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唇香草质量标准的初步研究



全 文 :基金项目:国家自然科学基金资助项目(编号:81060365)
作者简介:于 谦(1986-),女,在读硕士,研究方向:新疆中药、民族药活性成分研究。
通信作者:田树革,男,教授,硕士生导师,研究方向:新疆中药、民族药活性成分研究,E-mail:tianshuge@hotmail.com。
唇香草质量标准的初步研究
于 谦1,2,施 洋1,2,袁苏宁1,2,田树革1,2
(1新疆名医名方与特色方剂学重点实验室,2新疆医科大学中医学院实验中心,乌鲁木齐 830011)
摘要:目的 建立唇香草药材的质量标准,为药用植物资源的开发利用提供科学依据。方法 对唇香草原
植物进行鉴定,并对其性状进行描述;对唇香草的茎、叶和粉末进行显微鉴别;对唇香草水提液和醇提液化学成分
进行理化鉴别;以蒙花苷、咖啡酸、迷迭香酸对照品对唇香草药材采用薄层色谱法进行定性鉴别;测定7批唇香草
药材的水分、总灰分、酸不溶性灰分。结果 唇香草药材水分不得超过9%,总灰分不得超过12%,酸不溶性灰分
不得超过4%。结论 建立的质量标准定性方法简便,准确,灵敏度高,重现性好,专属性强,可作为唇香草药材质
量控制的参考。
关键词:唇香草;理化鉴别;显微鉴定;薄层鉴定;
中图分类号:R282.71  文献标识码:A  文章编号:1009-5551(2012)03-0301-05
Preliminary study of quality standards of ZiziphoraclinopodioidesLam
YU Qian1,2,SHI Yang1,2,YUAN Su-ning1,2,TIAN Shu-ge1,2
(1 Xinjiang Key Laboratory of Famous Prescription and Science of Formulas,2 College of TCM,
Xinjiang Medical University,Urumqi 830011,China)
Abstract:Objective To provide a scientific basis for the utilization and development of ziziphora
clinopodioides Lam.by setting up the quality control specification of ziziphora clinopodioides Lam.Meth-
ods Identification of the original plant of ziziphora clinopodioides Lam,and describe their properties;It′
s stems,leaves and powder for microscopic identification;it′s water extract and alcohol extract of the
physical and chemical identification and in contrast to linarin,caffeic acid and rosmarinic acid on TLC.The
7batches of ziziphora clinopodioides Lam of moisture and ash were determined.Results Check in formu-
lating moisture was less than 9%.Total ashes were less than 12%.Acid-insoluble ashes were less than
4%.Conclusion The quality standard qualitative method is simple,accurate,sensitive,reproducible,
specific,and quality control of medicinal herbs can be used as ziziphora clinopodioides Lam reference.
Key words:ziziphora clinopodioides Lam;physical and chemical identification;microscopic identification;
TLC
 第35卷 第3期 新 疆 医 科 大 学 学 报 Vol.35 NO.3
 2012年3月 Journal of Xinjiang Medical University Mar.2012
    维 药 唇 香 草 (Ziziphora clinopodioides,
Lam.)为唇形科新塔花属植物唇香草的干燥地上部
分,别名芳香新塔花、小叶薄荷、山薄荷等,维吾尔名
称为苏则、续则。唇香草为多年生半灌木状草本,喜
生于低山坡、草地及干旱坡地上,是新疆的特有药
材。主要分布于我国新疆的阿勒泰山、天山、准噶尔
西部山地、帕米尔高原的山地草原及砾石质坡地,中
亚的哈萨克斯坦、吉尔吉斯斯坦、蒙古亦有分布[1]。
唇香草作为一种传统的维吾尔药用植物在新疆有多
