全 文 ：第 3 期 魏云 雪胆的鉴别及含量测定
2011 年 9 月第 34 卷第 3 期 成都中医药大学学报
Sept. 2011，Vol. 34，No. 3 Journal of Chengdu University of TCM
雪胆的鉴别及含量测定
魏云
(四川省绵阳市食品药品检验所，四川 绵阳 621000)
摘 要:目的:建立雪胆的鉴别及含量测定方法，为雪胆药材质量标准的制定提供科学依据。方法:
采用显微鉴别法、薄层色谱法对雪胆进行定性鉴别，采用高效液相色谱法对雪胆甲素进行定量分析。结
果:显微鉴别和薄层色谱结果表明雪胆有较显著的鉴别特征。HPLC 法表明雪胆甲素峰面积与进样量在
0. 1255 mg /mL ～ 2. 51 mg /mL呈良好线性关系，可为评价雪胆品质提供依据。结论:所建立的方法简便、
准确、可靠，重现性好，可为提供雪胆的鉴别及含量测定参考。
关键词:雪胆;显微鉴别;薄层色谱;高效液相色谱
中图分类号:O657. 7;R282. 5 文献标识码:A 文章编号:1004-0668 (2011)03-0081-05
基金项目:四川省中药材标准修订起草项目 (编号:川食药监注【2008】21 号)
作者简介:魏云，男，1966 年生;副主任中药师;研究方向:中药材、中成药的检验及个别品种研究。
Study on Quality Standard of Hemsleya Amabilis
WEI Yun
(Mianyang city，Sichuan Province Institute for Food and Drug Control，Mianyang 621000;Sichuan)
［Abstract］Objective:To provide scientific basis for the utilization and development of Hemsleya Amabilis by establishing the i-
dentification and determination method. Method:The qualitation identification was carried out by microscopic identification and TLC.
And quantitation determination was carried out by HPLC. Result:The results of microscopic identification and TLC showed that signifi-
cant characteristics were found for Hemsleya Amabilis. The results of HPLC quantitative analysis showed that the linear range of rubi-
maillin was 0. 1255 mg·mL［－ 1］ － 2. 51mg·mL［－ 1］． Conclusion:These methods are convenient，accurate，reliable with good re-
producibility and can be used to enhance the quality standard for the medicinal material．
［Key words］:Hemsleya Amabilis;microscopic identification;TLC;HPLC
雪胆，本品为葫芦科雪胆属植物长果雪胆
Hemsleya dolichocarpa W. J. Chang，峨眉雪胆 Hems-
leya omeiensis L. T. Shen et W. J. Chang 或巨花雪胆
Hemsleya gigantha W. J. Chang 的干燥块根［1］。含雪
胆皂苷，雪胆素。秋末春初采挖，除去杂质，趁鲜
切片，干燥。
别名金龟莲 金盆罗锅底，四川省习称金龟莲。
能清热解毒，消炎止痛。用于菌痢，肠炎，支气管
炎，急性扁桃体炎，虚火牙痛，胃痛［2］。
本品历代本草均有记载。本草便方称金盆，修
订增补天宝本草和《四川中药志》均称金龟莲。分
类草药性以金银盆收载。雪胆属植物大多数种分布
于我国西南，中南地区，四川是其主产区之一。据
