全 文 ：·论著 ·
滇丹参提取液对心肌缺血大鼠血液流变性的影响
基金项目:云南省科委应用基础研究基金资助项目(NO.98C067N)
何洪静1 ,练生利2 ,李惠兰3 ,张荣平3
(1.成都军区昆明总医院 , 云南 昆明　650032;　2.重庆市九龙坡区第二人民医院 , 重庆　400052;　3.昆明医学院)
摘要　目的:探讨云南产甘西鼠尾属药物滇丹参对大鼠血液流变性的影响。方法:结扎大鼠冠状动脉左前降支造成急性
心肌梗塞模型 , 股静脉给药 , 1.5 h 后颈动脉取血测定全血粘度 、血浆粘度 、红细胞压积 、血浆纤维蛋白原含量等血液流变
学指标。结果:滇丹参 10 g/kg 、4 g/kg 、2 g/kg 三种剂量均能显著降低高 、中 、低切变率下的全血粘度和血浆粘度(P<0.
01 , P<0.05), 能显著降低纤维蛋白原含量(P<0.01);10 g/kg 时 ,能降低红细胞压积(P <0.01 , P<0.05)。结论:滇丹
参具有改善心肌缺血大鼠血液流变异常的作用。
关键词　滇丹参;心肌缺血;血液流变性
中图分类号　R 541　　文献标识码　A　　文章编号　1004 - 0188(2005)05- 0465- 03
Effects of S.yunnanensis C.H.Wright on hemodynamics in myocardial ischemia rats
HE Hong - jing1 , LIAN Sheng - li2 , LI Hui- lan2 , ZHANG Rong - ping3　1:Departm ent of Ph arm acy , Kunming General Hospi tal of
Chengdu Milit ary Command , Kunmin g , 650032;2:Second Peoples Hospi tal of Jiulongpo Dis t rict in Chongqing City , Chongqing ,
400052;3:Kunming Medical College , 650031.
Abstract　Objective:T o com pare the ef fects of S.yu nnan ensis C.H.Wright and Slavia mi tio rrhiza Bun ge on hem ody namics in
myocardial i schemia rat s.Methods:Th e my ocardial i schemia model w as estab lished by ligating the lef t anterio r des cending co ronary
artery(LAD)in rat s.Both drugs w ere injected th rou gh femoral vein in to the models.Then 1.5 h late , the w hole blood vis cosity , plasma
viscosi ty , hematocrit(HCT)of red b lood cel l , the conten ts of plasma fib rinogen were observed.Results:Both drugs could markedly
reduce the w h ole blood and plasm a viscosi ties under high , middle and low shear rates(P<0.01～ 0.05).With high and middle d os e , th e
drugs could decrease th e contents of plasma f ibrinogen(P<0.01).With high dose , b oth of them could reduce HCT(P<0.01 ～ 0.05).
Conclusion:S.yunnanensis C.H .Wright can signifi can tly im prove th e hem ody namics in myocardial is chem ia rat s.
