全 文 ：收稿日期:2015-06-07
基金项目:陕西省科技新星计划项目(2013KJXX-71)
作者简介:孙静(1978-)，女，副教授，主要从事中药制剂过程的关键技术及适宜性研究;Tel:029-38184958，E-mail:ph. 175@ 163. com。
黄花油点草活血作用物质基础的初步研究
孙 静，贾田芊
(陕西中医药大学，陕西 咸阳 712046)
摘要 目的:初步探明黄花油点草活血作用药效的物质基础。方法:采用小鼠耳廓微循环及大鼠出、凝血时间
和血栓形成实验考察黄花油点草不同提取物的活血作用。结果:给药剂量为 2. 5 g /kg 时，水提取物具有显著增加
血瘀小鼠动、静脉管径及血流速度变化值，延长血瘀小鼠凝血时间及抗血瘀大鼠血栓形成作用，甲醇提取物具有显
著增加血瘀小鼠动脉管径及动、静脉血流速度变化值和延长血瘀小鼠凝血时间的作用;70%乙醇提取物具有显著
改善血瘀小鼠动、静脉血流速度作用。结论:黄花油点草活血作用主要药效部位为水提取物，其发挥作用的机制为
改善微循环及抗血栓形成。
关键词 黄花油点草;活血作用;物质基础
中图分类号:Ｒ285. 5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2016)02-0419-03
DOI:10. 13863 / j. issn1001-4454. 2016. 02. 045
黄花油点草俗称羊角七，是陕西“太白七药”的
重要品种之一。在民间使用过程中，对骨伤科瘀血
引起的各种病症有较好疗效，而且对缺血性脑血管
疾病引起的手脚麻木、偏头痛、头晕、乏力等症效果
突出。现代医学研究表明，这两种病症均属于血瘀
证范畴。血瘀证的病理生理基础可概括为血液循环
障碍、血液高黏滞状态、血小板活化和黏附聚集、血
栓形成等。由于该药材属于地方习用品种，基础研
究薄弱，活血作用的物质基础与作用机制尚不明确。
本实验拟通过对该药材活血作用有效提取物进行研
究，初步探明药效物质，阐明作用机制，为进一步合
理开发利用该资源，有效指导临床安全合理用药，同
时为开发一种治疗缺血性脑血管疾病的中药制剂奠
定基础。
1 材料与仪器
1. 1 实验动物 SPF 级昆明小鼠，雌雄各半，体质
量 18 ～ 22 g，合格证号:0002679;SPF 级雄性 SD 大
鼠，体质量 180 ～ 220 g，合格证号:0002710，均由西
安交通大学医学院实验动物中心提供。
1. 2 药物与试剂 黄花油点草购于陕西盘龙药业
有限责任公司，经陕西中医学院药学院标本馆王继
涛教授鉴定为百合科植物黄花油点草 Tricyrtis mac-
ulata (D. Don)Machride 的干燥全草;多贝斯(西安
利君制药厂，批号:091202);银杏叶片(江苏晨牌药
业有限公司，批号:110101)，取适量，研碎后用 80%
乙醇超生提取，提取液回收乙醇，浓缩至干膏，加蒸
馏水制备成浓度为 2 500 mg /mL 的对照药;盐酸肾
上腺素(上海合丰制药有限公司，批号:101201);乌
拉坦(上海化学试剂厂，批号:090612)。TTC 染色
剂，2% 2，3，5-三苯基氯化四氮唑(国药集团化学试
剂有限公司，批号:F20080416);D101(西安电力树
脂厂，批号:20110105);其他试剂为分析纯。
1. 3 主要仪器 XSZ-H 生物显微镜(北京福凯仪
器有限公司);YLS-14B 小动物血栓生成仪(山东省
医学科学院设备站);AＲ-1140 电子天平(梅特勒-托
利多仪器(上海)有限公司);Forma-86c ULT Ffreezer
超低温冰箱(Thermo Electron COＲPOＲATION);图
像分析软件:ImagePro Plus 6. 0。
2 方法
2. 1 黄花油点草不同提取物活血作用实验研究
2. 1. 1 受试药物的配制〔1〕:称取同一批黄花油点
草药材 7 份，每份 100 g，分别加入水、70%乙醇、甲
