全 文 :示 , 皱瘤海鞘抗病毒活性成份可是一些溶于水的物质 , 这为我
们进一步对皱瘤海鞘抗病毒活性的物质基础追踪指明了方向。
海洋中有丰富的资源 , 近几年来 , 在寻找有效抗病毒药物
的过程中 , 不断发现海洋生物对病毒有良好抑制作用 [ 6, 7] 。本
实验表明海鞘的有效部位对 HSV-2具有一定的抑制作用 , 其抗
病毒作用的药理活性值得进一步深入研究。
参考文献
1 FreemanEE, WeissHA, GlynnJR, etal.Herpessimplexvirus2infec-
tionincreasesHIVacquisitioninmenandwomen:systematicreviewandme-
ta-analysisoflongitudinalstudies.AIDS, 2006;20∶ 73 ~ 83
2 KimberlinDW, WhitleyRJ.Neonatalherpes:whathavewelearned.
SeminPediatrInfectDis., 2005;16∶ 7~ 16
3 万新详 , 张鑫 , 刘强 , 等.皱瘤海鞘乙醇提取物抗乙肝 HBsAg和
HBeAg的初步研究.中国海洋药物 , 2003;3∶ 40~ 42
4 WangR, DuZL, DuanWJ, etal.AntiviraltreatmentofhepatitisBvi-
rus-transgenicmicebyamarineorganismStyelaplicata.WorldJGastroen-
terol, 2006;12(25)∶ 4038~ 4043
5 胡文军 ,万新详.皱瘤海鞘提取物体外抗乙肝病毒有效部位的筛选.
中国医院药学杂志 , 2004;24(4)∶ 202 ~ 203
6 于囡 ,刘赛,王海桃 ,等.扇贝裙边糖胺聚糖体外抗I型单纯疱疹病毒
实验研究.中国药理学通报 , 2008;24 (2)∶ 210~ 213
7 朱萧 ,于红 , 张文卿.钝顶螺旋藻多糖抗单纯疱疹病毒 2型的作用.
中山大学学报(医学科学版), 2008;29(1)∶ 73~ 76
Thescreeningofeffectivefractionforanti-Herpessimplexvirus2 fromStyelaplicata
ZhouZhipin1, 2 , LiangHuajuan1 , WanXinxiang1
(1 PharmaceuticalResearchCenter, SouthernMedicalUniversity, Guangzhou 510315;
2 GuangxiTraditionalChineseMedicalUniversity, Nanning 530001)
Objective:Toscreeneffectivefractionsforanti-Herpessimplexvirus2 fromStyelaplicata.Methods:ThemodelthatHerpessimplex
virus2 proliferateinverocellswasapplied, CytopathicefectassayandMTTassaywasappliedtoevaluatetheeffectofdefferentfractionfrom
StyelaplicataonHerpessimplexvirus2 invitro.Results:AntiHerpessimplexvirus2wasdemonstratedinwater-solublefraction, andthere
wasnosignificantefcetinchloroformandn-butanolfractions.Conclusions:ExtractionsfromStyelaplicatahasanti-Herpessimplexvirus2
effect, andtheeffectivefractionmaybethewater-solublecomponents.
