全 文 ：第 25卷 第 1期
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中 华 中 医 药 学 刊
CH INESE ARCH IVES OF TRAD IT IONAL CH INESE MED IC INE
Vo.l 25 No. 1
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中华中医药
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学刊
五叶草莓煎液对荷瘤小鼠免疫功能及抑瘤率的影响
李巧兰,李 斌,何瑾瑜,张跃林
(陕西中医学院, 陕西 咸阳 712046)
摘 要:目的:探讨五叶草莓对肿瘤的抑制作用及机制。方法: 选择小鼠皮下接种 S180瘤株及腹水 S180瘤
为模型,观察不同剂量五叶草莓对肿瘤的抑瘤率、小鼠生存期、血清 IL-2的影响。结果: 五叶草莓组小鼠抑瘤率、
生存期、IL-2水平明显高于空白组。结论: 五叶草莓煎液能有效的抑制 S180肿瘤生长, 延长荷瘤小鼠存活期。
关键词:五叶草莓;肿瘤; IL-2; S180腹水瘤; S180实体瘤
中图分类号: R285. 5 文献标识码: A 文章编号: 1673 - 7717( 2007) 01 -0085 - 03
The E ffect o fDecoction ofW uyecaome i on the
Immunity ofM ice and Inh ib it ion Rate of Tumor
L IQ iao-lan, L I B in, HE Jin-yu, ZHANG Yao-lin, ZHANG Yue-lin
( Shaanx iC ollege of Tradit iona lCh ineseM ed icine, X ianyang 712046, Shaanx,i Ch ina)
Abstrac t: Objective: To explore the inhibition and its m echanism o fW uyecaom ei to tum o rs. Methods: Se lec tm ice vaccinated
subcutaneously S180 tum or strain and S180 asc ites sarcom a as mode ls and obse rve the effect ofW uyecaom e iw ith differen t dosages
on the inhibition ra te of tum or, surv iva l pe riod o f them ice and b lood se rum IL-2. R esults: The inhibition rate of tum or, surv ival pe-
riod of the m ice and the level o f b lood se rum IL-2 in theWuyecaom ei g roup are appa rently h igher than those in the b lank g roup.
Conclus ion: The decoction o fW uyecaome i can e ffec tively inhibite the g row th of S180 tum or and pro long the surv ival period o f tum o r-
bea ringm ice.
Keywords: W uyecaom e i ( aw ild perenn ial he rb from rose fam ily g row ing in Q inlingM oun tains); tumo r; IL-2; S180 asc ites
sa rcom a; S180 so lid ca rcinom a;
收稿日期: 2006 - 08 - 09
基金项目:陕西省科技厅资助项目 ( 2001SM 90)
作者简介:李巧兰 ( 1956 - ) ,女, 陕西汉中人,教授, 硕士研究生导
