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３　讨论
配制十二烷基硫酸钠－正丁醇－正辛烷－水微乳流
动相，将该流动相分别稀释成表面活性剂的浓度为
０．１４，０．１０，０．０６９，０．０５２，０．０４２，０．０２６，０．０２０和
０．１７ｍｏｌ·Ｌ－１，考察不同十二烷基硫酸钠浓度对丹
参２个有效成分的洗脱和分离情况。结果表明，当十
二烷基硫酸钠的浓度降低到０．０５２ｍｏｌ·Ｌ－１以下时，
隐丹参酮和丹参酮ⅡＡ不能被洗脱；对比０．１４，０．１０
和０．０６９ｍｏｌ·Ｌ－１，随着十二烷基硫酸钠浓度的降
低，脂溶性成分的理论板数都降低，而保留因子都增
大，并且当十二烷基硫酸钠浓度为０．１４ｍｏｌ·Ｌ－１
时，２个脂溶性成分都可以达到基线分离，出峰时间
适宜，可以在３５ｍｉｎ内完成对２个成分的分析。故
确定十二烷基硫酸钠的浓度为０．１４ｍｏｌ·Ｌ－１。
本研究对不同提取方法效果进行了考察，比较甲
醇超声提取、微乳超声提取和甲醇加热回流提取３种
方法。结果显示，在３种提取方法中，隐丹参酮加热
回流提取的含量最高，而丹参酮ⅡＡ是甲醇超声提
取的含量最高。加热回流提取含量降低的原因可能
是，丹参酮ⅡＡ对热不稳定，长时间的高温会使丹参
酮ⅡＡ部分分解。因此，选用甲醇超声进行提取。
参考文献：
［１］　国家药典委员会．中国药典２０１０年版［Ｓ］．一部．北
京：中国医药科技出版社，２０１０：７０－７１．
［２］　刘园庆，刘丽君，姚芳琦．丹参的药理作用及临床应用
［Ｊ］．中外医疗，２００８，（１９）：９１．
［３］　Ｙａｎ－Ｘｕ　Ｃｈａｎｇ，Ｘｉａｏｐｉｎｇ　Ｄｉｎｇ．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｈｅ－
ｎｏｌｉｃ　ａｃｉｄｓ　ｉｎ　Ｄａｎｓｈｅｎ　Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ　ｂｙ　ＬＣ　ｗｉｔｈ　ｃｈｅｍｉ－
ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉａ，２００９，６９：
３１９－３２３．
［４］　刘梅，侴桂新，张勉，等．超高效液相色谱法同时测定丹
参药材中丹酚酸Ｂ和丹参酮ⅡＡ 的含量［Ｊ］．中国中
药杂志，２００８，３３（３）：３１９－３２１
［５］　邱丽丽，容蓉，蒋海强，等．高效液相色谱法同时测定丹
参提取物中４种成分的含量［Ｊ］．分析实验，２００９，２８
（Ｓ１）：２３－２６．
［６］　任志会，苏会霞，柏艳柳．丹参脂溶性及水溶性成分集
成提取工艺研究［Ｊ］．中国中医药信息杂志，２００９，１６
（３）：５４－５６．
［７］　余萍，郭大全，王冬．微乳液高效液相色谱的发展与应
用［Ｊ］．理化检验－化学分册，２０１１，４７（２）：２４８－２５２．
［８］　张守尧，姚育法．微乳液相色谱法及研究进展［Ｊ］．中国
药师，２００９，１２（７）：８８４－８８６．
（收稿日期：２０１４－０４－０８）
藏药榜嘎中的双酯型和内酯型生物碱分析方法研究
康　慧１，骆桂法２＊，杨凤梅２（１．青海省人民医院，西宁　８１０００７；２．青海省食品药品检验所，西宁　８１００１６）
摘要：目的　建立藏药榜嘎中双酯型和内酯型生物碱的测定方法，为榜嘎的质量标准提高提供参考。方法　采用高效液相色谱
法。色谱柱为：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｓ　ｌｕｎａ　Ｃ１８（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ）；流速：１．０ｍＬ·ｍｉｎ
－１。双酯型生物碱的流动相为：Ａ为乙腈－四
氢呋喃（２５∶１５），Ｂ为０．１ｍｏｌ·Ｌ－１醋酸铵溶液（每１　０００ｍＬ加冰乙酸０．５ｍＬ），梯度洗脱；检测波长为２３５ｎｍ；柱温为室温。