种用途,包括治疗心脏病、高血压、哮喘、多汗、心悸
失眠、水肿、咳嗽、支气管炎、肺脓疡和其他疾病[2]。
有关研究已经表明,唇香草具有广泛的抗菌和抗氧
化的效果[3-5]。Senejoux等[6]还探索了唇香草的扩
血管作用的基本机制为抑制钙离子经细胞膜上的钙
通道进入细胞内、松弛血管平滑肌达到扩血管作用。
到目前为止,唇香草有效成分的研究主要集中在挥
发油类成分,其中胡薄荷酮为主要成分[7-9]。本课
题组前期已初步研究了唇香草挥发油的稳定性[10];
唇香草挥发油抑制细菌的活性筛选和唇香草挥发油
化学成分分析[11];并用高效液相色谱法测定唇香草
药材中齐墩果酸和熊果酸的含量[12];考查了唇香草
药材中总多酚和黄酮含量;唇香草不同极性提取物
的抗氧化活性[13];用微波消解-火焰原子吸收光谱
法测定唇香草中10个金属元素[14];RRLC法同时
测定新疆不同产地唇香草中咖啡酸和迷迭香酸的含
量[15]。杨小菊等[16]报道,唇香草中含有多种活性成
分包括咖啡酸、迷迭香酸和齐墩果酸、熊果酸、水杨
酸和黄酮类化合物。但目前有关唇香草药材的基础
研究报道很少,本研究旨在建立对唇香草药材定性
的质量标准,为药用植物资源的开发利用提供科学
的依据,现报道如下。
1 仪器、试剂和样品
1.1 仪器 Mikroskop Primo StarX2005型数码照
相显微镜(德国麦克奥迪实业有限公司),AL204型
电子天平(梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司),
Milipore Q3超纯水器(美国密理博公司),KQ-
100DE型数控超声波发生器(昆山市超声仪器有限
公司),TGL-16B型离心机(上海安亭科学仪器厂),
薄层显色加热器(武汉药科新技术开发有限公司),
AK-1000A型500g摇摆式中药粉碎机(温岭市奥
力中药机械有限公司)。
1.2 试剂 蒙花苷标准品(中国药品生物制品检定
所),咖啡酸标准品 (美国 Sigma 公 司,CFAE-
536954),迷迭香酸标准品 (美 国 Sigma 公 司,
100984090);薄层 H 板(安徽霍山硅源材料厂),薄
层G板(青岛海洋化工厂),甲醇、乙醇、浓 H2SO4、
α-萘酚乙醇溶液、铁氰化钾、三氯化铁、试剂均为分
析纯,水为超纯水。
1.3 样品 唇香草采摘于新疆10个不同产地(乌
鲁木齐板房沟、乌鲁木齐乌拉泊、阿勒泰、塔城托里
县、伊犁特克斯、伊犁夏塔古道、伊犁伊昭公路、伊犁
果子沟、昌吉州吉木萨尔、昌吉州阜康)。经新疆医
科大学中医学院中药系李永和主任药师鉴定为唇形
科植物唇香草 (Ziziphora clinopodioides Lam.),
样品标本存于新疆医科大学中药民族药标本馆。
2 方法与结果
2.1 原植物鉴别 原植物为半灌木,具薄荷香味;
高10~35cm,根木质。茎直立或斜上,从基部分
枝,四棱,密被向下弯曲的短柔毛。叶对生,腋间常
具小叶,宽椭圆形至卵圆形,长0.7~1.5cm,宽2~
8mm,先端渐尖,基部楔形延伸成柄,全缘,两面近
无毛或被极短毛,具明显的棕色腺点。轮伞花序顶
生,密集在茎顶成球状;花梗长1~3mm,包片小,被
短毛;花萼筒状,长5~7mm,外被极短柔毛,萼齿5
裂,锐尖,近相等。花冠紫红色,长10~12mm,内外
被短柔毛,冠檐二唇形,上唇直,顶端微凹,下唇3裂,
裂片较狭长。雄蕊2裂,伸出冠外。花柱先端2浅
裂,裂片极不相等。小坚果卵圆形,细小。
2.2 性状鉴别 茎呈方柱形,直径2~3mm,通常
被腺毛和短柔毛,表面黄绿色,多数带紫棕色,断面
淡黄绿色,髓部中空。叶片呈广披针形、卵圆形或长
圆形,长0.7~1.5cm;宽0.2~0.8cm;叶面呈微灰
203 新 疆 医 科 大 学 学 报 第35卷 
绿色,有明显的棕色油腺点,呈黄棕色。轮伞花序顶
生,密集成头状,花萼筒状,长5~7mm,外密被短
柔毛,花冠淡紫红色至粉红色。有特殊清凉芳香气,
味辛性凉,微苦。
2.3 显微鉴别
2.3.1 唇香草茎枝横切面 表皮细胞1列,切线延
长,外被保护毛,四角棱脊均为厚角细胞,皮层细胞
1~3列,内含棕色物;内皮层细胞1列,长方形,排
列整齐,可见凯氏点,韧皮部较窄,细胞较小,形成层
不明显,木质部广阔,导管单行径向排列,髓部由较
大的薄壁细胞组成,中央常形成空隙,见图1。
图1 唇香草茎横切面显微图
2.3.2 唇香草叶的表面观 腺鳞头部多细胞;非腺
毛,常弯曲、壁厚。下表皮气孔多见,直轴式,见图2。
气孔   腺鳞和非腺毛
图2 唇香草叶表皮显微图
2.3.3 唇香草粉末 呈黄绿色,在显微镜下可见的
主要特征为:单细胞毛与多细胞非腺毛,非腺毛一般
15~200μm。腺毛单头单柄,呈椭圆形,长23~
33μm,腺鳞由多细胞组成,直径23~70μm。气孔
直轴式,长轴30μm,短轴约20μm。叶肉细胞中含
有方晶。螺纹导管,直径15~25μm。花粉粒圆形
或椭圆形,壁厚,直径25~33μm,见图3。
2.4 水提取法和醇提取法理化鉴别 取2份唇香
草粉末各10g,分别加水100mL和加乙醇100
mL,各超声30min,过滤,得到水提液和醇提液。
滤液各取1~2mL作糖类、苷类、酚类、鞣质类、黄
酮类有机酸类成分的检测,结果见表1。
1.导管;2.方晶;3.腺鳞;4.花粉粒;5.花碎片乳状突起;6.
