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草乌叶抗炎作用的研究



全 文 :2009 年 2 月第 26 卷第 1 期
Feb. 2009, Vol.26 No.1
天 津 中 医 药
Tianjin Journal of Traditional Chinese Medicine
草乌叶为北乌头的干燥叶,在中医药学中基本
不用,而在蒙医药和藏医药中应用广泛,并占有重要
地位,具有消炎、清热、解毒、止痛作用,是一种常用
药材[1-3]。目前对北乌头块根的研究成果较多,主要
集中在北乌头块根内生物碱和非生物碱化学成分及
药理作用方面的研究,对草乌叶内生物碱和非生物
碱化学成分及药理作用研究较少,为了探讨草乌叶
的用药原理,笔者对草乌叶的提取物进行了抗炎作
用的研究。
1 实验材料
1.1 动物 ICR小鼠,160只,体质量(20±2) g,雌雄
各半,购自中国医学科学院放射医学研究所(天津)。
动物许可证号:SCXK(津)2005—0001。
1.2 药物 草乌叶从内蒙古大青山采集,经内蒙古
药品所鉴定,属于毛茛科植物北乌头 Aconitum kus-
nezoffii Reichb.。
1.3 主要试剂 泼泥松注射液(北京制药厂,批号
060515),二甲苯(天津市化学试剂三厂,批号:
20060428)。
1.4 主要仪器 1712型电子天平(德国 W-GER-
MANY公司制造),高压灭菌锅(上海精密仪有限公
司生产)。
2 实验方法
2.1 草乌叶提取 草乌叶提取方法 [4]:取干燥草乌
叶 6 kg,用 95%乙醇回流提取 2次、60%乙醇回流提
取 1次,每次 2 h,合并提取液,过滤,回收乙醇所得
浸膏用适量水分散,依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、
正丁醇萃取,回收溶剂。
按照该流程得到氯仿萃取物 17 g,正丁醇萃取
物 7 g,分别取氯仿和正丁醇萃取物用蒸馏水配成含
量分别为 1 g/L溶液(加入适量聚山梨酯-80作为增
溶剂),用于抗炎作用实验。
2.2 耳壳肿胀实验 取 ICR小鼠 80只,随机分成
8组,每组 10只,空白对照组灌服蒸馏水,草乌叶氯
仿和正丁醇萃取物高、中、低剂量组分别以 50、100、
150 mg/(kg·d)剂量灌胃,盐酸泼尼松阳性对照组以
5 mg/(kg·d)剂量皮下注射,连续 3 d。每组于第 3 d给
药 1 h 后,均用二甲苯在右耳的前后两面涂布,
20 μL/耳,左耳不作任何处理,30 min后颈椎脱臼处
死小鼠,相同部位剪下左右耳壳,用直径 6 mm打孔
器打孔,取耳片称质量,记录左右耳片质量之差。
2.3 棉球肉芽肿实验 取 ICR小鼠 80只,随机分
成 8组,每组 10只,空白对照组灌服蒸馏水。草乌
叶氯仿和正丁醇萃取物高、中、低剂量组分别以 50、
100、150 mg/(kg·d)剂量灌胃,盐酸泼尼松阳性对照
组以 5 mg/(kg·d)剂量皮下注射,上述各组均麻醉,
于两侧腋下各植入 5 mg棉球 1粒,随即缝合皮肤。
从手术当日开始,连续给药 7 d,第 8天处死,将棉球
取出,剔除脂肪组织,置 80 ℃干燥箱烘干,称质量,
减去棉球质量即为肉芽组织质量。
2.4 统计学处理 实验数据用 SPSS 11.5软件统计
分析,数据以均数±标准差(x±s)表示,组间比较用单
因素方差分析。
3 结果
3.1 对耳壳肿胀的影响 见表 1。
结果表明,草乌叶正丁醇和氯仿萃取物均能明
*基金项目:内蒙古自治区科委资助项目(20030602)
作者简介:柳占彪(1960-),男,硕士,副研究员,主要从事新
药开发研究工作。
草乌叶抗炎作用的研究 *
柳占彪 1,乌力吉特古斯 2,王怀松 3,丁月旭 3,苏艳芳 3
(1.天津中医药大学中医药研究院,天津 300193;2.内蒙古自治区中蒙医院,呼和浩特 010020;