内酯型生物碱的流动相为甲醇－水－氯仿－三乙胺（７０∶３０∶２∶０．１）；检测波长２３０ｎｍ；柱温３０℃。结果　榜嘎中均不含新乌头
碱、乌头碱、次乌头碱等双酯型生物碱；内酯型生物碱：阿替新在２．０２４～２０．２４μｇ范围内线性关系良好，线性方程：Ｙ＝１．９１８×
１０４　Ｘ－６７８（ｒ＝０．９９９　９），平均回收率９７．３％，ＲＳＤ＝０．９％；异叶乌头碱在２．００８～２０．０８μｇ范围内线性关系良好，线性方程：Ｙ
＝１．６０２×１０４　Ｘ－２１５（ｒ＝０．９９９　９），平均回收率９８．６％，ＲＳＤ＝１．４％。结论　该方法准确，可靠，专属性强，可用于榜嘎的质量
控制。
关键词：榜嘎；唐古特乌头；船形乌头；阿替新；异叶乌头碱；高效液相色谱
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００４－２４０７．２０１４．０５．００２
中图分类号：Ｒ２８４　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００４－２４０７（２０１４）０５－０４４３－０４
Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ａｎａｌｙｔｉｃａｌ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　ｄｉｅｓｔｅｒ－ｔｙｐｅ　ａｎｄ　ｌａｃｔｏｎｅ－ｔｙｐｅ　ａｌｋａｌｏｉｄｓ　ｉｎ　Ｔｉｂｅｔａｎ
ｍｅｄｉｃｉｎｅ　Ｂａｎｇｇａ
ＫＡＮＧ　Ｈｕｉ　１，ＬＵＯ　Ｇｕｉｆａ２＊，ＹＡＮＧ　Ｆｅｎｇｍｅｉ　２（１．Ｑｉｎｇｈａｉ　Ｐｒｏｖｉｎｃｉａｌ　Ｐｅｏｐｌｅ′ｓ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｘｉｎｉｎｇ　８１０００７，Ｃｈｉｎａ；２．Ｑｉｎｇｈａｉ　Ｉｎｓｔｉｔｕ－
ｔｅ　ｆｏｒ　Ｆｏｏｄ　ａｎｄ　Ｄｒｕｇ　Ｃｏｎｔｒｏｌ，Ｘｉｎｉｎｇ　８１００１６，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ａｎ　ＨＰＬＣ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｄｉｅｓｔｅｒ－ｔｙｐｅ　ａｎｄ　ｌａｃｔｏｎｅ－ｔｙｐｅ　ａｌｋａｌｏｉｄｓ　ｉｎ　Ｂａｎｇｇａ（ａ
Ｔｉｂｅｔａｎ　ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　ｍｅｄｉｃｉｎｅ）．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅ　ｃｏｌｕｍｎ　ｗａｓ　Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ　ｌｕｎａ　Ｃ１８（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ），ａｎｄ　ｔｈｅ　ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ　ｗａｓ
１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１．Ｔｈｅ　ｄｉｅｓｔｅｒ－ｔｙｐｅ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ　ｗａｓ　Ａ　ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ－ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｕｒａｎ（２５∶１５），Ｂ　０．１ｍｏｌ·Ｌ－１　ａｍｍｏｎｉｕｍ　ａｃｅｔａｔｅ
