全 文 ：17种国产菝葜属植物中白藜芦醇含量比较
王光忠 , 李秋怡 , 干国平 , 刘焱文＊
(湖北中医学院 ,湖北 武汉　430061)
摘要:目的 测定 17种国产菝葜属植物样品中白藜芦醇的含量。方法 以活性成分白藜芦醇为指标 , 采用 HPLC法对采
自我国 17种菝葜属植物样品进行含量测定。结果 不同品种菝葜中白藜芦醇的含量有显著差异。小果菝葜 、长托菝葜 、
黑果菝葜等含量较高 , 而短梗菝葜 、尖叶菝葜 、土茯苓等不能检测出。结论 该研究为菝葜属植物资源的深入开发利用提
供了一定的科学依据。
关键词:菝葜;　白藜芦醇;　HPLC法;　含量测定
中图分类号:R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2007)07-1679-01
ComparisonofResveratrolContentfrom 17SpeciesofSmilaxinChina
WANGGuang-zhong, LIQiu-yi, GANGuo-ping, LIUYan-wen＊
(HubeiColegeofTraditionalChineseMedicine, Wuhan430061 , China)
Abstract:ObjectiveTodeterminethecontentofresveratrolfrom17 speciesofSmilaxsampleinChina.MethodsResveratrol
ofsamplesfrom17 speciesofSmilaxinChinawereanalyzedbyHPLC.ResultsThereweresignificantdifferencesinresveratrol
contentfromdifferentspecies.ThecontentsofresveratrolinSmilax.feroxWall.exKunthetc.werehigh, butthatinS.glabr
Roxb.etc.couldntbedetected.ConclusionThestudymayprovidereliablefoundationforfortherdevelopmentandutilizationof
SmilaxinChina.
Keywords:Smilax;　Resveratrol;　HPLC;　Quantitativeanalysis
　　百合科菝葜属(Smilax)植物在我国有 60多种 , 主要分布于
长江以南的广大地区 , 资源丰富。 《中国药典》(2005年版Ⅰ 部)
仅收载菝葜 SmilaxchinaL.一个品种供药用 [ 1] , 文献已对不同产
地菝葜中白藜芦醇的含量进行了比较 [ 2] 。由于同属植物的形态
相近 , 其根茎入药后从外形上更难辨认 , 常常有其它品种混入代
替菝葜作为药用。为了考察不同菝葜品种成分含量差异 ,本研究
采用高效液相色谱法对国产 17种 23个菝葜样品中白藜芦醇进
行了定量分析。
1　仪器与试药
高效液相色谱仪:Agilent1100系统;超声波清洗机:(频率
25 kHz, 功率 250W)中国华南超声波设备厂;白藜芦醇对照品:由
湖北中医学院中药资源与中药化学重点实验室提供 , 纯度
98.4%。甲醇为色谱纯 ,水为双蒸水。 17种 23个菝葜样品由课
题组成员亲自采集 , 经湖北中医学院中药鉴定教研室鉴定 , 取其
根茎作为测定样品。见表 1。
2　方法 [ 2]与结果
2.1　色谱条件 色谱柱为 KromasilTMC18 (4.6 mm×200 mm, 5μm);流动相为甲醇 -水(40:60);检测波长 303 nm;流速 0.8
ml/min;柱温 30℃。
2.2 　对照品溶液的制备 精密称取白藜芦醇对照品适量 , 加甲
醇制成 0.015 mg/ml的对照品溶液。
2.3　供试品溶液的制备 取样品粉末约 0.5 g,精密称定 , 置 50
ml量瓶中 , 加入甲醇 40 ml, 超声处理 40 min, 放置至室温 , 加甲
醇至刻度 ,摇匀 , 滤过 ,取续滤液作为供试品溶液。
2.4 　线性关系的考察 精密称取白藜芦醇对照品 3.86 mg, 置
25 ml量瓶中 , 用甲醇溶解 ,并定容至刻度 ,摇匀 ,备用。精密吸取
此溶液 0.5, 1.0, 2.0, 4.0, 8.0 ml置 10 ml量瓶中 ,用甲醇稀释至
刻度 , 摇匀 , 制成待测对照品溶液。精密吸取上述不同浓度对照
品溶液各 10 μl,注入高效液相色谱仪中 ,按上述色谱条件测定峰
面积。 以对照品进样量为横坐标 , 色谱峰面积为纵坐标 , 经线性
回归 , 白藜芦醇的回归方程为:Y=7 576.13X-51.72, r=
0.999 8,白藜芦醇在 0.077 2 ～ 1.235 2 μg范围内线性关系良好。
2.5　样品中白藜芦醇的测定 分别精密吸取对照品溶液与供试
品溶液各 10μl,注入高效液相色谱仪 ,记录色谱图。以峰面积按
外标法计算。结果见表 1。
收稿日期:2006-11-28;　修订日期:2007-02-28
作者简介:王光忠 (1965-),男(汉族),湖北随州人 ,现任湖北中医学院副研究员 ,学士学位 ,主要从事中药物质基础及其制剂质量控制工作.