醇、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、95%乙醇进行提取，提
取液回收溶剂后浓缩，干燥后得到不同溶剂提取干
膏，加入一定量蒸馏水，制成生药浓度为 500 mg /mL
的溶液。
2. 1. 2 给药剂量的考察:以小鼠耳廓微循环实验
为考察指标，将 50 只体质量 18 ～ 22 g 的昆明小鼠
适应性喂养 3 d 后，随机分为 5 组，即模型组(灌胃
等体积蒸馏水)、多贝斯(0. 2 g /kg)阳性对照组及黄
花油点草水提取物低(2. 5 g /kg)、中(5 g /kg)、高
(10 g /kg)剂量组，每组 10 只，雌雄各半。灌胃给药
3 d后对小鼠进行血瘀模型造模(选择冰水浴加注
射肾上腺素的常规方法造模。即注射盐酸肾上腺素
2 h后，将实验动物放在 0 ℃冰水中 5 min，取出擦
干，2 h后进行第 2 次盐酸肾上腺素注射，即得血瘀
模型〔2〕)，随后继续给药 2 d，第 5 天给药后 25 min，
采用 10%乌拉坦 17. 5 mg /kg腹腔注射麻醉小鼠，将
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小鼠腹部向下固定在观察台上，使耳托平展于玻片
上，滴加少许香柏油后，置于 XSZ-H 型生物显微镜
50 倍镜下观察，测定动、静脉管径变化值及动、静脉
血流速度变化值。
2. 1. 3 对血瘀小鼠耳廓微循环的影响:将 90 只昆
明小鼠随机分为 9 组，即模型组、银杏叶片阳性对照
组及黄花油点草水提取物组、70%乙醇提取物组、甲
醇提取物组、氯仿提取物组、乙酸乙酯提取物组、正
丁醇提取物组、95%乙醇提取物组，每组 10 只，雌雄
各半。适应性喂养 3 d后，除模型组外，各给药组均
按生药 2. 5 g /kg 给药，同“2. 1. 2”项下方法造模并
测定得动、静脉血管管径及血流速度的变化值。
2. 1. 4 对血瘀小鼠出、凝血时间的影响:出血时间
采用断尾法测定。凝血时间采用玻片法测定。昆明
小鼠分组、造模及给药同“2. 1. 3”项下。
2. 1. 5 对血瘀大鼠血栓形成的影响:将 90 只雄性
SD大鼠随机分为 9 组，每组 10 只。适应性喂养 5 d
后，连续给药 7 d，除空白对照组外，其余各组均按
“2. 1. 2”项下方法造模。随后颈总动脉取血，用人
造血管收集血液 2 mL，将人造血管两头插紧，置于
血栓生成仪上，启动开关，在 37 ℃条件下转动 10
min，待仪器报警后，倒出血液置于滤纸上，吸去多余
血液后，置于干燥的玻璃器皿上，测量血栓长度，并
称量血栓湿质量，待干燥后，称其干质量。
2. 2 统计学处理 计量资料采用 珋x ± s进行统计描
述，两组间比较符合正态性和方差齐性者采用 t 检
验，不符合正态性者采用非参数检验，多组间比较采
用单因素方差分析检验，符合正态分布、方差齐性采
用 LSD 法，符合正态分布、方差不齐性采用 Tam-
haneT2 法。所有数据均以 0. 05 为差异性检验标
准。进行分析采用 SPSS 17. 0 统计软件包进行处
理。
3 结果
3. 1 不同剂量黄花油点草水提物的活血作用 结
果如表 1 所示，黄花油点草水提物 2. 5 g /kg 即有显
著的改善血液微循环作用，故选择 2. 5 g /kg 作为给
药量。
3. 2 黄花油点草不同提取物对血瘀小鼠耳廓微循
表 1 不同剂量黄花油点草水提物的活血作用(珔x ± s，n =10)
组别
剂量 /
(g /kg)
动脉管径变化值 /μm 静脉管径变化值 /μm 动脉流速变化值 /(μm /s) 静脉流速变化值 /(μm /s)
30 min 60 min 30 min 60 min 30 min 60 min 30 min 60 min