Keywords Styelaplicata;efectivefraction;anti-HSV-2
贵州产菝葜属及肖菝葜属 8个品种镇痛及抗炎作用研究*
陈秀芬 ,任广聪 ,曲国玉 ,董凯旋 ,黄勇其 ,董立莎**
(贵阳中医学院 ,贵阳 550002)
摘 要 目的:通过镇痛及抗炎试验比较菝葜属及肖菝葜属 8个品种间总提取物药效作用的异同。方法:采用冰醋酸致小鼠
扭体法及热板法镇痛试验 , 二甲苯致小鼠耳肿胀 、角叉菜胶致大鼠足肿胀和小鼠棉球肉芽肿形成的抗炎试验 ,对 8个品种进行抗炎
镇痛试验比较。结果:在冰醋酸致小鼠扭体法镇痛试验中 , 8个品种均具有显著镇痛作用;在热板法镇痛试验中 , 菝葜 、柔毛菝葜 、托
柄菝葜 、小叶菝葜 、黑叶菝葜具有显著镇痛作用。 8个品种对小鼠棉球肉芽形成均具有显著抑制作用 ,而短梗菝葜 、黑叶菝葜及短柱
肖菝葜三个品种对角叉菜胶致大鼠足肿胀亦具有显著抑制作用 , 表明它们对亚急性炎症及慢性增生性炎症的抗炎作用较好 ,但对
二甲苯致小鼠耳廓炎症肿胀急性炎症的效果较差。结论:菝葜属及肖菝葜属中 8个品种具有一定的镇痛 、抗炎作用 , 可作为菝葜属
及肖菝葜属新的药用资源开发提供可能的依据。
关键词 菝葜属;肖菝葜属;抗炎;镇痛
百合科菝葜属(SmilaxL.)及肖菝葜属(HeterosmilaxK.)植
物在贵州省有药用记载的共 33种 , 其中肖菝葜属的有 2种 [ 1] ,
多为本省民间用药 , 蕴藏量较大 , 其中作为中药收载 2010版
《中华人民共和国药典》(一部)的现仅有光叶菝葜 Smilaxglabra
Roxb.和菝葜 SmilaxchinaL.两种的根茎 , 均具有解毒散瘀 、除
湿 、止痛等功效 [ 2] 。菝葜及土茯苓水 、醇提物对二甲苯所致小
鼠耳肿胀有显著抑制作用 , 能明显抑制蛋清及角叉菜胶所致的
小鼠足肿胀 ,对醋酸所致小鼠扭体反应均有明显抑制作用 [ 3 ~ 5] 。
关于贵州产菝葜属及肖菝葜属其他品种药效的研究迄今未见
报道 ,故本文以镇痛抗炎试验为指标 , 首次对贵州菝葜属及肖菝
63中药药理与临床 2010;26(6)
* [基金项目 ]国家自然科学基金资助项目(30960503),贵州省科学技术基金资助项目(黔科合 J字 [ 2008] 2143号) **责任作者
DOI :10.13412/j.cnki.zyy l.2010.06.020
葜属 8个品种进行了药效学的比较研究 , 旨在为开发利用贵州
省新的药用资源奠定一定实验基础及可能的依据。
1 材料与方法
1.1 试验药物 菝葜属及肖菝葜属 8个品种药材样品由作者
在贵州产地采集 , 并经贵阳中医学院药学系生药教研室董立莎
教授鉴定为小叶菝葜 (S.microphylla)、黑叶菝葜 (S.nigres-
cens)、短梗菝葜(S.scobinincaulis)、菝葜(S.china)、托柄菝葜
(S.discotis)、光叶菝葜(土茯苓 S.glabra)、柔毛菝葜(S.chingi)
及短柱肖菝葜(H.yunnanensis)。除去地上部分后 , 根茎或根洗
净 , 切片 ,阴干备用。通过预试验 , 8个品种药材以 60%乙醇提
取物 , 高剂量作为受试药物。按文献方法 [ 6] , 土茯苓中有效成
分的提取以 10倍量 60%乙醇提取 3次 , 每次 1.5 h, 故本试验
所用 8个品种受试药均以此条件制备 , 得到收膏率分别为:菝葜
为 25.5%, 土茯苓 21.9%,柔毛菝葜 13.4%, 托柄菝葜 14.9%,
短梗菝葜 11.9%,小叶菝葜 14.3%,黑叶菝葜 10.6%,短柱肖菝