叶表皮细胞;7.气孔;8.非腺毛;9.腺毛
图3 唇香草粉末显微图
2.5 薄层鉴别
2.5.1 对照品溶液和供试液的制备 对照品溶液
的制备:分别取适量蒙花苷、咖啡酸和迷迭香酸标准
品用甲醇溶解,放入离心机8 000 r/min离心5
min,为对照品溶液。供试液制备:分别称取10种
不同产地的唇香草各0.5g,精密称定,加甲醇20
mL,放置30min,超声处理30min,滤过。滤液水
浴浓缩至约1mL,放入离心机8 000 r/min离心5
min,为供试品溶液。
2.5.2 展开分析及结果
2.5.2.1 蒙花苷的薄层鉴别 取以上2种溶液分
别点于同一硅胶G薄层板上,氯仿-甲醇-水(3∶
1∶0.1)为展开剂,展开,取出,晾干,在紫外灯365
nm下检测,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的
位置上,显相同颜色的斑点,结果见图4。
2.5.2.2 咖啡酸和迷迭香酸的薄层鉴别 取以上
2种溶液分别点于同一硅胶 H薄层板上,甲苯-乙
酸乙酯-甲酸(5∶5∶1)为展开剂,展开,取出,晾
干,在紫外灯365nm下检测,供试品色谱中,在与
对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,结果
见图5。
303 第3期 于 谦等:唇香草质量标准的初步研究
表1 唇香草水提液和醇提液实验结果
提取液 加入试剂 正反应指标 现象 结论
水提取液
醇提取液
5%-α-萘酚乙醇溶液,1~3d,后加入浓硫酸 两液面间有紫色环
(+) 说明样品水提取液中可能含有糖类或苷类物质成分
(-) 说明样品乙醇提取液中不含有糖类或苷类物质成分
水提取液
醇提取液
加铁氰化钾-三氯化铁 显蓝黑色
(+)
(+)
说明样品水提取液和醇提液中均可能含有酚类成分
水提取液
醇提取液
水提取液
醇提取液
醋酸镁 生成沉淀
明胶试剂 生成沉淀
(-)
(-)
(-)
(-)
说明样品水提液和醇提液中均不含有鞣质类
水提取液
醇提取液
水提取液
醇提取液
水提取液
醇提取液
加镁粉,浓 H2SO42d,微热1~2min 显红色
加三氯化铁溶液 显绿色
NaOH数滴 显橙黄色
(+)
(+)
(+)
(+)
(+)
(+)
说明样品水提液和醇提液中均含有黄酮类成分
水提取液
醇提取液
水提取液
醇提取液
滴加溴甲酚蓝 蓝色背景下显黄色斑点
pH试纸
(+)
(+)
pH=7
说明样品水提取液和醇提液中均可能含有有机酸类成分
          
1.特克斯;2.板房沟;3.阿勒泰;4.托里;5.夏塔古道;6.昭苏公
路;7.果子沟;8.乌拉泊;9.阜康;10.吉木萨尔;11.蒙花苷
图4 唇香草样品蒙花苷TLC图
  
1.咖啡酸;2.特克斯;3.板房沟;4.阿勒泰;5.托里;6.夏塔古道;7.昭
苏公路;8.果子沟;9.乌拉泊;10.阜康;11.吉木萨尔;12.迷迭香酸
图5 唇香草样品中咖啡酸和迷迭香酸TLC图
2.6 水分和灰分的测定 水分测定法、总灰分测定
法、酸不溶性灰分测定参照《中国药典》2010年版
(一部)附录Ⅸ H 和附录Ⅸ K。每个样品各取3份
进行测定后求平均值,结果见表2。根据结果,暂订
唇香草质量标准中水分应不得超过9%,总灰分不
得超过12%,酸不溶性灰分不得超过4%。
表2 水分、总灰分、酸不溶性灰分测定结果(珔x±s)
产地 采集时间 水分/% 灰分/% 酸不溶性灰分/%
特克斯 2010年7月 0.89±0.03  6.54±0.05  0.54±0.03
板房沟 2010年7月 0.87±0.02  8.98±0.05  2.05±0.02
阿勒泰 2010年7月 0.88±0.02  6.57±0.11  0.49±0.39
托里 2010年7月 0.41±0.01  11.79±0.23  3.92±0.02
夏塔古道 2010年7月 0.68±0.01  6.98±0.05  0.21±0.09
昭苏公路 2010年7月 0.57±0.02  11.15±0.40  3.70±0.03
果子沟 2010年7月 0.64±0.02  10.24±0.95  2.99±0.04
3 结论
唇香草作为维吾尔医药用植物药在治疗心脏
病、高血压、气管炎、肺脓肿等疾病中发挥作用。国
内外文献报道中多集中在其活性成分的研究和含量
的测定,没有一个完善的质量标准,不利于唇香草药
材的开发和利用。本实验所做的工作为唇香草药材
的性状鉴别、理化鉴别、薄层鉴别及水分、灰分和酸
不溶性灰分的测定,旨在完善唇香草药材的基础研
究,可以为唇香草药材制定质量标准和进行资源开
发利用提供依据。
参考文献:
[1] 刘勇民.维吾尔药志:上册[M].乌鲁木齐:新疆科技卫生出版
社,1999:446-451.
