全 文 :2011 年 12月第 8卷第 34期 ·实验研究·
CHINA MEDICAL HERALD 中国医药导报
[基金项目] 福建省自然科学基金(项目编号:2008J0290);福建省卫生厅
项目(项目编号:wzzy0903);陈可冀中西医结合发展基金(项目编号:ckj2008034
zyx200810);福建省中西医结合老年性疾病重点实验室开放课题·陈可冀
中西医结合发展基金(项目编号:2008J1004-44 ckj2008081)。
[作者简介] 程再兴(1975-),男,硕士研究生,讲师,主要从事中药药理学
教学与科研工作。
[通讯作者] 陈红(1977-),博士研究生,副教授,主要从事中药化学和中药
炮制学的教学与科研工作。
枫香脂挥发油及乙酸乙酯部位
对小鼠血管活性因子的影响
程再兴,陈卫琳,陈锡铖,林 丹,陈 红
福建中医药大学药学院,福建福州 350108
[摘要] 目的:观察枫香脂挥发油和乙酸乙酯部位对小鼠血管活性因子的影响。 方法:小鼠给药 10 d 后,取血分离血
浆,按照试剂盒说明采用酶联免疫法测定血栓素 A2(TXA2)、前列腺素 I2(PGI2)、组织型纤维溶酶激活物(t-PA)和内
皮素 1(ET-1)的含量。 结果:给予枫香脂挥发油和乙酸乙酯部位后,小鼠血浆 TXA2的含量均降低,与空白组[(268.870±
42.257)μg/L]相比,挥发油大剂量组[(224.258±35.479)μg/L、]中剂量组[(232.484±29.138)μg/L]比较,差异均有高度统
计学意义(均 P<0.01),挥发油小剂量组[(244.645±36.687)μg/L]差异有统计学意义(P<0.05),而枫香脂乙酸乙酯部位
差异均无统计学意义;血浆 PGI2 含量均升高,与空白组 [(107.850±12.264)μg/L]比较,挥发油大剂量组 [(117.900±
6.676)μg/L]、中剂量组[(116.167±6.284)μg/L]差异有统计学意义(均 P<0.05),而挥发油小剂量组和乙酸乙酯部位各
剂量组均无统计学意义;血浆 t-PA 含量均降低,与空白组 [(1 968.400±229.873)μg/L]比较,乙酸乙酯部位组大剂
量组 [(1 647.200±141.717)μg/L]、中剂量组[(1 748.000±198.017)μg/L]、小剂量组[(1 550.800±152.062)μg/L]差异均有
统计学意义 (均 P<0.05), 而枫香脂挥发油各剂量组均无统计学意义; 血浆 ET-1 的含量均降低, 但与空白组
[(716.147±52.137)μg/L]比较,只有挥发油大剂量组[(665.321±32.012)μg/L]差异有统计学意义(P<0.05),而其他各剂
量组均无统计学意义。结论:枫香脂“活血化瘀”功效可能与枫香脂挥发油和乙酸乙酯部位对血管活性因子的调节作
用有关,具体机制可能与改善血管内皮功能有一定联系,但有待进一步深入研究。
[关键词] 枫香脂;挥发油;血管活性因子;乙酸乙酯
[中图分类号] R931.6 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2011)12(a)-037-03
Effect of essential oil and ethyl acetate extract of Resina Liquidambaris on
vascular active factor of normal mice
CHENG Zaixing, CHEN Weilin, CHEN Xicheng, LIN Dan, CHEN Hong
College of Pharmacy, Fujian University of TCM, Fujian Province, Fuzhou 350108, China
[Abstract] Objective: To observe the effect of essential oil and ethyl acetate extract of Resina Liquidambaris on vascular
active factor of normal mice. Methods: The blood plasma was separated, then the contents of TXA2, PGI2, t-PA and ET
were determined by using the enzyme-linked immunosorbent assay after normal mice were administered with essential oil
and ethyl acetate extract of Resina Liquidambaris within 10 days. Results: After normal mice were administered with the
essential oil and the ethyl acetate extract of Resina Liquidambaris, the content of TXA2 in plasma of mice was decreased,
with the remarkably significant difference (all P<0.01) presented in the comparison of the high-dose groups and middle-dose
[(224.258±35.479) μg/L and 2 (232.484±29.138) μg/L] of essential oil with blank control group (268.870±42.257) μg/L,
and the significant difference of small-dose [(244.645±36.687) μg/L]. The content of PGI2 was increased significantly (P<
0.05) presented in the comparison of the high-dose and middle-dose groups [(117.900±6.676) μg/L and (116.167±6.284)
μg/L] of essential oil with blank control group [(107.850±12.264) μg/L]. The content of t-PA was all decreased with the
significant difference (P<0.05) presented in the comparison of the all dose groups [(1 647.200±141.717), (1 748.000±
198.017), (1 550.800±152.062) μg/L] of the ethyl acetate extract with blank control group [(1 968.400±229.873) μg/L].
