全 文 ：通讯作者:唐秀玲 Tel:(0771)2611653 E-mail:tangxiuling1@ 163． com
白背叶根质量标准的建立
唐秀玲1 罗轶1 黄清泉1 唐秀利2 (1．广西食品药品检验所 南宁 530021;2．柳州市柳铁中心医院)
摘 要 目的:完善和提高白背叶根的质量标准。方法:显微鉴别白背叶根横切面和粉末;采用 TLC法对白背叶根水溶性成
分和脂溶性成分进行定性鉴别;特征图谱采用 HPLC法以芦丁为参照物确定各特征峰的相对保留时间及相对峰面积，色谱柱:
SPOLAＲ C18柱(250 mm ×4． 6 mm，5 μm) ，流动相:乙腈-0． 4%磷酸溶液梯度洗脱;检测波长为 328 nm;流速:1． 0 ml·min
－1;柱
温:35℃。结果:显微特征明显;薄层色谱斑点圆整、清晰、重复性好。特征图谱供试品色谱呈现 5 个特征峰，与参照物(芦丁)
峰的相对保留时间应在规定值 ± 5%之内，其中峰 3、峰 4 相对峰面积不低于0． 23和0． 66。结论:所建立的方法简便快捷，重复
性好，结果准确可靠，能有效控制白背叶根质量，可作为白背叶根的质量标准的主要控制指标。
关键词 白背叶根;显微鉴别;薄层色谱法;高效液相色谱法;特征图谱
中图分类号:Ｒ282． 5 文献标识码:A 文章编号:1008-049X(2015)03-0508-04
Establishment of Quality Standard for Malloti Apeltae Ｒadix
Tang Xiuling1，Luo Yi1，Huang Qingquan1，Tang Xiuli2(1． Guangxi Institute for Food and Drug Control，Nanning 530021，China;2．
Liuzhou Liutie Central Hospital)
ABSTＲACT Objective:To perfect and improve the quality standard of Malloti Apeltae Ｒadix． Methods:Microscopic identification
was used to identify the transverse section and the powder． The water-soluble and the fat-soluble components were identified by TLC．
Ｒutin was used as the reference in the characteristic chromatogram established by HPLC to determine the relative retention time and rel-
ative peak area of each characteristic absorption band． A SPOLAＲ C18 chromatographic column (250 mm ×4． 6 mm，5 μ m)was used
with acetonitrile-0． 4% phosphate solution as the mobile phase with gradient elution，the detection wavelength was set at 328 nm，the
flow rate was 1． 0 ml·min －1，and the temperature was 35℃ ． Ｒesults:The microscopic characteristics were obvious． The spots of
TLC were round and clear with good repeatability． Five characteristic absorption bands were shown in the fingerprints with the relative
retention time within ± 5% of reference value of rutin，and the relative area of peak 3 and peak 4 was not lower than 0． 23 and 0． 66，