Key words:S.yu nnanensis C.H .Wrigh t , hem orheology , myocardial i schemia
　　祖国医学认为冠心病属于血瘀症中胸痹 、心痛的
范畴 ,活血化瘀是其重要治则之一。常用的活血化瘀
中药丹参是唇形科(Labiatae)鼠尾草属植物丹参
(Salvia milt iorrhiza Bunge)的干燥根 ,目前主要用于
治疗心脑血管疾病 。实验研究证实丹参具有扩张离
体心脏冠状动脉增加冠脉流量 ,增加侧枝循环对缺血
区的血液供应〔1〕 ;改善或对抗急性心肌缺血所致的心
电异常;使血液流变性异常得到不同程度的改善〔2 ～ 6〕
等功能。由于产地等的差异 ,滇丹参可能与丹参在药
用成分 ,药效等方面有所不同 ,为更好地开发利用云
南地方中药资源 ,鉴于目前国内外尚未见滇丹参对血
液流变性影响的实验室研究报道 ,本实验对滇丹参提
取液与丹参注射液在血液流变性方面的药理作用进
行比较研究 ,现报道如下:
1　材料与方法
1.1　材料
1.1.1 　药品与试剂 　丹参注射液:(生药含量
1.5 g/ml),上海第九制药厂生产 ,批号:000604;滇丹
参水溶性提取液(生药含量 2 g/ml),由昆明医学院药
学系植化教研室提供;酚试剂 ,由昆明医学院附属一
医院检验科提供;酪氨酸液(1 m l=0.2 mg):上海康
达氨基酸厂生产 ,批号:200011。
1.1.2　常用仪器　LBY—N 6型自动清洗旋转式粘
度计 ,北京普利生公司;80 - 2型离心机 ,上海手术器
械厂;SH120 - 1 型微量血液离心机 ,上海手术器械
厂;江湾Ⅰ型微型人工呼吸机 ,第二军医大学教材处;
722分光光度计 ,上海分析仪器厂;H .H .S21.4电热
恒温水浴锅 ,上海医疗器械三厂。
1.1.3　实验动物　Sprague - daw ley(SD)大鼠 ,体重
250 ～ 300 g ,雌雄各半 ,由昆明医学院天然药物药理重
点实验室动物中心提供 ,合格证:滇动物证 9805。
1.2　方法
1.2.1　实验分组　健康 SD大鼠 ,体重 200 ～ 250 g ,
雌雄各半 , 80只 ,随机分为 8 组 ,模型组 、假手术组和
用药组 ,每组 10 只 , 每种药高 、中 、低剂量分别为 10
g/kg 、4 g/kg 、2 g/kg 。分别在冠脉结扎前 5 min股静
脉注射药物或生理盐水。
·465·西南国防医药 2005年第 15卷第 5期
1.2.2　大鼠心肌缺血模型的制备　大鼠 ip25.0%乌
拉坦 1 g/kg 麻醉 ,仰卧位固定 ,剪去左胸皮肤第 2 ～ 5
肋区域的毛 ,在第 4肋间隙打开胸腔 ,剪破心包膜 ,将
心脏挤出 ,结扎冠状动脉左前降支后关闭胸腔 。每组
结扎后 1.5 h ,分别颈动脉取血 4 m l及 3 m l(4 ml血
用 500 u/ml的肝素 0.2 ml烤干抗凝 ,3 ml血用3.8%
枸橼酸钠 1∶9抗凝)。假手术组冠脉穿线前 5 min股
静脉注射生理盐水 ,只穿线 ,不结扎 。
1.2.3　全血粘度的测定　将旋转式粘度计预热至
37℃±0.5℃,取混匀后的全血 1 ml ,加入测量槽中 ,
分别在 150 S-1 、60 S-1 、10 S-1转速下测定全血粘度 。
1.2.4　血浆粘度的测定 　取全血 3 m l , 3400 转/
min ,离心 5 min ,分离出血浆 ,在粘度计测定槽中 ,120
S-1转速下测定。
1.2.5　红细胞压积的测定 　用毛细管取 100 μl血
液 ,在微量血液离心机内 , 3000 转/min离心 30 min ,
取血浆与细胞层分界处读数作为红细胞压积值。
1.2.6　血沉　由于大鼠血液粘度大 ,红细胞难以下
沉 ,血沉值均取 1.00 mm/h。
1.2.7　血浆纤维蛋白原含量的测定　颈动脉取血 3
ml ,3.8%枸橼酸钠 1∶9抗凝 , 3000 转/min ,离心 10
min ,取上层血浆 200 μl ,加入 0.9% NaCl 1.5 m l ,0.
25%CaC l2 0.4 ml混匀置 37℃恒温水浴 15 min 后 ,
用小玻棒取出纤维蛋白 ,蒸馏水洗涤(1次即可)。将
小玻棒放入含 10.0% NaOH 0.3 m l试管中煮沸 10
min ,取出后向试管中加入 H2O 5.2 m l ,酚试剂 0.3
ml ,标准管中加标准酪氨酸液 0.2 ml , H 2O 5 ml , 10.