3.天津大学药学院,天津 300072)
摘要:[目的]探讨草乌叶的抗炎作用。[方法]草乌叶用乙醇制成浸膏后分别用氯仿和正丁醇萃取,然后采用小鼠
耳壳肿胀实验和棉球肉芽肿实验观察两种萃取物的抗炎作用。[结果]草乌叶正丁醇和氯仿萃取物分别以 50、100、
150/(kg·d)剂量灌胃,能明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀(P<0.01),抑制棉球所致小鼠肉芽肿形成(P<0.01或 P<
0.05)。[结论]草乌叶正丁醇和氯仿萃取物均具有抗炎作用。
关键词:草乌叶;萃取;药理作用;动物实验
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1672-1519(2009)01-0075-03
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Tianjin Journal of Traditional Chinese Medicine
2009 年 2 月第 26 卷第 1 期
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显抑制二甲苯所致小鼠耳壳肿胀具有抗炎作用,两
种萃取物的抗炎作用相近,均弱于泼尼松。
3.2 对棉球肉芽肿形成的影响 见表 2。
结果表明,草乌叶正丁醇和氯仿萃取物均能明
显抑制棉球所致小鼠肉芽肿具有抗炎作用,两种萃
取物的抗炎作用相近,均弱于泼尼松。
4 讨论
蒙医不但应用乌头属植物的根茎,还应用它的
叶子。认为草乌叶味辛、涩、性平、有小毒,具有清热
解毒、止痛、杀黏等功效[1]。临床上主要用于黏性刺
痛、肠刺痛、时疫、麻疹、白喉、丹毒、泄泻腹痛、头痛、
牙痛等疾病 [3]。中医药只用草乌的块根,不用草乌
叶,认为草乌味辛、苦、性大热,归心、肝、肾、脾经,具
有祛风除湿、温经止痛的功能。临床上用于风寒湿
痹、关节疼痛等[3]。
目前对草乌根茎的化学成分及药理作用研究比
较深入,已从 30余种乌头碱属植物中,分离出已定
结构的生物碱有 90多个,其中以乌头碱、中乌头碱、
美沙乌头碱、次乌头碱为主,总生物碱含量为
0.701%[3]。药理学证明乌头碱具有镇痛、麻醉、消炎、
降压、抗癌等多种药理作用[3]。而对草乌叶的化学成
分及药理作用研究比较少。于海兰等[5]将草乌干燥
叶粗粉用乙醇室温浸泡,再用氯仿萃取,分离得到
5个化合物,经光谱分析鉴定了其中 3个化合物的
结构,分别为 C19-乌头碱型二萜生物碱 beiwutine
(Ⅰ)、8-乙氧基 14-苯甲酰基 mesaconine(Ⅱ)和
3,10,13,15-四羟基 1,6,16,18-四甲氧基,N-甲基,
14-苯甲酰基乌头烷(Ⅲ),其中Ⅲ是草乌叶的主要成
分,这与本实验氯仿萃取方法相近,提示这几种物质
可能是草乌叶具有抗炎作用的物质基础。在草乌叶
药理作用研究方面,张宏等 [6]研究了草乌叶的解热
作用,当给药剂量为 960 mg/(kg·d)时具有显著的解
热降温作用。对草乌叶的抗炎作用研究未见报道。
本实验用氯仿和正丁醇萃取物进行抗炎实验,当给
药剂量为 50、100、150 mg/(kg·d)时均能明显抑制二
甲苯所致小鼠耳廓肿胀,抑制棉球所致小鼠肉芽肿
形成。结果表明:两种萃取物均具有抗炎作用。通过
对草乌叶提取物抗炎作用的研究,将对明确它的药
用物质基础有积极意义,同时也将为乌头属植物的
综合利用提供科学依据。
此外,应当指出的是当给药剂量升至 150 mg/(kg·d)
时,小鼠出现嘴角流涎、四肢麻木中毒症状,这表明
草乌叶也有与草乌一样的神经毒性作用,临床使用
时应注意控制其用量。
参考文献:
[1] 卫生部药品生物制品检定所.中国民族药志[M].北京:人民卫生出
版社,1984:363-367.
