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佛手瓜蒌胶囊对心肌缺血家兔血清NO、NOS及GSH-PX活性的影响



全 文 :表 1 各组家兔血清M DA的含量(x ±s)
组别 n 8周 10周
空白组 7 3.52±0.96 3.52±0.96
模型组 7 15.36±2.261)2) 20.11±3.851)2)3)
养心颗粒防治组 7 5.69±0.84 4.80±0.42
养心颗粒治疗组 7 12.09±0.941)2) 9.93±1.291)2)4)
胺碘酮治疗组 7 5.64±0.55 4.56±0.973)
  与养心颗粒防治组比较 , 1)P <0.05;与胺碘酮治疗组比较 , 2)
P <0.05;与本组 8周时比较 , 3)P <0.05 , 4)P<0.001
2.2 各组家兔心肌组织病理形态学结果 空白组心肌纤维排
列整齐 ,心肌细胞无肿胀 , 细胞核无改变 , 无间质水肿。模型组
心肌纤维排列紊乱明显 , 肌纤维肿胀 , 较多炎细胞浸润 , 心肌间
质水肿 , 脂质沉着明显 ,部分区域见有明显局灶性坏死 , 细胞核
萎缩。养心颗粒防治组与治疗组心肌排列较整齐 , 肌纤维轻度
肿胀 ,细胞核萎缩 , 心肌间质水肿 ,脂质沉着。
3 讨 论
养心颗粒由黄芪 、茯苓 、茯神 、当归 、川芎 、半夏 、柏子仁 、酸
枣仁 、远志 、五味子 、人参 、肉桂 、炙甘草等药物组成。其中当归
对肾上腺素引起的心律失常有一定的对抗作用 ,可使心率减慢 ,
使室性 、室上性心动过速减少。当归水提物乙醇提取物对肾上
腺素 、强心甙和氯化钡等诱发的多种动物心律失常 , 都有明显的
对抗作用 , 对实验性心房纤颤有治疗作用。人参能纠正心肌缺
氧和改善血流动力学;川芎活血化瘀能抗纤溶 , 抗血栓 , 扩张冠
状动脉 , 解除小动脉痉挛 , 增加冠状动脉血流量 , 以改善心肌供
血;人参皂甙能保护血管内皮对抗氧自由基损伤;酸枣仁与炙甘
草亦能改变心率[ 2] 。脂质过氧化反应的结果是自由基攻击不饱
和脂肪酸 , 裂解生成MDA等终产物 , 可以与硫代巴比妥酸
(TBA)反应 , 以此进行检测分析[ 3] 。一般来说 , 机体内过多的
活性氧能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸 , 引发脂质过氧化
作[ 4] 。活性氧损伤伴随着氧化损伤产物 MDA 的升高 , 而抗氧
化剂对活性氧的清除作用表现为 MDA 的相对降低 , 因此 , 测定
M DA 能较好地反映脂质过氧化水平 ,间接地反映出细胞损伤的
程度[ 5] 。
在冠心病心肌缺血保护的研究中 ,缺血/再灌注损伤与自由
基介导的脂质过氧化有关 , 自由基增多和氧自由基触发的脂质
过氧化反应是导致缺血性损伤及再给氧损伤的主要原因 , 是引
起冠心病恶化的重要环节。有动物实验表明 , 脂质过氧化的损
伤作用是内皮细胞损伤的主要原因之一 ,可引起血管内皮细胞
结构和功能改变[ 6] 。因此有效清除自由基 , 增强机体的抗氧化
能力 , 对血管内皮损伤和心肌缺血将起保护和治疗作用。 冠心
病病人内皮功能与血清超氧化歧化酶(SOD)与 MDA 含量相
关 , MDA 含量高低可反映脂质过氧化的程度。一般来说 , 活性
氧损伤伴随着氧化损伤产物 MDA 的升高 , 而抗氧化剂对活性
氧的清除作用表现为 MDA 的相对降低 ,因此测定 MDA 能较好
地反映脂质过氧化水平。
本研究结果表明 , 高脂饮食引起的动脉粥样硬化可使内皮
损伤 , 在肢体缺血期 , 血浆 MDA 水平即有一定程度升高 , 养心
颗粒可以起到抗氧化作用 , 使 MDA 一定程度的降低 , 进而达到
防治与治疗冠心病心律失常的作用。
参考文献:
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作者简介:吴桐菲(1981—),女 ,现为黑龙江中医药大学 2005级硕士研
