全 文 ：白回收率)×100%,即已包含的挥发油占投入的 β-
环糊精量的质量分数 。另外还有含油率(%)=回
收的挥发油量 /(包合物得量 ×空白回收率)×
100%,即挥发油在包合物中的质量分数。这里给出
定义的包合率与含油率在数值上相差不大 ,但它们
与包合物的收率和油转化率数值相差悬殊 ,不宜同
时计入综合评价指标。由于得到的包合物可能不
纯 ,其中有未包合挥发油的 β-环糊精 ,因而包合物的
收率在综合评价指标中占 20%,油转化率占 80%。
本实验采用研磨法包合 ,便于工业生产 。在放
大试验中 ,因为胶体磨的研磨强度大 ,可以适当缩短
研磨时间和增大加水量 。挥发油的 β-环糊精包合
液的稀稠还要根据喷雾干燥的要求调节。放大试验
结果表明 ,正交试验的结果基本适用于生产 。采用
β-环糊精包合技术 ,能减少挥发油的逸散 ,使挥发油
粉末化 ,便于制成各种剂型 。
致谢:示差热分析由中山大学测试中心测试:气相色谱由中国科
学院广州分院测试中心色谱室测试;包合工艺的放大试验在天江药
业有限公司进行 ,特表谢忱。
参 考 文 献
[ 1] 国家药典委员会 .中华人民共和国药典 [ S] .一部 .北
京:化学工业出版社 , 2005:33, 162, 272.
[ 2] 刘亮峰 , 黄晓丹 ,蔡大可 , 等.广藿香油及藿香油的研究
概况 [ J] .中国中医药信息杂志 , 2009, 16(2):100-102.
[ 3] 刘如良 , 马秀红 .橘红与化橘红的药材应用鉴别 [ J] .
光明中医 , 2008, 23(8):1096-1097.
[ 4] 尹克春 ,吴焕林.邓铁涛教授调脾护心法治疗心力衰竭
经验 [ J] .新中医 , 2002, 34(5):11-12.
[ 5] 阮新民 , 江巍 ,林宇 , 等.调脾护心法改善冠状动脉搭桥
术患者临床疗效及生存质量的研究 [ J] .中国中西医结
合杂志 , 2006, 26(1):28-32.
[ 6] 阮新民 , 林宇 ,江巍 , 等.调脾护心法改善冠状动脉桥术
患者生存质量的研究 [ J] .中医杂志 , 2006, 47(8):586-
590.
[ 7] 宫淑艳 , 石春生 ,张炳吉 , 等.包合技术在中药制剂中的
应用 [ J] .中华临床医学卫生杂志 , 2005, 3(11):36-38.
[ 8] 易延逵 ,陈志良.环糊精包合中药复方中挥发性成分研
究 [ J] .南方医科大学学报 , 2006, 26(9):1337-1340.
收稿日期:2009-03-10基金项目:广西自然科学基金资助(桂科计字 [ 2004] 47号)作者简介:杨月(1951-),男 ,副教授 ,主要从事天然药物化学的研究;Tel:0773-5893362, E-mail:yangyue1951@glme.edu.cn。
广西刺楸茎皮中主皂苷成分提取工艺研究
杨　月1 ,杨新平 2 ,刘笑甫 1 ,蒋小军1
(桂林医学院 1.天然药物教研室;2.有机药物化学教研室 ,广西 桂林 541004)
　　摘要　利用正交试验设计 ,用乙醇回流法提取广西刺楸茎皮中的总皂苷 , 并采用大孔吸附树脂和正丁醇分别
对其进行分离 , 通过纯度分析和得率计算 , 探索其主皂苷成分的最佳提取工艺。实验结果表明采用大孔吸附树脂
法分离主皂苷成分得率为 1.32%, 而采用正丁醇法分离其得率为 1.05%;且大孔吸附树脂法的产品外观颜色优于
正丁醇法。采用大孔吸附树脂法提取分离该植物的主皂苷成分 ,成本低 , 操作简便易行且具有非常强的实用性。
关键词　大孔吸附树脂;正丁醇;正交试验;主皂苷成分
中图分类号:R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2009)09-1457-03
StudiesonExtractionProcessoftheMainSaponinConstituentsfromtheStem
BarkofKalopanaxseptemlobusinGuangxi
YANGYue1 , YANGXin-ping2 , LIUXiao-fu1 , JIANGXiao-jun1
(1.DepartmentofNaturalMedicinal;2.DepartmentofMedicinalChemistry, GuilinMedicalColege, Guilin541004, China)
Abstract　Usingorthogonalexperimentdesign, thetotalsaponinconstituentswereobtainedbyrefluxingextractionwithalcohol
andseparatedbymacroporousadsorptionresinandn-ButylalcoholfromthestembarkofKalopanaxseptemlobus.Accordingtothepuri-
tyanalysisandtheyield, theextractionprocesswasoptimized.Theresultsshowedthatthemainsaponinconstituentsweregainedwith
ayieldof1.32% byusingmacroporousadsorptionresinbut1.05% byusingn-Butylalcohol.Theformerwasmoreeficientthanthe
lateronbothyieldandcolor.Theoptimalprocesswithisolationbymacroporousadsorptionresinischeap, simpleandpractical.