403 新 疆 医 科 大 学 学 报 第35卷 
[2] Tian SG,Shi Y,Yu Q,et al.Determination content of olean-
olic acid and ursolic acid in Ziziphora clinopodioides Lam.by
HPLC method[J].Pharmacogn Mag,2010,6(22):116-119.
[3] Behravan J,Ramezani M,Hassanzadeh MK,et al.Composi-
tion,Antimycotic and antibacterial activity of ziziphora clinop-
odioides lam essential oil from Iran[J].J Essent Oil Bear Pl,
2007,10(4):339-345.
[4] Ozturk S,Ercisli S.Antibacterial activity and chemical consti-
tutions of Ziziphora clinopodioides[J].Food Control,2007,18
(5):535-540.
[5] Unal EL,Mavi A,Kara AA,et al.Antimicrobial and antioxi-
dant activities of some plants used as remedies in turkish tradi-
tional medicine[J].Pharm Biol,2008,46(3):207-224.
[6] Senejoux F,Girard C,Kerram P,et al.Mechanisms of vaso-
relaxation induced by Ziziphora clinopodioides Lam.(Lamiace-
ae)extract in rat thoracic aorta[J].J Ethnopharmacol,2010,
132(1):268-273.
[7] Sonboli A,Atri M,Shafiei S.Intraspecific variability of the
essential oil of Ziziphora clinopodioides ssp.rigida from Iran
[J].Chem Biodiver,2010,7(7):1784-1789.
[8] Mohammadreza VR.Essential oil composition and biological
activity of Ziziphora clinopodioides Lam.from Iran[J].Res J
Pharmacol,2008,2(1):17-19.
[9] Chitsaz M,Barton M,Bazargan M.Essential oil composition
and antibacterial effects of Ziziphora clinopodioides[J].Int J
Antimicrob Ag,2007,2(2):203.
[10] 施洋,毕肯,徐暾海,等.维药唇香草挥发油稳定性的研究[J].
中国民族民间医药,2009,6:1-3.
[11] 周晓英,施洋,马秀敏,等.唇香草抑菌活性筛选及挥发油类
化学成分分析[J].现代中药研究与实践,2011,25(2):44-47.
[12] 施洋,徐暾海,田树革.HPLC法测定新疆不同产地唇香草中
齐墩果酸和熊果酸的含量[J].中国实验方剂学杂志,2010,16
(16):38-40.
[13] Tian SG,Shi Y,Zhou XY,et al.Total polyphenolic(fal-
conoid)content and antioxidant capacity of activity of differ-
ent ziziphora clinopodioides lam.extracts[J].Pharmacogn
Mag,2011,7(25):65-68.
[14] 田树革,周晓英,徐暾海,等.微波消解-FAAS法测定维药唇
香草中十种金属元素[J].光谱学与光谱分析,2009,29(7):
1993-1996.
[15] Zhou XY,Yu Q,Gong HY,et al.Simultaneous determina-
tion of caffeic acid and rosmarinic acid in Ziziphora
clinopodioides Lam.from different sources in xinjiang by a
novel rapid resolution liquid chromatography method[J].
Latin Am J Pharmacy,2011,30(8):1651-1655.
[16] 杨小菊,李宁,孟大利,等.芳香新塔花的化学成分的分离与鉴
定[J].沈阳药科大学学报,2008,25(6):456-458.
[收稿日期:2011-10-25
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