全 文 ：基金项目：新疆维吾尔自治区高校科研计划项目（ＸＪＥＤＵ２００９Ｓ４９）；新疆医科大学科研创新基金（２００７２１４）
作者简介：菅丽君（１９８７－），女，硕士，助理工程师，研究方向：食品质量监测。
通信作者：常军民，男，博士，教授，硕士生导师，研究方向：天然药物的研究与开发，Ｅ－ｍａｉｌ：ｃｊｍｃｊｎ２４７１＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ。
刺糖多糖的分离纯化与基础结构分析
菅丽君１，常军民２，李改茹２，程江南３
（１新疆产品质量监督检验研究院，乌鲁木齐　８３０００２；２新疆医科大学药学院，乌鲁木齐　８３００１１；３新疆药物研究所，乌鲁木齐　８３０００４）
摘要：目的　分离纯化刺糖多糖，并对刺糖多糖的结构进行基础性分析。方法　采用水提醇沉法提取刺糖
多糖，联合使用大孔吸附树脂、纤维素和葡聚糖凝胶柱色谱对刺糖多糖进行分离纯化，采用凝胶过滤法测定其纯度
和相对分子量，气相色谱法分析其单糖组成，对含量较高的刺糖多糖组分进行部分酸水解、高碘酸氧化和Ｓｍｉｔｈ降
解分析。结果　经分离纯化得到１１个精制多糖组分，相对分子量为２～１０ｋＤａ，单糖组成多为鼠李糖、阿拉伯糖、
甘露糖、葡萄糖和半乳糖。ＡＰ１－３的主链单糖残基为鼠李糖、甘露糖和半乳糖，末端残基和分支单糖残基为葡萄
糖；ＡＰ２－３的主链单糖残基为鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖，末端残基和分支单糖残基为鼠李糖、阿拉伯糖和
甘露糖。结论　采取的分离纯化方法切实可行。经结构分析可知刺糖多糖各组分多为有分枝的杂多糖。
关键词：刺糖；多糖；分离纯化；结构分析
中图分类号：Ｒ９１７　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９－５５５１（２０１３）０４－０４６０－０４
Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ，ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｂａｓｉｃ　ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ　ｅｌｕｃｉｄａｔｉｏｎ　ｏｆ
ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｆｒｏｍ　Ａｌｈａｇｉ－ｈｏｎｅｙ
ＪＩＡＮ　Ｌｉ－ｊｕｎ１，ＣＨＡＮＧ　Ｊｕｎ－ｍｉｎ２，ＬＩ　Ｇａｉ－ｒｕ２，ＣＨＥＮＧ　Ｊｉａｎｇ－ｎａｎ３
（１　Ｘｉｎｊｉａｎｇ　Ｕｙｇｕｒ　Ａｕｔｏｎｏｍｏｕｓ　Ｒｅｇｉｏｎ　Ｐｒｏｄｕｃｔ　Ｑｕａｌｉｔｙ　Ｓｕｐｅｒｖｉｓｉｏｎ　ａｎｄ　Ｉｎｓｐｅｃｔｉｏｎ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，
Ｕｒｕｍｑｉ　８３０００２，Ｃｈｉｎａ；２　Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｕｒｕｍｑｉ，８３００１１，Ｃｈｉｎａ；
３　Ｘｉｎｊｉａｎｇ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｍａｔｅｒｉａ　Ｍｅｄｉｃａ，Ｕｒｕｍｑｉ　８３０００４，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｉｓｏｌａｔｅ，ｐｕｒｉｆｙ　ｔｈｅ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｆｒｏｍ　Ａｌｈａｇｉ－ｈｏｎｅｙ　ａｎｄ　ｃｌａｒｉｆｙ　ｉｔｓ　ｂａｓｉｃ　ｃｈｅｍｉｃａｌ
ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　ｗａｔｅｒ　ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ－ａｌｃｏｈｏｌ　ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｎｇ　ｗａｓ　ａｐｐｌｉｅｄ　ｔｏ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ
ｆｒｏｍ　Ａｌｈａｇｉ－ｈｏｎｅｙ．Ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ　ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ　ｒｅｓｉｎ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ＤＥＡＥ　ｃｅｌｕｌｏｓｅ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　ａｎｄ
Ｓｅｐｈａｄｅｘ　ｇｅｌ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　ｗｅｒｅ　ａｐｐｌｉｅｄ　ｔｏ　ｆｒａｃｔｉｏｎａｌｉｚｅ　ａｎｄ　ｐｕｒｉｆｙ　ｔｈｅ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ．Ｔｈｅ　ｈｏｍｏｇｅｎｅｉｔｙ
ａｎｄ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｗｅｉｇｈｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　Ｇｅｌ　ｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ　ｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｃｏｍ－
ｐｏｓｉｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　ｗｅｒｅ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ｂｙ　Ｇａｓ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＧＣ）．Ｐａｒｔｉａｌ　ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ　ｗｉｔｈ
ａｃｉｄ，ｐｅｒｉｏｄａｔｅ　ｏｘｉｄａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｓｍｉｔｈ　ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ　ｗｅｒｅ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ａｎａｌｙｚｅ　ｔｈｅ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｏｆ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａ－
ｒｉｄｅ　ｆｒａｃｔｉｏｎｓ　ｗｈｉｃｈ　ｉｓ　ｏｆ　ｈｉｇｈ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｎ　ａｌｈａｇｉ－ｈｏｎｅｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　１１Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｆｒａｃｔｉｏｎｓ　ｗｅｒｅ　ｇｏｔｔｅｎ
　第３６卷　第４期 新 疆 医 科 大 学 学 报 Ｖｏｌ．３６　Ｎｏ．４