respectively． Conclusion:The method is convenient，fast and repeatable，and the result is accurate and reliable，which can be used to
control the quality of Malloti Apeltae Ｒadix effectively，and as the main index of the quality standard．
KEY WOＲDS Malloti Apeltae Ｒadix;Microscopic identification;TLC;HPLC;Characteristic chromatogram
白背叶根为大戟科植物白背叶［Mallotus apelta(Lour．)
Muell． -Arg］的根及根茎。在《中药大辞典》、《中华本草》中
均有记载［1，2］。具有清热、祛湿，收涩，消瘀等功效;主治慢
性肝炎，肝脾肿大，子宫下垂，跌打扭伤等症［2］，药理研究表
明，白背叶根具有较好的抗肝纤维化作用和抗氧化能力，在
体外细胞培养中具有直接抗乙型肝炎病毒(HBV)活性，并
在体内具有抑制鸭乙型肝炎病毒(D-HBV)复制的作用［3，5］，
这与其传统功能主治治疗慢性肝炎等症相符合。现代应用
中白背叶根常用以治疗妇科炎症，为妇科中成药“花红片”
“花红颗粒”“花红胶囊”的主要原料之一，随着中医药发展
及中成药生产规模的不断扩大，白背叶根的应用已越来越广
泛，如何科学、有效、合理的控制白背叶根药材的质量已迫在
眉睫。
目前有关白背叶根化学成分研究较少［6 ～ 8］，其质量标准
收载于《广西中药材标准》第 2 册［9］。只有显微鉴别、理化
鉴别及薄层色谱鉴别，不能有效控制白背叶根药材质量。根
据《中国药典》2015 年版一部科研立项课题:中药材和饮片
部分专题十四中药材和饮片质量标准增修订———白背叶根
的要求，对其药材质量标准提高进行了深入研究。完善了性
状项;制定了根横切面和粉末特征显微鉴别;以白背叶根为
对照药材，制订了本品水溶性成分和脂溶性成分两个 TLC
鉴别;增加了水分、总灰分、酸不溶性灰分检查及浸出物检
查;用 HPLC法建立本品特征图谱。所制定的显微鉴别特征
明显，TLC鉴别斑点圆整、清晰，重复性好，检查项各指标限
度合理。用 HPLC法检查特征图谱，采用甲醇回流提取制备
供试品，用乙腈-0． 4%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱，所
得各特征峰分离良好。按照《中国药典》2010 年版一部附
录［10］“中药质量标准分析方法验证指导原则”进行方法学验
证，结果表明该方法专属性强、稳定性、重复性好，结果可靠。
完善和提高后的白背叶根质量标准，能有效控制白背叶根的
质量。
1 仪器与试药
1． 1 仪器
徕卡 DM2000 /DFC450 数码显微成像系统;CAMAG TLC
VISUALIZEＲ薄层色谱数码成像系统;Waters 2695 高效液相
色谱仪，2487 紫外检测器;美国 Agilent1100 型高效液相色谱
仪;戴安 Ultimate 3000 型高效液相色谱仪;岛津 LC-20A 型
高效液相色谱仪，SPD-M20A 检测器;MILLI-POＲE 纯水处理
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www． zgys． org 研究简报
器;HETTICH MIKＲO 22Ｒ 型高速冷冻离心机;梅特勒
AB204-S电子分析天平。
1． 2 试药
芦丁(批号:100080-200707，供含量测定用，高效液相色谱
用含量为90． 5%)购自中国食品药品检定研究院。乙腈为色
谱纯，水为高纯水，其它试剂均为分析纯。15 批白背叶根分
别采集或购买于广西各地，经本所黄清泉老师鉴定为大戟科
植物白背叶［Mallotus apelta(Lour．)Muell． -Arg］的根及根茎。
表 1 白背叶根样品信息
编号 药用部位 采集 /购买地点 批号
BBYG-1 根及根茎 广西南宁 20130106
BBYG-2 根及根茎 广西柳城县 20130101
BBYG-3 根及根茎 广西来宾县 20121202
BBYG-4 根及根茎 广西象州石龙镇 20121006
BBYG-5 根及根茎 广西象州县 20130102
BBYG-6 根及根茎 广西柳州穿山镇 20130302
BBYG-7 根及根茎 广西忻城县 20130301
BBYG-8 根及根茎 广西桂林荔浦县 20130402