The content of ET-1 was also decreased, but the significant difference (P<0.05) only presented in the comparison of the
high-dose group [(665.321±32.012) μg/L] of the essential
oil with blank control group [(716.147 ±52.137) μg/L].
Conclusion: Promoting blood circulation and removing
blood stasis of Resina Liquidambaris is concerned with es-
sential oil and ethyl acetate extract adjusting the vascular
active factor.
[Key words] Resina Liquidambaris; Essential oil; Vascu-
lar active factor; Ethyl acetate
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·实验研究· 2011 年 12月第 8卷第 34期
中国医药导报 CHINA MEDICAL HERALD
枫香脂为金缕梅科植物枫香树 Liquidambar formosana
Hance 的干燥树脂,始载于《唐本草》,《中国药典》自 1977 年
版开始收载。 该药性味辛、苦、平,归脾、肺、肝经,有活血止
痛、解毒、生肌、凉血之功效,用于吐血、咯血、衄血、金疮出
血、一切痛疽疮毒及牙痛等症,在闽南地区有用枫香树皮炖
肉食用预防和治疗寒湿痹症的传统。 研究表明 [1-3],枫香脂可
能含有萜类、黄酮类、酚酸类、苯丙素类、挥发油等化学成分,
有扩张冠状动脉和血管、增加血流量、抗心肌缺氧、改善血液
流变性、抗凝血、抗血栓形成和血小板聚集等药理作用。但目
前关于枫香脂“活血化瘀”的主要物质基础及作用机制的研
究很少进行,为了进一步对枫香脂进行精制,提高其临床利
用效果,本次实验研究其挥发油和乙酸乙酯提取部位对正常
小鼠血管活性因子的影响,现报道如下:
1 仪器与试药
1.1 药物与试剂
枫香脂(购自福建莆田,经由福建中医药大学药学院鉴
定教研室主任杨成梓副教授鉴定为金缕梅科植物枫香树
Liquidambar formosana Hance 的干燥树脂)、吐温-80(上海联
试化工试剂有限公司,批号:20091027)、乙酸乙酯(上海久亿
化学试剂有限公司,分析纯)、小鼠前列环素(PGI2)酶联免疫
分析试剂盒、小鼠血栓素 A2(TXA2)酶联免疫分析试剂盒、小
鼠组织型纤维溶酶激活物(t-PA)酶联免疫分析试剂盒、小鼠
内皮素 1(ET-1)酶联免疫分析试剂盒(均购自上海劲马生物
科技有限公司)。
1.2 实验动物
昆明种小鼠,雌雄各半,体重 18~22 g,清洁级,购于上海
斯莱克,饲养于福建中医药大学实验动物中心。
1.3 实验仪器
Model 680 型酶标仪(Bio-Rad)、PYX-DHS-40X50-BS-
Ⅱ恒温水浴培养箱(上海跃进医疗器械厂)、TDL-50B 离心
机(上海安亭科学仪器厂)等。
2 方法与结果
2.1 实验方法
将 70 只昆明小鼠随机分为 7 组:空白组、挥发油大剂量
组、挥发油中剂量组、挥发油小剂量组、乙酸乙酯部位大剂量
组、乙酸乙酯部位中剂量组、乙酸乙酯部位小剂量组,每组各
10只,分别灌服 5%吐温-80液,枫香脂挥发油(用 5%吐温-80
配制)4.00、2.00、1.00 ml/kg, 枫香脂乙酸乙酯提取部位 (用
5%吐温-80配制)0.40、0.20、0.10 g/kg,灌胃体积为 0.2 ml/10 g,
每日灌胃 1 次。 于灌胃第 10 天,给药 2 h 后眼球取血,分离
血浆 , 按照试剂盒说明采用酶联免疫法测定 TXA2、PGI2、
t-PA 和 ET-1 等。
2.2 统计学方法
数据分析采用 SPSS 11.5 for windows 统计软件, 计量资
料数据以均数±标准差(x±s)表示,采用 t 检验。 计数资料以
率表示,采用 χ2检验。组间比较用单因素方差分析。以 P<0.05
为差异有统计学意义。
2.3 实验结果
眼球取血,1%肝素抗凝,3 000 r/min 离心,分离血浆,按
照试剂盒说明采用酶联免疫法测定 TXA2、PGI2、t-PA 和 ET-1
的含量。结果显示,给予枫香脂挥发油和乙酸乙酯部位后,小
鼠血浆 ET 的含量均降低,但与空白组相比,只有挥发油大