究生(邮编:150040);周亚滨 ,工作于黑龙江中医药大学附属第一医院;
徐倩 、冯研 ,现为黑龙江中医药大学 2005级硕士研究生。
(收稿日期:2007-11-22)
(本文编辑 郭怀印)
佛手瓜蒌胶囊对心肌缺血家兔血清 NO 、NOS
及GSH -PX活性的影响
李妍怡 ,巩 婷 ,杨瑞龙 ,刘清君 ,顾 雪
摘要:目的 探讨佛手瓜蒌胶囊对心肌缺血家兔血清中一氧化氮(NO)、心肌组织中一氧化氮合酶(NOS)及谷胱甘肽过氧化物
酶(GSH-PX)活性的影响。方法 将 40 只家兔随机分为假手术组 、模型组 、佛手瓜蒌胶囊小剂量组 、佛手瓜蒌胶囊大剂量组及地
奥心血康对照组。灌胃 22 d 时通过结扎家兔冠状动脉前降支造成心肌缺血模型 , 测定血清中 NO、心肌组织中 NOS 及 GSH-PX 的
含量。结果 模型组 NO 、NOS 及 GSH-PX含量降低 , 佛手瓜蒌胶囊组 NO、NOS 及 GSH-PX 含量增加。结论 佛手瓜蒌胶囊可
能通过提高血清中 NO 、心肌组织中 NOS 的含量 , 促进心肌组织中 GSH-PX 的活性 , 保护血管内皮细胞 , 清除氧自由基 , 从而达到
防治心肌缺血的作用。
关键词:佛手瓜蒌胶囊;心肌缺血;一氧化氮;一氧化氮合酶
中图分类号:R542.2 R285.5   文献标识码:A   文章编号:1672-1349(2008)02-0164-03
  佛手瓜蒌胶囊是甘肃省中医院治疗冠心病的院内制剂 , 经
多年临床实践应用 ,取得了良好的临床疗效。本实验通过动物
实验探讨佛手瓜蒌胶囊抗心肌缺血的作用机制 , 观察佛手瓜蒌
胶囊对家兔血清中一氧化氮(NO)、心肌组织中一氧化氮合酶
·164· CHIN ESE JOURNAL OF INTEGRA TIVE M EDICINE ON CARDIO-/CEREBROVASCU LAR DISEASE Feb ruary 2008 Vo1.6 No.2
(NOS)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性的影响 , 从分子
水平探讨其作用机制 ,为临床用药提供实验及理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验药品 佛手瓜蒌胶囊(甘肃省中医院治疗冠心病的
院内制剂),家兔用量小剂量为 0.288 g/ kg , 大剂量为 2.875 g/ kg。
地奥心血康[ 成都地奥制药集团有限公司 , (9 1)药卫准字
Z-51 号]家兔用药量为 21 mg/kg。
1.1.2 实验动物 青紫蓝家兔 40 只,雌雄兼用 ,体重(2.0 ~ 2.5)
kg , 由兰州生物制品研究所提供 , 合格证号:医动字第1 4-
004号(附实验动物合格证)。
1.1.3 实验仪器 UV-120-02 紫外分光光度计(日本生
产),离心沉淀机(德国生产), XP96-A 型快速混匀器(上海手
术器械厂生产), HHS21-4 型电热恒温水浴锅(上海医疗器械
五厂生产), Analy zer“ 780”半自动生化分析仪(MADE IN EC),
可调式微量移液器(上海求精生化试剂仪器有限公司生产)。谷
胱甘肽过氧化物酶测试盒 、一氧化氮合酶测试盒 、NO 测试盒均
由南京建成生物工程研究所生产 ,批号为 2006-04-10。
1.2 方法
1.2.1 动物分组 实验家兔共分 5 组:假手术组 、模型组 、佛手
瓜蒌胶囊小剂量组 、佛手瓜蒌胶囊大剂量组及地奥心血康对照
组 ,每组 8 只。
1.2.2 造模方法 青 、紫 、蓝家兔称重后 ,给予 25%乌拉坦注
射麻醉(4 mL/kg),仰位固定 , 沿胸骨左缘剪断第 2 肋~ 第 3 肋
软骨 ,用小开胸器撑开胸腔切口 , 可见搏动的心脏 ,剪开心包 ,用
止血钳将左心耳提起 ,用持针器将小弯针在冠状动脉前降支根