　２０１３年４月 Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｘｉｎｊｉａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ａｐｒ．２０１３
ｆｒｏｍ　Ａｌｈａｇｉ－ｈｏｎｅｙ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗ　ｔｈａｔ　ｔｈｅｙ　ｗｅｒｅ　ｈｏｍｏｇｅｎｅｏｕｓ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ
ｗｅｉｇｈｔｓ　ｗｅｒｅ　ｂｅｔｗｅｅｎ　２ｋＤａ　ａｎｄ　１００ｋＤａ．Ｔｈｅｙ　ｗｅｒｅ　ｃｏｍｐｏｓｅｄ　ｏｆ　ｒｈａｍｎｏｓｅ，ａｒａｂｉｎｏｓｅ，ｍａｎｎｏｓｅ，ｇｌｕ－
ｃｏｓｅ　ａｎｄ　ｇａｌａｃｔｏｓｅ．Ｔｈｅ　ｍａｉｎ　ｃｈａｉｎ　ｏｆ　ＡＰ１－３ｉｓ　ｍａｉｎｌｙ　ｍａｄｅ　ｕｐ　ｏｆ　ｒｈａｍｎｏｓｅ，ｍａｎｎｏｓｅ，ａｎｄ　ｇａｌａｃｔｏｓｅ．
Ｔｈｅ　ｓｉｄｅ　ｃｈａｉｎ　ｉｓ　ｃｏｍｐｏｓｅｄ　ｏｆ　ｇｌｕｃｏｓｅ；Ｔｈｅ　ｍａｉｎ　ｃｈａｉｎ　ｏｆ　ＡＰ２－３ｉｓ　ｍａｉｎｌｙ　ｍａｄｅ　ｕｐ　ｏｆ　ｒｈａｍｎｏｓｅ，ａｒａｂｉ－
ｎｏｓｅ，ｇｌｕｃｏｓｅ　ａｎｄ　ｇａｌａｃｔｏｓｅ．Ｔｈｅ　ｓｉｄｅ　ｃｈａｉｎ　ｉｓ　ｃｏｍｐｏｓｅｄ　ｏｆ　ｒｈａｍｎｏｓｅ，ａｒａｂｉｎｏｓｅ　ａｎｄ　ｍａｎｎｏｓｅ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ
　Ｉｔ　ｈａｖｅ　ｂｅｅｎ　ｐｒｏｖｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｅｌｅｖｅｎ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｆｒａｃｔｉｏｎｓ　ｗｅｒｅ　ｐｕｒｅ　ａｎｄ　ｈｏｍｏｇｅｎｅｏｕｓ，ｓｏ　ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄｓ
ｗｅ　ｈａｖｅ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｉｓｏｌａｔｅ　ａｎｄ　ｐｕｒｉｆｙ　ｐｏｌｙｓａｅｅｈａｒｉｄｅｓ　ｗｅｒｅ　ｆｅａｓｉｂｌｅ　ａｎｄ　ｗｏｒｋａｂｌｅ．Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ　ｅｌｕｃｉｄａｔｉｏｎ　ｓｈｏｗ
ｔｈａｔ　ｍｏｓｔ　ｏｆ　Ａｌｈａｇｉ－ｈｏｎｅｙ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｆｒａｃｔｉｏｎｓ　ｗｅｒｅ　ｈｅｔｅｒｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ａｌｈａｇｉ－ｈｏｎｅｙ；ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ；ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ；ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ　ｅｌｕｃｉｄａｔｉｏｎ
　 　 刺 糖 （Ａｌｈａｇｉ－ｈｏｎｅｙ）为 豆 科 植 物 骆 驼 刺
（Ａｌｈａｇｉ　ｐｓｅｕｄｌｈａｇｉ．Ｄｅｓｖ）枝叶分泌的糖液凝结而
成的颗粒，色黄白，味甜，略具粘性，是维吾尔医常用
药材，可治疗痢疾、腹泻、血尿等疾病。维吾尔族民
间常将之与牛奶一起服用，称其性热而燥，可以开塞
通窍，强壮身体。现代研究表明刺糖的主要化学成
分为多糖［１］。本研究对刺糖多糖的分离纯化方法进
行研究，并对其结构进行分析，为今后进一步开发利
用维药刺糖奠定了理论基础。
１　仪器与试药
