全 文 ：　JTCVM
2008年第 4期
　
调查研究
樗白皮提取物对溃疡性小鼠脾脏与血清中腺苷脱氨酶的影响
程富胜 1, 2 ,张　霞3 ,崔　燕 1
(1.甘肃农业大学动物医学院 , 甘肃兰州　730070;2.中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所新兽药工程实验室;
3.甘肃农业大学生命科学技术学院)
　　摘　要:　为了探讨樗白皮不同活性成分对溃疡性结肠炎防治作用 , 以小白鼠为实验动物 ,随机分为正常对照
组 、模型组 、水提取物组 、水提醇沉提取物组 、95%乙醇提取物组 、65%乙醇提取物组 、45%乙醇提取物组 、25%乙醇
提取物组。以 2, 4-二硝基氯苯制备小鼠溃疡性结肠炎模型 ,以各种提取物灌胃模型小鼠 , 7 d后 ,测定血清及脾脏
组织中腺苷脱氨酶(ADA)活性。结果, 与模型组相比 ,水提醇沉物能显著地降低血清和脾脏(P<0.01)中 ADA的
含量 , 45%醇提物能降低血清与脾脏匀浆(P<0.01)ADA的含量 , 25%醇提物也能降低血清和脾匀浆(P<0.05)中
ADA的含量 , 65%醇提物组仅对脾脏匀浆中 ADA含量降低有作用(P<0.05),而对血清中 ADA含量的降低无差异
显著性 , 95%醇提物和水提物对血清与脾匀浆 ADA含量无显著性影响。表明樗白皮中含有降低溃疡性结肠炎时
腺苷脱氨酶的活性成分 , 能影响组织细胞核酸代谢 , 对溃疡性结肠炎具有一定的防治作用。
　　关键词:　小鼠;樗白皮;溃疡性结肠炎;腺苷脱氨酶
　　中图分类号:S859.7　　　　 　文献标识码:A　　文章编号:1000-6354(2008)04-0015-03
　　溃疡性结肠炎(ulcerativecolitis, UC)1859年由 Wilks首
先描述 , 1920年被医学界公认 , 我国于 1956年首次报道。
溃疡性结肠炎可引发肠狭窄 、肠穿孔 、中毒性巨结肠 、肠梗
阻 、结肠癌等 , 严重危害人体健康。溃疡性结肠炎的治疗以
磺胺类和皮质激素类西药为主 ,且溃疡性结肠炎的药物治疗
效果仍十分有限 ,迄今 , 溃疡性结肠炎发病机理尚不清楚 , 近
年来 ,中医药治疗溃疡性结肠炎已成为消化道疾病研究中引
人注目的课题 ,尤其是筛选出新型高效 、低毒 、低成本的良好
抗溃疡性结肠炎中药 ,在临床上治疗溃疡性结肠炎更是备受
关注。樗白皮为苦木科臭椿之皮 , 性味苦 、寒 、涩 , 《本草纲
目》及 《本草拾遗》记载 , 臭椿树皮具有除热 、燥湿 、涩肠 、止
血 、杀虫之特效 。樗白皮(臭椿皮)对肠炎 、赤痢 、肠出血等
消化道炎性疾病有良效。研究发现中药樗树含有丰富的矿
物质元素 。笔者等在 2, 4 -二硝基氯苯(DNCB)致小鼠溃
疡性结肠炎模型的基础上 , 观察了樗白树皮不同提取物对
脾脏与血清中腺苷脱氨酶(ADA)活性的影响。
1　材料与方法
1.1　材料
1.1.1　实验动物　昆明系小鼠(购自兰州生物药厂), 健康 ,
7-9周龄 ,体重 18-20 g, 雄性。
1.1.2　实验药物药品与试剂　樗白皮水提取 、水提醇沉提
取物 、95%乙醇提取物 、 65%乙醇提取物 、45%乙醇提取物 、
25%乙醇提取物(中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究
所);将各提取物配制成浓度为 0.9%的水溶液 , 4℃保存备
用。 2, 4-二硝基氯苯(DNCB,北京化学试剂公司)。
收稿日期:2008-03-12
资助基金:中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所基金项目
(MYJJ04-01)
作者简介:程富胜(1971-),男 ,副研究员 ,在读博士 ,研究方向:天然
药物活性成分及免疫药理学。通讯作者:崔　燕
1.2　方法
1.2.1　动物分组　取昆明系小鼠 80只 , 随机分为 8组 , 每
组 10只 ,分别为正常对照组 、模型组 、水提取物组 、水提醇沉
提取物组 、95%乙醇提取物组 、65%乙醇提取物组 、 45%乙醇
提取物组 、25%乙醇提取物组。
1.2.2　涂敷液制备　称取 DNCB330 g, 溶于 10 mL丙酮 -
橄榄油混合液中 , 配成终浓度为 3.3%的溶液 , 低温保存备
用。
