免费文献传递   相关文献

独蒜兰种子自然萌发特性分析



全 文 :第 9 期
收稿日期:2013-03-13
基金项目:贵州省中药现代化科技产业研究开发专项(黔科合社字[2009]5036 号,黔科合中药字[2011]5039 号);贵州省科技计划项目
(黔科合院所创能[2010]4002);中央补助地方科技基础条件专项基金项目(黔科条中补地[2010]4002);贵州省农业科学院博士
科研启动项目(黔农科院人才启动项目[2009]006 号)
作者简介:蓝家望(1986-),男,福建龙岩人,在读硕士研究生,研究方向为药用植物的开发与利用,(电话)18798842414(电子信箱)
zhrmljw@126.com;通讯作者,朱国胜(1971-),男,副研究员,博士,主要从事药用植物益生菌及食药用真菌的研究工作,
(电话)13984319801(电子信箱)zgsah@yahoo.com.cn。
第 52 卷第 9期
2013 年 5 月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol. 52 No.9
May.,2013
独蒜兰(Pleione bulbocodioides)为兰科独蒜兰
属多年生草本植物,半附生。 生于海拔 900~3 600 m
的灌木林缘腐殖质丰富的土壤或苔藓覆盖的岩石
上。 独蒜兰花大而鲜艳,具有较高的观赏价值;独蒜
兰的干燥假鳞茎习称冰球子,具有清热解毒、化痰
散结的功效,因其抗癌作用而备受关注[1]。 近年来,
由于生态环境的不断破坏和人类大肆采挖,野生资
源日益减少,独蒜兰已被列入国家重点保护野生名
录(第一批)。
独蒜兰花期 3~4 月,果期 8~11 月,单个蒴果内
具有 21 000~34 000 粒种子, 利用种子进行有性繁
殖成为独蒜兰保护抚育的重要手段。 但独蒜兰和其
他兰科植物一样,种子细小,没有胚乳,自然繁殖系
数极低,弄清独蒜兰自然萌发特性,建立独蒜兰自
独蒜兰种子自然萌发特性分析
蓝家望 1,桂 阳 2,张丽娜 2,王 沁 2,朱国胜 1
(1.贵州师范大学生命科学学院,贵阳 550000;2.贵州省现代中药材研究所,贵阳 550000)
摘要:为了解独蒜兰(Pleione bulbocodioides)种子的萌发特性,设计 4 个成熟度(授粉后 125、160、190、
219 d)和两种储存方式(4 ℃冷藏和常温储存)调查独蒜兰种子自然萌发与种子成熟度、储存方式的相关
性。 结果表明, 各成熟度种子相对发芽率、 死亡率间差异不明显;DAP125 种子萌发生长指数显著小于
DAP160 种子萌发生长指数,DAP160 种子萌发生长指数显著小于 DAP190、DAP219 种子萌发生长指数,
DAP190、DAP219 种子萌发生长指数相近;4 ℃冷藏提高了各成熟度种子相对发芽率、 萌发生长指数,其
中显著提高了 DAP190 的萌发生长指数。 因此,选用 DAP190 种子,4 ℃储存有利种子的萌发生长。
关键词:独蒜兰(Pleione bulbocodioides); 有性繁殖; 成熟度; 萌发生长指数
中图分类号:S682.31;Q945.53 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2013)09-2077-06
Study on Natural Germination Characteristics of Pleione bulbocodioides Seeds
LAN Jia-wang1,GUI Yang2,ZHANG Li-na2,WANG Qin2,ZHU Guo-sheng1
(1. College of Life Science, Guizhou Normal University,Guiyang 550000, China;
2. Institute of Morden Chinese Medicinal Materials, Guizhou Academy of Agricultural Sciences, Guiyang 550000, China)
Abstract: In order to understand the natural germination characteristics of Pleione bulbocodioides seeds, 4 different maturity
degree of P. bulbocodioides seeds DAP(days after pollination)125, DAP160, DAP190 and DAP219) and two storage methods
(at 4 ℃ and at room temperature)were designed to investigate the natural germination characteristics of P. bulbocodioides
seeds. The results showed that there was no significant difference in the germination rate and the death rate among 4 maturity
degrees seeds. The germination-growth index of the DAP125 seeds was significantly lower than that of the DAP160 seeds,
which was significantly lower than that of DAP190 seeds and DAP219 seeds. There were similar germination-growth index between
DAP190 seeds and DAP219 seeds. When the seeds were treated by cold storage at 4 ℃, the germination rate and the germi-
nation-growth index of all seeds would be increased, and the germination-growth index of DAP190 seeds was increased sig-
nificantly. So the method of choosing DAP190 seeds and storage at 4 ℃ is beneficial to the seeds, germination and growth.