葜 14.1%。分别精密称取 8个品种的浸膏粉 ,用 0.2 ml吐温-
80先碾磨后再加蒸馏水配制成相应浓度的混悬液。阿司匹林
肠溶片(国药准字 H32025901, 规格:每片 50mg, 批号:081009,
江苏平光制药有限责任公司)。
1.2 动物 昆明种小鼠 , 一级 , 6 ~ 8周龄 , 体重 20±2g, 雌雄
各半;Wistar大鼠 , 体重 150 ~ 180g, 雌雄各半。由贵阳医学院
实验动物中心提供 , 动物质量合格证:SCXK(黔)2008-0001。
1.3 试剂 二甲苯(成都东金化学试剂有限公司生产 , 批号:
20040403), 冰醋酸(天津市致远化学试剂有限公司 , 批号:
080116)。
1.4 仪器 ASRB-300型智能热板仪(成都遨生电子有限公司
)。
1.5 方法
1.5.1 冰醋酸致小鼠扭体法镇痛试验 取小鼠 140只 , 随机
分组的原则将其平均分为 10组 , 分别作为空白对照(生理盐
水)组 、阿司匹林组 、菝葜组 、土茯苓组 、柔毛菝葜组 、托柄菝葜
组 、短梗菝葜组 、小叶菝葜组 、黑叶菝葜组及短柱肖菝葜组 , 每组
14只。 2次 /24h给药 ,共给药 5次 ,给药体积 0.2ml/10g。末次
给药后 1h,各组小鼠再腹腔注射 0.7%冰醋酸溶液 0.2ml/只 ,
观察 15min内出现扭体反应的次数 [ 6] 。
镇痛百分率(%)=[ (空白对照组扭体反应次数 -空白给药组扭体反应次
数)/空白对照组扭体反应次数 ] ×100%
1.5.2 热板镇痛试验 各组小鼠于给药前先用热板测痛仪
(55±0.5 ℃)分别测定每只小鼠的正常痛阈值。测定小鼠放于
热板上至出现舔后足的所需时间作为痛阈值(秒), 连续 2次 ,
间隔 30min,以两次痛阈值的平均值作为该小鼠给药前的正常
痛阈值。将舔后足时间小于 5s或大于 30s, 或跳跃者不用于此
实验。取合格小鼠 140只 , 雌雄各半 , 按随机分组的原则 , 将其
平均分为 10组 , 分别作为空白对照(生理盐水)组 、阿司匹林
组 、菝葜组 、土茯苓组 、柔毛菝葜组 、托柄菝葜组 、短梗菝葜组 、小
叶菝葜组 、黑叶菝葜组及短柱肖菝葜组 , 每组 14只。 2次 /24h,
共 5次 , 给药体积 0.2ml/10g。末次给药后 30min, 测小鼠痛阈
值。如 60s仍无反应 , 其痛阈值以 60s计算。
镇痛率(%)=[ (给药组痛阈值 -空白对照组痛阈值)/空白对照组痛阈值 ]
×100%
1.5.3 二甲苯致小鼠耳肿胀试验 取小鼠 140只 , 按随机分组
的原则 ,将其平均分为 10组 , 分别作为空白对照(生理盐水)
组 、阿司匹林组 、菝葜组 、土茯苓组 、柔毛菝葜组 、托柄菝葜组 、短
梗菝葜组 、小叶菝葜组 、黑叶菝葜组及短柱肖菝葜组 , 每组 14
只。每天灌喂给药一次 , 连续 5 d, 给药体积 0.2 ml/10g。在最
后一次给药后的 1.5 h用致炎剂均匀涂于小鼠右耳正反两面 ,
每只小鼠 0.03ml, 左耳不涂作为对照 , 40 min后脱臼处死小鼠
并沿耳基线剪下左右两片耳朵 , 用 8 mm的打孔器分别在左右
两片耳朵钻取相同部位 ,置于精密电子天平上称量 , 计算肿胀度
和抑制率。
抑制率(%)=[ (对照组耳肿胀度 -给药组耳肿胀度)/对照组耳肿胀度 ] ×
100%
1.5.4 对角叉菜胶性大鼠足肿胀的影响试验 取大鼠 140只 ,
按随机分组的原则 , 将其平均分为 10组 , 分别作为空白对照
(生理盐水)组 、阿司匹林组 、菝葜组 、土茯苓组 、柔毛菝葜组 、托