ｓｏｌｕｔｉｏｎ（ａｄｄ　０．５ｍＬ　ｇｌａｃｉａｌ　ａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ　ｐｅｒ　１　０００ｍＬ），ｇｒａｄｉｅｎｔ　ｅｌｕｔｉｏｎ，ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｗａｓ　２３５ｎｍ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｏｌｕｍｎ
３４４西北药学杂志　２０１４年９月　第２９卷　第５期
ｈｔｔｐ：／／ＸＢＹＺ．ｃｂｐｔ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ
ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｗａｓ　ａｔ　ｒｏｏｍ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ．Ｔｈｅ　ｌａｃｔｏｎｅ－ｔｙｐｅ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ　ｗａｓ　ｍｅｔｈａｎｏｌ－ｗａｔｅｒ－ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ－ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（７０∶３０∶２∶
０．１）．Ｔｈｅ　ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１，ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｗａｓ　２３０ｎｍ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｏｌｕｍｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｗａｓ　ａｔ　３５℃．Ｒｅ－
ｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅｒｅ　ｉｓ　ｎｏ　ｄｏｕｂｌｅ　ｔｈａｔ　ｅｓｔｅｒ　ａｌｋａｌｏｉｄｓ　ｓｕｃｈ　ａｓ　ａｃｏｎｉｔｉｎｅ，ｎｅｗ　ａｃｏｎｉｔｉｎｅ，ａｎｄ　ｈｙｐａｃｏｎｉｔｉｎｅ　ｅｘｉｓｔ　ｉｎ　Ｂａｎｇｇａ．Ｔｈｅ　ｌｉｎｅａｒｉｔｙ　ｒａｎｇｅ
ｏｆ　ａｔｉｓｉｎｅ　ｗａｓ　２．０２４－２０．２４μｇ，Ｙ＝１．９１８×１０
４　Ｘ－６７８（ｒ＝０．９９９　９），ａｎｄ　ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｗａｓ　９７．３％，ＲＳＤ＝０．９％；Ｔｈｅ　ｌｉｎ－
ｅａｒｉｔｙ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ　ｈｅｔｉｓｉｎｅ　ｗａｓ　２．００８－２０．０８μｇ，Ｙ＝１．６０２×１０
４　Ｘ－２１５（ｒ＝０．９９９　９），ａｎｄ　ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｗａｓ　９８．６％，ＲＳＤ＝
１．４％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ａｃｃｕｒａｔｅ，ｒｅｌｉａｂｌｅ　ａｎｄ　ｓｐｅｃｉｆｉｃ．Ｉｔ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｆ　Ｂａｎｇｇａ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｂａｎｇｇａ；Ｈｅｒｂａ　ａｃｏｎｉｔｅ　Ｔａｎｇｕｔｉｃｉ；Ａｃｏｎｉｔｕｍ　ｎａｖｉｃｕｌａｒｅ　Ｓｔａｐｆ；ａｔｉｓｉｎｅ；ｈｅｔｉｓｉｎｅ；ＨＰＬＣ
基金项目：国家民族药标准提高项目（编号：２０１１－７１３）
作者简介：康慧，女，主管药师
＊通信作者：骆桂法，男，主任药师