[2] 乌力吉特古斯,白学良,阿拉坦松布尔,等.蒙药草乌叶化学成分
及临床研究进展[J].中草药,2006,37(3):472-474.
[3] 徐文龙,丁 丽,都希格.草乌蒙中医用药及浅析[J].中国民族医药
杂志,2003,10(4):52-55.
[4] Jesús G D,Juan G R,Werner H.Nordiberpene and diterpene alkaloids
fromAcoritum voriegatum[J].Phytochemistry,2005,66(7):837-846.
[5] 于海兰,贾世山.蒙药乌头叶中一个新二萜生物碱 Beiwucine[J].药
学学报,2000,35(3):232-234.
[6] 张 宏,余成浩,彭 成,等.草乌叶煎煮时间、给药剂量与解热
功效的相关性研究[J].陕西中医,2007,28(2):225-226.
(收稿日期:2008-09-20)
表 1 草乌叶萃取物对二甲苯所致耳壳炎症的影响(x±s)
Tab.1 Effects of extracts of kusnezoff monkshood leaf on
inflammation of auricle caused by dimethyl benzene(x±s)
组 别
空白对照
泼尼松
正丁醇萃取物高剂量
正丁醇萃取物中剂量
正丁醇萃取物低剂量
氯仿萃取物高剂量
氯仿萃取物中剂量
氯仿萃取物低剂量
n
10
10
10
10
10
10
10
10
剂量[mg/(kg·d)]
0
5
150
100
50
150
100
50
两耳质量差(mg)
4.21±0.82
1.05±0.14**
2.16±0.83**##
2.31±1.01**##
2.27±1.07**##
2.53±0.70**##
2.64±1.19**##
2.43±0.57**##
注:给药组与空白对照组比较 *P<0.05,**P<0.01;药物治疗组
与泼尼松组比较 #P<0.05,##P<0.01;药物治疗组之间的两两比较
△P<0.05,△△P<0.01。(下同)。
表 2 草乌叶萃取物对棉球所致肉芽肿的影响(x±s)
Tab.2 Effects of extracts of kusnezoff monkshood leaf on
granulation tumor in mouse caused by cotton ball(x±s)
组 别
空白对照
泼尼松
正丁醇萃取物高剂量
正丁醇萃取物中剂量
正丁醇萃取物低剂量
氯仿萃取物高剂量
氯仿萃取物中剂量
氯仿萃取物低剂量
动物数(只)
10
10
10
10
10
10
10
10
剂量[mg/(kg·d)]
0
5
150
100
50
150
100
50
肉芽组织重量(mg)
24.47±0.74
12.84±0.83**
21.14±2.32**##
22.04±1.93**##
21.92±2.50**##
20.55±1.38**##
21.37±1.98**##
22.75±2.29*##
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2009 年 2 月第 26 卷第 1 期
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天 津 中 医 药
Tianjin Journal of Traditional Chinese Medicine
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甲壮腺机能亢进病多见女性,以中青年为主。临床以怕
热、多汗、低热、疲乏无力、体质量减轻、常伴眼球突出为主
症。笔者自 2001年—2003年间共治疗甲状腺机能亢进门诊
患者 62例,现将治疗结果报道如下。
1 临床资料
1.1 一般资料 观察病例均为 2001年—2003年的门诊患
者,共 62例,随机分为两组。治疗组 32例,男 7例,女 25例,
年龄 22~45 岁,平均(30.7±1.8)岁,病程 2 个月~7 a,平均
3.7 a。对照组 30例,男 6例,女 24例,年龄 26~49岁,平均
(38.2±1.0)岁,病程 4个月~7 a,平均 4.1 a.两组患者年龄、性
别、病程等均经统计学处理,差异无显著性意义(P>0.05)。具
有可比性。
1.2 诊断标准 符合甲状腺机能亢进诊断标准[1]
2 治疗方法
两组均口服他巴唑片。治疗组在此基础上加服补肾疏肝
方。处方:吴茱萸 12 g,桑寄生 20 g,枸杞子 20 g,柴胡 10 g,白
芍 15 g,郁金 15 g,连翘 12 g,甘草 5 g。治疗 3个月为 1个疗
程。对照组单服他巴唑片,疗程同治疗组。
3 疗效标准与治疗结果
3.1 疗效标准 参照《内科学》相关内容制定。显效:主要症
状消失,体质量增加,甲状腺肿及眼突征减轻,血游离三碘甲
状腺原氨酸(FT3),游离甲状腺素(FT4),总三碘甲状腺原氨酸
(TT3),血清总甲状腺素(TT4),促甲状腺激素(STSH)恢复正常;
且停服中、西药后稳定在正常范围达 6个月以上。有效:症状