柄菝葜组 、短梗菝葜组 、小叶菝葜组 、黑叶菝葜组及短柱肖菝葜
组 ,每组 14只。每天灌喂给药一次 , 连续 5 d, 给药体积 1 ml/
100 g。未给药前 , 用千分尺测定大鼠正常足掌厚度 , 给药 20
min后 , 分别在大鼠的后肢足爪皮下注射 1%角叉菜胶致炎 , 用
游标卡尺测量致炎前及致炎后 1、2、4、6、8 h各测定一次足同一
部位的厚度 ,记录结果 , 以致炎前后足厚度的差值作为肿胀度。
肿胀度 =致炎后足厚度 -致炎前足厚度。
1.5.5 小鼠棉球肉芽肿试验 取小鼠 140只 , 按随机分组的原
则 ,将其平均分为 10组 ,分别作为空白对照(生理盐水)组 、阿
司匹林组 、菝葜组 、土茯苓组 、柔毛菝葜组 、托柄菝葜组 、短梗菝
葜组 、小叶菝葜组 、黑叶菝葜组及短柱肖菝葜组 ,每组 14只。在
戊巴比妥纳麻醉(30 mg/kg)无菌条件下(在每只鼠的左右蹊部
用碘酒消毒 , 75%酒精棉球脱碘后), 于小鼠胸部却开 1cm的小
口 ,植入(10±1)mg的灭菌(高压灭菌)棉球 2个分别放于左右
腋下(皮下), 缝合。术后当日开始灌胃给药 0.2 ml/10g, 每天 1
次 ,连续 13 d。于第 14 d处死小鼠后取出棉球 ,剔除脂肪组织 ,
在 60℃烘箱中烘 24 h, 称重 , 减去棉球原重量 , 即为肉芽肿重
量。
抑制率(%)=[ (空白对照组肉芽重量均值-给药组肉芽重量均值)/空白对
照组肉芽重量均值 ] ×100%
2 结果
2.1 菝葜属及肖菝葜属 8个品种小鼠扭体法试验 结果见表
1。
表 1 菝葜属及肖菝葜属 8个品种小鼠扭体法试验( x±s)
组别 剂量(生药)(g/kg)
鼠数
(只)
扭体次数
(次 /15min)
镇痛百分率
(%)
生理盐水组 14 22.23±10.04
阿司匹林组 0.5 14 4.54±5.52* 79.58
菝葜组 5 14 11.08±8.55* 50.16
土茯苓组 5 14 10.92±7.78* 50.88
柔毛菝葜组 5 14 11.77±8.78* 47.05
托柄菝葜组 5 14 11.46±9.59* 48.45
短梗菝葜组 5 14 12.31±10.50* 44.62
小叶菝葜组 5 14 12.00±6.59* 46.02
黑叶菝葜组 5 14 11.92±6.61* 46.38
短柱肖菝葜组 5 14 12.62±8.42* 43.22
与生理盐水组相比较 *P<0.05, ** P<0.01(下同)
64 中药药理与临床 2010;26(6)
从表 1可见 , 菝葜属及肖菝葜属 8个品种均具有明显的镇
痛作用 , 且在相同的有效剂量下 , 8个品种间没有明显差异。
2.2 菝葜属及肖菝葜属 8个品种小鼠热板法试验 结果见表
2。
表 2 菝葜属及肖菝葜属 8个品种的镇痛作用小鼠热板法试验( x±
s)
组别 剂量(生药)(g/kg)
鼠数
(只)
痛阈值
(S)
镇痛百分率
(%)
生理盐水组 14 14.03±3.71
阿司匹林组 0.5 14 26.54±7.38* 89.17
菝葜组 5 14 22.04±8.99* 57.09
土茯苓组 5 14 18.89±6.86 34.64
柔毛菝葜组 5 14 22.81±10.34* 62.58
托柄菝葜组 5 14 23.79±9.13* 69.57
短梗菝葜组 5 14 19.09±6.33 36.07
小叶菝葜组 5 14 21.49±4.05* 53.17
黑叶菝葜组 5 14 22.16±4.90* 57.95