　　历代藏医药书籍对榜嘎均有记载。《蓝琉璃》［１］
记载：“本品基生叶三、四片，茎叶稍小，或深裂为七、
八片，茎小而柔，花白色有蓝红光泽。解时疫毒，清胆
热。”《晶珠本草》［２］记载：“榜嘎性凉，解瘟毒，清胆热，
洗毒蛇咬伤；生高山碎石隙和高山草甸，其块根状如
小象犬牙，叶翠绿，花螺状，甚美”。现藏医所用榜嘎，
原植物为毛茛科植物唐古特乌头Ａｃｏｎｉｔｕｍ　ｔａｎｇｕｔｉ－
ｃｕｍ （Ｍａｘｉｍ．）Ｓｔａｐｆ和船盔乌头（船形乌头）Ａｃｏｎｉ－
ｔｕｍ　ｎａｖｉｃｕｌａｒｅ（Ｂｒｕｈｌ．）Ｓｔａｐｆ，以全草入药，与上述
记载相符，收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》
藏药第一册［３］。唐古特乌头和船形乌头为多年生直
立草本，青海、甘肃、云南、四川、西藏少部分地区等地
多用唐古特乌头，西藏大部分地区用船形乌头，在《部
颁标准》和《中国药典》藏药成方制剂中约有４１个品
种处方中含有榜嘎，约占２０％左右，是常用的藏药材
之一。据文献报道［４］，榜嘎全草含阿替辛、异叶乌头
碱、杂阿替辛、唐乌碱等毒性较小的内酯型生物碱。
本文经过实验研究也证明榜嘎中不含剧毒成分的双
酯型生物碱，同时对这２种植物特征性成分进行了研
究，为榜嘎的质量标准制定提供科学依据。
１　仪器与试药
１．１　仪器　日本岛津ＳＩＬ－２０Ａ型高效液相色谱仪
（二极管阵列检测器）；ＫＱ５２００Ｂ型超声波清洗器（４０
ｋＨｚ，２００Ｗ，昆山市超声仪器有限公司）。
１．２　试药　乌头碱对照品（中国药品生物制品检定
院，批号１１０７２０－２００４１０）；次乌头碱对照品（中国药
品生物制品检定院，批号１１０７９８－２００４０４１２）；新乌头
碱（中 国 药 品 生 物 制 品 检 定 院，批 号 １１０７９９－
２００４０４）；阿替新（Ｓｉｇｍａ公司）；异叶乌头碱（Ｓｉｇｍａ公
司）；乙腈、甲醇（进口色谱纯）；其他试剂为分析纯。
药材收集１０批，见表１。
２　方法与结果
２．１　榜嘎药材中双酯型生物碱乌头碱类成分的
ＨＰＬＣ分析
表１　不同产地榜嘎药材
Ｔａｂ．１Ｂａｎｇｇａ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｏｒｉｇｉｎｓ
编号 供　样 产　地
１ 自采样品（青海）唐古特乌头 Ａｃｏｎｉｔｕｍ
ｔａｎｇｕｔｉｃｕｍ （Ｍａｘｉｍ．）Ｓｔａｐｆ
青海互助县
２ 西藏藏医学院藏药厂船盔乌头（船形乌
头）Ａｃｏｎｉｔｕｍ　ｎａｖｉｃｕｌａｒｅ（Ｂｒｕｈｌ．）Ｓｔａｐｆ
西藏
３ 西藏那曲地区唐古特乌头Ａｃｏｎｉｔｕｍ　ｔａｎ－
ｇｕｔｉｃｕｍ （Ｍａｘｉｍ．）Ｓｔａｐｆ
西藏
４ 金诃藏药股份有限公司唐古特乌头Ａｃｏ
ｎｉｔｕｍｔａｎｇｕｔｉｃｕｍ （Ｍａｘｉｍ．）Ｓｔａｐｆ
青海
５ 青海久美藏药药业有限公司唐古特乌头
Ａｃｏｎｉｔｕｍ　ｔａｎｇｕｔｉｃｕｍ （Ｍａｘｉｍ．）Ｓｔａｐｆ
西藏
６ 青海东格尔药业有限公司提供唐古特乌头
Ａｃｏｎｉｔｕｍ　ｔａｎｇｕｔｉｃｕｍ （Ｍａｘｉｍ．）Ｓｔａｐｆ
青海
７ 四川成都荷花池药材市场船盔乌头（船形乌
头）Ａｃｏｎｉｔｕｍ　ｎａｖｉｃｕＬａｒｅ（ＢｒｕｈＬ．）Ｓｔａｐｆ
四川
８ 青海晶珠藏药股份有限公司唐古特乌头
Ａｃｏｎｉｔｕｍ　ｔａｎｇｕｔｉｃｕｍ （Ｍａｘｉｍ．）Ｓｔａｐｆ
西藏
９ 青海格拉丹东藏药有限公司船盔乌头（船形
乌头）Ａｃｏｎｉｔｕｍ　ｎａｖｉｃｕＬａｒｅ（Ｂｒｕｈｌ．）Ｓｔａｐｆ
青海
１０ 青海柴达木药业有限公司唐古特乌头
Ａｃｏｎｉｔｕｍ　ｔａｎｇｕｔｉｃｕｍ （Ｍａｘｉｍ．）Ｓｔａｐｆ
青海
２．１．１　色谱条件与系统适用性实验　Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ
ｌｕｎａ　Ｃ１８色谱柱（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ）；流动相
