 1 9吕2 , s : 一5 9
〔 13〕 O五k u m a T 等 . i b i d 1 9 5 5 , 6 : 88
〔1 4〕 T s u d a M 等 . J B i o c h e m 1 9 7 9 , 8 6 : 1 4 63
〔15〕 W a t a n a b e Y 等 : B u l l C h e m S o c J p n 19 6一 ,
3 7 ( 5 ) : 7 4 7
〔1 6〕 Ik e k a 贾 a T 等 : J p n J C a n c e r R e s 1 9 8 5 , 7 6 :
14 2
〔1 7〕 L i n J Y . N a t u r e 1 9 74 , 2 52 : 2 3 5
〔i 吕〕 I k e k a , a T : Jp n K o k a i T o k k了 0 K o h o J P 1 9 8 3 ,
1 2 1 : 2 9 7
〔 19 〕 胡德群等 : 药用真 菌 1 9 8只 . ( 7 ) : 1 4
一 肠 一
ùóf
;
几.引f
se