BBYG-9 根及根茎 广西金秀县 20130602
BBYG-10 根及根茎 广西柳江县 20130401
BBYG-11 根及根茎 广西象州县 20120910
BBYG-12 根及根茎 广西来宾武宣县 20130301
BBYG-13 根及根茎 广西象州县 20130302
BBYG-14 根及根茎 广西象州县 20130401
BBYG-15 根及根茎 广西象州县 20130102
2 方法与结果
2． 1 显微鉴别
2． 1． 1 根横切面 木栓层为数至十数列细胞，易脱落。皮
层宽，薄壁细胞多皱缩，有的含黄色或红棕色物;纤维壁厚，
数个至十数个成束，切向延伸或散在，周围薄壁细胞或含草
酸钙方晶;草酸钙簇晶散在薄壁细胞中。韧皮部纤维束较
多，断续排列成环。形成层不明显。木质部宽广，导管单个
或 2 ～ 4 个径向排列，木射线细胞 1 ～ 2 列。
2． 1． 2 粉末黄白色或浅灰黄色 薄壁细胞类方形或多边
形，壁微木化，内含黄色或红棕色物。纤维成束，直径 8 ～ 20
μm，壁厚，周围薄壁细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。具缘
纹孔导管多见，直径 20 ～ 120 μm。草酸钙簇晶单个散在或
存在于薄壁细胞中，直径 8 ～ 30 μm。
2． 2 TLC色谱鉴别
2． 2． 1 取本品粉末 5 g，加乙醇 50 ml，超声处理 30 min，滤
过，滤液蒸干，残渣加乙醇 1 ml 使溶解，作为供试品溶液。
另取白背叶根对照药材 5 g，同法制成对照药材溶液。照薄
层色谱法(附录ⅥB)试验，吸取上述两种溶液各 5 ～ 10 μl，
分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯
(20∶ 1)为展开剂，展开，取出，晾干，在紫外光(365 nm)下检
视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相
同颜色的荧光斑点;喷以磷钼酸试液，在 105℃加热至斑点
显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置
上，显相同颜色的斑点。见图 1、图 2。
2． 2． 2 取本品粉末 2 g，加石油醚(60 ～90℃)30 ml，超声处理
30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇 1 ml使溶解，作为供试品
1．白背叶根对照药材 2 ～ 15．白背叶根
图 1 白背叶根薄层鉴别(1)紫外光(365 nm)下检视
1．白背叶根对照药材 2 ～ 15．白背叶根
图 2 白背叶根薄层鉴别(1)日光下检视
溶液。另取白背叶根对照药材 2 g，同法制成对照药材溶液。
照薄层色谱法(附录Ⅵ B)试验，吸取上述两种溶液各 10 μl，
分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以石油醚(60 ～ 90℃)-乙醚
(1∶ 1)为展开剂，置氨蒸气饱和的展开缸中，展开，取出，晾干，
喷以 10%硫酸乙醇溶液，在 105℃加热至斑点显色清晰，分别
在日光和紫外光(365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照
药材色谱相应的位置上，日光下显相同颜色的斑点;紫外光下
显相同颜色的荧光斑点。见图 3、图 4。
1．白背叶根对照药材 2 ～ 15．白背叶根
图 3 白背叶根薄层鉴别(2)日光下检视
2． 3 特征图谱
2． 3． 1 色谱条件 色谱柱 SPOLAＲ C18 柱(250 mm ×
4． 6 mm，5 μm) ，检测波长 328 nm;流速:1． 0 ml·min －1;柱
温:35;进样量 10 μl;以乙腈为流动相 A，以0． 4%磷酸溶液
为流动相 B，按表 2 的规定梯度洗脱。在上述色谱条件下，
各特征峰峰形良好，与相邻峰达到基线分离，见图 5 ～图 7。
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中国药师 2015 年第 18 卷第 3 期 China Pharmacist 2015，Vol． 18 No． 3
1．白背叶根对照药材 2 ～ 15．白背叶根
图 4 白背叶根薄层鉴别(2)紫外光(365nm)下检视
表 2 梯度洗脱程序表