1.2.3　灌肠液　称取 DNCB40 mg, 溶于 10 mL60%乙醇
中 ,配成终浓度为 0.4%的溶液 ,低温保存备用。
1.2.4　溃疡性结肠炎(UC)模型制作　除对照组外都进行
造模 , 小鼠禁食不禁水 , 24 h后 , 腹部剪毛 , 以涂敷液涂腹
部 , 1次 /d,连续 4 d;第 5天开始以灌肠液灌肠 , 1次 /d,每次
2.0 μL/g, 连续 5d,对照组灌胃相同体积的 60%乙醇。第 9
天 ,每组随机抽取小鼠 2只 , 处死后取其结肠 , 进行大体形态
和病理组织学检查 ,用 UC判定标准 ,观察小鼠体征和组织学
变化 ,以确定模型建立成功。
1.2.5　血清及脾脏匀浆(10%)的制备　眼球采血 , 分离血
清;动物处死后 , 取脾脏称重 ,漂洗 , 玻璃匀浆器中匀浆 ,制成
10%脾脏匀浆 , 3 000 r/min, 离心 10-15 min, 收集上清备
用。
1.2.6　血清及组织匀浆中 ADA的测定　分别按照相关试
剂盒说明书进行。
1.2.7　组织匀浆中蛋白含量的测定　具体操作严格按照考
马斯亮兰蛋白测定试剂盒说明书进行。测出各管在 595 nm
处的吸光度 ,并计算组织匀浆中的组织蛋白含量(g/ L)及血
清与组织匀浆中 ADA含量。
2　结果
模型组小鼠血清和脾脏匀浆中 ADA含量明显高于正常
对照组(P<0.01),灌服樗白皮提取物后 , 各组 ADA含量均
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有不同程度下降。与模型组相比 ,水提醇沉物能显著地降低
血清和脾脏(P<0.01)中 ADA的含量 , 45%醇提物可降低
ADA含量(匀浆 P<0.01;血清 P<0.05), 25%醇提物也能
降低 ADA含量(匀浆 P<0.05;血清 P<0.01), 65%醇提物
组仅对脾脏匀浆中 ADA含量有显著降低作用(P<0.05), 而
对血清中 ADA含量的降低无显著性差异。 95%醇提物和水
提物无显著性差异。结果见图 1、2。
图 1　血清中 ADA含量变化
注:与正常组比较 , ＊ P<0.05, ＊＊P<0.01;与模型组比
较 , #P<0.05, ##P<0.01。
图 2　脾脏匀浆中 ADA含量变化
注:与正常组比较 , ＊ P<0.05, ＊＊P<0.01;与模型组比
较 , #P<0.05, ##P<0.01。
3　讨论
腺苷脱氨酶(adenosinedeaminase, ADA)是一种核酸分
解代谢酶类 , 可特异性催化腺嘌呤核苷产生不可逆脱氨反
应 ,生成次黄嘌呤 , 最终氧化成尿酸排出体外。它属细胞免
疫功能有关的核酸代谢酶类 , 广泛分布于人体各组织中 ,以
盲肠 、肠系膜 、脾脏中含量最多。在临床上通过测定体液中
该酶活性用以诊断或鉴别诊断某些疾病。由于以往对该酶
同工酶认识不足 ,临床应用受到一定局限。据国内外学者的
最新研究成果 , ADA有两种主要同工酶 ,即 ADA1和 ADA2 ,
其主要作用是催化腺苷 、2′-脱氧腺苷脱氨转化为肌苷和 2′
-脱氧肌苷。腺苷和 2′-脱氧腺苷在人体细胞内有许多生
物作用 ,因此 , 保持这些物质在细胞内的内稳定状态以及同
工酶 ADA1和 ADA2的活性十分重要。近年来 , ADA在一些
疾病的早期诊断 、治疗以及免疫障碍发病机理研究中受到重
视 ,体液中 ADA的测定已越来越广泛应用于临床。
本试验中溃疡性结肠炎模型小鼠 ADA含量极显著地高
于正常对照组 , 这与相关报道血清 ADA活力在脾脏实质受
损时明显升高一致 ,说明 UC发生时 ,血清和主要免疫器官脾
脏中 ADA含量明显升高。 当灌服樗白皮不同提取物后 ,
ADA含量具有不同程度的下降 , 有调节 UC模型小鼠血清和
脾脏中 ADA含量趋向正常的作用。樗白皮不同提取物对小
鼠 ADA的效果与它们所含的化学成分有关 , 水提醇沉物降
低效果最明显 ,提示与其中所含的多糖类物质有关 , ADA含
量的降低 ,说明樗白皮提取物能够降低细胞核酸代谢速度 ,
缓解组织细胞的死亡进程 , 减轻黏膜细胞的坏死与脱落 , 促
进组织细胞的再生 ,对小鼠溃疡性结肠炎具有一定的防治作
用。
参考文献:
[ 1] 江学良 ,权启镇 , 刘　涛 ,等.溃疡性结肠炎研究的新进
展 [ J] .世界华人消化杂志 , 2000(8):216-218.