部(离冠状动脉起始约 3 mm ~ 5 mm)穿一丝线结扎 , 并同时扎
入 1 cm 长硅胶管 1 根 , 在结扎线下 0.5 cm 处再结扎一丝线 ,然
后关闭胸腔 ,使家兔心肌缺血 , 观察 40 min。其中假手术组家兔
开胸 、暴露心脏 、剪开心包并在冠状动脉前降支根部穿线 , 但并
不结扎;其余各组均按上述方法造模。
1.2.3 给药方法 假手术组与模型组以等量温生理盐水灌胃 ,
其余各组用温生理盐水溶解实验药物成混悬液灌胃 , 分别给予
佛手瓜蒌胶囊小剂量 、大剂量以及地奥心血康 , 每天 1 次 , 连续
21 d ,于第 22 天晨灌服药物 1 h 后进行手术。
1.3 标本采集及指标测定
1.3.1 血清制备 实验动物心肌缺血 40 min 时经颈静脉抽血
5 mL , 将 5 m L血在 37 ℃条件下水浴 30 min ,以加速血液凝固。
血液凝固后用竹签沿试管壁四周轻轻剥离血块 , 使血清尽快自
行析出 , 然后置于离心机中 , 调节至 2 500 r/ min 离心 20 min , 用
吸管吸出上层血清备用。
1.3.2 组织匀浆制备 实验动物心肌缺血 40 min 后处死 , 立
即开胸 , 取心脏前壁缺血区心肌组织约 0.3 g , 置入冰生理盐水
中冲洗 , 用滤纸吸去多余水分 , 称重 ,放入组织匀浆器中 , 按重量
1∶9 的比例加入冰生理盐水 , 将匀浆器置于冰水混合物中 , 用力
研磨组织匀浆 , 然后置于离心机中 , 调节至 2 500 r/ min 离心 20
min ,用吸管吸出上层清液备用。所有指标均使用比色分析法测
定 , 按照试剂盒说明书操作程序严格执行。
1.4 统计学处理 实验数据应用 SPSS 10.0 统计软件分析 , 所
有数据以均数±标准差表示(x ±s),多组间比较采用单因素方
差分析 , 两组间比较采用 t 检验 , P< 0.05 为有统计学意义。
2 结 果
模型组血清中 NO 、NOS、GSH-PX含量较假手术组明显下
降 , 而治疗后各用药组血清中 NO、NOS 、GSH-PX 含量较模型
组明显升高(P <0.01)。 佛手瓜蒌胶囊小剂量 、大剂量组与地
奥心血康组比较血清中NO 、NOS 、GSH-PX含量明显升高
(P <0.01)。详见表 1。
表 1 佛手瓜蒌胶囊对心肌缺血损伤家兔血清中 NO、NOS 、GSH-PX含量的影响(x ±s)
组别 n NO(μmol/ L) NOS[ U/(mg·prot)] GSH-PX[ U/(mg·prot)]
假手术组 8 11.854±0.513 2.746±0.088 13.012±0.382
模型组 8 5.352±0.2071) 0.456±0.0171) 3.630±0.2641)
佛手瓜蒌胶囊小剂量组 8 9.855±0.6532)3) 1.853±0.1252)3) 8.931±0.5782)3)
佛手瓜蒌胶囊大剂量组 8 9.466±0.6192)3) 1.986±0.0642)3) 9.556±0.2942)3)
地奥心血康组 8 8.056±0.2532) 1.175±0.0892) 6.760±0.5282)
与假手术组比较 , 1)P <0.01;与模型组比较 , 2)P <0.01;与地奥心血康组比较 , 3)P <0.01
3 讨 论
冠心病是一种常见病 、多发病 , 在我国其发病率有明显增高
的趋势 , 成为死亡的重要原因之一。 NO 作为一种重要的心血
管调节因子 , 对于冠心病的发生发展有着重要的意义[ 1] 。 NO
的持续基础释放 ,具有扩张血管 、抑制平滑肌细胞增生 、阻止血
小板聚集和白细胞黏附以及清除氧自由基等重要生理功能 , 是
心血管系统中抗冠状动脉粥样硬化 、血栓形成以及维持正常血
管舒缩反应必不可少的保护因子。 NOS 作为合成 NO 的关键
酶 ,对 NO的生成具有重要的影响。目前已经知道至少存在 3