时间(min) 流动相 A(%) 流动相 B(%)
0 ～ 35 10→22 90→78
35 ～ 50 22→24 78→76
50 ～ 60 24 76
图 5 芦丁 HPLC色谱图
图 6 白背叶根特征图谱
图 7 白背叶根对照特征图谱
2． 3． 2 溶液的制备
2． 3． 2． 1 参照物溶液 取芦丁对照品适量，精密称定，加甲
醇制成每 1 ml含 60 μg的溶液，作为参照物溶液。
2． 3． 2． 2 供试品溶液 取本品粉末(过二号筛)约 1 g，精密
称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇 25 ml，密塞，称定重
量，加热回流 1 h，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重
量，摇匀，滤过，精密吸取续滤液 15 ml，回收溶剂至干，残渣
精密加入参照物溶液 2ml使溶解，摇匀，滤过，即得。
2． 3． 3 测定及结果 分别精密吸取参照物溶液与供试品溶
液各 10 μl，注入液相色谱仪，记录 60 min 的色谱图，计算各
特征峰与芦丁参照物峰的相对保留时间和相对峰面积。供
试品色谱中应呈现 5 个特征峰，与参照物峰(芦丁)相应的
峰为 S峰，计算各特征峰与 S 峰的相对保留时间，其相对保
留时间应在规定的 ± 5%之内，规定值为1． 00(峰 S)、1． 07
(峰 1)、1． 19(峰 2)、1． 54(峰 3)、1． 60(峰 4)、1． 98(峰 5) ;
峰 3、峰 4 的相对峰面积不低于0． 23、0． 66。
2． 3． 4 稳定性考察 对同一供试品溶液(编号:BBYG-1) ，
每隔一定时间测定一次，共测定 9 次，各特征峰相对保留时
间 ＲSD在0． 20%以内，峰 3、4 相对峰面积 ＲSD 在1． 9%以
内。表明供试品溶液室温下放置，至少在 48 h内稳定。
2． 3． 5 仪器精密度试验 取同一供试品溶液(编号:BBYG-
1) ，连续测定 6 次。结果 6 次测定结果各特征峰相对保留时
间 ＲSD在0． 07%以内，峰 3、4 相对峰面积 ＲSD 在0． 41%以
内。结果表明本法仪器精密度良好。
2． 3． 6 重复性试验 取同一供试品(编号:BBYG-1) ，按
“2． 3． 1”色谱条件及“2． 3． 2”的溶液制备方法平行测定 6
份，6 份样品各特征峰分离良好，各特征峰相对保留时间
ＲSD在0． 04%以内，峰 3、峰 4 相对峰面积 ＲSD 在2． 8%以
内。结果表明本法重复性良好。
2． 3． 7 耐用性试验
2． 3． 7． 1 柱温及流速的考察 分别考察了不同柱温及不同
流速各特征峰的分离度。流速为 1． 0ml·min －1时，分别在
柱温 20，25，30，35，40℃进样测定，结果柱温在 20，25℃时峰
1 分离不佳，其他各峰分离良好，柱温在 30，35，40℃时各特
征峰均能达到良好的分离效果;进一步对流速0． 8 ml·
min －1和1． 2 ml·min －1进行考察，柱温 35℃时，三种流速
0． 8，1． 0，1． 2 ml·min －1各特征峰均能达到很好的分离。
2． 3． 7． 2 仪器与色谱柱的影响
2． 3． 7． 2． 1 不同仪器的考察 用同一柱子［色谱柱Ⅰ:SPO-
LAＲ C18(250 mm ×4． 6 mm，5 μm) ］在 4 个不同品牌高效液
相色谱仪器上试验:Ⅰ． Waters 2695，Ⅱ． Agilent 1100，Ⅲ． 戴
安 Ultimate 3000，Ⅳ．岛津 LC-20A，结果各特征峰均能达到良
好的分离效果，相对保留时间 ＲSD 在2． 4%以内，峰 3、峰 4
相对峰面积 ＲSD在3． 0%以内，符合要求。
2． 3． 7． 2． 2 不同色谱柱的考察 在同一台 Waters高效液相色
谱仪，考察 5种色谱柱:柱Ⅰ． SPOLAＲ C18(250 mm × 4． 6 mm，5
μm) ;柱Ⅱ． CAPCELLPAK C18(250 mm ×4． 6 mm，5 μm) ;柱Ⅲ．
Acclaim TM 120A C18(250 mm ×4． 6 mm，5 μm) ;柱Ⅳ． Kroma-
sil C18(250 mm × 4． 6 mm，5 μm) ;柱Ⅴ． ODS HYPEＲSLL C18
(250 mm ×4． 6 mm，5 μm)。结果各特征峰均能达到良好的分