Keywords　Macroporousadsorptionresin;n-Butylalcohol;Orthogonalexperiment;Mainsaponinconstituents
·1457·JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 32卷第 9期 2009年 9月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2009.09.042
　　刺楸系五加科刺楸属植物(Kalopanaxseptemlo-
bus(Thunb.)Koidz.),全国各省均有分布 ,喜阳光充
足和湿润的土壤 ,在山谷 、溪旁 、林缘中常见 ,根皮可
供药用 ,用治风湿腰膝酸痛 、肾炎水肿 、跌打损伤 、内
痔便血 〔1〕。据文献报道刺楸中主要含的皂苷成分
为刺楸皂苷 A(KalopanaxsaponinA),水解后可产生
长春藤皂苷元 、阿拉伯糖及鼠李糖;刺楸皂苷 B
(KalopanaxsaponinB),水解后产生一分子阿拉伯
糖和两分子鼠李糖〔2, 3〕;此外 ,还有刺楸皂苷 C、刺楸
皂苷 D、刺楸皂苷 F、刺楸皂苷 La、刺楸皂苷 Lb、刺
楸皂苷 Lc、刺楸皂苷 Jla、刺楸皂苷 Jlb,以及从长白
山产的刺楸根中分离出来的两种微量新皂苷———刺
楸皂苷 G和刺楸皂苷 H等〔4〕。本文对广西刺楸茎
皮中的主皂苷成分提取工艺进行了研究 ,现报道如
下 。
1　材料与方法
1.1　材料　刺楸采自广西桂林全州县 ,经桂林医
学院王育生副教授鉴定为五加科刺楸属植物刺楸
[ Kalopanaxseptemlobus(Thunb.)Koidz.] 。
1.2　仪器　DZF-150型数显自控可调真空干燥箱
(郑州长城科工贸有限公司);HH-SI-4恒温水浴箱
(上海跃进医疗器械厂);B型玻璃仪器烘干器(郑
州长城科工贸有限公司);RE501旋转蒸发器(巩义
市予华仪器有限公司);TN-100B托盘式扭力天平
(上海第二天平仪器厂)。
1.3　药品与试剂　大孔树脂 D101(天津橡胶厂);
硅胶 G、H(薄层用 ,青岛海洋化工集团公司);0.8%
CMC-Na溶液;D-葡萄糖(药用);L-鼠李糖(自制);
甲醇(上海振兴化工厂 , AR);正丁醇 (广东西陇化
工厂 , AR);乙醇(东莞东江化学试剂厂 , AR);氯仿
(武汉宏大化学试剂厂 , AR);乙酸酐 (广州化学试
剂厂 , AR)。显色剂:甲醇-浓硫酸 (1∶1);展开剂:
CHCl3-MeOH-H2O(65∶35∶6)。
1.4　刺楸茎皮中总皂苷成分的提取　称取刺楸茎
皮粗粉 100g(9份),取不同浓度的乙醇在水浴上回
流提取(按照正交设计方法进行试验)。选择乙醇
浓度 、乙醇倍数 、提取时间 、提取次数 4个因素进行
考察 ,选用 L9(34)表安排实验 ,考察指标为提取物
干重 ,因素 、水平见表 1。
　表 1 　因素水平表
因素 A乙醇浓度/% B乙醇倍数/倍 C提取时间/min D提取次数/次
1 60 3 50 3
2 75 4 60 4
3 85 5 90 5
　　各提取液用 10%NaOH水溶液调至 pH9,放置
过夜 ,使鞣质形成絮状沉淀 ,过滤后将滤液用 10%
的 HCl水溶液调至中性 ,加热回收溶剂 ,将浓缩物
蒸干后 ,置于真空干燥箱内干燥 ,各干燥物称重 ,实
验结果见表 2。
　表 2 　正交试验结果
因素 A B C D 乙醇提取物干重/g
1 1 1 1 1 3.12
2 1 2 2 2 3.84
3 1 3 3 3 3.82