种 NOS 亚型:神经源型 、诱导型 、内皮型。在冠心病的发病机制
中起重要作用的是内皮型 NOS(eNOS)。 心肌缺血性损伤时
eNOS mRNA 呈低表达 , NOS 活性降低 ,心肌 NO 的合成和释放
减少 ,血清 NO浓度下降[ 2] ,必然导致血管收缩 ,血流减少 , 流速
减慢 , 中性粒细胞在内皮细胞上聚集 , 释放各种介质和氧自由
基 , 加重心肌细胞的损伤[ 3] 。 GSH-PX 是一种含硒蛋白 , 是生
物机体内重要的抗氧化酶之一 , 它可以消除机体内的过氧化氢
及脂质过氧化物 , 阻断活性氧自由基对机体的进一步损伤 , 是生
物体内重要的活性氧自由基清除剂 , 人体清除氧自由基主要依
靠自身的抗氧化防御系统 , 而 GSH-PX是 AODS 的最重要组
成部分。 GSH-PX增加能降低脂质过氧化物含量 ,增强灌注后
的心肌收缩力 , 并且明显改善心肌的超微结构。因此 , 不难看
出 , 提高 GSH-PX的基因表达水平和活力 , 对于防止缺血再灌
注损伤 , 加强心肌保护至关重要[ 4] 。
本实验结果表明 , 佛手瓜蒌胶囊能够提高 NO 、NOS 的含
量 , 增加 GSH-PX的活性 , 对心肌缺血细胞起到保护作用。因
此 , 氧自由基清除及血管内皮保护效应可能是该药抗心肌缺血
·165·中西医结合心脑血管病杂志 2008年 2月第 6卷第 2期
的作用机制之一。
参考文献:
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作者简介:李妍怡(1950—),女 ,主任医师 ,硕士生导师 ,现工作于甘肃省
中医院(邮编:730050);巩婷 ,工作于甘肃省中医学院;杨瑞龙 ,工作于甘
肃省中医院;刘清君 、顾雪 ,工作于甘肃省中医学院。
(收稿日期:2007-10-26)
(本文编辑 郭怀印)
针刺百会 、大椎对老年性痴呆大鼠脑内
SOD及 AChE的影响1)
马 莉 ,赵立刚 ,成燕萍 ,程为平 ,吴 茜 ,郑祖艳 ,梅晨健
摘要:目的 探讨针刺百会 、大椎对老年性痴呆大鼠的脑内超氧化物歧化酶(SOD)及乙酰胆碱酯酶(AChE)含量的影响。 方法
 选用纯系Wistar老年大鼠 52只 , 随机分为假手术组 、模型组 、针刺组和西药组 , 采用 β-淀粉样蛋白向海马 CA1 区定向注射制作
老年性痴呆模型 ,进行百会 、大椎针刺治疗。检测大鼠脑内 SOD 及 AChE 的含量。结果 针刺老年性痴呆大鼠的百会 、大椎穴 , 可
明显提高脑组织内 SOD的含量 , 降低脑组织内 AChE 的含量 , 与模型组比较有统计学意义(P<0.05)。结论 针刺能提高老年性痴
呆大鼠的学习记忆能力 ,改善自由基代谢 , 促进老年性痴呆大鼠的智能恢复。
关键词:针刺疗法;老年性痴呆;超氧化物歧化酶;乙酰胆碱酯酶
中图分类号:R749.1 R255.2   文献标识码:A   文章编号:1672-1349(2008)02-0166-02
The Ef fect of Baihui Point(DV 20)and Dazhui Point(DV 14)on the SOD and the AChE Contents in Rats with Aged Dementia
Ma Li , Zhao Ligang , Cheng Yanping , et al
The F irst Hospital , Heilongjiang University of TCM (Harbin 150040)
Abstract:Objective To study the effect of Baihui Point and Dazhui Point on the SOD and the AChE content in A lzheimer Disease