师,研究方向:中医老年病和心身疾病。
五叶草莓 (又名泡儿、栽秧泡 ), 属蔷薇科草莓属多年
生草本植物,是秦岭山区的一种野生植物。笔者根据民间
应用经验,将五叶草莓全草粉碎装胶囊试用于消化道肿瘤
(胃癌、食道癌、大肠癌、肝癌 )及前列腺癌等疾病的治疗,
对于缩小瘤体、缓解及改善全身症状,提高患者生活质量等
方面有着极显著的效果。本实验旨在探讨五叶草莓煎液对
小鼠 S180肉瘤的抑制率以及对荷瘤小鼠生存期的影响。
并用放免法测定其 IL-2水平,为进一步研究其抑瘤机理提
供参考。
1 材料与方法
1. 1 实验药品
五叶草莓全草采购自陕西秦岭山区; 环磷酰胺注射液
(江苏恒瑞医药股份有限公司, 生产批号 05083021 ); IL-2
放射免疫分析药盒 (北京科美东雅生物技术有限公司, 生
产批号 050925)。
1. 2 动物与瘤株
ICR种小鼠 90只,体重 18 ~ 22g, 雌雄各半,购自陕西
省中医医院实验动物中心 (合格证号: 医动字第 08-24 )。
S180瘤株购自陕西省中医研究院实验动物中心, 荷瘤 S180
腹水瘤小鼠,每 7天传代 1次。
1. 3 药剂制备
将五叶草莓全草经水煎、过滤, 浓缩成 5g /mL浓度。
将浓缩好的五叶草莓原液 5g /mL分别稀释成 0. 09g /mL、
0. 18g /m L, 4e 冰箱中保存备用。
1. 4 模型动物的建立
将已接种 7天的荷瘤 S180腹水瘤小鼠的腹水与生理盐水
按 1B3的比例进行稀释,并用血球计数板计数瘤细胞 [ ( 2~ 3)
@ 107个 /mL ]。用锥虫蓝溶液染色进行活细胞计数,活细胞率
> 95%。在小鼠右腋皮下注射 0. 2mL稀释液,制成实体瘤模
型 [1]。无菌条件下, 按常规每鼠腹腔接种 0. 2mL ( 4 @ 106个 /
mL) S180腹水瘤细胞悬液,制成腹水瘤模型。
1. 5 实验仪器
电子天平: 上海精密科学仪器有限公司天平仪器厂
( FA1004N型 ); 电热恒温水浴箱: 北京西城区医疗器械
厂 (型号: DR2HW22); 低速离心机: 北京医用离心机厂
( LD5-2A型 )。
1. 6 分组与处理
1. 6 1 小鼠分组 实体瘤组, 50只 ICR种小鼠除去正常组
10只外 ,其余小鼠在建立荷瘤模型, 第 2日按随机数字表
法将小鼠随机分为阴性对照组、环磷酰胺组、五叶草莓煎液
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DOI：10.13193/j.archtcm.2007.01.87.liql.035
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低浓度治疗组、五叶草莓煎液高浓度治疗组,每组 10只。
腹水瘤组, 40只 ICR种小鼠在建立荷瘤模型 24h后,
随机分成阴性对照组、环磷酰胺组、五叶草莓煎液低浓度治
疗组、五叶草莓煎液高浓度治疗组,每组 10只。
1. 6. 2 给药方法 按参考文献 [ 2 ]制定给药方法。环磷
酰胺组为腹腔注射给药, 药物浓度为 2mg /mL, 给药剂量为
0. 02g /( kg# d)。正常组和阴性对照组每只给予蒸馏水 0. 4
mL /天灌胃。五叶草莓煎液低浓度治疗组按 1. 8g /kg灌
胃,每只小鼠 0. 4mL /天,五叶草莓煎液高浓度治疗组按 3. 6
g /kg灌胃给药 , 每只小鼠 0. 4m L /天, 每组均连续给药 14
天。重复实验批数为 2次,两次实验结果基本相似,仅以第
2批实验结果表述如下。
1. 6. 3 小鼠增重比及生存期延长率的计算 腹水模型各
组小鼠,接种腹水后各组分别称量体重。分组继续灌胃给
药及饲喂,每日称取体重, 直至死亡前 1日, 计算增重比。
以接种肿瘤之日算起至对照组小鼠全部死亡结束实验,记
录死亡时间,计算生存期延长率。
生存期延长率 (% ) =
给药组平均生存天数 -对照组平均生存天数
对照组平均生存天数 @ 100%
1. 6. 4 脾指数和胸腺指数的计算 实体瘤组全部给药结
束后称取小鼠体重,随后处死 ,分别用电子天平称取脾脏和