4 2 1 2 3 3.50
5 2 2 3 1 3.52
6 2 3 1 2 3.70
7 3 1 3 2 4.10
8 3 2 1 3 4.21
9 3 3 2 1 4.20
K1 10.78 10.72 11.03 10.84
K2 10.72 11.57 12.54 11.64
K3 12.51 11.72 11.44 11.53
K1 3.59 3.57 3.67 3.61
K2 3.57 3.86 3.84 3.88
K3 4.17 3.91 3.81 3.84
R 0.58 0.34 0.17 0.27
　　根据实验结果分析 ,确定总皂苷的最佳提取方
法为 A3B3C2D2 ,即用 5倍量 85%EtOH回流 4次 ,每
次提取时间为 60 min。
将最佳提取工艺制得的乙醇提取物经初步分离
纯化后的提取物分别用大孔吸附树脂与正丁醇进行
主皂苷成分的分离工艺研究 。
1.5　大孔吸附树脂分离刺楸茎皮中主皂苷成分
1.5.1　大孔吸附树脂的预处理:取市售的大孔吸
附树脂 ,用乙醇洗脱洗至洗脱液蒸干后无残留物 ,经
乙醇洗净的树脂挥去溶剂后保存备用。
1.5.2　以乙醇湿法装柱(静态法),继续用乙醇在
柱上流动清洗 ,不时检查流出的乙醇 ,将乙醇流出液
加水混合不产生白色混浊为止(取 1 mL乙醇液加 5
mL水),然后以大量的蒸馏水洗 ,除去乙醇 ,备用。
不除去残留在树脂中的少量乙醇 ,将会大大降低树
脂的吸附力。
1.5.3　上样与总皂苷成分洗脱:取乙醇提取物(见
表 3)用蒸馏水(1∶30)温热溶解 ,放冷 ,过滤 ,滤液用
氯仿萃取 3次 ,氯仿萃取液经化学鉴定未检出皂苷
成分 。吸取水溶液加到已处理好的大孔吸附树脂柱
上(乙醇提取物与树脂的比例为 1∶50),慢慢滴加完
·1458· JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 32卷第 9期 2009年 9月
后 ,分别用 30%、50%、70%、90%的乙醇洗脱 ,收集
各洗脱部分 。用乙酸酐-浓硫酸反应跟踪皂苷成分 ,
结果在乙醇浓度为 30%、90%时未检出皂苷成分 ,
而在乙醇浓度为 50%、70%时检出有皂苷成分 。
用 50%、70%乙醇洗脱液 ,在硅胶 G板上点样 ,
以 CHCl3-MeOH-H2O(65∶35∶6)展开 ,经显色 ,检出
主要有 Rf值为 0.2(Ⅰ )和 0.6(Ⅱ)的两个主斑点
一致的洗脱液 ,合并蒸干 ,得刺楸中主皂苷成分的各
部分提取物 ,真空干燥 ,分别称重 ,主皂苷平均得率
为 1.32%。结果见表 3。
　表 3　　　　　大孔吸附树脂法分离刺楸
主皂苷成分的结果(n=3)
批次 乙醇提取物/g (Ⅰ )+(Ⅱ)总重量 /g 得率/% 平均得率/%
1 3.50 0.046 1.31
2 3.80 0.050 1.32 1.32
3 4.00 0.055 1.34
1.6　正丁醇萃取法分离刺楸茎皮中主皂苷成分　
取乙醇提取物(见表 4)用适量蒸馏水(1∶30)温热
溶解 ,放冷 ,过滤 ,滤液用氯仿萃取 3次 ,氯仿萃取液
经化学鉴定未检出皂苷成分。水溶液再以 n-BuOH
(正丁醇)萃取 10次 ,用量为 n-BuOH∶水溶液 =1∶
6,萃取至水溶液中无皂苷反应为止 ,合并正丁醇萃
取液 ,减压回收 n-BuOH后有产物析出 ,放冷 ,析出
淡黄色粉末 ,真空干燥 ,称重 。薄层检查有 6个斑
点 ,其中检出主要有 Rf值为 0.2(Ⅰ)和 0.6(Ⅱ)的两
个斑点 ,主要皂苷平均得率为 1.05%。结果见表 4。
