全 文 ：HPLC 法测定蒙药广枣中没食子酸含量
内蒙古民族大学蒙医药学院 2007 研究生(通辽 028000)　智　慧
内蒙古民族大学蒙医药学院(通辽 028000)　　　　　　白玉霞
摘　要:目的:为蒙药广枣质量标准的完善提供依据;方法:利用高效液相色谱(HPLC)方法 , 使用 C18柱(200＊4.6mm)甲醇
-0.1%磷酸水溶液(5:95)为流动相 ,检测波长为 273nm ,对不同产地蒙药广枣中所含的有效成分没食子酸进行了含量测定
研究;结果:没食子酸对照品线性范围为 0.048～ 0.24μg , r=0.9997 平均回收率为 98.20%(RSD=0.79%)。结论:该实验方
法简便快捷 ,重复性好 , 结果准确可靠 ,可作为广枣的质量控制方法。
关键词:HPLC;蒙药广枣;没食子酸;含量测定
中图分类号:R291.2　文献标识码:B　文章编号:1006-6810(2009)01-0040-02
　　蒙药广枣是蒙古族习用药材 , 为漆树科植物南酸枣
Choerospondias axillaris(Roxb.)Burtt〔1〕的成熟果实。具有
清心热 , 强心功能。临床主要用于心热 , 心悸 , 心刺痛 , 癫
狂 ,昏厥 , 心赫依 、心衰等症〔2〕。收载于《中国药典》 2005 版·
一部 , 尚缺含量测定项。本试验参照文献〔3〕的方法采用高
效液相色谱法对广枣中所含没食子酸进行了含量测定研
究。结果表明该方法先进 、结果可靠为广枣质量标准的完
善提供了科学依据。
1　仪器与材料
高效液相色谱仪:日本岛津 LC-10ATVP 泵 、SPD-
M10AVP检测器 、SCL-10AVP 工作站;KQ-100 型超声
波清洗器(昆山市超声波仪器有限公司);电子天平 BS210S
(Max=210g , d=0.01mg)北京赛多利斯天平有限公司;水
浴锅(HH-S21-4)上海跃进医疗器械厂;没食子酸对照品
由中国药品生物制品检定所提供 , (批号为:110831 -
200302)。
流动相用甲醇为色谱纯 , 0.1%的磷酸 、重蒸馏水 、甲醇
等提取溶剂均为分析纯。
2　实验方法与结果
2.1　色谱条件〔3 , 4〕:LC-10ATVP 泵 , SPD-M10AVP检测
器 , SCL-10AVP 工作站;C18柱(200mm ＊4.6mm)流动相
-甲醇-0.1%磷酸水溶液(5:95)。流速 1ml/ min , 检测波
长 273nm。 没食子酸在此条件下的保留时间为 17.97 分
钟 ,对照品见附图 1 , 样品色谱图见附图 2。对照品理论板
数大于 2000。
图 1　没食子酸对照品 HPLC 图谱　　　　　　图 2　广枣样品 HPLC图谱
2.2　试验溶液的制备
2.2.1　对照品溶液的制备:精密称取没食子酸对照品 4.
80mg ,置 5ml容量瓶中 , 加甲醇溶解并稀释至刻度。从中精
密吸取 1ml用甲醇稀释至 50ml即得 19.2μg/ ml的溶液。
2.2.2 标准曲线的制备:精密吸取对照品溶液(19.2μg/ ml)
2.5μl , 5.0μl , 7.5μl , 10.0μl , 12.5μl分别注入高效液相色谱
仪中测定峰面积 , 以 X(μg)为横坐标 , 峰面积值 A 为纵坐
标 ,绘制标准曲线。其回归方程为 A=147031x-1930.3 r
=0.9997.结果表明 , 没食子酸进样量在 0.048 ～ 0.240μg
范围与内峰面积具有良好的线性关系 ,结果如表 1。
表 1　没食子酸进样量与峰面积(A)的关系
C(μg) 0.048 0.096 0.144 0.192 0.240
A(面积) 145519 287476 445870 585079 731874
r=0.9997 a=-1930.3 b=147031
2.3　供试品提取工艺选择:精密称取广枣 3.0310g , 加甲醇
40ml超声 30min , 滤过 , 滤液用甲醇定容至 50ml , 再用 0.
