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菝葜乙酸乙酯提取物抗炎作用研究



全 文 :·基础研究·
菝葜乙酸乙酯提取物抗炎作用研究
郑州大学护理学院(450052) 王 涛 王 鹏
  菝葜又名金刚藤 、金刚刺等 , 是百合科植物 Smilax Chi-
na L.的根茎 ,为一种民间常用药物 , 具有活血化瘀 、软坚散
结 、镇痛消肿等功效[ 1] ,千百年来 , 广泛被用来作为祛风湿 、
利小便 、消肿毒 、治疗关节炎 、水肿 、镇痛等的药物。国外还
有将其用于过敏性哮喘 、牛皮癣等治疗的报道。目前国内
菝葜商品主要是水提物(生药含量 20 g/g 生药),主要治疗
妇科多种急慢性炎症 , 疗效确切 ,具有生药含量低 、服用量
大的缺点。为进一步提高传统中药菝葜治疗多种疾病的疗
效的样标含量 ,富集有效成分 , 使根据其制成的各类药物更
符合现代中药的要求 ,对菝葜的提取工艺进行了改进 , 开发
出菝葜的乙酸乙酯提取物(专利申请号:01128391.2), 并按
菝葜的主治与功能对其进行了一系列基础实验研究 , 现对
其抗炎作用报告如下。
1 材料与方法
1.1 实验材料:菝葜乙酸乙酯提取物由华中科技大学同济
医学院药学院药物研究室制备 , 生药含量:每克含生药
388.9 g;金刚藤胶囊:由湖北省福人制药厂提供 , 生药含
量:每克内容物含生药 20 g;氢化可的松注射液(扬州制药
有限公司);二甲苯[(上海试剂一厂(AR)] ;昆明种小白鼠
(清洁Ⅱ级)60 只 ,(27.0±1.0)g , 雄性 , 由华中科技大学同
济医学院实验动物中心提供 ,合格证书为湖北省医动字 19
-052 号。 阿奇霉素为湖北瑞康药业产品;Prostglandin
F2αEIA K it(Cayman Chemical Company);酶标检测仪 Mul-
tiskan Ascent V 1.23。
1.2 实验方法
1.2.1 提取物对大鼠子宫炎症的影响:取体重(200±20)g
雌性SD 大白鼠 50 只 ,随机分为 5 组 , 每组 10 只;设第 1 组
以蒸馏水为阴性对照组;第 2 组为金刚藤胶囊组 , 剂量为
15 g/kg生药;第 4 , 5 , 6 组为菝葜乙酸乙酯提取物组 , 剂量
依次为 3.75 g/kg , 7.5 g/ kg , 15 g/ kg 生药;各组动物在乙
醚浅麻醉下 ,剪去下腹部毛 , 75%的乙醇消毒 , 于下腹部正
中切口 2 cm 长 , 暴露子宫 ,沿子宫左侧角上 1 cm 处作一横
切口 , 将一塑料管(管径 2 mm , 长 0.5 cm , 重 2 mg , 75%酒
精消毒)放置于子宫内 ,将子宫切口缝合固定 , 伤口滴入阿
奇霉素(312.5 mg/ kg)防止感染;各组动物于术后 2 h 灌胃
给药 , 每日 1 次 , 2 mL/只;给药 7 d 后杀死动物 , 取出两侧
子宫 ,除去脂肪 , 分析天平下称重 , 每鼠子宫左侧重量减去
右侧子宫重量即为炎症肿胀度 , 计算各组肿胀度之 x ±s ,
按下面公式求出给药组的肿胀率 ,进行统计学检验 , 比较组
间差异的显著性[ 2] 。
肿胀率 E(%)=[(Vt-Vn)/ Vn] ×100%(其中 Vn 和
Vt分别代表未致炎侧和致炎侧子宫平均重量)。
抑制率 I(%)=[(Ec-En)/Ec] ×100%(其中 En 和 Ec
分别代表给药组和对照组的平均肿胀率)。
1.2.2 提取物对大鼠炎性子宫内膜中前列腺素(PGF)2α
含量的影响:精确称取 50 mg左右致炎侧子宫 , 速冻 , 加至
微型匀浆器 , 加无水乙醇 0.4 m L , 生理盐水 1.6 mL , 制成
匀浆;取组织匀浆 1 mL 至提取管中 ,加 0.1 mol/ L 的盐酸
100 μL ,用 5 mL 乙酸乙酯提取两次 ,提取液合并吹干 , -20
℃保存;采用酶联免疫法(EIA)测定组织中 PGF2α的含量 ,
操作按酶联免疫试剂盒说明进行。