离效果，柱Ⅰ～Ⅱ各特征峰相对保留时间 ＲSD在规定值 ± 5%以
内，柱Ⅲ ～Ⅴ各特征峰相对保留时间 ＲSD 在规定值 ± 5%以
外。峰 3、峰 4相对峰面积 ＲSD在2． 8%以内。
2． 3． 8 样品测定 按“2． 3． 2”制备 15 批样品溶液，照
“2． 3． 1”项下色谱条件测定，计算样品中各特征峰的相对保
留时间及峰 3、峰 4 的相对峰面积。结果峰 1 ～ 5 相对保留时
间分别为1． 07、1． 19、1． 54、1． 60、1． 98，相对保留时间 ＲSD均
在0． 12%以内;峰 3、峰 4 的相对峰面积最低为0． 29和0． 82，
考虑到药材不同产地和采收季节的影响，将峰 3、峰 4 相对
峰面积限度制定为不低于0． 23和0． 66。
3 讨论
3． 1 白背叶根化学研究较少，尚无法确定活性成分或指标性
成分，含量测定方法有待研究。特征图谱检查也是中药质量
控制的发展趋势，目前特征图谱检查以其活性成分作参照物，
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www． zgys． org 研究简报
确定各特征峰的相对保留时间，同时测定活性成分的含量。
本研究加入芦丁参照物对各特征峰定位，确定各特征峰的相
对保留时间及峰 3、峰 4 的相对峰面积。经方法学验证、耐用
性试验及 15批样品试验，确定供试品特征图谱中应呈现 5 个
特征峰，其相对保留时间应在规定的 ± 5%之内，峰 3、峰 4 相
对峰面积不低于0． 23、0． 66，能有效控制白背叶根的质量。
3． 2 特征图谱提取溶剂分别考察石油醚(60 ～ 90℃)、乙酸
乙酯、乙醇、70%乙醇、甲醇，结果用甲醇为溶剂提取，所得供
试品色谱信息较丰富，杂质较少，峰形良好。流动相考察了
等度洗脱和梯度洗脱，结果梯度洗脱既缩短时间又将各成分
峰有效分离。
3． 3 测定波长的选择，采取二极管阵列检测器检测，提取各
波长下色谱图，在 220 ～ 240 nm波长下所得色谱峰的信息量
最多，但该波长段基线噪音大，260 ～ 300 nm 波长下所得色
谱峰的信息较少，320 ～ 340 nm波长下所得色谱峰的信息量
多，各色谱峰面积、高度适中，分离度好，各主要色谱峰最大
吸收波长多在 328 nm，所以确定检测波长为 328 nm。
3． 4 本特征图谱检查，规定各特征峰的相对保留时间，耐用
性考察 5 种不同品牌色谱柱在同一高效液相色谱仪中试验，
有 3 根色谱柱各特征峰相对保留时间的 ＲSD 大于规定值 ±
5%，提示要规定色谱柱。
参 考 文 献
1 南京中医药大学． 中药大辞典(上册)［M］． 上海科学技术出版
社，2005． 1006
2 国家中医药管理局《中华本草》编委会．中华本草［M］．第 5 册上
海科学技术出版社，1999． 827-829
3 赵进军，呂志平，王晓东，等．白背叶根在肝纤维化动物模型中抗
氧化作用的实验研究［J］．中药材，2002，25(3) :185-187
4 张晓刚，呂志平，谭秦湘，等．白背叶根抗乙型肝炎病毒的体外实
验研究［J］．时珍国医国药，2006，17(8) :1437-1438
5 徐舒，呂志平，蔡红兵，等．白背叶根抗鸭乙型肝炎病毒的实验研
究［J］．中西医结合学报，2006，4(3) :285-288
6 单雪琴，冯廉彬，吴承顺． 白背叶根的化学成分［J］． 植物学报，
1985，27(2) :192-195
7 冯子明，李福双，徐建富，等． 白背叶根化学成分研究［J］． 中草
药，2012，43(8) :1489-1491
8 李吉来，陈飞龙，吕志平． 白背叶根挥发性成分的研究［J］． 中药
材，2003，26(10) :723-724
9 广西壮族自治区卫生厅．广西中药材标准［S］． 第 2 册． 1996． 90-
92
10 中国药典［S］． 2010 年版．一部． 130
(2014-06-20 收稿 2014-12-26 修回)
通讯作者:柳琴 Tel:18672771345 E-mail:4262467@ qq． com
西藏玛咖对小鼠抗疲劳作用的初步研究
柳琴1 程贝2 (1．武汉市普仁医院药学部 武汉 430018;2．湖北省新华医院药学部)
摘 要 目的:探讨西藏玛咖抗疲劳作用的机制。方法:分别以西藏玛咖干粉和其醇提液喂养小鼠，通过小鼠负重游泳实
验，测定西藏玛咖对小鼠血乳酸浓度、血清乳酸脱氢酶(LDH)、负重小鼠游泳时间、小鼠运动后血清尿素氨水平，比较西藏玛