［５］：
Ａ为乙腈－四氢呋喃（２５∶１５），Ｂ为０．１ｍｏｌ·Ｌ－１醋酸
铵溶液（每１　０００ｍＬ加冰乙酸０．５ｍＬ）按表２梯度洗
脱；检测波长：２３５ｎｍ；柱温：室温；理论板数按乌头
碱峰计算大于３　０００。
表２　梯度洗脱方法
Ｔａｂ．２Ｇｒａｄｉｅｎｔ　ｅｌｕｔｉｏｎ　ｐｒｏｇｒａｍ
时间／ｍｉｎ 流动相Ａ比例／％ 流动相Ｂ比例／％
０→４８　 １５→２６　 ８５→７４
４８→４９　 ２６→３５　 ７４→６５
４９→５８　 ３５　 ６５
５８→６５　 ３５→１５　 ６５→８５
２．１．２　对照品溶液的制备　分别精密称取乌头碱对
照品７．１５ｍｇ、次乌头碱对照品１６．７５ｍｇ、新乌头碱
对照品７．３５ｍｇ，置于５０ｍＬ量瓶中，加二氯甲烷溶
４４４ 西北药学杂志　２０１４年９月　第２９卷　第５期
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解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液（每１ｍＬ含乌
头碱０．１４３ｍｇ·ｍＬ－１、次乌头碱０．３３５ｍｇ·ｍＬ－１、
新乌头碱０．１４７ｍｇ·ｍＬ－１）。
２．１．３　供试品溶液的制备　取榜嘎药材粉末（过三
号筛）约３ｇ，精密称定，置于具塞锥形瓶中，加氨水
６ｍＬ湿润，加入乙醚５０ｍＬ，超声５ｍｉｎ，放置过夜，
再超声５ｍｉｎ，放冷，滤过，残渣用乙醚１０ｍＬ分３次
洗涤，合并乙醚液，４０℃挥干，残渣用二氯甲烷溶解并
定容至２ｍＬ，摇匀，经微孔滤膜（０．４５μｍ）滤过，即得。
在上述色谱条件下，分别精密吸取药材溶液各
２０μＬ、对照品溶液１０μＬ，注入色谱仪。榜嘎药材色
谱图中，在与乌头碱、次乌头碱、新乌头碱对照品色谱
图相应保留时间处，无相同的色谱峰。结果表明，榜
嘎药材（唐古特乌头和船形乌头）不含双酯型乌头碱
类成分。
２．２　榜嘎药材中内酯型生物碱阿替新、异叶乌头碱
的 ＨＰＬＣ分析
２．２．１　色谱条件与系统适用性实验　色谱柱：Ｐｈｅ－
ｎｏｍｅｎｅｘ　Ｃ１８柱（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ）；流动相
为甲醇－水－氯仿－三乙胺（７０∶３０∶２∶０．１）［６］；流速
１ｍＬ·ｍｉｎ－１；柱温３０ ℃；检测波长２３０ｎｍ。按
阿替新计，色谱柱理论板数不低于 ３　０００。色谱
图见图１。
图１　ＨＰＬＣ图
Ａ．阿替新对照品；Ｂ．异叶乌头碱对照品；Ｃ．样品１（唐古特乌
头，自采，经鉴定）；
Ｄ．样品３（船形乌头，企业提供）；１．阿替新；２．异叶乌头碱
Ｆｉｇ．１ＨＰＬＣ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ
Ａ．ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅ　ｏｆ　ａｔｉｓｉｎｅ；Ｂ．ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅ　ｏｆ　ｈｅ－
ｔｉｓｉｎｅ；Ｃ．ｓａｍｐｌｅ　１（Ａｃｏｎｉｔｕｍ　ｔａｎｇｕｔｉｃｕｍ （Ｍａｘｉｍ．）Ｓｔａｐｆ）；
Ｄ．ｓａｍｐｌｅ　３（Ａｃｏｎｉｔｕｍ　ｎａｖｉｃｕｌａｒｅ（Ｂｒｕｈｌ．）Ｓｔａｐｆ）；１．ａｔｉｓｉｎｅ；
２．ｈｅｔｉｓｉｎｅ
２．２．２　对照品溶液的制备　精密称取阿替新、异叶
乌头碱适量，分别加二氯甲烷制成１ｍＬ约含１．０１２和
１．００４ｍｇ的对照品储备溶液。分别精密吸取储备液
１ｍＬ，置于具塞试管中，精密加入０．０１ｍｏｌ·Ｌ－１硫
酸溶液１ｍＬ，涡旋２ｍｉｎ，离心５ｍｉｎ，取上清液，
即得。
２．２．３　供试品溶液的制备　取本品粉末（过三号
筛），约５ｇ，精密称定，置于１００ｍＬ锥形瓶中，加氨
水６ｍＬ，湿润，加乙醚５０ｍＬ，超声处理５ｍｉｎ，浸泡
过夜，放冷，再超声处理５ｍｉｎ，放冷，滤过，滤渣用乙
