全 文 ：[ 收稿日期] 　2001-01-03
[ 作者简介] 　金政(1960-), 男(朝鲜族), 副教授 , 医学硕
士;王启伟(1970-), 男 , 讲师 , 医学硕士;金美善(1954
-), 女(朝鲜族),高级实验师.
蓝靛果对四氯化碳损伤小鼠肝脏保护作用的组织化学研究
金政1 ,王启伟1 ,金美善1 ,李相伍1 ,洪淳赞2
(1.延边大学医学院 组织学与胚胎学教研室 , 吉林 ,延吉 133000;2.延边大学医学院 附属医院制剂科 ,吉林 , 延吉 133000)
[ 摘要] 　[ 目的] 探讨蓝靛果对四氯化碳损伤小鼠肝脏的保护作用.[方法] 将小鼠随机分为 3 个组 , 用
油红 O法观察中性脂肪 , 用琥珀酸脱氢酶法观察琥珀酸脱氢酶活性.[结果] 实验组与对照组相比 , 肝小
叶损伤区域缩小 ,肝细胞中脂滴减少 , 琥珀酸脱氢酶活性增强.[结论] 蓝靛果对四氯化碳损伤小鼠肝脏
具有保护作用.
[ 关键词] 　创伤和损伤;肝;四氯化碳;植物 , 药用;小鼠
[ 中图分类号] 　R285　　　[ 文献标识码] 　A　　　[ 文章编号] 　1000-1824(2001)01-0018-03
Histochemical study of protective effects of the Lonicera edulis for mice
liver damaged by carbon tetrachloride
JIN Zheng
1 ,WANG Qi-wei1 , JIN Mei-shan1 , LI Xiang-wu1 ,HONG Chun-zan2
(1.Department of Histology and Embryology , Y anbian University College of Medicine , Yanji 133000 , J ilin , China;
2.Department Pharmacy , Af f iliated Hospital of Yanbian University College of Medicine , Yanji 133000 , Jilin , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To study the protective effects of the Lonicera edulis on hepatic tissue of mice
damaged by carbon tetrachloride.METHODS The mice were randomly divided into 3 groups.The morphologi-
cal change of neutral fat was observed by oil red O stain and the activity of succinate dehydrogenase (SDH)by
histochemist ry .RESULTS Compared to the control g roup , the necro tic area of hepat ic lobule and fat droplets of
hepat ic cells were decreased and SDH activity was increased in the experimental g roup.CONCLUSION The
Lonicera edulis has protective effects fo r the hepatic tissue of mice damaged by carbon tet rachlo ride.
Key words:wounds and injuries;liver;carbon tet rachlo ride;plants , medicinal;mice
　　蓝靛果(Lonicera edulis)是忍冬科忍冬
属植物 ,主要分布于长白山及小兴安岭 ,民间
入药 ,认为有清热解毒作用 ,也有人报道具有
降压作用[ 1] .国内关于蓝靛果药理作用的研
究报道甚少.本实验为了解蓝靛果对四氯化
碳所致肝损伤是否具有保护作用 ,应用组织
化学方法进行了观察.
1　材料与方法
1.1　实验动物　昆明种小鼠 ,体重 20 g±2
·18· Journal of Medical Science Yanbian University　Mar.2001 Vol.24 No.1
DOI :10.16068/j.1000-1824.2001.01.005
g ,均为雄性 ,由延边大学医学院实验动物科
提供.
1.2　主要试剂　蓝靛果提取物由延边大学医
学院附属医院制剂科提供.蓝靛果总提物的制
备:于 6～ 7月份采集蓝靛果置于阴凉干燥处
干燥 ,再置于干燥器真空干燥 ,备用;准确称取
干燥果实 500 g ,加适量蒸馏水浸泡 12 h ,用捣
碎机捣碎 ,砂布过滤;残渣重新进行捣碎 ,纱布
过滤 ,重复 2次 ,合并滤液 ,滤纸抽滤 ,并将残
渣水洗至无颜色.将滤液用旋转蒸发器浓缩至
1 000 mL即得.四氯化碳为北京化学试剂厂产
品 ,批号为 1999年 3月 28日 ,分析纯.