模型组 － 0. 02 ± 0. 12 0. 02 ± 0. 12 0. 04 ± 0. 10 0. 20 ± 0. 30 2. 00 ± 3. 87 2. 22 ± 4. 41 0. 00 ± 1. 73 2. 22 ± 2. 54
多贝斯组 0. 2 1. 70 ± 1. 02＊＊ 2. 67 ± 1. 00＊＊ 2. 06 ± 1. 25＊＊ 3. 33 ± 1. 37＊＊ 27. 80 ± 1. 21＊＊ 44. 20 ± 9. 16＊＊ 30. 40 ± 3. 33＊＊ 50. 60 ± 2. 26＊＊
水提取物组 2. 5 1. 57 ± 1. 28＊＊ 1. 88 ± 1. 73＊＊ 1. 80 ± 1. 65＊＊ 2. 03 ± 1. 99* 33. 56 ± 13. 48＊＊ 27. 11 ± 25. 96* 22. 67 ± 13. 49＊＊ 20. 89 ± 20. 30*
5 2. 37 ± 1. 57＊＊ 3. 27 ± 1. 61＊＊ 1. 01 ± 0. 51＊＊ 1. 79 ± 0. 50＊＊ 15. 67 ± 7. 04＊＊ 28. 56 ± 8. 99＊＊ 13. 33 ± 12. 00＊＊ 20. 89 ± 12. 73＊＊
10 1. 73 ± 1. 79* 2. 58 ± 1. 51＊＊ 1. 66 ± 1. 01＊＊ 2. 51 ± 1. 72＊＊ 16. 67 ± 10. 05＊＊ 29. 78 ± 14. 09＊＊ 16. 00 ± 8. 19＊＊ 30. 67 ± 17. 72＊＊
注:与模型组比较，* P ＜ 0. 05，＊＊P ＜ 0. 01
环的影响 结果如表 2 所示，黄花油点草水提取物
能显著增加动、静脉管径及动、静脉血流速度变化值
(P ＜ 0. 05 或 P ＜ 0. 01)，甲醇提取物与 70%乙醇提
取物能显著增加动、静脉血流速度变化值(P ＜
0. 01)，甲醇提取物能显著增加动脉管径变化值(P
＜ 0. 05)。
表 2 黄花油点草不同提取物对血瘀小鼠耳廓微循环的影响(珔x ± s，n =10)
组别 剂量 /(g /kg) 动脉管径变化值/μm
静脉管径变化值
/μm
动脉流速变化值
/(μm/s)
静脉流速变化值
/(μm/s)
模型组 － 0. 74 ± 0. 71 0. 20 ± 0. 17 1. 70 ± 3. 77 0. 36 ± 2. 93
银杏叶片组 0. 2 2. 08 ± 0. 79＊＊ 2. 16 ± 0. 59＊＊ 35. 20 ± 10. 55＊＊ 29. 40 ± 10. 59＊＊
水提组 2. 5 2. 14 ± 1. 29＊＊ 1. 96 ± 0. 49＊＊ 29. 20 ± 15. 95* 17. 10 ± 7. 77＊＊
70%乙醇组 2. 5 1. 45 ± 0. 78 1. 39 ± 1. 17 24. 50 ± 11. 44＊＊ 11. 10 ± 5. 04＊＊
甲醇组 2. 5 1. 83 ± 1. 47* 0. 58 ± 0. 91 14. 90 ± 9. 54＊＊ 11. 00 ± 8. 64＊＊
氯仿组 2. 5 0. 53 ± 0. 25 0. 66 ± 1. 53 9. 50 ± 11. 22 7. 70 ± 9. 88
乙酸乙酯组 2. 5 1. 02 ± 1. 38 0. 59 ± 1. 54 9. 90 ± 13. 71 5. 10 ± 8. 06
正丁醇组 2. 5 0. 81 ± 1. 33 0. 29 ± 0. 83 6. 20 ± 8. 57 2. 80 ± 9. 26
95%乙醇组 2. 5 1. 07 ± 1. 32 0. 39 ± 1. 25 5. 7 ± 17. 42 2. 10 ± 9. 62
注:与模型组比较，* P ＜ 0. 05，＊＊P ＜ 0. 01
3. 3 黄花油点草不同提取物对血瘀小鼠出、凝血
时间的影响 结果如表 3 所示，黄花油点草水提取
物及甲醇提取物能显著延长小鼠凝血时间(P ＜
0. 01)。