(AD)Model Rats.Methods Fifty-two aging Wistar ra ts w ere divided into model group , acupuncture g roup , medicine group , and nega-
tiv e injury group.Aβ1-40 was injected to hippocampal CA1 to established AD models.Content o f SOD and AChE in the cerebral issues
w ere examine after acupuncture treatment with Baihui Boint and Dazhui point.Results After the acupuncture trea tment , the statistic data
show ed that Baihui point and Dazhui point could promote the content of SOD , decrease the content of AChE in cerebral issues.Conclusion 
Baihui point and Dazhui point acupuncture could increase the learning and memory ability , improve the metabolism of free radical and restore
intelligence of AD rats.
Key words:Baihui point (DV 20);Dazhui point (DV 14);free radical;Alzheimer disease
  阿尔茨海默病(Alzheimer disease, AD)是老年人最常见的神
经变性疾病 ,以记忆障碍和其他认知功能障碍为主要临床表现 ,
多以病人的海马和新皮层胆碱乙酰转移酶及乙酰胆碱(ACh)显
著减少为特点[ 1] 。其病因尚不清楚。 AD 的发病率随年龄增高
而增高 , 65 岁以上患病率约为 6%。近 10 年来国内外关于 AD
的研究进展很快 ,本研究采用颅内注射法进行实验研究 ,并针刺
百会 、大椎穴 , 以期找到治疗 AD的更好方法 。
1 材料与方法
1.1 动物 选用纯系健康Wistar雄性大鼠 52 只 , (18 ~ 20)月
龄 ,体重 500 g±20 g , 由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。
1.2 仪器与试剂 脑立体定位仪(NARISHIGE SN-2 型), 电
动离心机(北京医用离心机厂 LD5-2 型),电热恒温水浴箱(江
苏省金坛市医疗仪器厂 RF-540 型),电热恒温培养箱(中国厦
门医疗电子仪器厂 HWB-2 型), 电动玻璃匀浆机(宁波新芝科
学仪器研究所 DY89-1 型), 分析振荡器(江苏泰县医疗器械厂
FZQ—2 型), 托盘式扭力天平(上海第二天平仪器厂 TN-100B
型), 722 光栅分光光度计(上海第二分析仪器厂)。过氧化物歧
化酶(SOD)及乙酰胆碱酯酶(AChE)试剂盒均由南京建成生物
工程研究所提供。
1.3 方法
1.3.1 老年性痴呆模型的建立 采用颅内注射法[ 2] 。 52 只
Wistar大鼠 , 随机分为假手术组 、模型组 、西药组和针刺组 , 每组
13只。 针刺组 、西药组和模型组大鼠术前 12 h 禁食 、禁水 , 以
20%乌拉坦(0.55 m L/kg)腹膜注射麻醉后 , 待角膜反射和肌张
力消失后 , 将大鼠固定在脑立体定位仪上 , 按脑立体定位图谱
(AP=2.22 mm , ML=3.0 mm , DV=2.8 mm),用手摇牙科钻
  1)为黑龙江省教育厅科学技术基金资助项目(No.11511360)
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