0%NaOH 0.3 m l ,酚试剂 0.3 ml ,混匀后用722型分
光光度计在 620 nm波长下比色 ,计算:纤维蛋白原含
量=(测定μ÷标准 S)×0.04×10.7×(100.0%÷ 2)
=(μ÷ S)×2.14
1.2.8　统计学处理　数据用 x ±s表示 ,组间比较采
用单因素方差分析 ,组内比较 S —N —K 法 ,以 P<0.
05为有统计学意义。
2　结果
2.1　滇丹参对心肌缺血大鼠高 、中 、低切变率下全血
粘度的影响　高 、中 、低切变率下的全血粘度 ,用药组
与假手术组均显著低于模型组(P <0.01 , P <0.05),
说明冠脉结扎可引起全血粘度显著升高 ,滇丹参高 、
中 、低剂量下均能显著降低全血粘度。滇丹参在预防
心肌缺血所致全血粘度升高方面具有与丹参相似的
疗效 ,并且在低切变率下降低全血粘度表现出一定的
量效依赖关系 ,结果见表 1。
表 1　滇丹参对心肌缺血大鼠高 、中 、低切变率下
全血粘度的影响(x±s , n=10)
组别 剂量(g/ kg)
全血粘度
低切(10 S -1) 中切(60 S -1) 高切(150 S-1)
假手术 15.58±1.61② 7.74±0.71② 5.79±0.52②
模型 25.57±1.97 11.21±1.02 8.74±1.04
丹参注射液 2 22.41±2.49② 9.92±1.09② 7.34±0.83②
4 19.35±2.16② 9.22±0.77② 6.72±0.70②
10 15.11±2.58② 7.89±1.13② 6.05±0.92②
滇丹参 2 21.46±3.00② 9.74±1.01② 7.04±0.97②
4 19.19±3.04② 9.16±0.94② 6.78±0.38②
10 13.98±1.97② 6.99±1.09② 5.35±0.79②
　　注:与模型组比较 , ①P<0.05, ②P<0.01
2.2　滇丹参对心肌缺血大鼠血浆纤维蛋白原含量 、
血浆粘度和红细胞压积的影响　高 、中剂量滇丹参与
假手术组血浆粘度和纤维蛋白原含量明显低于模型
组(P<0.01 , P <0.05)。说明冠脉结扎可引起纤维
蛋白原含量显著升高。在高 、中剂量下滇丹参能显著
降低纤维蛋白原含量 。滇丹参在降低血浆粘度和纤
维蛋白原含量具有与丹参相似的作用。高剂量用药
组与假手术组红细胞压积均显著低于模型组(P <0.
01 , P<0.05),冠脉结扎可引起红细胞压积显著升高 ,
注射滇丹参和丹参液高剂量时 ,能预防冠脉结扎所引
起的红细胞压积升高(见表 2)。
表 2　滇丹参对心肌缺血大鼠纤维蛋白原 、血浆粘度和红细胞
压积的影响(x±s , n=10)
组别 剂量(g/ kg)血浆纤维蛋白原 血浆粘度 红细胞压积
假手术 2.14±0.42② 1.13±0.31 44.26±5.94②
模型 3.24±0.31 1.32±0.32 54.83±4.66
丹参注射液 2 3.12±0.51 1.21±0.25 52.10±5.82
4 2.65±0.62② 1.04±0.22① 50.00±4.97
10 1.92±0.36② 1.00±0.13② 43.12±2.54②
滇丹参 2 2.91±0.59 1.38±0.36 50.56±4.51
4 2.57±0.31② 1.17±0.19 52.09±3.50
10 1.96±0.51② 1.05±0.14① 44.98±5.69②
　　注:与模型组比较 , ①P<0.05, ②P<0.01
3　讨论
大量资料证明 ,对人类生命健康威胁最大的是心
脑血管病患者均出现明显的血液流变性障碍