短柱肖菝葜组 5 14 17.61±5.91 25.52
从表 2可见 , 菝葜属及肖菝葜属中菝葜 、柔毛菝葜 、托柄菝
葜 、小叶菝葜 、黑叶菝葜均具有显著的镇痛作用 ,而土茯苓 、短梗
菝葜 、短柱肖菝葜无显著的镇痛作用。
2.3 菝葜属及肖菝葜属 8个品种对二甲苯致小鼠耳肿胀的影
响 结果见表 3。
表 3 菝葜属及肖菝葜属 8个品种对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响
( x±s)
组别 剂量 g(生药)/kg
动物数
(只)
炎症肿胀度
(mg)
抑制率
(%)
生理盐水组 14 16.90±5.36
阿司匹林组 0.5 14 10.42±8.17 38.34
菝葜组 5 14 18.81±16.11 -
土茯苓组 5 14 14.01±5.08 17.10
柔毛菝葜组 5 14 16.84±3.68 -
托柄菝葜组 5 14 17.75±6.03 -
短梗菝葜组 5 14 23.87±33.78 -
小叶菝葜组 5 14 13.96±5.46 17.40
黑叶菝葜组 5 14 14.49±7.13 14.26
短柱肖菝葜组 5 14 17.41±5.71 -
-:无抑制作用
从表 3可见 ,菝葜属及肖菝葜属 8个品种对二甲苯致小鼠耳
廓炎症肿胀均无显著抑制作用 , 即对这种炎症模型无抗炎作用。
2.4 菝葜属及肖菝葜属 8个品种对角叉菜胶性大鼠足肿胀的
影响 结果见表 4。
表 4 菝葜属及肖菝葜属 8个品种对角叉菜胶性大鼠足肿胀的影响( x±s, n=14)
组别 剂量(生药)(g/kg)
致炎后不同时间的足肿胀度(mm)
1h 2h 4h 6h 8h
生理盐水组 2.55±0.03 2.54±0.04 2.59±0.04 2.39±0.03 2.12±0.03
阿司匹林组 2.5 1.89±0.03* 1.78±0.03* 1.86±0.04* 1.60±0.04* 1.66±0.03*
菝葜组 2.5 2.52±0.04 2.55±0.04 2.56±0.03 2.37±0.04 2.12±0.04
土茯苓组 2.5 2.51±0.02 2.54±0.04 2.58±0.04 2.37±0.03 2.16±0.03
柔毛菝葜组 2.5 2.57±0.04 2.56±0.04 2.57±0.04 2.37±0.06 2.10±0.04
短梗菝葜组 2.5 2.50±0.05 2.52±0.06 2.15±0.05* 2.16±0.05 1.79±0.05*
短柱肖菝葜组 2.5 2.52±0.04 2.54±0.05 2.13±0.03* 2.17±0.04 2.04±0.04
小叶菝葜组 2.5 2.52±0.03 2.54±0.03 2.57±0.03 2.37±0.04 2.10±0.03
黑叶菝葜组 2.5 2.52±0.03 2.55±0.04 2.10±0.04* 2.11±0.04 2.01±0.03
托柄菝葜组 2.5 2.55±0.04 2.53±0.03 2.56±0.04 2.36±0.05 1.99±0.04
从表 4可见 , 在致炎后 4 h时 , 仅有短梗菝葜 、黑叶菝葜及
短柱肖菝葜三个品种具有显著抗炎作用 , 而短梗菝葜抗炎作用
持续时间较长 , 在致炎后 8 h仍有显著抗炎作用。
2.5 菝葜属及肖菝葜属 8个品种对小鼠棉球肉芽肿形成的影
响 结果见表 5。
表 5 菝葜属及肖菝葜属 8个品种对小鼠棉球肉芽肿形成的影响
( x±s)
组别 剂量(生药)g/kg
鼠数
(只)
肉芽重量
(mg)
抑制率
(%)
生理盐水组 14 32.70±6.25