1.2.3 提取物对小鼠耳肿胀的影响:取体重(27.0±2.0)g
雄性昆明种小鼠 60 只 ,随机分为 6 组 , 每组 10 只。 第 1 组
以蒸馏水作为阴性对照组;第 2 组为金刚藤胶囊组 , 剂量为
30 g/ kg生药;第 3 , 4 , 5 组为菝葜乙酸乙酯提取物组 ,剂量
依次为 60 g/kg , 30 g/kg , 15 g/ kg 生药;第 6 组为氢化可的
松组 , 剂量为 5 mg/ kg 。致炎前1 h 各组动物按上述剂量灌
胃给药 1 次 , 灌胃体积为 0.4 m L/只;给药后每鼠左耳涂二
甲苯 0.1 mL , 右耳作空白对照 , 致炎后 30 min 各组分别再
按上述剂量灌胃给药 1次;于 4 h后将小鼠处死 ,剪下两耳
并打下圆耳片 , 电子天平上减重法称重 ,以每只小鼠左耳重
减右耳重为肿胀度。将对照组与用药组的肿胀度进行统计
处理 , 判断各用药组与对照组之间是否具有差异 , 用以下公
式计算各组药物炎症抑制率 ,并经方差分析作 q 检验比较
给药组和对照组的差异情况[ 2] 。
肿胀抑制率(%)=(对照组平均肿胀度-用药组平均
肿胀度)×100%
2 结  果
2.1 提取物对大鼠子宫诱发炎症作用:菝葜乙酸乙酯提取
物与金刚藤胶囊对大鼠子宫炎症的影响结果见表 1。
表 1 提取物与金刚藤胶囊对大鼠子宫炎症的影响实验结果
组别 剂量
g/ kg
动物数

肿胀率
%
抑制率
%
阴性对照组 10 72.99 
金刚藤胶囊组 15 10 12.711) 82.59
菝葜乙酸乙酯提取物组 3.75 10 28.841) 43.43
菝葜乙酸乙酯提取物组 7.5 10 26.141) 64.19
菝葜乙酸乙酯提取物组 15 10 11.291) 84.53
  1)与阴性对照组比较 P <0.01。
  实验过程中可见 , 阴性对照组大鼠左侧放置塑料管后
子宫比对侧子宫明显红肿 , 子宫壁厚度增加 , 两侧子宫差异
较大 , 阴性对照组平均肿胀率为 72.99%;金刚藤胶囊组的
大鼠子宫左侧无明显变化 , 子宫两侧肿胀率明显低于阴性
对照组。
结果表明金刚藤胶囊对动物子宫内放置塑料管所致炎
症有明显的抑制作用 , 有显著的治疗意义。不同剂量的菝
葜乙酸乙酯提取物组的大鼠子宫无明显变化 ,两侧子宫肿
·890· 山西医药杂志 2007年 10月第 36卷第 10期 Shanxi Med J , October 2007 , Vol 36 , No.10
胀率明显低于对照组 , 表明菝葜乙酸乙酯提取物对动物子
宫内放置塑料管所致炎症有明显的抑制作用 , 并与剂量有
关 ,随着菝葜乙酸乙酯提取物剂量的增加 , 大鼠子宫肿胀率
呈下降趋势 ,抑制率增加。这一实验为将菝葜乙酸乙酯提
取物用于临床治疗育龄妇女因上环等原因引起的感染的治
疗提供了实验依据。
2.2 提取物组对炎症子宫组织中 PGF2α含量:测定结果:
生理盐水组(23±4)ng/g;金刚藤胶囊组(15 g/ kg)(12±3)
ng/g;菝葜乙酸乙酯提取物低剂量组(3.75 g/ kg)(19±4)
ng/g , 中 剂 量 组(7.5 g/ kg)为(17 ±3)ng/ g , 高剂量组
(15 g/kg)(12±3)ng/ g。 从结果可见 , 菝葜乙酸乙酯提取
物在高剂量时与金刚藤胶囊一样能降低炎症子宫组织中
PGF2α的含量 ,两者与生理盐水对照组相比 , 差异均具有统
计学意义(P <0.05)。
2.3 提取物对小鼠诱发耳肿胀的治疗作用:菝葜乙酸乙酯
提取物抗二甲苯所致小鼠耳肿胀结果见表 2 , 从表 2 中可
见 , 菝葜乙酸乙酯提取物能明显减轻小鼠炎症反应。经统
计学处理与线性分析表明 , 菝葜乙酸乙酯提取物抗炎作用
的剂量与抑制率之间呈显著的量效关系。而金刚藤乙酸乙
酯提取物与金刚藤胶囊在相同生药剂量时 , 对二甲苯引起
的小鼠耳肿胀抑制率差异无统计学意义 , 它们的治疗效果
具有等效性。提示通过改进工艺可以使在服用较少剂量药
物的同时取得和临床常用药物大剂量应用时相同的治疗效
果。