醚洗涤３次，合并乙醚液，滤液在６０℃下挥干，残渣用
二氯甲烷溶解并定量转移至５ｍＬ量瓶中。精密吸取
１ｍＬ，置于具塞试管中，精密加入０．０１ｍｏｌ·Ｌ－１硫酸
溶液１ｍＬ，涡旋２ｍｉｎ，离心５ｍｉｎ（５　０００ｒ·ｍｉｎ－１），
取上清液经微孔滤膜（０．４５μｍ）滤过，即得。
２．３　线性考察　精密吸取上述阿替新和异叶乌头碱
对照品溶液２，４，６，８和１０μＬ，注入液相色谱仪，在
上述色谱条件下，测定峰面积，以对照品进样量为横
坐标、对照品峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，求得回
归方程。阿替新进样量在２．０２４～２０．２４μｇ范围内
线性关系良好，线性方程：Ｙ＝１９　１７６　Ｘ－６７８（ｒ＝
０．９９９　９）；异叶乌头碱进样量在２．００８～２０．０８μｇ范
围内线性关系良好，线性方程：Ｙ＝１６　０１８　Ｘ－２１５
（ｒ＝０．９９９　９）。
２．４　精密度实验　精密吸取混合对照品溶液５μＬ，
连续进样５次，阿替新峰面积的ＲＳＤ为０．８４％，异
叶乌头碱峰面积的 ＲＳＤ为０．６７％，表明精密度
良好。
２．５　重复性实验　取榜嘎药材粉末５份，分别按
２．２．３项下的供试品溶液制备方法制成供试品溶液，
精密吸取５μＬ注入液相色谱仪，在上述色谱条件下
测定，计算阿替新、异叶乌头碱的含量，结果阿替新平
均含量为０．６３７ｍｇ·ｇ－１，ＲＳＤ为０．９７％；异叶乌头
碱平均含量为０．４９４ｍｇ·ｇ－１，ＲＳＤ为０．５４％，表明
该方法重复性良好。
２．６　稳定性实验　取同一供试品溶液５μＬ，每隔
２ｈ进样，测得峰面积值，阿替新ＲＳＤ＝０．８６％，异叶
乌头碱ＲＳＤ＝０．９３％。结果表明：供试品溶液在８ｈ
内所测得结果基本稳定。
２．７　加样回收率实验　精密称取已知含量的样品
（青海金诃药业有限公司提供）６份，约２．５ｇ，分别精
密加入混合对照品溶液１．５ｍＬ，低温挥干，按２．２．３
项下的方法制成供试品溶液，并按上述色谱条件测定
阿替新、异叶乌头碱含量，计算回收率。结果阿替新
和异叶乌头碱平均回收率分别为９７．３２％（ＲＳＤ＝
０．９３％）和９８．５６％（ＲＳＤ＝１．３７％），结果表明，该方
法准确。见表３。
５４４西北药学杂志　２０１４年９月　第２９卷　第５期
ｈｔｔｐ：／／ＸＢＹＺ．ｃｂｐｔ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ
表３　回收率实验结果
Ｔａｂ．３Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｔｅｓｔ
样品含量／ｍｇ 对照品加入量／ｍｇ 测得量／ｍｇ 回收率／％ 平均回收率／％ ＲＳＤ／％
阿替新 异叶乌头碱 阿替新 异叶乌头碱 阿替新 异叶乌头碱 阿替新 异叶乌头碱 阿替新 异叶乌头碱 阿替新 异叶乌头碱
１．５７７　 １．２２３　 １．５１８　 １．５０６　 ３．０４８　 ２．７０９　 ９６．９０　 ９８．６７
１．５９３　 １．２３５　 １．５１８　 １．５０６　 ３．０７９　 ２．７２９　 ９７．８９　 ９９．２０
１．６０８　 １．２４７　 １．５１８　 １．５０６　 ３．０９８　 ２．７６１　 ９８．１６　 １００．５３　 ９７．３２　 ９８．５６　 ０．９３　 １．３７
１．５８８　 １．２３２　 １．５１８　 １．５０６　 ３．０４２　 ２．６８４　 ９５．７８　 ９６．４１
１．５７９　 １．２２５　 １．５１８　 １．５０６　 ３．０６７　 ２．７０３　 ９８．０２　 ９８．１４
１．６０１　 １．２４２　 １．５１８　 １．５０６　 ３．０７６　 ２．７２６　 ９７．１７　 ９８．４１
２．８　样品测定　取１０个厂家提供的样品１０批，按
２．２．３项下的方法制成供试品溶液。精密吸取上述
对照品溶液与供试品溶液各５μＬ，分别注入色谱仪，
按上述色谱条件测定，计算阿替新、异叶乌头碱的含
