全 文 ：[ 收稿日期] 　2001-04-03
[ 作者简介] 　金政(1960-), 男(朝鲜族), 副教授 , 医学硕
士;王启伟(1970-), 男 , 讲师 , 医学硕士;李相伍(1963
-), 男(朝鲜族),实验师.
[实验研究]
肝损伤后溶酶体和酸性磷酸酶活性改变和蓝靛果的作用
金政 ,王启伟 ,李相伍 ,金美善
(延边大学医学院 组织学与胚胎学教研室 , 吉林 ,延吉 133000)
[ 摘要] 　[ 目的] 探讨蓝靛果对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用.[ 方法] 用四氯化碳造成小鼠
肝细胞损伤模型 ,观察肝细胞中溶酶体及酸性磷酸酶活性的变化.[ 结果] 实验组与对照组相比 ,肝细胞
中溶酶体数量减少 ,酸性磷酸酶活性降低.[结论] 蓝靛果对肝细胞具有一定的保护作用.
[ 关键词] 　肝衰竭 ,急性;溶酶体;植物 , 药用;小鼠
[ 中图分类号] 　R575.3　　　[ 文献标识码] 　A　　　[ 文章编号] 　1000-1824(2001)02-0079-03
Changes of lysosome and acid phosphatase activity after liver lesion and
study of effects of lonicera edulis
JIN Zheng ,WANG Qi-wei ,LI Xiang-wu , JIN Mei-shan
(Department of Histology and Embryology , Yanbian University College of Medicine , Yanji 133000 , J ilin , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE It w as studied that the pro tective effects of lonicera edulis for acute liver lesion of
mice induced by carbon tet rechloride.METHODS The model of liver lesion of mice w as induced by carbon te-
trachloride , and the changes of ly sosome and acid phosphatase of liver cells w ere observed.RESULTS Compared
to control g roup , the lysosome amount and the acid phosphatase activity of liver cells decreased in experimental
g roup.CONCLUSION The lonicera edulis has a protective ef fects for liver cells.
Key words:liver failure , acute;ly sosomes;plants ,medicinal;mice
　　溶酶体是细胞内对细胞吞噬之物质进行
消化与蛋白质溶解的主要场所 ,同时也是细胞
为维护其细胞器的正常更新及在细胞的生理
活动发生明显改变时所伴随的胞质内部结构
改建的主要细胞器[ 1] .本文在小鼠四氯化碳肝
损伤模型上观察了肝细胞溶酶体及酸性磷酸
酶改变 ,同时研究了蓝靛果对此改变的影响.
1　材料与方法
1.1　实验动物　为昆明种小鼠 ,体重 20g ±
2g ,雌雄兼用 ,由延边大学医学院实验动物科
提供.
1.2　主要试剂　蓝靛果提取物由延边大学
医学院附属医院制剂科提供.四氯化碳为北
京化学试剂厂产品(批号:1999年 3月 28日 ,
分析纯).
·79·延边大学医学学报　2001 年 6 月　第 24卷　第 2期
DOI :10.16068/j.1000-1824.2001.02.001
1.3　方法　取小鼠 30只 ,随机分为 3 组 ,每
组 10只 ,即正常对照组 、肝损伤盐水组 、肝损
伤蓝靛果组.正常对照组不给任何药物 ,正常
喂养;后二组均灌胃给药 ,每日 1 次 ,共 6 d ,
均于第 1 d 、第 6 d上午按每 kg 体重往背部皮
下注射四氯化碳 10mL(10 g/ L),全部动物均
于末次注射后 12 h 断头处死 ,迅速取出肝左
叶.取肝组织冰冻切片 ,切片厚 10μm ,进行酸
性磷酸酶染色[ 2] .同时取材 ,按电子显微镜标
本常规方法制作标本 ,用 JEM-1200EX 透射
电子显微镜观察切片.酸性磷酸酶活性按反
应颜色的深浅不同 ,分别对照观察 ,并分为阴
性(-)、弱阳性(±)、阳性(+)、中等阳性
( )、强阳性( )和最强阳性( )等 6 个等
级.观察每只动物的 50 个肝细胞 ,酸性磷酸
酶反应的定性均以 85%细胞的反应特点为
标准.
2　结果
2.1　酸性磷酸酶　正常组肝细胞内可见少
数淡黄色反应颗粒 ,即为酸性磷酸酶活性处.
正常组 85%的肝细胞内酸性磷酸酶为阳性
(+),核阴性(-),酸性磷酸酶反应颗粒细
小 、分布均匀 、稀疏.肝损伤组肝细胞内可见
极显著的黄色或黄棕色反应颗粒 ,即示酸性
磷酸酶的活性增强 ,多数(85%的肝细胞)为
中阳性( ),少数细胞内为强阳性( )或最
强阳性( )(图 1).肝损伤蓝靛果组酸性磷
酸酶反应颗粒与肝损伤组比较 ,明显减少 ,
85%的肝细胞内为阳性(+),少数细胞内为
中阳性( )或强阳性( )(图 2).
←肝细胞酸性磷酸酶呈强阳性( )
图 1　肝损伤组酸性磷酸酶　500×
←肝细胞酸性磷酸酶呈阳性(+)
图 2　肝损伤蓝靛果组酸性磷酸酶　500×
2.2　超微结构变化　正常组肝细胞内可见
高电子密度的溶酶体 ,通常呈圆形或卵圆形 ,
包膜完整.肝损伤盐水组溶酶体增大 ,数量明
显增多 ,溶酶体多失去正常时的圆形或卵圆
·80· Journal of Medical Science Yanbian University　Jun.2001 Vol.24 No.2
形结构而呈杆状 、肾形 、马蹄形(图 3)、C 字形
及不规则形(图 4),有时可见 C 字形溶酶体
向一侧弯曲后两端呈球形膨大(图 4),部分
肝细胞溶酶体包膜不完整.肝损伤蓝靛果组
肝细胞损伤减轻 ,肝细胞内溶酶体数量减少.
←肝细胞溶酶体呈马蹄形
图 3　肝损伤组超微结构变化　15 000×
←溶酶体呈 C 字形 , ←溶酶体呈不规则形
图 4　肝损伤组超微结构变化　15 000×
3　讨论
酸性磷酸酶定位于细胞溶酶体 ,其活性
在正常情况下相当稳定 ,当受到不良因素影
响时 ,其活性增强[ 3] ,一方面吞噬消化变性坏
死结构 ,另一方面水解正常细胞结构 ,加速细
胞变性坏死过程 ,与本实验观察结果相似 ,故
推测四氯化碳使肝细胞受损 ,溶酶体膜脆性
增加 ,通透性升高 ,可溶性的酸性磷酸酶泄漏
至细胞质内引起溶酶体数量增加 ,形态发生
变化 ,酶活性增高.蓝靛果对此有一定的改善
作用 ,说明蓝靛果可能通过保护溶酶体膜而
对肝细胞起到保护作用 ,其机理有待进一步
研究.
[参　考　文　献]
[ 1] 　安　劬 ,李曼 , 黄敏 ,等.正常大鼠肾脏细胞溶酶体膜的
构成蛋白[ J] .中国组织化学与细胞化学杂志 , 1992 , 1
(1):85.
[ 2] 　陈啸梅.组织化学手册[ M] .北京:人民卫生出版社 ,
1982.72.
[ 3] 　刘树元 ,熊希凯 , 张艳 ,等.急性缺血对犬的大脑皮层锥
体细胞影响的实验形态学研究[ J] .解剖学报 , 1991 ,
(增):48.
·81·延边大学医学学报　2001 年 6 月　第 24卷　第 2期