胸腺的重量。脾脏指数和胸腺指数分别为各组小鼠脾脏、
胸腺的重量 ( m g) /小鼠的体重 ( g)。
1. 6. 5 五叶草莓抑瘤率的作用 实体瘤模型组停药次日称
重,脱颈处死小鼠,剖取瘤组织,电子天平称重,计算抑瘤率。
抑瘤率 (% ) =
对照组平均瘤重 -给药组平均瘤重
对照组平均瘤重 @ 100%
1. 6. 6 小鼠血清 IL-2测定 小鼠于实验结束后, 摘眼球取
血 0. 5~ 1mL,置于试管内, 4e 3000r /m in离心 5m in,取血清
置于 -20e 保存。 IL-2测定采用放免分析法测定 [3 - 4], 操作
步骤严格按照 IL-2放射免疫分析药盒说明书进行。
1. 7 统计学处理
计量资料以 €x? s表示, 组间比较采用 t检验。计数资
料采用 V2检验。P < 0. 05为有统计学意义。
1. 8 实验条件
实验室温度 20~ 25e ,湿度 60% ~ 80% ;动物自由饮食。
2 结 果
2. 1 各组荷瘤小鼠体重增重比 存活期的变化
如表 1所示,五叶草莓煎液在低、高浓度均可明显提高
小鼠存活天数,其中高浓度组具有显著性差异。
表 1 五叶草莓煎液对 S180小鼠的体重增重比
存活期的影响 (€x ? s)
组 别 体重增加比
(起始 /终止 )
存活天数
(天 )
生命延长率
(% )
模 型 组 19. 38 /31. 51 7. 7 ? 1. 49 -
环 磷 酰 胺 组 18. 42 /27. 23 12. 0 ? 2. 26* * 55. 8
五叶草莓低浓度组 19. 49 /26. 6 9. 5 ? 1. 43* 23. 4
五叶草莓高浓度组 20. 24 /24. 03 11. 6 ? 2. 50* * 50. 6
注:与对照组比较, * P < 0. 05, * * P < 0. 01。
2. 2 五叶草莓对荷瘤小鼠脾脏指数与胸腺指数的影响
如表 2所示,五叶草莓煎液高浓度组可显著提高小鼠
胸腺指数和脾脏指数, 与对照组相比其脾脏指数具有显著
性差距。
表 2 五叶草莓煎液对 S180小鼠脾脏指数与
胸腺指数的影响 (€x ? s)
组 别 n 剂量
( g# kg - 1)
胸腺指数
( mg# g - 1)
脾脏指数
( mg# g - 1)
正 常 组 10 - 2. 29 ? 0. 33* * 9. 01 ? 0. 59* *
模 型 组 10 - 1. 75 ? 0. 24 6. 51 ? 0. 63
环 磷 酰 胺 组 10 0. 02 1. 91 ? 0. 39 7. 50 ? 0. 98*
五叶草莓低浓度组 10 1. 8 1. 94 ? 0. 23 7. 25 ? 0. 91
五叶草莓高浓度组 10 3. 6 2. 12 ? 0. 33* 8. 90 ? 0. 68* *
注: 与对照组比较, * P < 0. 05, * * P < 0. 01。
2. 3 五叶草莓煎液对 S180瘤生长的抑制作用
结果表明,五叶草莓煎液能明显抑制 S180瘤重, 结果
见表 3。
表 3 五叶草莓煎液对 S180小鼠瘤重的影响 (€x ? s)
组 别 例数 剂量
( g /kg)
瘤重
( g)
抑瘤率
(% )
模 型 组 10 - 2. 39 ? 0. 41 -
环 磷 酰 胺 组 10 0. 02 1. 17 ? 0. 40* * 31. 7
五叶草莓低浓度组 10 1. 8 1. 79 ? 0. 52* 43. 6
五叶草莓高浓度组 10 3. 6 1. 35 ? 0. 48* * 51
注:与对照组比较, * P < 0. 05, * * P < 0. 01。
2. 4 五叶草莓煎液对荷瘤鼠血清 IL-2产生的影响
五叶草莓煎液体内给药, S180荷瘤小鼠血清 IL-2的含
量显著高于荷瘤对照组。见表 4。
表 4 五叶草莓煎液对 S180小鼠 IL-2产生的影响 (€x ? s)
组 别 例数剂量 ( g# kg- 1 ) IL - 2( ng# mL- 1 )
正 常 组 10 - 1. 36 ? 0. 17
模 型 组 10 - 1. 08 ? 0. 21v v
环 磷 酰 胺 组 10 0. 02 1. 12 ? 0. 24v v