＊通讯作者简介:刘焱文 (1945-),男(汉族),湖北武汉人 ,现任湖北中医学院教授 ,学士学位 ,主要从事中药及其制剂有效成分研究工作.
表 1　不同品种不同产地样品中白藜芦醇测定结果
样品编号 样品 产地 白藜芦醇含量 C/mg· g-1 RSD(%)
1 长托菝葜 SmilaxferoxWal.exKunth 江西吉安 2.35 1.2
2 湖北宜都 1.67 0.8
3 广东从化 1.42 1.7
4 小果菝葜S.davidianaA.DC. 江西湖口 1.89 0.9
5 江西吉安 1.42 1.3
6 广东韶关 1.06 1.2
7 黑果菝葜 S.glauco-chinaWarb. 湖北大冶 1.79 1.4
8 安徽岳西 1.75 1.0
9 江西湖口 1.05 1.5
10 梵净山菝葜 S.vanchingshanensisWangetTang 江西樟树 1.54 1.2
11 鞘柄菝葜 S.stansMaxim. 湖北宜昌 1.30 1.0
12 托柄菝葜 S.discotisWarb. 湖南韶山 1.16 1.4
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2007VOL.18NO.7 时珍国医国药 2007年第 18卷第 7期
续表 1
样品编号 样品 产地 白藜芦醇含量 C/mg· g-1 RSD(%)
13 防己叶菝葜 S.menispermoideaA.DC. 安徽岳西 0.99 1.4
14 暗色菝葜 S.lanceifoliaRoxb.var.opacaA.DC. 江西樟树 0.72 0.9
15 密刺菝葜 S.dataensibarbWangetTang 陕西眉县 0.67 1.8
16 柔毛菝葜 S.chingiWangetTang 湖南怀化 0.61 1.6
17 小叶菝葜 S.microphylaC.H.Wright 湖北巴东 0.26 1.5
18 粗糙菝葜 S.lebruniLevl 湖南韶山 0.18 1.7
19 短梗菝葜 S.scobinicaulisC.H.Wright 陕西眉县 -
20 牛尾菜 S.ripariaA.DC. 陕西眉县 -
21 尖叶菝葜 S.arisanensisHay 湖北五峰 -
22 华东菝葜 S.sieboldiMiq. 云南昆明 -
23 土茯苓 S.glabraRoxb. 浙江温州 -
　　 -表示未能检出 , n=3
3　讨论
从表 1中可以看出不同品种样品中白藜芦醇含量差异显著 ,
其中长托菝葜 、小果菝葜 、黑果菝葜 、梵净山菝葜 、鞘柄菝葜 、托柄
菝葜中白藜芦醇含量均高于 1 mg/g, 而短梗菝葜 、牛尾菜 、尖叶
菝葜 、华东菝葜 、土茯苓中未能检出。药理学研究证明 ,白藜芦醇
具有抗炎 、抗肿瘤 、调节脂代谢 、抑制血小板凝集和保护心血管等
多种作用。小果菝葜 、长托菝葜 、黑果菝葜等品种的白藜芦醇含
量较高 , 且资源丰富 ,值得进一步研究开发。
参考文献:
[ 1 ] 　国家药典委员会.中国药典 , Ⅰ 部 [ S] .北京:化学工业出版社 ,
2005:216 .