阿司匹林组 0.5 14 23.60±4.06* 27.83
柔毛菝葜组 5 14 25.92±4.16* 20.73
黑叶菝葜组 5 14 25.71±6.67* 21.38
菝葜组 5 14 25.63±4.45* 21.62
托柄菝葜组 5 14 26.99±5.23* 17.46
短梗菝葜组 5 14 26.23±4.31* 19.79
土茯苓组 5 14 24.70±3.84* 24.46
小叶菝葜组 5 14 26.28±2.60* 19.63
短柱肖菝葜组 5 14 25.39±5.89* 22.35
从表 5可见 , 菝葜属及肖菝葜属 8个品种对小鼠棉球肉芽
形成均具有显著抑制作用 , 短梗菝葜 、黑叶菝葜和短柱肖菝葜三
个品种具有显著抗炎作用 , 而短梗菝葜抗炎作用持续时间较长 ,
在致炎后 8 h仍有显著抗炎作用。
3 讨论
3.1 小鼠扭体法镇痛实验表明菝葜属及肖菝葜属 8个品种均
具有明显的镇痛作用 ,且镇痛作用强度相近;小鼠热板法镇痛实
验中菝葜 、柔毛菝葜 、托柄菝葜 、小叶菝葜和黑叶菝葜也呈现显
著镇痛作用。
3.2 菝葜属及肖菝葜属 8个品种对小鼠棉球肉芽形成均具有
显著抑制作用 ,而短梗菝葜 、黑叶菝葜及短柱肖菝葜三个品种对
角叉菜胶致大鼠足肿胀亦具有显著抑制作用 ,表明它们对亚急
性炎症及慢性增生性炎症的抗炎作用较好 , 但对二甲苯致小鼠
耳廓炎症肿胀急性炎症的效果较差。
3.3 据《新编中药志》记载 [ 7] , 百合科植物短梗菝葜 ,黑叶菝葜
根皮根茎在我国北方作威灵仙药用有较长的历史 , 其具有祛风
除湿 、散瘀 、解毒等功效 ,用量可至 30g, 这与我们试验结果相吻
合。
3.4 柔毛菝葜 、托柄菝葜 、短梗菝葜 、小叶菝葜 、黑叶菝葜及短
柱肖菝葜具有一定的镇痛 、抗炎作用 , 可作为菝葜属及肖菝葜属
65中药药理与临床 2010;26(6)
新的药用资源开发提供可能的依据。
致谢:本论得到成都中医药大学黄国钧教授的悉心指导。
参考文献
1 贵州植物志编辑委员会.贵州植物志(第三卷).贵阳:贵州人民出版
社 , 1986∶426~ 457
2 中华人民共和国药典委员会编著.中华人民共和国药典(一部)2010
年版 ,北京:中国医药科技出版社 , 2010∶ 216 ~ 217
3 张白嘉 ,刘亚欧.土茯苓及落新妇苷抗炎镇痛及利尿作用研究.中药
药理与临床 , 2004;20(1)∶11 ~ 12
4 孙晓龙 ,王宽宇.土茯苓注射液抗炎 、镇痛作用的实验研究.中国中
医药科技 , 2004;11(4)∶231~ 232
5 沙飞 ,禹志领.土茯苓品质与药理研究进展.中药材 , 2006;5(29)∶
516~ 518
6 张永太 ,冯年平.土茯苓中有效成分提取工艺考察.中成药 , 2007;29
(7)∶2 ~ 3
7 肖培根.新编中药志(第一卷).北京:化学工业出版社 , 2001;689 ~
692
二仙汤对青春期肥胖雄性大鼠生长发育的早期干预作用*
张东方 1 ,郑玉凤 2 ,赵书楷 2 ,袁长季 1
(1中国医科大学药学院 ,沈阳 110001;2东北制药集团供销有限公司 ,沈阳 110023)
摘 要 目的:探讨二仙汤(EXD)对青春期肥胖大鼠发育迟缓的早期干预作用。方法:采用高脂饲料喂养大鼠 6周建立肥胖
大鼠模型 , 分别以 1.0、2.0、4.0g/kgEXD早期干预 7周 ,测量体重 ,体长 , 计算 Lees指数 , 称睾丸重量 ,计算脏器系数 ,睾丸组织显微
观察 , 采用放射免疫法测定血清 T、E
2