五叶草莓低浓度组 10 1. 8 1. 60 ? 0. 34* *
五叶草莓高浓度组 10 3. 6 1. 86 ? 0. 50* * v v
注:与正常组比较, v P < 0. 05, v v P < 0. 01;与对照组比较比
较, * P < 0. 05, * * P < 0. 01。
3 讨 论
笔者的实验发现,盐水组小鼠全部死亡, 而环磷酰胺组
小鼠死亡 2只, 五叶草莓低剂量组死亡 6只,五叶草莓高剂
量组死亡 2只而实验过程中,五叶草莓两组荷瘤小鼠的生
活状况明显好于环磷酰胺组和生理盐水组;表明五叶草莓
煎液可以提高荷瘤小鼠的存活率, 改善动物的生存状态。
尤以高浓度效果显著;另外在剥离瘤块时, 发现生理盐水组
小鼠的瘤块明显增大,界限不清、质地柔软,不易剥离, 有的
浸润到胸骨和锁骨;但五叶草莓组和环磷酰胺组瘤块体积
较小,界限清晰, 质地较硬易剥离; 小鼠荷瘤形成后出现免
疫指标的异常,表现为脾脏指数与胸腺指数均降低, 与正常
组及治疗组比较有统计学意义 (P < 0. 01), 胸腺和脾脏分
别是机体主要的中枢免疫器官和外周免疫器官, 它们能从
一定程度上表达免疫功能的状况。胸腺指数和脾脏指数的
大小直接反映机体免疫水平的高低。环磷酰胺组小鼠的胸
腺指数明显降低,表明小鼠免疫功能受到抑制, 尤其是细胞
免疫严重抑制,导致环磷酰胺组小鼠生存状况下降; 然而五
叶草莓组小鼠的胸腺指数、脾脏指数比环磷酰胺组小鼠明
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收稿日期: 2006 - 08 - 27
基金项目:浙江省教育厅资助项目 ( 20020080)
作者简介:陈华 ( 1964 - ),女,浙江杭州人,副主任医师,研究方向:
儿童消化系统疾病。
显提高,表明五叶草莓能够提高荷瘤小鼠的免疫功能。至
于五叶草莓对免疫功能的影响的其他指标及其机理, 笔者
还在进一步的研究之中。
已知肿瘤能诱发产生抑制性 T细胞和抑制性巨噬细
胞,它们能抑制淋巴细胞产生 IL-2促进肿瘤生长。 IL-2活
性在一定程度上反映了机体的免疫监视功能。其主要生物
活性是促进 T淋巴细胞和 NK细胞的增值,促进 B细胞分
化和增值,促进抗体生成等。因此 IL-2在抗肿瘤免疫中具
有重要作用。 IL-2也是机体重要的免疫调节因子, 对多种
免疫活性细胞均具有阳性促进作用, 如 IL-2诱导细胞毒性
淋巴细胞 ( CTL )的分化, 诱生淋巴因子激活的杀伤细胞
( LAK细胞 ), CTL和 LAK细胞皆是重要的杀瘤细胞。 IL-2
还可诱发干扰素,干扰素除可增强 NK活性外, 其本身就有
抑制肿瘤细胞生长的作用 [5 ]。本实验中荷瘤鼠血清 IL-2
水平低于正常对照组, 但五叶草莓煎液能促进荷瘤小鼠提
高 IL-2水平, 结果揭示五叶草莓煎液抑瘤效应与恢复和增
强荷瘤小鼠机体细胞免疫功能及分泌 IL-2水平有关。由
于肿瘤目前最常用治疗方法放射治疗和化学治疗都存在着
抑制机体免疫功能等严重的副作用,而五叶草莓煎液所具
有的增强免疫活性的作用, 将使其在肿瘤的治疗中显现好
的前景。
参考文献
[ 1 ] 黄兰青,王坤,佘尚扬,等.钩吻对环磷酰胺化疗小鼠的造血
保护作用 [ J].右江民族医学院学报, 1994, 16( 4 ) : 5 - 7
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国协和医科大学联合出版社, 1997: 297 - 298
[ 3 ] 黄国伟.白细胞介素 - 2的放射免疫分析研究 [ J]. 标记免疫
学杂志, 1996, 9: 21
[ 4 ] 曲婷婷,金岩,柳越冬, 等. 人参皂苷 Rb1、Rg1与 5 -氟脲嘧
啶对荷瘤小鼠免疫功能的影响 [ J ].中医研究, 2006, 19 ( 5) :
16 - 18
[ 5 ] 杨贵贞.医学免疫学 [M ] . 4版.长春:吉林科学技术出版社,
1999: 191 -195
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中 华 中 医 药 学 刊