表 2 提取物抗二甲苯引起的小鼠耳肿胀结果( x ±s)
组别   动物数只
剂量
g/kg
右耳重
g
左耳重
g
肿胀度
g
抑制率
%
阴性对照组 10 0.22±0.11 0.09±0.05 0.13±0.06 
金刚藤胶囊组 10 15 0.14±0.10 0.08±0.05 0.06±0.051) 52.56
菝葜乙酸乙酯提取物 10 15 0.17±0.11 0.07±0.05 0.09±0.06  29.13
菝葜乙酸乙酯提取物 10 30 0.13±0.07 0.08±0.05 0.05±0.031) 61.43
菝葜乙酸乙酯提取物 10 60 0.11±0.08 0.08±0.05 0.03±0.032) 77.00
氢化可的松注射液 10 0.005 0.16±0.10 0.08±0.06 0.07±0.051) 47.51
  1)与阴性对照组比较 P <0.05。
  2)与阴性对照组比较 P <0.01。
3 讨  论
妇科盆腔炎 、附件炎及附件炎性包块 、痛经是妇科常见
病多发病 ,临床表现为下腹疼痛 、腰部酸痛 、月经不调 、带下
量多 、女性不孕 、腹部包块 、身体虚弱等 , 其特点是反复发作
难于根治 ,虽不危及生命 , 但给患者带来难言之苦 , 严重影
响家庭生活 、工作学习。目前虽然治疗盆腔炎 、附件炎的药
物和方法很多 ,但其疗效均不令人满意。探索研制一种纯
天然 、安全有效 、使用方便的药物一直是医药界研究的重要
课题。
实验表明 ,菝葜乙酸乙酯提取物可以有效降低动物模
型中由物理化学因素造成的急性 、慢性炎症。 通过酶联免
疫法测定发现 ,菝葜乙酸乙酯提取物可以降低炎症子宫内
膜中前列腺素(PG)F2α的含量。资料显示 ,人类子宫内膜
中 PGs 含量 , 在增生早期 PGF2α及 PGE2 值接近 , 随着月
经周期的进展 , 两者含量渐渐增多 , 及至排卵后 PGF2α值
持续升高 , 月经期达峰值 , 为增生早期的 6 倍 , 明显大于
PGE2 值 , 因此 PGF2α是黄体期及月经期内膜最主要的
PGs[ 3] 。PGs合成虽然在内膜 , 可是 PGs 受体主要在肌细
胞。体外实验提示:PGs对人体子宫肌的作用与 PGs 剂量
有关 ,并随月经周期的时间而不同。 PGE2 使子宫肌松弛 ,
而 PGF2α促使肌肉收缩 , 振幅增大 , 频率增多 , 在月经前期
这一作用更为显著。在体试验 , 给予正常非孕妇女静脉注
射或宫腔注入 PGF2α, 可引起下腹部轻度痉挛性疼痛。因
此 , PGF2α含量增高是引起痛经的重要因素之一 。
这一研究为我们将其菝葜乙酸乙酯提取物用于临床治
疗痛经及育龄妇女因上环等原因引起的感染的治疗提供了
实验依据。
目前菝葜产品仅有“糖浆剂”和“胶囊剂” 两种水提取
物 , 皆为本植物的粗制品。糖浆剂产品含糖量高 , 服用口感
不适 , 同时不便贮藏与运输 , 服用量不容易掌握 , 对疗效有
一定影响;胶囊剂同样因含糖量高 、服用量大等弊病 ,对疗
效也有一定影响。
通过改进工艺 , 开发出的菝葜乙酸乙酯提取物生药含
量得到了提高。实验表明 , 口服此提取物 5 mg/kg 相当口
服本品糖浆剂 20 mL(10 g/ kg 生药)和口服本品胶囊(0#胶
囊)2粒(10 g/ kg 生药)的疗效 , 必将极大地方便患者服用。
具有很大的开发利用价值。
参 考 文 献
1 中国中医研究院中药研究所.全国中草药名鉴.北京:人民卫生
出版社 , 1996.
2 徐叔云 ,卞如濂 ,陈修.药理实验方法学.3版.北京:人民卫生出
版社 , 2002.
3 金若敏 ,陈兆善.益母草治疗痛经机制探索.中国现代应用药
学 , 2004 , 21(2):90-93.
(收稿日期:2007-06-14)
作者简介:王涛 ,男 , 1979 年 1 月生 , 助教 , 郑州大学护理学
院 , 450052
·891·山西医药杂志 2007年 10月第 36卷第 10期 Shanxi M ed J ,October 2007 , Vol 36 , No.10