文献报道:有 9 种，6 变种［3］。资源极为丰富，分
布于四川盆地周围的中山区，常生于林缘及山沟灌
丛中。主产绵阳，乐山，雅安等地。但商品药材的
主流品种为文中收载的 3 种。中国药典 1977 年版所
载雪胆［4］，据资料报道，四川省尚未发现有分布。
植物形态 :长果雪胆———多年生攀援草本，
块根肥大。茎纤细，具深沟纹，被疏长柔毛，卷须
常分两叉。叶互生，鸟足状，具小叶 5 ～ 7 枚，总
叶柄长 3. 5 ～ 6. 5 cm，小叶柄长 3 ～ 8 mm，小叶倒
卵状披针形或椭圆状披针形，正中小叶长 7 ～ 15
cm，宽 4 ～ 7 cm，两侧小叶较小，顶端短尖，基部
楔形，边缘有锯齿。花雌雄异株，雄花序为稀疏的
总状或圆锥状，总花梗纤细，长 1. 5 cm，丝线形;
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DOI:10.13593/j.cnki.51-1501/r.2011.03.028
成都中医药大学学报 2011 年第 34 卷
萼片 5，披针形，长 6 mm，宽 3 mm，花冠反折，
球形，直径 8 ～ 9 mm，5 深裂，雄蕊 5 枚，花丝长
1 mm，花药卵形;雌花子房圆柱形，长 6 mm，直
径 3 mm;花柱 3，极短，柱头两裂。蒴果柱状椭
圆形，顶端近平切，长 5 ～ 8 cm，直径 2 ～ 3. 5 cm，
干后具明显 10 条果棱，果皮厚革质，成熟后顶端
3 裂缝，种子 10 余枚，近圆形，长 1. 3 ～ 1. 4 cm，
宽约 1 cm，浅黄褐色，中部有细小疣点，近边缘
有约 1 mm的扁平部分，有明显的齿状沟纹。花期
6 ～ 8 月。峨眉雪胆与长果雪胆的主要区别:小叶
较多，部分超过 7 枚，通常 5 ～ 7 枚，花冠常外露，
果实球形，直径约 2. 5 cm，种子卵状三角形。巨
花雪胆与长果雪胆的主要区别:花冠反折成球形或
到圆柱形，直径多在 1 cm以上［3］。
本实验所用样品，购置于成都中药材市场或在
当地采集，均经廖荣贵副主任中药师鉴定为葫芦科
雪胆 属 植 物 长 果 雪 胆 Hemsleya dolichocarpa
W. J. Chang，峨眉雪胆 Hemsleya omeiensis L. T. Shen
et W. J. Chang 或 巨 花 雪 胆 Hemsleya gigantha
W. J. Chang。
1 性状
本品呈不规则的片块，厚 0. 5 ～ 1 cm，边缘稍
卷曲，表面棕褐色或黄褐色，切面微粗糙 . 质坚
实，折断面黄棕色至黄白色，微具蜡样光泽。气
微，味极苦 (见图 1 ～图 3)。
图 1 雪胆药材
图 2 雪胆药材
图 3 雪胆药材
2 鉴别
2. 1 显微特征
本品粉末淡黄色。淀粉粒众多，类圆形，多为
单粒，直径 2 ～ 10 um，少数复粒，由 3 ～ 4 分粒组
成，脐点点状。石细胞较多，类圆形、方形、类三
角形或长椭圆形，直径 30 ～ 110 um，细胞壁增厚不
等。导管多为网纹，偶见环纹，管胞梭形。木栓细
胞淡黄棕色，多角形 (见图 4 ～图 12)。
图 4 长果雪胆粉末显微特征
图 5 长果雪胆粉末显微特征
图 6 长果雪胆粉末显微特征
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第 3 期 魏云 雪胆的鉴别及含量测定
图 7 峨眉雪胆粉末显微特征
图 8 峨眉雪胆粉末显微特征
图 9 峨眉雪胆粉末显微特征
图 10 巨花雪胆粉末显微特征
图 11 巨花雪胆粉末显微特征
图 12 巨花雪胆粉末显微特征
2. 2 薄层色谱
样品的前处理:取本品粉末 2 g，加乙醇 20
mL，置水浴上加热回流 1 h，滤过，滤液置水浴上
浓缩至约 5 mL，作供试品溶液。
对照品的制备:取雪胆素甲对照品，加乙醇溶
解制成每 1 mg /mL的溶液，作为对照品溶液。
吸附剂:硅胶 G薄层板。
展开剂:氯仿 －乙醇 (95∶5)。
显色剂:喷以 5%磷钼酸乙醇溶液，置 120℃
烘约 10 min。
点样量:5 ～ 10 uL。
结果:供试品溶液在与对照品溶液相应的位置
上，显相同颜色的斑点。
对照品雪胆素甲由中国药品生物制品鉴定所提
供 (1111518 － 200602)。实验表明长果雪胆，峨
眉雪胆，巨花雪胆均与对照品在相应的位置上显相
同颜色的斑点 (见图 13)。