1.3　方法　取 30只小鼠 ,随机分为 3个组 ,
即正常组 10只 ,肝损伤盐水(每 kg 体重 20
mL)组 10只 ,肝损伤蓝靛果(每 kg 体重 2.0
g)组 10 只.正常组不给任何药物 ,正常喂养;
后 2组均灌胃给药 ,每日 1次 ,共 6 d ,于第 1 、
第 6 d上午以每 kg 体重 10 mL 的剂量往各
只小鼠背部皮下注射 10 g/ L四氯化碳 ,全部
动物均于末次注射后 12 h 断头处死 ,迅速取
出肝左叶.取小块组织经 Carnoy 液固定 ,石
蜡包埋 ,切片厚为 6μm ,苏木素-伊红染色;另
取肝组织冰冻切片 ,切片厚为 10μm ,进行组
织化学染色.油红 O 法显示中性脂肪 ,琥珀
酸脱氢酶法显示乳酸脱氢酶活性[ 2] .
2　结果
2.1　中性脂肪　正常组肝细胞中被油红 O
染成桔红色的中性脂肪非常稀少 ,脂滴细小;
肝损伤盐水组坏死区肝细胞的脂滴被油红 O
染成桔红色 ,脂滴明显增多 ,大小不等 ,有的
大于肝细胞(图 1);肝损伤蓝靛果组油红 O
染色显示的脂滴范围和大小均减少(图 2).
2.2　乳酸脱氢酶　正常组肝细胞内乳酸脱
氢酶活性强 ,呈紫蓝色颗粒状 ,核不着色 ,小
叶周围活性强于中央带;肝损伤盐水组琥珀
酸脱氢酶活性显著降低(图 3),尤以中央带
明显 ,大部分波及整个中间带 ,小部分延及整
个小叶 ,受影响区域较宽;周边区大部分肝细
胞酶活性亦下降 ,但仍有部分细胞没有明显
变化.肝损伤蓝靛果组大部分肝小叶中央带
的乳酸脱氢酶活性减弱 ,但比肝损伤盐水组
的变化明显减轻 ,受影响的区域较窄 ,仅波及
中间带(图 4).
图1　四氯化碳肝损伤小鼠油红O法显示中性脂肪　3×40 图 2　蓝靛果处理小鼠油红 O法显示中性脂肪　5×40
·19·延边大学医学学报　2001 年 3 月　第 24卷　第 1期
图 3　四氯化碳肝损伤小鼠琥珀酸脱氢酶活性　5×40 图 4　蓝靛果处理小鼠琥珀酸脱氢酶活性　5×40
3　讨论
　　本实验用四氯化碳制成肝损伤动物模
型 ,其主要形态学和组织化学变化与前人所
见一致[ 3] .主要形态学反应为小叶发生中心
性脂肪变性坏死 ,经用蓝靛果治疗后 ,以中央
静脉为中心的坏死区缩小 ,含有脂滴多的肝
细胞明显减少 ,脂滴由多变少 ,由大变小 ,说
明蓝靛果具有减轻肝细胞坏死 、防止脂肪变
性及促进肝细胞恢复的作用.乳酸脱氢酶位
于线粒体外膜上 ,为其标志酶 ,位于所有有氧
呼吸的细胞内 ,它与线粒体膜牢固结合 ,定位
于线粒体内膜嵴.据报道 ,线粒体被损伤 ,即
使是形态上简单的膨胀或收缩都会影响其功
能 ,这就必然导致线粒体内膜标志蛋白酶
———乳酸脱氢酶活性受抑制 ,使其活性降低.
本实验中肝损伤盐水组乳酸脱氢酶活性降
低 ,肝损伤蓝靛果组乳酸脱氢酶活性增强 ,表
明蓝靛果可能促进肝线粒体恢复和再生.
　　上述结果提示蓝靛果对四氯化碳损伤小
鼠肝脏具有保护作用 ,这种保护作用可能与
通过该药减轻线粒体损伤和脂肪变性 ,继而
保护细胞膜性结构免受损害有关 ,其确切的
机理有待于进一步研究.
[参　考　文　献]
[ 1] 　郎杰 , 隋政 , 高慧英 著.蓝靛果降压作用的实验研究
[ J] .中医药信息 , 1996 , 1:45.
[ 2] 　陈啸梅 编.组织化学手册[ M] .北京:人民卫生出版
社 , 1982.224.
[ 3] 　金香子 , 李莲花 , 姜逢春 , 等 著.熊胆对四氯化碳所致
肝细胞损伤的保护作用[ J] .中国中医药科技 , 1999 , 6
(3):169.
·20· Journal of Medical Science Yanbian University　Mar.2001 Vol.24 No.1