(disturbance of hemorheolog y),而且血液流变性障碍
对心脑血管疾病的发展 ,甚至合并症的发生均起着不
可忽视的促进作用 。心肌缺血时血液变得浓 、粘 、凝 、
聚 ,具体表现为:血液粘度升高 、红细胞比容增高 、红
细胞聚集性增强 、红细胞变形性减弱或者血小板聚集
·466· 西南国防医药 2005年第 15卷第 5期
性增强等 。
研究认为 ,血浆组成成份的变化(主要是血浆纤维
蛋白原的增多)、红细胞数增多 、红细胞呈聚集状态 、红
细胞膜和血红蛋白结构异常 、红细胞几何形状的异常这
些因素可以引起红细胞变形性异常 、血液和血浆粘度增
高。红细胞压积增高是血液粘度增高的重要因素之一。
任何原因引起的红细胞增多都可引起血液粘度增高 、血
流缓慢 、血流阻力增加 。血流缓慢 ,再加上血小板数增
多 ,就容易发生血管内血栓形成。
本实验通过结扎大鼠冠状动脉左前降支造成急性
心肌缺血 ,观察滇丹参对血液流变异常的影响。结果表
明 ,滇丹参能显著降低全血粘度 ,显著降低纤维蛋白原
含量 ,能预防冠脉结扎所引起的红细胞压积升高 ,具有
一定的防治血浆粘度升高的作用 ,说明滇丹参对结扎大
鼠冠状动脉引起的血液流变异常有改善作用。
文献报道 ,过氧化脂质(LPO)可能影响血液和血
浆粘度的变化〔7〕 。Moj指出〔8〕 ,体内氧自由基反应 ,特
别是血浆 LPO 的增加 ,是影响血液流变性的重要因
素。另外体外实验表明 , LPO可降低红细胞膜的流动
性并使血红蛋白形成 Heinz小体 ,从而降低红细胞变
形能力;LPO 还可能和血浆蛋白发生交联 ,提高血液
粘度 。欧阳静萍指出 ,血液中还可能含有一些致使血
液流变学变化的物质〔9〕 。
黄诒森等从丹参中提取的三种水溶性成分对微
粒体脂质过氧化都有很强的抑制作用〔10〕。实验研究
证明 ,加入丹参提取物 ,可抑制黄嘌呤 ———黄嘌呤氧
化酶化学反应体系产生超氧化阴离子自由基。丹参
素对线粒体 ADP/O , RCR及细胞色素氧化酶具有保
护作用 ,提示丹参素为良好的 OH 离子清除剂〔11〕 。张
力等证明 ,丹参素对外源性 O -2 有清除作用〔12〕 。上述
实验结论提示 ,丹参主要是通过抑制氧自由基的产生
或清除氧自由基 ,抑制脂质过氧化反应 ,起到改善血
液粘度异常作用 。本实验结果与文献报道相符合 ,作
用相近 ,因此推测其作用机理也可能相似 。另外 ,丹
参素能提高红细胞的负电荷 ,使彼此不易聚集 ,减少
了内摩擦力;降低全血粘度 ,抑制血小板聚集 ,激活纤
溶酶系统;增加红细胞膜的机械强度〔13〕。
综上所述 ,滇丹参 、丹参可能通过①清除氧自由
基;②抑制氧自由基产生;③增加红细胞膜的机械强
度;④降低纤维蛋白原含量;⑤降低红细胞压积;⑥抑
制血小聚集;⑦激活纤溶酶系统等方面发挥抗心肌缺
血作用。
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收稿日期:2005 - 06 - 07
福建省平潭岛春季恙虫病疫源地现场标本的芯片检测及防制措施
操　敏1 ,郭恒彬1 ,唐家琪1 ,李越希1 ,张锦海1 ,陶开华1
(1.南京军区联勤部军事医学研究所 , 江苏 南京　210002)
摘要　目的:利用基因芯片技术对平潭岛春季恙虫病疫区的恙虫病疑似病人 、宿主 、媒介标本进行检测 , 证实疫源地的存
在 ,采取有针对性的防制措施控制流行。方法:现场采集恙虫病疑似病人外周静脉血和捕鼠采集体表恙螨。根据 Ot
56kD外膜蛋白基因序列 , 设计群特异性引物及探针 ,制备寡核苷酸芯片。 PCR技术分别扩增样本 Ot DNA 片段 ,与芯片
·467·西南国防医药 2005年第 15卷第 5期