CH INESE ARCH IVES OF TRAD IT IONAL CH INESE MED IC INE
Vo.l 25 No. 1
Jan. 2 0 0 7
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理气化痰祛瘀法对非酒精性脂肪性肝炎大鼠
血浆前列环素及血栓素的影响
陈 华,陈芝芸,严茂祥,施军平,何蓓晖
(浙江中医药大学附属医院,浙江 杭州 310006)
摘 要:目的:观察理气化痰祛瘀中药对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎 ( NASH )大鼠血浆前列环素、
血栓素的影响, 探讨其防治 NASH的作用机理。方法:以高脂饮食喂养 12周诱导 W istar大鼠建立非酒精性脂肪
肝模型,以不同剂量的理气化痰祛瘀中药预防及治疗,放免法测定血浆前列环素和血栓素 A 2的稳定代谢产物 6-
酮 -前列环素 1A ( 6-K-PGF1A )和 TXB2含量, 光镜观察肝组织切片病理学改变。结果: 模型大鼠血浆 TXB2含量及
TXB2 /6-K-PGF1A比值较相对应的正常大鼠显著升高, 而 6-K-PGF1A的含量与正常大鼠相比差异无显著性; 应用不
同剂量的理气化痰祛瘀法中药进行预防和治疗则能明显改善大鼠肝组织的脂肪变和炎症活动程度
(P < 0. 01, P < 0. 05), 显著降低血浆中 TXB2含量和 TXB2 /6-K-PGF1A比值 (P < 0. 01, P < 0. 05)。结论: 血浆
TXA
2
与 PG I
2
平衡失调,可能参与大鼠 NASH的发病; 理气化痰祛瘀法中药能显著降低大鼠血浆 TXB
2
水平, 维持
TXA 2与 PG I2的动态平衡,防止 NASH的发生发展。
关键词:脂肪肝;非酒精性; 血栓素 A2; 前列环素; 大鼠;理气化痰祛瘀法
中图分类号: R -33 文献标识码: A 文章编号: 1673 - 7717( 2007) 01 -0087 - 03
E ffects of Regula ting Q i to D iss ipate B lood Stas is and Phlegm on P lasma
Prostacyc line and Thromboxane in Ratsw ith Nonalcoholic Steatohepatit is
CHEN H ua, CHEN Zh i-yun, YAN M ao-x iang, SH I Jun-ping, HE Bei-hu i
( The A ffiliatedH osp ita l ofZhejiang TCM Un iversity, H angzhou 310006, Zhejiang, Ch ina)
Abstrac t Ob jective: to investiga te the Ch inese H erbs w ith the effects o f regulating qi to dissipate blood sta sis and ph legm on
plasma P rostacycline and thromboxane in ratsw ith nona lcoho lic Stea tohepatitis. M ethod s: the mode l o f nonalcoho lic S tea tohepa titis
inW ista r ra ts we re induced by a te rm o f 12-w eek high fa t die ,t and w ere prevented and trea ted by d iffe rent doses o f Chinese H erbs
w ith regu la ting qi to dissipa te b lood stasis and phlegm. , the plasma P rostacycline and thromboxane. s stab le m etabo lic produc ts-6-
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