剂量组有统计学意义(P<0.05);血浆 TXA2的含量也均降低,
与空白组相比,挥发油大、中剂量组有高度统计学意义(P<
0.01),挥发油小剂量组有统计学意义(P<0.05);血浆 PGI2含
量均升高,与空白组相比,挥发油大、中剂量组有统计学意义
(P<0.05);血浆 t-PA 含量均降低,与空白组相比,乙酸乙酯
部位组大、中、小剂量组均有统计学意义(P<0.05);血浆 ET-1
的含量均降低,但与空白组相比,只有挥发油大剂量组有统
计学意义(P<0.05)。 见表 1。
3 讨论
血管活性因子对血管张力、凝血、纤溶的作用分为正性
和负性、促进和拮抗两方面。 在生理情况下,由于神经、体液
和局部的正负反馈机制的内在调节,维持着两者的平衡。 其
中 TXA2和 PGI2均是花生四烯酸的主要代谢产物,TXA2 主
要功能为促进血管收缩和血小板聚集,PGI2主要功能为抗血
小板聚集,舒张血管,尤其可使微血管舒张、局部血流量增
加。 PGI2和 TXA2的平衡是维持正常血小板功能、血管张力以
空白组
挥发油大剂量组
挥发油中剂量组
挥发油小剂量组
乙酸乙酯部位大剂量组
乙酸乙酯部位中剂量组
乙酸乙酯部位小剂量组
组别 动物数(只) 剂量(/kg)
10
10
10
10
10
10
10
0 ml
4.00 ml
2.00 ml
1.00 ml
0.40 g
0.20 g
0.10 g
TXA2
268.870±42.257
224.258±35.479△
232.484±29.138△
244.645±36.687*
232.677±15.614
249.065±22.852
256.065±25.066
PGI2
107.850±12.264
117.900±6.676*
116.167±6.284*
115.383±8.155
114.833±8.228
115.667±12.846
113.500±7.733
t-PA
1 968.400±229.873
1 957.800±347.059
1 939.800±273.518
1 867.800±186.083
1 647.200±141.717*
1 748.000±198.017*
1 550.800±152.062*
ET-1
716.147±52.137
665.321±32.012*
674.680±36.809
677.120±40.842
671.468±49.522
685.872±49.771
684.036±87.065
表 1 枫香脂挥发油和乙酸乙酯部位对小鼠血栓素 A2、前列腺素 I2、组织型纤维溶酶激活物和内皮素 1 的影响(x±s,μg/L)
注:与空白组比较,*P<0.05,△P<0.01
及保护内皮细胞免受损伤的重要环节,血浆 TXA2/PGI2比例
失调在微血管病变中起重要作用[4-5]。纤溶酶原激活系统是体
内防止血栓形成的重要机制,其中心环节是 PA 系统将纤溶
酶原转化成纤溶酶从而发挥纤溶作用。 t-PA 是人体血液中
存在的两种纤溶酶原活化剂之一,对纤维蛋白有很强的亲和
力,能在纤维蛋白上激活纤溶酶原。 t-PA 抗原浓度升高常常
意味着其活性下降,也可造成一种血栓前高凝状态[6-7]。 ET-1
具有强大的收缩血管作用,可调节局部血管的紧张度,参与
血压的调节;促进血管平滑肌细胞的增殖,调节心脏的内分
泌和代谢功能[8-9]。 现代研究认为,血瘀证病理改变与血管活
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性因子密切相关, 血管内皮细胞合成多种血管活性物质,从
小分子气体的一氧化氮(NO)到肽类大分子 ET-1 与缓激肽,
对血管的舒缩功能与血液的流动性有不可替代的调节作用,
对维持正常血液循环有重要的生理意义。
本次实验结果表明,枫香脂挥发油和乙酸乙酯部位可以
通过调节血管活性因子在体内的分泌, 即减少缩血管物质
ET-1、TXA2的分泌,促进扩血管成分 PGI2的分泌,调节两者
之间的比例,还能够降低 t-PA 的浓度,促进其活性升高,从
而达到改善小鼠血流状态的作用等。 因此,枫香脂“活血化
瘀”功效与枫香脂挥发油和乙酸乙酯部位对血管活性因子的
调节作用有关,具体机制可能与改善血管内皮功能有一定联
系,但有待进一步深入研究。 本次研究将为进一步研究枫香
脂在心血管疾病、类风湿性关节炎等方面的药理作用及其活
性物质奠定基础。
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(收稿日期:2011-06-28)
防风为伞形科植物防风 Saposhnikovia divaricata(Turcz.)