咖干粉与醇提液的抗疲劳作用效果。结果:灌胃小鼠 30 d后，服用玛咖干粉与醇提液 1，2，3 组小鼠的血清 LDH 活力明显高
于对照组(P ＜ 0． 05) ;小鼠负重游泳时间也明显高于对照组(P ＜ 0． 05)。服用玛咖干粉与醇提液 1，2，3 组的小鼠运动后血乳
酸浓度则明显低于对照组(P ＜ 0． 05)。结论:西藏玛咖能够提高负重后小鼠游泳的时间，降低游泳后血清尿素氨的水平和血
乳酸的浓度，提示西藏玛咖干粉与醇提液具有显著的抗疲劳功效。
关键词 西藏玛咖;血乳酸;乳酸脱氢酶;血清尿素氨;抗疲劳
中图分类号:Ｒ285． 5 文献标识码:A 文章编号:1008-049X(2015)03-0511-03
Preliminary Ｒesearch on Anti-fatigue Effect of Tibet Maca in Mice
Liu Qin1，Cheng Bei2(1． Department of Pharmacy，Wuhan Puren Hospital，Wuhan 430018，China;2． Department of Pharmacy，Xin-
hua Hospital of Hubei Province)
ABSTＲACT Objective:To explore the anti-fatigue effect of Tibet maca in mice． Methods:The mice were respectively given the
powder or the alcohol extract of Tibet maca． The lactic acid concentration in blood，serum lactate dehydrogenase (LDH) ，the time of
weight loading swimming and serum urea ammonia level after the exercise in the mice were detected，and the anti-fatigue effect of the
powder and the alcohol extract of Tibet maca was compared． Ｒesults:After the 30-day feeding，the serum LDH activity of the mice
taking the powder or alcohol extract of Tibet maca was obviously higher than that of the mice in the control group(P ＜ 0． 05) ，the time
of weight loading swimming was significantly longer than that in the control group (P ＜ 0． 05) ，and the blood lactic acid concentration
after the exercise was obviously lower than that in the control group (P ＜ 0． 05)． Conclusion:Tibet maca can improve the time of
weight loading swimming of mice，and reduce the level of serum urea ammonia after exercise and blood lactic acid concentration，sug-
gesting the powder and alcohol extract of Tibet maca have obvious anti-fatigue effect．
KEY WOＲDS Tibet maca;Blood lactic acid;Lactate dehydrogenase;Serum urea ammonia;Anti-fatigue
玛咖(Lepidium meyennii Walp．)作为一种药食两用的植 物，它含有多种均衡合理的营养成分及生理活性的次生代谢
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中国药师 2015 年第 18 卷第 3 期 China Pharmacist 2015，Vol． 18 No． 3