Key words: Pleione bulbocodioides; sexual propagation;maturity degree; germination and growth index
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2013.09.053
湖 北 农 业 科 学 2013 年
然萌发技术方法,是解决独蒜兰保护抚育的关键。
独蒜兰自然萌发特性研究首先要建立自然播
种方法,Rasmussen等[2]建立的种子袋原生地播种技
术使得回收微小兰科植物种子成为可能。 目前,种
子袋原生地播种法已成功应用于多种兰科植物种
子自然萌发特性的研究,定期回收种子袋检测种子
的萌发情况,可调查种子的萌发启动时间、种子萌
发形态变化过程及种子在土壤中的存活时期[3-5];还
可调查在不同地点播种种子萌发与地点分布的相
关性 [6-8];还可诱捕共生菌,调查种子萌发与共生菌
的相关性[9-11]。 迄今为止,还没有独蒜兰在自然界中
萌发特性的相关报道。 该研究应用原生地种子袋播
种法,探索种子成熟度及种子储存方式对种子萌发
的影响,总结独蒜兰种子自然萌发特性,为建立独
蒜兰自然萌发技术奠定基础。
1 材料与方法
1.1 材料
于贵州省凯里市雷公山采集独蒜兰人工异花
授粉后 125 d (DAP125)、160 d (DAP160)、190 d
(DAP190)、219 d(DAP219)的新鲜饱满蒴果 ,先用
硅胶干燥 1 周,然后随机分成两份分别置于实验柜
室温储存和冰箱 4 ℃储存。
1.2 方法
1.2.1 播种前种子质量的检测 选择成熟饱满的
蒴果,将各蒴果种子取出混合均匀,取适量种子加
入 1.5 mL 离心管中至约 0.25 mL 刻度处, 加入 1%
TTC溶液 1 mL,30 ℃黑暗放置 48 h。 染色 48 h后用
胶头滴管吹吸使种子混匀,吸取种子转移至载玻片
上,用滤纸吸去染液,体式显微镜下统计种子活力
指数(种子活力指数=有活力种子总数 /统计种子总
数),各样品 3次重复[12]。 有活力种子胚被染为橙色
或者粉红色,无活力种子胚不着色或染成黄色。
1.2.2 室外播种 参考原生地播种法 [2],采用 300
目尼龙网制作成 5 cm×8 cm 种子袋,一端开口;分别
将相同成熟度在相同储存方式下的种子混合均匀,
从网袋开口端撒入 ,稀疏平铺种子袋一层 ,约为
1 500 粒种子。 于 2011 年 11 月 10日在贵州省凯里
市雷公山按种子类别进行播种。 播种深度为表层土
5 cm,种子袋水平铺开,袋间间隔 10 cm,覆土,盖些
许杂草保湿、保温。 播种后 3个月开始取材观察,共
观察 5 次,每次取回 10 个种子袋,观察时间为 2012
年 2 月 15 日、2012 年 3 月 7 日、2012 年 5 月 6 日、
2012 年 7月 15日、2012年 9 月 10日。
1.2.3 数据统计与分析 统计独蒜兰种子相对发
芽率、生长指数及死亡率。 由于各类型种子质量有
差别,在进行种子发芽率比较前需要折算为同一水
平,此处通过计算相对发芽率来进行比较。 相对发
芽率=发芽种子总数 / (统计种子总数×播种前种子
活力指数); 萌发生长指数 GI=(N0+N1×2+N2×3+N3×
4+N4×5) / (N0+N1+N2+N3+N4),其中 N0是未萌发种子
数,N1是萌发 1 阶段种子数,以此类推[13]。 生长指数
能够反映种子萌发后各阶段原球茎的生长情况。
按时按量取回种子袋, 用毛刷刷去种子袋表面
泥土,打开种子袋,置于体式显微镜下统计种子萌发
情况。 运用 SPSS 17.0 软件,以种子成熟度、种子储
存方式为分析因子,以种子相对发芽率、死亡率及萌
发生长指数为因变量对统计数据进行单因素方差分
析,分析各因子对独蒜兰种子自然萌发的影响。
2 结果与分析
2.1 独蒜兰种子播种前的质量
独蒜兰种子播种前质量检测结果见表 1。
2.2 独蒜兰种子自然萌发过程
2.2.1 独蒜兰种子的死亡过程 独蒜兰室外播种,
种子发芽率低死亡率高,耕作地、栽培地、原生地种
子在土壤中具有 3 种相同的存在状态即种胚正常、
种胚变色(橙色、黑色)、种胚消解,其中种胚变色种