3. 4 黄花油点草不同提取物对血瘀大鼠血栓形成
的影响 结果如表 4 所示，黄花油点草水提取物具
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有显著的抗血栓形成作用(P ＜ 0. 01)。
表 3 黄花油点草不同提取物对血瘀小鼠出、凝血
时间的影响(珔x ± s，n =10)
组别
剂量 /
(g /kg) 出血时间
/ s 凝血时间 / s
模型组 － 909. 40 ± 415. 88 27. 90 ± 11. 83
银杏叶片组 0. 2 1489. 10 ± 602. 76＊＊ 70. 20 ± 18. 46＊＊
水提组 2. 5 1370. 50 ± 252. 82 52. 40 ± 24. 71＊＊
70%乙醇组 2. 5 1116. 50 ± 330. 35 49. 80 ± 10. 90
甲醇组 2. 5 1079. 70 ± 268. 11 52. 70 ± 13. 73＊＊
氯仿组 2. 5 879. 40 ± 362. 91 31. 80 ± 12. 14
乙酸乙酯组 2. 5 727. 10 ± 140. 75 32. 40 ± 10. 99
正丁醇组 2. 5 989. 70 ± 302. 11 30. 10 ± 8. 77
95%乙醇组 2. 5 981. 40 ± 299. 14 28. 10 ± 7. 58
注:与模型组比较，＊＊P ＜ 0. 01
表 4 黄花油点草不同提取物对血瘀大鼠血栓
形成的影响(珔x ± s，n =10)
组别 剂量 /(g /kg) 血栓湿质量 /g 血栓干质量 /g
模型组 － 1. 53 ± 0. 25 0. 43 ± 0. 06
银杏叶片组 0. 2 2. 12 ± 0. 34＊＊ 0. 33 ± 0. 10＊＊
水提组 2. 5 1. 34 ± 0. 47 0. 31 ± 0. 07＊＊
70%乙醇组 2. 5 1. 55 ± 0. 17 0. 45 ± 0. 04
甲醇组 2. 5 1. 51 ± 0. 20 0. 44 ± 0. 05
氯仿组 2. 5 1. 57 ± 0. 21 0. 45 ± 0. 05
乙酸乙酯组 2. 5 1. 65 ± 0. 13 0. 46 ± 0. 05
正丁醇组 2. 5 1. 56 ± 0. 11 0. 44 ± 0. 15
95%乙醇组 2. 5 1. 57 ± 0. 19 0. 43 ± 0. 07
注:与模型组比较，＊＊P ＜ 0. 01
4 讨论
黄花油点草临床疗效突出，但由于缺乏基础研
究，活血作用有效部位未见相关报道，对指导临床合
理用药、深入研究开发该药材资源有一定影响。基
于此本实验在中医理论指导下，以寒凝血瘀动物模
型考察了黄花油点草不同提取物的活血作用，从药
理活性方面对各部位的作用给予了客观评价。结果
显示黄花油点草水提取物可显著改善血瘀小鼠血液
微循环，增加动、静脉管径及血流速度变化值，显著
延长血瘀小鼠凝血时间，抗血瘀大鼠血栓形成，甲醇
及 70%乙醇提取物对动、静脉管径及脉血流速度方
面也有一定改善作用。初步表明黄花油点草水提取
物为活血作用有效物质存在的主要部位，改善微循
环、抗血栓形成是其发挥作用的途径之一。水、甲
醇、70%乙醇三种不同溶剂提取的物质中，是否存在
共性物质类型，这些物质是否是活血作用有效成分
群将成为进一步研究的重点。只有深入黄花油点草
基础研究，才能合理开发利用该药材资源，为研制基
于黄花油点草有效部位的治疗缺血性脑血管疾病的
新制剂提供科学依据。
参 考 文 献
［1］孙静，刘洁琼，夏新华，等 . 黄花油点草总黄酮提取物提
取工艺实验研究［J］．中药材，2012，35(4):641-644.
［2］陈奇 . 中药药理研究方法学［M］．第 2 版 . 北京:人民
卫生出版社，2006.
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