　表 4　正丁醇萃取法分离刺楸主皂苷成分的结果(n=3)
批次 乙醇提取物/g (Ⅰ )+(Ⅱ)总重量 /g 得率/% 平均得率/%
1 3.50 0.034 0.97
2 3.80 0.040 1.05 1.05
3 4.00 0.045 1.13
2　主皂苷成分的化学鉴定和成分分析
(Ⅰ )和(Ⅱ)经 Liebermann反应 ,产生的颜色由
黄色逐渐变为红色 、紫色 、蓝色 ,最后为黑色 〔5〕。取
(Ⅰ )和(Ⅱ)各 20 mg加 25%(W/W)的 NH4OH水
溶液 10 mL,加热回流 4 h,用薄层色谱法检查 ,用
10%H2SO4甲醇溶液显色 ,在用对照品展开时发现
(Ⅰ )中 C28位有酯基糖苷存在 ,通过水解液与葡萄
糖标准品 ,在硅胶-硼酸板上用展开剂展开得同一斑
点 ,可知水解液中有葡萄糖和 L-鼠李糖 。通过熔点
测定 、色谱检识初步鉴定为刺楸皂苷 B〔6〕。 (Ⅱ)通
过分析确定为皂苷成分 ,具体成分有待进一步确定。
3　讨论
3.1　两种分离方法的纯度检查 ,通过薄层色谱法
可以明显看出大孔吸附树脂法获得的主皂苷成分得
率高于正丁醇提取法 ,且提取的产品纯度较高 ,这点
可通过薄层色谱法分析予以确定 。
3.2　在用正丁醇萃取法时 ,正丁醇萃取前应当先
加入足量蒸馏水 ,使之饱和 ,这样可以在萃取时达到
更好的效果。但由于正丁醇沸点较高 、粘度较大 ,溶
剂回收较困难 。大孔吸附树脂法在装柱前应当处理
好 ,否则也会影响分离效果 ,还应注意的是要尽量将
气泡除去 ,以避免柱子出现断层 ,影响分离效果。大
孔吸附树脂洗脱的速度应当慢 ,以 3mL/min的速度
为宜 ,以保证分离的效果 。
参 考 文 献
[ 1] 全国中草药汇编编写组 .全国中草药汇编 (上册)
[ M] .北京:人民卫生出版社 , 1976:487-488.
[ 2] ParkHJ, KwonSH, LeeJH, etal.KalopanaxsaponinA
isabasicsaponinstruturefortheanti-tumoractivityof
Hederageninmonodesmosides[ J] .PlantaMed, 2001, 66
(4):118-121.
[ 3] 孙文基 , 张登科 .刺楸根皮中皂苷的化学成分研究
[ J] .药学学报 , 1990, 25(1):29-34.
[ 4] 王广树 , 孙平 .新刺楸皂苷 G和 H的化学结构的研究
[ J] .中国药学杂志 , 1995, 30(6):333-335.
[ 5] 杨月 .天然药物化学实验(第二版)[ M] .北京:中国医
药科技出版社 , 2006:193.
[ 6] 杨月 , 蒋小军 ,李丽 .刺楸茎皮中皂苷的化学成分初步
研究 [ J] .华夏医学 , 2004, 17(4):501-502.
售 《中药材 》杂志合订本
现有 1990年(50元), 1991年(50元), 1992年(50元), 1995年(70元), 1996年(70元), 1997年(75
元), 1998年(精装 100元), 1999年(精装 100元), 2000年(精装 150元), 2001年 、2002年 、2003年 、2004年
(精装上 、下册每年 180元), 2005年 、2006年(精装上 、下册每年 200元), 2007(精装上 、下册 220元)《中药
材 》杂志合订本。需者请汇款至 《中药材》编辑部购买。
·1459·JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 32卷第 9期 2009年 9月