[ 2] 程富胜 ,董鹏程 , 金　莉 ,等.臭椿树不同药用部位元素
的测定与分析 [ J] .微量元素与健康研究 , 2005, 22(5):
23-24.
[ 3] 余万桂 ,张恒文 , 张道明.DNCB致小鼠结肠炎模型的建
立及 NO、TNF-α的变化 [ J] .湖北省卫生职工医学院
学报 , 2004, 17(4):4-6.
[ 4] 孟水平.腺苷脱氨酶(ADA)同工酶的诊断与生物作用
[ J] .现代诊断与治疗 , 1999, 10(3):154-155.
[ 5] GoldbergDM.Serumadenosinedeminaseinthediferential
diagnosisofjaundice[ J] .BrMedJ, 1965(1):353-355.
[ 6] GoldbergDM.Serumadenosinedeaminaseactivityinhe-
paticdisease[ J] .ClinClimActa, 1966(14):720-723.
[ 7] RaczynskaJ.Diagnosticvalueofadenosinedenminaseinsome
liverdisease[ J] .ClinClimActa, 1966(13):151-153.
EffectsofextractsfromAilanthusaltissimaonthecontentsofadenosinedeaminase
inspleenandserumofmiceinfectedwithulcerouscolitis
CHENGFu-sheng, CUIYan
(CollegeofVeterinaryMedicine, GansuAgriculturalUniversity, LanzhouGansu730070, China)
Abstract:Objective:ToinvestigatethetreatmentfunctionofdiferentextractsfromAilanthusaltissimaonmiceinfectedwith
ulcerouscolitis.Mothods:80 Kunmingmicewererandomlydividedinto8 groups:control, model, extractofwater, extractof
water-alcoholdeposit, extractof95% alcohol, extractof65% alcohol, extractof45% alcohol, extractof25% alcohol.Mice
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调查研究
modelofulcerouscolitiswasmadeby2, 4-dinitrochloro-benzene(DNCB), eachextractwasgiventothemousebyintragastric
administration.After7days, thecontentsofadenosinedeaminase(ADA)inserumandspleenweredetermined.Results:Com-
paredwiththemodelgroup, thecontentsofADAinserumandspleendecreasedinwater-alcoholdepositgroup(P<0.01), as
whileas45% alcoholgroup(P<0.01)and25% alcoholgroup(P<0.01 orP<0.05).Theextractof65% alcoholcouldde-
creasedthecontentsofADAinspleen(P<0.05).Whiletheextractin95%alcoholandwatergroupshadnoinfluenceontheac-
tivityofADA.Conclusion:TheefectiveconstituentinAilanthusaltissimacoulddecreasetheactivityofADA, adjustthemetabo-
lismofnucleicacidandtreatulcerouscolitis.