1、雪胆素甲 (1111518 － 200602)
2、4、巨花雪胆 产地:雅安
5、6 长果雪胆 产地:平武
7、峨眉雪胆产地:绵竹
图 13 雪胆药材薄层色谱图
3 检查 (品种未加以区分)
3. 1 水分
按中国药典 2005 年版一部水分测定法项下第
一法测定，测定结果见表 1 (n = 2)。
3. 2 总灰分
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成都中医药大学学报 2011 年第 34 卷
按中国药典 2005 年版一部总灰分测定项下，
测定结果见表 1 (n = 2)。
3. 3 浸出物
以乙醇为溶剂，按中国药典 2005 年版一部 浸
出物项下热浸法测定 ，测定结果见表 1 (n = 2)。
表 1
产地 水分% 总灰分% 浸出物%
四川雅安 12. 41 2. 54 23. 09
平武龙安镇 10. 68 2. 31 18. 20
平武土城镇 10. 93 2. 48 28. 37
四川乐至 12. 89 3. 17 17. 47
四川邛崃 12. 82 1. 97 18. 19
四川乐山 12. 31 2. 53 26. 84
4 含量测定
照中华人民共和国药典 2005 年版一部高效液
相色谱法附录 VI D进行。
4. 1 色谱条件与系统适用性试验
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇 －
水 (55∶45)为流动相;检测波长为 250 nm。理
论板数按雪胆甲素峰计算应不低于 4000。
4. 1. 1 对照品溶液的制备
精密称取雪胆甲素 (1111518 － 200602)适
量，加甲醇制成每 1 mL含 450 μg的溶液，即得。
4. 1. 2 供试品溶液的制备
取本品粉末约 1 g 精密称定，置索氏提取器
中，加乙酸乙酯提取 4 h，回收乙酸乙酯，残渣用
水溶解，用石油醚脱脂，水液浓缩至干，甲醇定容
到 2 mL，离心，取上清液进样。
4. 1. 3 仪器与试药
色谱仪:Waters 2695 /2487 检测器，Empower
数据处理系统，雪胆甲素对照品 (批号 1111518 －
200602，中国药品生物制品检定所)。
4. 2 定量分析
4. 2. 1 色谱条件［7］
Symmetyshield RP 185 μm 4. 6 × 250 mm 检测波
长 nm，流动相:甲醇 － 水 (55 ∶ 45)流速 1. 0
mL /min，柱温 35℃，检测器灵敏度 2. 000AUFS。
4. 2. 2 溶液的配制
对照品溶液的制备:取雪胆甲素对照品，加甲
醇制成 0. 4302 mg /mL的溶液，作为对照品溶液。
4. 3 线性关系考察
精密取含量为 2. 51 mg /mL 的雪胆甲素对照品
溶液，分别取 0. 1 mL、0. 5 mL、0. 8 mL、1. 2 mL、
1. 6 mL、2. 0 mL。加甲醇至 2. 0 mL，按上述色谱
条件进行分析，进样 20 μL，以对照品浓度 (mg /
mL)为横坐标，以其峰面积值为纵坐标，绘制标
准 曲 线，得 回 归 方 程。 Y = 378578. 1833 +
35007008. 34X 。R =0. 99993。结果见表 1。
表 1 雪胆甲素线性关系考察结果
溶液
编号
1 2 3 4 5 6
雪胆甲
素 (mg)
0. 1255 0. 6275 1. 004 1. 506 2. 008 2. 51
峰面积
(A ) 4422186 22890354 35481030 53193689 70235415 88438327
结果表明，雪胆甲素进样量在 0. 1255 mg /mL
～ 2. 51 mg /mL呈良好线性关系。
4. 4 精密度试验
取 0. 4508 mg /mL的雪胆甲素对照品溶液，连
续进样 6 次。测定其峰面积，RSD = 0. 8% (n =
6)。结果见表 2。
表 2 进样精密度实验结果
进样
次数
1 2 3 4 5 6 RSD%
峰面积 20759312 20327664 20361734 20405217 20468789 20525868 0. 8
表明本方法精密度较高。
4. 5 重现性试验
精密称取同样批样品 5 份，按供试品溶液制备
方法制备，在相同色谱条件下进样，考察方法的重