[ 2 ] 　王光忠 ,徐淑珍 ,干国平 ,等.不同产地菝葜中白藜芦醇的含量比较
[ J].中国中药杂志 , 2006, 31(13):1054.
收稿日期:2006-11-22;　修订日期:2007-03-07
作者简介:陈　稚 (1979-),女(汉族),湖南衡阳人 ,现任广东医学院助
教 ,硕士学位 ,主要从事药物成分及液相色谱技术研究工作.
邻苯二甲醛柱前衍生反相高效液
相色谱法检测珍珠粉中的氨基酸含量
陈　稚 , 陈　波 , 揭新明 , 张立坚
(广东医学院分析中心 ,广东 湛江　524023)
摘要:目的 测定珍珠粉中的氨基酸含量。方法 邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生反相高效液相色谱法 , 采用荧光检测 ,梯度
洗脱。结果 该法在 28 min之内分离出 15种氨基酸。结论 该法样品用量少 、灵敏度高 、线性范围宽 、重现性好 , 适于分
离大量样品。
关键词:高效液相色谱;　柱前衍生法;　氨基酸;　珍珠粉
中图分类号:R284.1　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2007)07-1680-02
DeterminationoftheContentsofAminoAcidsinPearlPowderbyRP-HPLCafterPre-
columnDerivationwithO-Phthaldialdehyde(OPA)
CHENZhi, CHENBo, JIEXin-ming, ZHAGNLi-jian
(AnalyticCentreofGuangdongMedicalColege, Zhanjiang524023, China)
Abstract:ObjectiveInthispaper, wedeterminedaminoacidsinpearlpowder.MethodsAmanualpre-columnderivation
procedurehasbeendevelopedbyreversed-phaseHPLCwithO-phthalaldehydeandfluorescencedetector.ResultsMorethan
15 aminoacidswereseparatedwithin28 min.ConclusionThemethodissensitive, preciseandshowsgoodrepeatability.
Keywords:High-performanceliquidchromatography;　 Pre-columnderivation;　Aminoacids;　Pearlpowder
　　随着生命科学和生物工程的发展 ,氨基酸作为组成生物大分
子的基本单元 , 其分析方法受到重视。 20世纪 70年代以后 , 反
相高效液相色谱技术在氨基酸分析中得到广泛应用 ,使分离时间
缩短。而荧光柱前衍生技术的采用使检测灵敏度提高了两个数
量级 , 达到 pmol级。常用的衍生方法有:DABS法(衍生剂为磺
酰氯二甲胺偶氮苯-DABSYL-Cl)、DNS法(衍生剂为丹酰氯-DAN-
SYL-Cl)、FMOC法(衍生剂为氯甲酸芴甲酯-FMDC-Cl)、PITC法
(衍生剂为异硫氰酸苯酯 -PITC)和 OPA法(衍生剂为邻苯二甲
醛-OPA)等 [ 1, 2] 。前 4种方法存在反应活性差 、速度慢 、灵敏度
低 、反映试剂干扰等缺点 , 而 OPA法具有衍生步骤简单 、反应速
度快 、剩余试剂不干扰测定等优点 , 其应用最为广泛 [ 3 , 4] 。本文
用 WatersPump515双泵高效液相色谱仪 ,以 OPA为衍生试剂 , 测
定了珍珠粉中氨基酸的含量。该法操作简单 , 重现性好 , 适于分
离大量样品。
1　仪器与试剂
1.1　仪器 WatersPump515双泵高效液相色谱仪 , WatersMassl-
ynxTM 3.5色谱管理系统(Waters, 美国), 配岛津 RF-10A荧光检
测器 , AL204电子天平(上海梅特勒 -托利多仪器有限公司)。
1.2 　试剂 15种氨基酸混合标准溶液:含每种氨基酸 1.0 mg/
ml, 用氨基酸标准品溶于 0.1 mol/L盐酸配制。 OPA衍生试剂:
取 500 mgOPA和 10 ml甲醇 , 加入 100 ml0.4 mol/L硼酸钠水
液 , 用氢氧化钠调 pH值至 10, 最后加入 400 μl的巯基乙醇 , 混
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时珍国医国药 2007年第 18卷第 7期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2007VOL.18NO.7