45μm 滤膜过滤 ,精密吸取 10μl注入高效液相色谱仪中 , 测
定计算没食子酸含量。结果见表 2。
精密称取广枣约 3.0235g , 加甲醇 40ml回流 30min , 滤
40　　　　　　　　　　　　　　　　　中国民族医药杂志　　　　　　　　　　　　　2009 年 1 月第 1 期
DOI :10.16041/j.cnki.cn15-1175.2009.01.025
过 ,滤液用甲醇定容至 50ml , 再用 0.45μm 滤膜过滤 , 精密
吸取 10μl注入高效液相色谱仪中 , 测定计算没食子酸含量
结果见表 2。
表 2　供试品提取方法含量结果
编号 提取方法 时间(min) 含量(mg/ g)
1 超声 30 2.82
2 回流 30 5.86
2.4　精密度试验:精密吸取上述对照品溶液及供试品溶液
各 10μl ,分别注入高效液相色谱仪中 , 重复进样 5 次测定峰
面积。结果对照品没食子酸 RSD=0.16%, 样品中没食子
酸 RSD=0.86%。
2.5　稳定性试验:精密吸取新制的供试品溶液 , 按供试品
测定方法每隔 1 小时进样测定 1 次 , 共测定 8 次。结果供
试品中没食子酸 RSD=1.11%。
2.6　重复性试验:精密吸取供试品溶液 10μl , 注入高效液
相色谱仪中 ,分别按含量测定方法操作测定含量 ,结果没食
子酸的平均值为 7.56mg/g , RSD为 0.499%。
2.7　回收率试验 称取已知没食子酸含量的广枣样品 0.5g
(民族大学附院提供)6 份 , 精密称定 ,分别加入一定量的没
食子酸对照品 ,照样品处理方法处理后进样测定峰面积 , 计
算回收率 ,结果见表 3。
表 3　没食子酸回收率实验结果
编号 样品含量
mg
加入量
mg
测得量
mg
回收率
(%)
平均回收
(%)
RSD
(%)
1 1.01 1.11 2.10 98.20
2 1.12 0.99 2.08 96.97
3 1.09 1.25 2.30 96.80 96.71 1.24
4 1.11 1.30 2.38 97.69
5 1.02 1.50 2.45 95.33
6 1.08 1.48 2.49 95.27
2.8　样品的测定:称取广枣约 3g ,精密称定 ,加 40ml甲醇回流 1h ,
定溶至 50ml ,并进样 10μl测定峰面积 ,并计算含量。结果见表 4。
表 4　广枣中没食子酸含量
批号 含量(mg/ g) 平均含量(mg/ g) RSD(%)
8.24
通辽库伦 8.14 8.19±0.05 0.61
8.19
1.95
广东 1.93 1.96±0.04 2.12
2.01
2.18
民族大学附院 2.15 2.16±0.015 0.71
2.16
3　讨　论
没食子酸为广枣所含主要活性成分之一。以没食子酸
为观察指标 ,采用 HPLC 法进行含量测定。研究方法简便 ,
可靠 , 为制定其质量标准研究奠定了良好基础。
参考文献
〔1〕中华人民共和国药典委员会.中国药典·一部〔S〕.北京:
学工业出版社 , 2005.29-30.
〔2〕中华本草编辑委员会 , 中华本草·蒙药卷〔M〕.上海:科
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〔3〕韩召敏 , 吕永宁 ,陈华延.HPLC 测定榆榴结肠康片中没
食子酸含量〔J〕.华西药学杂志 , 2006 , 21(1):95-96.
〔4〕瞿春梅 , 李津明 ,孟永海.HPLC 法测定老鹳草凝胶剂中
没食子酸含量〔J〕.黑龙江中医药 , 2006 , 2:51-52.
2008 年 5 月 16 日收稿
Determination of Gallic acid in Mongolian medicine Guangzao by HPLC
ZHI Hui , BAI Yu-xia
(Colleg of Mongolian M edicine and Pharmacology ,
Inner Mongolia Univ rsity for the Nationali ties , tongliao 028000)
Abstract:Objective:To M ongolian Medicine Guang zao the quali ty of standard-set ting provide the basis for
the development .Methods:The mobile phase is C18 column(200 ＊ 4.6 mm)of M thanol:0.1%Posphoric
acid solution(five ninety-five)by HPLC.The detect ion w avelength is 273nm ,Mongolian medicine Guangzao
o rigin of the dif ferent active ingredients contained in a Gallic acid content of study;Results:The Linear range
of Gallic acid reference substance is 0.048 ～ 0.24μg , r=0.9997 , The average recovery is 98.20%(RSD=0.
79%).Conclusion:This method of experiment is easy to do , w ith accurate result and good reliability and re-
produciticity .it can be in quality control of M ongolian medicine Guangzao.
Key words:HPLC ;Mongolian medicine Guangzao:Gallic acid:Content determination
412009 年 1 月第 1 期　　　　　　　　　　　　　中国民族医药杂志