Schischk.未抽花茎植株的干燥根,能解表祛风,胜湿止痉,用
于感冒头痛、风湿痹痛、风疹瘙痒及破伤风等症 [1]。 防风中的
化学成分包括色原酮、挥发油、香豆素、杂多糖等类物质,药
理实验表明,其具有解热、镇痛、镇静、抗炎、抗过敏、抗惊厥
和增强机体非特异性免疫功能的作用 [2-3]。 《中国药典》2010
年版中以防风中的升麻苷及 5-O-甲基维斯阿米醇苷为主要
大庆市不同产地防风中有效成分含量比较
于春月 1,张特立 2,白玉华 1,韩成花 1
1.哈尔滨医科大学大庆校区药学院,黑龙江大庆 163319;2.大庆市人民医院药剂科,黑龙江大庆 163316
[摘要] 目的:比较大庆市不同产地防风药材中升麻苷及 5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量。 方法:采用岛津 Inertsil ODS-
SP(4.6 mm×150 mm,5 μm)色谱柱,流动相为甲醇-水(40∶60),流速为 1.0 ml/min,检测波长为 254 nm,进样量为 10 μl。
结果:大庆市各个地区的防风有效成分含量均符合《中国药典》2010 年版标准,其中以杜尔伯特及肇源地区有效成
分总量较高。 结论:杜尔伯特及肇源地区的防风质量更优。
[关键词] 防风;高效液相色谱法;大庆;升麻苷;5-O-甲基维斯阿米醇苷
[中图分类号] R284.1 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2011)12(a)-039-03
Comparison of effective components in Saposhnikovia divaricata (Turcz.)
Schischk. from different habitats of Daqing
YU Chunyue1, ZHANG Teli2, BAI Yuhua1, HAN Chenghua1
1.College of Pharmacy, Daqing Campus of Harbin Medical University, Heilongjiang Province, Daqing 163319, China;
2.Department of Pharmacy, the Peoples Hospital of Daqing, Heilongjiang Province, Daqing 163316, China
[Abstract] Objective: To compare the contents of prim -O -glucosylcimifugin and 4 -O -beta -glucopyranosyl -5 -O -
methylvisamminol in Saposhnikovia divaricata (Turcz.) Schischk. from different habitats of Daqing. Methods: The sample
was analyzed on Inertsil ODS-SP (4.6 mm×150 mm, 5 μm) column, methanol-water (40∶60) was used as mobile phase with
the flow rate was 1.0 ml/min, the detection wavelength was 254 nm and injection volume was 10 μl. Results: The samples
from different habitats of Daqing were all complied with quality standards in Chinese Pharmacopoeia (2010 Edition), and the
higher was in the Duerbote and Zhaoyuan. Conclusion: The samples from Duerbote and Zhaoyuan are better than others.
[Key words] Saposhnikovia divaricata (Turcz.) Schischk.; High performance liquid chromatography; Daqing; Prim-O-glu -
cosylcimifugin; 4-O-beta-glucopyranosyl-5-O-methyl visamminol
[基金项目] 黑龙江省中医药管理局科技项目(项目编号:zhy10-w53)。
[作者简介] 于春月(1979-),女,硕士研究生,主要从事天然药物化学成
分研究。
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