冷冻干燥仪（ＦＤＵ　２０００上海爱朗仪器有限公
司），紫外－可见分光光度仪（Ｌａｂ－ｔｅｃｈ　９１００Ｄ，北京
莱伯泰科公司），气相色谱仪（ＳＨＩＭＡＤＺＵ　ＧＣ－
２０１０，日本岛津公司）。刺糖（购于新疆乌鲁木齐市
维吾尔药店，产地为吐鲁番，经新疆医科大学生药教
研室帕丽达教授鉴定为维吾尔药材刺糖）。葡萄糖、
甘露糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖（上海试剂二厂，
分析纯）；葡聚糖Ｔ５、葡聚糖Ｔ１０、葡聚糖Ｔ４０、葡聚
糖Ｔ７０、葡聚糖Ｔ５００，蓝色葡聚糖（上海源叶生物科
技有限公司）；乙醇（９５％，天津市富宇精细化工有限
公司，分析纯），ＤＥＡＥ－５２纤维素填料（美国 Ｗｈａｔ－
ｍａｎ公司），Ｓｅｐｈａｄｅｘ　Ｇ－１５０填料（Ｐｈａｒｍａｃｉａ 公
司），其它试剂均为分析纯。
２　实验方法与结果
２．１　刺糖多糖的分离、纯化［２］　刺糖原药材经石油
醚回流提取进行脱脂，再经９５％乙醇回流提取以除
去小分子醇溶物，滤渣挥干，按滤渣－水＝１∶９，７０℃
回流提取１．５ｈ，提取２次，过滤，合并滤液，减压浓
缩至原体积的１／４，加入９５％乙醇至最终醇浓度为
８０％，５℃静置２４ｈ，抽滤，收集沉淀，以Ｓｅｖａｇ法除
去蛋白，重复操作１０次，浓缩，冻干，得到粗多糖，提
取率为１０．２％。除去蛋白后的多糖上ＡＢ－８大孔吸
附树脂柱，以除去色素及蛋白质，蒸馏水洗脱，收集、
合并洗脱液，浓缩，上ＤＥＡＥ－５２纤维素柱，分别以
蒸馏水及０．１、０．２、０．４、０．６、０．８、１．０ｍｏｌ／Ｌ 的
ＮａＣｌ溶液梯度洗脱，得到各洗脱组分，将 ＮａＣｌ溶
液洗脱部分对蒸馏水透析除盐。再将各洗脱组分分
别上ｓｅｐｈａｄｅｘ　Ｇ－１５０葡聚糖凝胶柱，以蒸馏水洗
脱，得到１１个精制多糖：ＡＰ１－１、ＡＰ１－２、ＡＰ１－３、
ＡＰ１－４、ＡＰ１－５、ＡＰ１－６、ＡＰ２－１、ＡＰ２－２、ＡＰ２－３、ＡＰ２－
４、ＡＰ２－５，其中多糖 ＡＰ１－３和 ＡＰ２－３为刺糖多糖的
主要组分，分别占总洗脱量的８％和１１％。
２．２　纯度鉴定［３］　取各精制多糖５ｍｇ，溶解于
１ｍＬ的蒸馏水中，上ｓｅｐｈａｄｅｘ　Ｇ－１５０凝胶柱色谱
（１．０ｃｍ×５０ｃｍ），以蒸馏水洗脱，硫酸－蒽酮法跟踪
检测，绘制洗脱曲线，可观察到各精制多糖组分的洗
脱曲线形态对称，峰形锐利，说明纯度较好，分子量
分布较为均一。
再将各精制多糖配制成浓度为１ｍｇ／ｍＬ的水
溶液，在１９０～８００ｎｍ范围内进行紫外－可见吸收光
谱的扫描，检测杂质含有情况。结果显示其紫外－可
见吸收光谱在２００ｎｍ处有一较强吸收峰，为多糖
１６４　第４期 菅丽君，等：刺糖多糖的分离纯化与基础结构分析
特征吸收峰；在２６０ｎｍ和２８０ｎｍ处（核酸和蛋白
质的特征吸收区）无明显紫外吸收峰，因此可推断多
糖样品中基本不含有核酸和蛋白质等杂质。
２．３　相对分子量测定［４］　取葡聚糖标准品 Ｔ５、
Ｔ１０、Ｔ４０、Ｔ７０、Ｔ５００（分 子 量 为 ５、１０、４０、７０、
５００ｋＤａ）各５ｍｇ，分别上ｓｅｐｈａｄｅｘ　Ｇ－１５０凝胶柱色
谱（１．０ｃｍ×５０ｃｍ），硫酸－蒽酮法跟踪检测，绘制洗
脱曲线，计算出各葡聚糖标准品的洗脱体积Ｖｅ。同
法用已知分子量为２０００ｋＤａ的蓝色葡聚糖来测定
凝胶柱的空体积Ｖ０，以葡萄糖来测定凝胶柱的总柱
体积Ｖｔ。以有效分配系数Ｋａｖ为横坐标，分子量的
对数ｌｇＭｗ为纵坐标，制作标准曲线。
其中有效分配系数Ｋａｖ可由下式计算得到：
Ｋａｖ＝（Ｖｅ－Ｖ０）／（Ｖｔ－Ｖ０）
取各精制多糖组分５ｍｇ，同法分别上ｓｅｐｈａｄｅｘ
Ｇ－１５０凝胶柱层析，计算出各精制多糖的洗脱体积
和有效分配系数Ｋａｖ，根据绘制的分子量标准曲线，
计算出各精制多糖的分子量见表１。
表１　相对分子量测定结果
多糖样品 洗脱体积／ｍＬ　 Ｋａｖ　 ＬｇＭｗ 分子量 Ｍｗ／ｋＤａ
ＡＰ１－１　 ４３．０　 ０．３０３　６　 ４．９９８　８　 ９９．７