减轻,体重略有增加,甲状腺肿及眼突征减轻不明显,FT3、
FT4、TT3、TT4、STSH水平基本正常,但不能停服或只能减量服
用中、西药。无效:症状未见减轻,甲状腺肿及眼突征亦未减
轻,FT3、FT4、TT3、TT4、STSH亦无明显改善,不能停药或要加
量服药。
3.2 治疗结果 治疗组:显效 18例(56.2%),有效 11例
(34.6%)无效 3 例(9.5%),总有效率为 90.8%;对照组:显效
9 例 (30%),有效 15 例 (50%),无效 6 例 (20%),总有效率为
80%。两组比较,差异有显著性意义(P>0.05)。
4 讨论
甲壮腺机能亢进病在中医学属瘿瘤范畴。笔者经过多年
临床观察,在应用西药控制本病的基础上,加用中药治疗后,无
论在临床证状改善、抗甲状腺药量减少、机体恢复及减少复
发保护机体等多方面都有很好的疗效。又本病是消耗性疾
病,日久必耗伤精气,运用补肾疏肝方治疗本病,是以补肾为
本,疏肝为标。方中吴茱萸、桑寄生、枸杞子补肾益精;柴胡、
白芍、郁金疏肝解郁,连翘平肝降火,甘草和中。临床疗效证
明,本方有调整机体的免疫功能,调整神经与体液系统功能
活动,抑制甲状腺的分泌,尤其是恢复机体的免疫功能,以达
到治疗甲状腺机能亢进和巩固疗效标本兼治的作用。
参考文献:
[1] 叶任高,陆再英.内科学[M].第 5版.北京:人民卫生出版社,2001:
738-740.
(收稿日期:2008-10-11)
作者简介:张 列(1961-),女,主治医师,从事中医内科、儿科
及中西医临床诊疗工作。
补肾疏肝方配合他巴唑治疗
甲状腺机能亢进 32例疗效观察
张 列
(广西梧州市中医院内科,梧州 543000)
·临床报道·
关健词:甲状腺机能亢进;中西医结合疗法;他巴唑;补肾疏肝方
中图分类号:R285.5 文献标识码:B 文章编号:1672-1519(2009)01-0077-01
Study on anti-inflammatory effects of kusnezoff monkshood leaf extracts
LIU Zhan-biao1, WU Li Ji-tegusi2, WANG Huai-song3, et al
(1.Research Institute of Traditional Chinese Medicine, Tianjin University of TCM, Tianjin 300193, China; 2. Inner Mongolia Traditional
Chinese and Mongolian Medicine Hospital, Huhhot 010020, China; Pharmacy Faculty of Tianjin University, Tianjin 300072, China)
Abstract: [Objective] To explore the anti-nflammatory effects of usnezoff monkshood leaf. [Methods] Kusnezoff monkshood leaf was
extracted with chloroform and n-butanol respectively after it was prepared into extract with alcohol. The anti-inflammatory effects of kus-
nezoff monkshood leaf extracted with chloroform and n-butanol were observed in two experiments. [Results] The mouse were drenched
with extracts of kusnezoff monkshood leaf with 50, 100 and 150·kg-1·d-1 respectively, while another experiment showed that the swelling
of auricle caused by dimethyl benzene was inhibited obviously (P<0.01) and showed that the formation of granulation tumor in mouse
caused by cotton ball was inhibited(P<0.01, P<0.05). [Conclusion] The result showed extracts of usnezoff monkshood leaf extracted with
chloroform and n-butanol had anti-inflammatory effects.
Key words: kusnezoff monkshood leaf; extraction; pharmacologic action; anti-inflammatory effects
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