。结果:与空白对照组对比 , EXD组大鼠体重 、体长 、Lees指数 、睾丸重量 、T均明显改善;而各
组大鼠 E2均无显著性差异;正常对照组和 EXD组大鼠睾丸生精小管发育正常 , 空白对照组部分大鼠睾丸生精小管出现异常。结
论:高脂饲料能抑制大鼠生长发育 , 而二仙汤能有效改善营养型肥胖大鼠生长发育。
关键词 二仙汤 ,青春期发育迟缓 , 肥胖
二仙汤由仙茅 、淫羊藿 、巴戟天 、黄柏 、知母 、当归六味中药
组成 [ 1] 。是上海中医药大学张伯讷教授 50年代针对更年期综
合征 , 在半个世纪的临床应用中 ,二仙汤的临床应用广泛 , 涉及
更年期综合征 [ 2] 、骨质疏松症 [ 3]等。
男性春青期性发育迟缓 ,易导致成人性发育不良甚至男性
不育症。随着人们生活水平的提高 ,过多地摄入高蛋白 、高脂食
物 , 青春期肥胖已成为性发育迟缓的主要原因之一。 而其治疗
具有时效性 , 应及时早期干预。当前无可靠药物治疗 , 二仙汤对
成人下丘脑-垂体-睾丸轴有调节作用 [ 4] 。本文旨在考察二仙汤
对青春期肥胖大鼠生长发育迟缓的早期干预作用。
1 材料与方法
1.1 试验药物 二仙汤提取物(EXD)自行提取 , 每 1g提取
物相当生药量 5g, 含小檗碱 1.34%、淫羊藿苷 0.81%。
1.2 动物 21日龄雄性清洁级 SD大鼠 ,由辽宁中医药大学实
验动物中心提供 , 实验动物生产许可证号:SYXK(辽)2004-
0032。基础饲料:实验动物鼠专用饲料(沈阳市前民动物饲料
厂);高脂饲料:基础饲料 74.5%, 猪油 12%, 胆固醇 1.5%, 蔗
糖 5%,蛋黄粉 5%, 胆盐 2%[ 5]
1.3 试剂 蔗糖 、胆盐 、胆固醇均购自国药试剂有限公司 ,睾酮
(testosterone, T)、雌二醇(estradiol, E2)放射免疫试剂盒购自
AdlitteramDiagnosticLaboratories, Ins., USA。
1.4 仪器 多孔离心机 C412(法国 Jouan),全自动酶标仪 2010
(奥地利 anthos)。
1.5 方法 21日龄大鼠 70只 , 断奶适应性饲养 1d后 , 随机分
为正常对照组(n=10)和低剂量组 、中剂量组 、高剂量组及空白
对照组各 20只。以基础饲料喂养正常对照组 ,以高脂饲料喂养
其他实验组。喂养 3周后(42日龄 , 即青春期开始), 正常对照
组 、空白对照组灌胃给 0.9%氯化钠;低剂量组 、中剂量组 、高剂
量组分别给 1g/kg、2g/kg、4g/kgEXD。各组大鼠按原饲料喂养。
3周(即高脂饲料喂养 6周)后 , 高脂饲料组大鼠的体重超过基
础饲料喂养大鼠体重的 20%视作营养型肥胖大鼠模型成功 , 其
他大鼠弃去。再给药 4周后 ,禁食不禁水 12小时 , 测量体重 , 体
长(鼻尖至肛门的距离), 计算 Lees指数 (Lees指数 =体重
(g)1 /3 ×103 /体长(cm))。 20%乌拉坦腹腔注射麻醉后 , 解剖 ,
腹腔主动脉取血 ,静置并离心 , 取血清于-70℃冷冻保存。并取
睾丸 ,称重 , 计算脏器系数(睾丸重(g)/体重(100g)), 后置
10%福尔马林溶液中固定 , HE染色 , 显微观察。采用放射免疫
法测定血清 T、E2。
2 结果
2.1 二仙汤对大鼠体重 、体长的影响 与基础饲料组对比 , 高
脂饲料喂养各组体长与体重均下降 , 说明高脂饲料能抑制大鼠
生长。与模型组对比 , EXD组大鼠体重 、体长均明显改善 , EXD
66 中药药理与临床 2010;26(6)
* 基金项目:沈阳市科技局资助项目(F10-149-9-14)。