ＡＰ１－２　 ４９．０　 ０．４１０　７　 ４．７４１　０　 ５５．１
ＡＰ１－３　 ５０．５　 ０．４３７　５　 ４．６７６　５　 ４７．５
ＡＰ１－４　 ５６．０　 ０．５３５　７　 ４．４４０　１　 ２７．５
ＡＰ１－５　 ６０．０　 ０．６０７　１　 ４．２６８　２　 １８．５
ＡＰ１－６　 ６２．５　 ０．６５１　８　 ４．１６０　６　 １４．５
ＡＰ２－１　 ６８．０　 ０．７５０　０　 ３．９２４　３　 ８．４
ＡＰ２－２　 ７３．０　 ０．８３９　３　 ３．７０９　３　 ５．１
ＡＰ２－３　 ７５．０　 ０．８７５　０　 ３．６２３　４　 ４．２
ＡＰ２－４　 ７６．０　 ０．８９２　９　 ３．５８０　３　 ３．８
ＡＰ２－５　 ７９．０　 ０．９４６　４　 ３．４５１　５　 ２．８
２．４　单糖组成测定［５－７］　参照文献［５］中的实验
步骤，采用气相色谱法对精制多糖进行单糖组成
测定。气相色谱条件为：Ｒｔｘ－５毛细管柱（３０ｍ×
０．２５μｍ）；氢火焰离子化检测器（ＦＩＤ）；高纯氮气为
载气；１μＬ进样量；３０∶１的分流比；进样口温度为
２５０℃；检测器温度为２８０℃；柱温箱为起始温度
１５０℃，保持４ｍｉｎ，程序升温５℃／ｍｉｎ，终止温度
１６０℃，保持１０ｍｉｎ，再程序升温２０℃／ｍｉｎ，终止温
度为２００℃，保持２６ｍｉｎ。
在规定色谱条件下，得到混合标准单糖和各精
制多糖水解产物的气相色谱图，再通过标准曲线法
可计算得到各精制多糖的单糖组成摩尔比：多糖
ＡＰ１－１由甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成，摩尔比为
１．１０∶２．１９∶４．３２；多糖 ＡＰ１－２由阿拉伯糖、葡萄
糖和半乳糖组成，摩尔比为１．６６∶１２．０８∶２．９２；多
糖ＡＰ１－３由鼠李糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成，
摩尔比为２．１１∶３．８０∶４．１９∶７．４３；多糖ＡＰ１－４由鼠
李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成，摩尔
比为８．９１∶３．２９∶５．６０∶０．６７∶３．７６；多糖ＡＰ１－５
由甘露糖组成；多糖 ＡＰ１－６由甘露糖和葡萄糖组
成，摩尔比为８．８６∶７．２１；多糖 ＡＰ２－１由鼠李糖和
阿拉伯糖组成，摩尔比为１．６９∶１７．２０；多糖ＡＰ２－２
由鼠李糖和甘露糖组成，摩尔比为１．４３∶１２．９６；多
糖ＡＰ２－３由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半
乳糖组成，摩尔比为１０．６１∶７．７９∶２．５４∶３．９８∶
１．１６；多糖 ＡＰ２－４由阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖组
成，摩尔比为１．６２∶９．１３∶７．２９；多糖 ＡＰ２－５由
阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成，摩尔比为
６．８３∶８．５７∶１０．２２∶１．７８。
２．５　多糖ＡＰ１－３、ＡＰ２－３的结构分析　多糖ＡＰ１－３
和ＡＰ２－３为刺糖多糖的主要组分，故本实验对其
进行了更进一步的结构分析，以期得到更多的结
构信息。
２．５．１　部分酸水解［８］　取多糖 ＡＰ１－３、ＡＰ２－３各
１５ｍｇ，加入０．０５ｍｏｌ／Ｌ的三氟醋酸１ｍＬ，９０℃水
浴加热２ｈ，放冷后加入适量乙醇并减压蒸干，重复
多次以除去过量的三氟醋酸，对蒸馏水透析２４ｈ，
袋内和袋外部分分别收集，浓缩干燥，经２ｍｏｌ／Ｌ的
三氟醋酸水解和糖腈乙酰化反应（方法同“２．４”项），
后进行ＧＣ分析可知：ＡＰ１－３部分酸水解袋内水解
产物中含有鼠李糖、甘露糖和半乳糖，说明多糖
ＡＰ１－３的主链单糖残基为鼠李糖、甘露糖和半乳糖；
ＡＰ１－３部分酸水解袋外水解产物中含有葡萄糖，说