子失去活力不能正常萌发,橙色种胚最终消解(图 1)。
表 1 独蒜兰种子播种前质量检测结果
种子成熟度
DAP125
DAP160
DAP190
DAP219
种子储存方式
4℃低温储存
室温储存
4℃低温储存
室温储存
4℃低温储存
室温储存
4℃低温储存
室温储存
种子活力指数
0.454 8
0.439 3
0.639 7
0.626 3
0.705 5
0.687 7
0.691 1
0.680 0
1.原生地播种 180 d;2.原生地播种 250 d;3、4 为各状态种子放大
箭头所示为种胚变化过程,a.种胚致死变黑;b.种子正常萌发;
c.种子致死变橙最终消解
图 1 独蒜兰种子死亡过程
a
b
c
c
1 2
3 4
2078
第 9 期
2.2.2 独蒜兰种子萌发过程 此次试验发现独蒜
兰种子萌发过程具有两种不同的情况,其一是种子
启动萌发,种胚膨大,在突破种皮前分化形成假根,
并且假根伴随独蒜兰种子整个萌发阶段; 其二,种
胚膨大在突破种胚前无假根分化,同时种子萌发的
整个过程不存在假根(图 2)。 根据独蒜兰种子萌发
过程中形态大小及结构分化的时间顺序将独蒜兰
种子萌发划分为 5 个阶段,其判断标准参照相关兰
科种子萌发阶段的划分办法[14,15]。 独蒜兰种子萌发
的 5 个阶段为:种胚未变化(阶段 0)、种胚膨大而尚
未突破种皮(阶段 1)、种胚膨大突破种皮或形成假
根(阶段 2)、种胚出现分生原基(阶段 3)、芽体形成
(阶段 4),其中阶段 0 为种子未萌发,阶段 1、2、3、4
为种子已萌发。
1、2、6、7、8 为独蒜兰种子萌发情况一,1~5 为独蒜兰种子萌发情况二。1.种胚未变化(阶段 0);2.种胚膨大顶种皮而尚未突破种皮(阶段 1);
3.种胚膨大突破种皮(阶段 2);6.形成假根(阶段 2);4、7.种胚出现分生原基(阶段 3);5、8.芽体形成(阶段 4)
图 2 独蒜兰种子原生地播种两种萌发情况
2.3 种子成熟度对种子萌发的影响
成熟度低的种子易于启动种子的萌发,种子在
播种前期集中萌发, 室温储存的 DAP125 种子播种
99 d 相对发芽率可达 80.82% ,DAP160、DAP190、
DAP219 种子播种 99 d 相对发芽率分别为 59.17%、
25.70%、30.48%(表 2)。成熟度较低的种子主要在播
种前期具有较高的发芽率,随着播种时间的延长,种
子的发芽率持续下降,各成熟度种子发芽率趋于相
近水平,最终室温储存的种子相对发芽率最高仅为
3.21%(图 3,表 2)。 方差分析结果显示,不同成熟度
和种子间发芽率差异未达到显著水平,说明种子成
熟度对种子发芽率没有显著影响(表 3),种子成熟
度在种子发芽率方面的差异主要体现在种子的萌
发启动上。
种子成熟度显著影响着种子萌发生长指数(表
3), 成熟度较高的种子具有较高的萌发生长指数
(图 4)。 进一步以成熟度为分析因子进行种子萌发
生长指数两两比较, 结果表明 DAP125 种子萌发生
长指数显著低于 DAP160、DAP190、DAP219 种子萌
发生长指数,DAP160 种子萌发生长指数显著低于
DAP190、DAP219 种子萌发生长指数, 但 DAP190、
DAP219 种子萌发生长指数处于同一水平, 由此可
以推断 DAP125、DAP160、DAP190 和 DAP219 种子
分别处于 3个成熟度梯度水平。
各成熟度种子死亡率变化趋势一致,随着播种
时间的延长种子死亡率持续上升, 并且播种 120~
180 d是种子死亡高峰期(图 5,表 2)。各成熟度种子
均能顺利萌发至第二阶段原球茎, 但由于已萌发种
子的死亡而未见第三阶段及更高阶段原球茎(表 2)。
以种子成熟度为分析因子,单因素方差分析表明,种
子成熟度并非为影响种子死亡率的关键因子(表 3)。
2.4 低温冷藏对种子萌发的影响
常温储存和 4 ℃储存种子相对发芽率、 萌发生
长指数、死亡率变化趋势相同,但 4 ℃冷藏提高了种
子的相对发芽率、萌发生长指数,降低种子死亡率,
并且促进效果对成熟度相对较高的 DAP190、
DAP219种子更为明显(图 6、7、8)。分别对各成熟度
种子以种子相对发芽率、萌发生长指数、死亡率为