现性，RSD = 2. 5% (n = 5)。结果见表 3。
表 3 样品重现性实验结果
测定份数 1 2 3 4 5
雪胆甲素 (%) 1. 687 1. 711 1. 705 1. 804 1. 662
RSD = 3. 1% (n = 5) ，表明本方法重现性良
好。
4. 6 稳定性试验
取对照品溶液和供试品溶液，按上述色谱条件
测定，取样品每间隔 6 h测定 1 次，测得雪胆甲素
峰面积积分值。结果见表 4 。
表 4 稳定性考察结果
溶液 0 h 5 h 10 h 15 h 20 h 25 h RSD%
对照品 22079492 21990485 21934673 21764384 21396886 20733652 2. 4
供试品 51036838 50823769 50221076 49640091 48913242 48116595 2. 3
取样品每间隔 5 h测定 1 次，测得雪胆甲对照 品、雪胆样品 RSD%分别为 2. 4、2. 3 (n = 6)结
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第 3 期 魏云 雪胆的鉴别及含量测定
果表明，25 h内基本稳定。
4. 7 加样回收试验
精密称取已知含量得同一雪胆甲素样品粉末各
5 份，按 2. 2. 2 项下操作，加入适量的雪胆甲素，
按自备样品供试液得方法处理，测得平均加样回收
率为 98. 54%，RSD = 0. 85% (n = 5)。
表 5 雪胆甲素加样回收试验结果
编号
(mg)
样品含
量 (mg)
雪胆甲
素 (mg)
加入对
照品量
测得大叶
雪胆甲
素 (mg)
回收率
(%)
平均
回收
率%
RSD %
(mg)
1 1. 845 2. 53 4. 312 98. 56
2 1. 967 2. 67 4. 610 99. 41
3 1. 930 2. 84 4. 625 96. 96
4 1. 787 2. 16 3. 885 98. 42
5 2. 004 2. 33 4. 226 97. 50
98. 17 0. 98
以上试验结果表明，该方法准确度良好。
4. 8 供试品的含量测定
按 2. 2. 2 相供试品溶液制备方法，按上述色谱
条件用外标法进行测定，并计算雪胆中雪胆甲素的
含量。结果见表 6。
表 6 雪胆中雪胆甲素的测定 (n = 2)
编
号
基源 产地 (采季)
干燥品含量
(mg /g)
701 峨眉雪胆 (Hemsleya omeiensisL. T. Shen et W. J. Chang) 四川峨眉山市 (秋末) 3. 875
706 同上 四川绵竹县 (秋末) 2. 920
702 同上 (栽培品) 四川乐山市 (秋末) 1. 356
713 同上 (栽培品) 四川乐至县 (秋末) 1. 286
704 巨花雪胆 (Hemsleyagigantha W. J. Chang) 四川雅安市 (秋末) 1. 729
705 同上 四川汉源县 (秋末) 1. 869
707 长果雪胆 (Hemsleyadolichocarpa W. J. Chang) 四川平武县 (夏初) 0. 883
708 同上 四川平武县 (夏初) 0. 998
709 同上 四川平武县 (秋末) 1. 898
712 同上 四川平武县 (秋末) 1. 826
5 讨论
本研究采用显微鉴别和薄层色谱相结合的方法
对雪胆进行鉴定，表明雪胆有明显的鉴别特征，高
效液相法检测结果可为评价雪胆提供依据，且方法
简便、可靠。结果表明，相同季节采挖的雪胆以峨
眉雪胆 Hemsleya omeiensis L. T. Shen et W. J. Chang
质量最好，而同是峨眉雪胆野生品比栽培品雪胆甲
素高出一倍有余。以秋末和夏初两个时段采收的情
况看，秋末时节比夏初时节雪胆中雪胆甲素含量高
出一倍。
以上说明，要有效控制雪胆质量，须制定相应
的含量测定指标，指导雪胆的人工栽培，以保证其
质量。并可以给予药材采收时节的指导。
参考文献
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国中药杂志，1996，21 (5) :276-277．
(收稿日期:2011-04-31 责任编辑:薛红)
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