量。结果样品编号为１，２，３，４，５，６，７，８，９和１０的阿
替新含量分别为０．８４，０．５２，０．７８，０．６４，０．４６，０．６４，
０．４６，０．６３，０．４２和０．５７ｍｇ·ｇ－１；异叶乌头碱含量
分别为０．６５，０．４５，０．５４，０．５０，０．５１，０．６２，０．５５，
０．６２，０．４６和０．７４ｍｇ·ｇ－１。
３　讨论
采用回流提取和超声提取，提取效率相当，故采
用较为简单的超声提取方法。
曾用《中国药典》制草乌项下的方法与文献报道
的提取方法，在色谱分离上无大的差异，但采用《中国
药典》项下的流动相梯度洗脱，耗时且在分离过程中
易向上漂移；后经摸索用文献报道的流动相，将对照
品和样品酸化后进样，峰形尖锐，对称性好。
藏药榜嘎为藏文音译名“榜阿嘎保”的简称，所用
药材为唐古特乌头和船形乌头，另一种藏药榜玛的音
译名“榜阿玛保”所用药材为褐紫乌头；还有一种藏药
榜那的音译名为“榜阿那保”，所用药材为铁棒锤和工
布乌头等，前２种有解毒作用，后一种有大毒，应加以
区别。
榜嘎是属于唐古特乌头系，植物化学分类上可将
此系称为内酯型二萜生物碱类群。此类群植物花粉
粒形态有一定差异［７］，其毒性在乌头属中最小，所含
生物碱成分是以内酯型二萜生物碱为主，实验也表
明，榜嘎不含毒性较大的双酯型生物碱（乌头碱类）成
分，这与《蓝琉璃》和《晶珠本草》记载及藏医用以解时
疫毒、清胆热相符合。
参考文献：
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第一卷［Ｍ］．上海：上海科学技术出版社，１９９６：３１８．
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出版社，１９８６：１４６．
［３］　中国卫生部药典委员会．中华人民共和国卫生部药品
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１９９５：３３０．
［４］　肖培根，王锋鵬，高峰．中国乌头属植物药用亲缘学研
究［Ｊ］．植物分类学学报，２００６，４４（１）：１－４６．
［５］　国家药典委员会．中国药典２０１０年版［Ｓ］．一部．北京：
中国医药科技出版社，２０１０：３６，２２０．
［６］　高宇明，曾锐．ＨＰＬＣ法测定藏药榜嘎中阿替新、异叶
乌头碱的含量［Ｊ］．中国民族民间医药，２００９，（１１）：
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［７］　张静，孙芸，王红丽，等，新疆地产乌头属６种植物及川
乌花粉形态研究［Ｊ］．西北药学杂志，２０１３，５（２８）：
４５３－４５４．
（收稿日期：２０１４－０４－１６）
黄翘ＨＰＬＣ指纹图谱研究
崔誉文１，杨黎彬１，杨　静１，许苗苗２，程茜菲２，宋小妹２＊，崔九成２（１．西安医学院，西安　７１００２１；２．陕西中医学院，咸
阳　７１２０４６）
摘要：目的　建立黄翘 ＨＰＬＣ指纹图谱，为黄翘的质量控制提供理论依据。方法　色谱柱：Ｔｈｅｒｍｏ　Ｃ１８ Ｃｏｌｕｍｎ（２５０ｍｍ ×
４．６ｍｍ，５μｍ）；流动相：乙腈－水，梯度洗脱；检测波长：２０３ｎｍ。结果　生成了黄翘的对照指纹图谱，标定了１７个共有峰，并确
定连翘苷、连翘酯苷Ａ和表松脂素各峰的归属。结论　黄翘的 ＨＰＬＣ指纹图谱稳定，重复性良好，信息涵盖量大，为进一步科学
评价黄翘的质量提供依据。
关键词：黄翘；连翘苷；连翘酯苷Ａ；表松脂素；ＨＰＬＣ；指纹图谱
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００４－２４０７．２０１４．０５．００３
中图分类号：Ｒ２８４．１　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００４－２４０７（２０１４）０５－０４４６－０４
６４４ 西北药学杂志　２０１４年９月　第２９卷　第５期