Keywords:Ailanthusaltissima;ulcerouscolitis;2, 4-dinitrochloro-benzene(DNCB);adenosinedeaminase;mouse
中药蛇床子对钉螺浸杀作用及机制的研究
陈滔滔 ,赵红梅 ,彭雪芹
(长江大学动物科学学院 ,湖北荆州　434025)
　　摘　要:　中药蛇床子有杀虫作用 ,用蛇床子进行钉螺浸杀试验 ,研究蛇床子的杀螺效果。将蛇床子水提取
液和乙醇提取液配制成不同浓度作浸杀钉螺试验 ,观察钉螺死亡率及蛇床子对钉螺软组织中总蛋白含量和糖原
含量的影响 , 并检测蛇床子提取液对鱼类的毒害作用。结果表明蛇床子有较强的杀螺作用 , 而且对鱼类的毒性不
显著。
　　关键词:　蛇床子;钉螺;机制
　　中图分类号:S853.74　　　　 　文献标识码:A　　文章编号:1000-6354(2008)04-0017-03
　　血吸虫病是一种人畜共患寄生虫病 , 它能寄生于牛 、
猪 、羊等数十种哺乳动物 [ 1] , 严重危害人类的健康 , 同时还
影响畜牧业和经济的发展 [ 2] 。钉螺是血吸虫病传播的唯一
中间宿主 ,消灭钉螺是控制和阻断血吸虫病传播途径 、防止
血吸虫感染的最有效措施之一 [ 3] 。因化学灭螺药物易对公
共卫生造成危害 , 故植物灭螺药物的开发越来越受到人们
的关注。 笔者等于 2007年 5-8月用血吸虫病重流行区湖
北省荆州区太湖港草滩钉螺进行了中药蛇床子的灭螺研
究。
1　材料及方法
1.1　材料
钉螺采自湖北荆州市太湖港草滩 , 挑选活力强 、螺龄相
仿的成螺备用。鲫鱼购于荆州水产研究所 , 挑选约 5 cm健
康无病的鱼苗。蛇床子购自沙市宏伟药店。
1.2　方法
1.2.1　蛇床子水煎液制备 [ 4-6]　称取蛇床子 5 g, 加 100 mL
水 ,浸泡 24h后 , 加热煎煮 3次 ,每次 30 min, 经绸布过滤 ,合
并煎煮液 ,离心去沉淀 ,用蒸馏水定容到药液的浓度为 50 g/L,
并做梯度稀释得浓度为 2 500 mg/L、 1 250 mg/L、 625 mg/L、
312.5 mg/L的药液。
1.2.2　蛇床子素的提取　分别称取蛇床子各 5 g,分别加入
30%、50%、70%乙醇适量;浸泡提取 48h后 ,过滤得滤液后 ,
收稿日期:2008-03-12
基金项目:湖北省教育厅基金项目资助(B200712003)
作者简介:陈滔滔(1985-),男 ,动物医学专业学生。通讯作者:赵红
梅
再浸泡 48 h, 获得滤液。连续浸泡提取 3次 , 合并提取液 , 常
压下用水浴锅 80 ℃蒸馏 , 分离出提取液中蛇床子的有效
成分蛇床子素。 用蒸馏水定容至药液浓度为 50 g/L备
用。
1.2.3　钉螺浸杀试验 [ 7-9]　在室温(25±1)℃下 , 将各组配
制成的试验组和对照组溶液 100 mL药液 , 分别置于烧杯中
混匀。投放 30只钉螺于烧杯中 , 在药液面下 1 cm处盖上纱
网防止钉螺爬出水面。浸泡 48h后倒去药液 ,用清水冲洗数
次 ,将水吸干 , 复苏 24 h后 , 用清水饲养 2 h, 将爬出钉螺检
出 ,不活动者用敲击法检查存活情况 ,并计数。
2　结果
2.1　蛇床子提取物杀灭钉螺试验结果
本试验选用蛇床子水提取和乙醇提取 2种方法提取其
成分 ,用蒸馏水稀释提取药液的浓度 ,并做水生毒性试验 , 结
果见表 1-3。
表 1　蛇床子水提取液浸杀钉螺试验结果
药物浓度
/mg·L-1
观察螺
数 /只
浸杀钉螺死亡率 /%
1 2 3 平均
2 500 30 100 100.0 100.0 100.0
1 250 30 90 83.3 86.7 86.7
625 30 70 66.7 70.0 68.9
312.5 30 40 36.7 36.7 37.8
疫水对照 30 0 0　 3.3 1.1
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