２６４ 新 疆 医 科 大 学 学 报 第３６卷　
明多糖ＡＰ１－３的末端残基和分支单糖残基为葡萄
糖；ＡＰ２－３部分酸水解袋内水解产物中含有鼠李糖、
阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖，说明多糖 ＡＰ２－３的主
链单糖残基为鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖；
ＡＰ２－３部分酸水解袋外水解产物中含有鼠李糖、阿
拉伯糖和甘露糖，说明多糖ＡＰ２－３的末端残基和分
支单糖残基为鼠李糖、阿拉伯糖和甘露糖。
２．５．２　高碘酸氧化与ｓｍｉｔｈ降解　参照文献［５］中
的实验步骤进行多糖 ＡＰ１－３、ＡＰ２－３的高碘酸氧化
与ｓｍｉｔｈ降解。多糖 ＡＰ１－３、ＡＰ２－３经高碘酸氧化
反应后均生成甲酸，说明这两种多糖结构中都可能
含有１→６或１→糖苷键；但消耗高碘酸钠的量与生
成甲酸的量之比明显＞２∶１，说明这２种多糖中还
可能存在大量消耗高碘酸钠但不生成甲酸的１→２
糖苷键、１→２，６糖苷键、１→４糖苷键、１→４，６糖苷
键或呋喃型１→糖苷键；多糖中所含单糖的量与消
耗的高碘酸钠的量之比为Ｒ，多糖ＡＰ２－３的Ｒ约等
于１，而多糖ＡＰ１－３的Ｒ略＞１，说明多糖ＡＰ１－３中
可能存在一些不消耗高碘酸钠的１→３糖苷键。
ＡＰ１－３的Ｓｍｉｔｈ降解产物通过ＧＣ分析只检测
到丙三醇，说明 ＡＰ１－３可能含有１→２糖苷键、１→
２，６糖苷键；ＡＰ２－３的Ｓｍｉｔｈ降解产物通过 ＧＣ分
析检测到乙二醇和丙三醇，说明ＡＰ２－３可能含有１
→糖苷键、１→６糖苷键、１→２糖苷键、１→２，６糖苷
键；２种多糖的Ｓｍｉｔｈ降解产物中都未检测出含有
丁四醇，说明可能均不含有１→４糖苷键、１→４，６糖
苷键。
３　讨论
本实验中采用的多糖提取方法是经过事先的正
交实验法确定的最佳提取方法。分离纯化所用的柱
色谱种类是根据多糖分子量较大这一特性而选取
的，因为大孔吸附树脂、纤维素以及葡聚糖凝胶柱色
谱都是分子筛分离原理。得到的１１个精制多糖组
分经检验证明纯度较好，说明采取的分离纯化方法
切实可行。
多糖的分离纯化效果直接影响着后续多糖结构
分析的准确性，如果经葡聚糖凝胶柱色谱分离纯化
得到的各多糖组分经纯度检验结果不理想，可以反
复经过葡聚糖凝胶柱色谱进行分离纯化，只收集洗
脱峰中间部位的洗脱液，这样多糖组分的得率会降
低，但纯度会提升。
气相色谱法测定多糖的单糖组成时，多糖样品
的完全酸水解是关键步骤，如果水解不完全会影响
测定结果的准确性，因此要严格控制完全酸水解的
条件。
参考文献：
［１］　菅丽君，常军民，李改茹．柱前衍生毛细管电泳法测定刺糖多糖
的单糖组成［Ｊ］．中国新药杂志，２０１２，２１（５）：７８－８１．
［２］　刘涛，马龙，赵军，等．琐琐葡萄多糖的提取及抗氧化能力研究
［Ｊ］．新疆医科大学学报，２００７，３０（１１）：１２３０－１２３２．
［３］　屠婕红，陈伟光，盛静，等．葎草多糖的提取分离及组成性质研
究［Ｊ］．北京中医药大学学报，２００８，３１（８）：５６１－５６４．
［４］　李军，蒋碧蓉，王海妹．海星多糖的分离纯化及鉴定［Ｊ］．食品工
业科技，２０１０，３１（０２）：１２２－１２５．
［５］　张惟杰．糖复合物生化研究技术［Ｍ］．杭州：浙江大学出版社，
２００３：３８－４０．
［６］　帕丽达·阿不力孜，丛媛媛，王勇，等．阿里红多糖的气相色谱
和红外光谱［Ｊ］．光谱实验室，２０１１，２８（４）：２１４７－２１５０．
［７］　张艳萍，俞远志，张虹．气相色谱分析生地黄多糖的单糖组成及
其含量［Ｊ］．中国中药杂志，２００９，３４（４）：４１９－４２１．
［８］　颜军，孙晓春，谢贞建，等．苦荞多糖的分离纯化及单糖组成测
定［Ｊ］．食品科学，２０１１，３２（１９）：３３－３６．
［收稿日期：２０１３－０１－２８］
（本文编辑　杨晨晨）
３６４　第４期 菅丽君，等：刺糖多糖的分离纯化与基础结构分析