指标,以种子储存方式为分析因子,进行单因素方
差分析,结果显示种子储存方式对各成熟度种子相
对发芽率、死亡率的影响均未达到显著水平,在种
子萌发生长指数方面, 种子储存方式对 DAP125、
DAP160、DAP219 种子萌发生长指数的差异不显
著, 但 4 ℃冷藏能够显著提高 DAP190 种子的萌发
生长指数(表 4)。
3 小结与讨论
独蒜兰种子在自然萌发过程中,种胚假根的产
蓝家望等:独蒜兰种子自然萌发特性分析
1 2
3 4 5
6 7 8
2079
湖 北 农 业 科 学 2013 年
表 2 独蒜兰原生地播种萌发统计结果
储存方式
4℃储存
室温储存
种子材料
DAP125
DAP160
DAP190
DAP219
DAP125
DAP160
DAP190
DAP219
种子总数
1 899
1 380
1 476
1 118
995
1 858
1 758
1 333
1 206
808
1 754
1 641
1 257
1 260
963
1 799
1 573
1 416
1 007
969
1 837
1 603
1 355
1 195
922
1 852
1 570
1 408
1 110
923
1 814
756
1 130
1 179
934
2 061
1 658
1 818
1 155
924
变色数
107
142
425
353
264
656
812
678
571
314
647
675
596
571
360
511
503
558
408
331
106
177
395
381
249
637
756
732
531
361
1 080
308
581
558
363
1 132
860
923
550
360
种胚消解数
874
680
766
716
709
256
348
452
577
474
125
323
307
546
573
142
335
494
490
584
840
717
745
771
659
529
324
508
540
540
178
224
418
592
547
283
326
615
558
544
种胚死亡数
981
822
1 191
1 069
973
912
1 160
1 130
1 148
788
772
998
903
1 117
933
653
838
1 052
898
915
946
894
1 140
1 152
908
1 166
1 080
1 240
1 071
901
1 258
532
999
1 150
910
1 415
1 186
1 538
1 108
904
死亡率//%
51.66
59.57
80.69
95.62
97.79
49.09
65.98
84.77
95.19
97.52
44.01
60.82
71.84
88.65
96.88
36.30
53.27
74.29
89.18
94.43
51.50
55.77
84.13
96.40
98.48
62.96
68.79
88.07
96.49
97.62
69.35
70.37
88.41
97.54
97.43
68.66
71.53
84.60
95.24
97.51
萌发阶段 0-1-2-3-4
400-304-204-0-0
290-98-170-0-0
90-85-110-0-0
20-12-17-0-0
10-5-7-0-0
150-392-404-0-0
71-319-208-0-0
56-64-83-0-0
18-9-31-0-0
5-6-9-0-0
50-443-489-0-0
14-221-398-0-0
58-47-249-0-0
17-23-103-0-0
0-10-20-0-0
160-481-505-0-0
105-210-420-0-0
12-114-238-0-0
5-30-74-0-0
0-18-36-0-0
440-223-228-0-0
407-106-196-0-0
63-108-44-0-0
24-4-13-0-0
12-3-6-0-0
143-353-190-0-0
93-257-140-0-0
51-48-69-0-0
13-10-16-0-0
11-4-7-0-0
261-81-214-0-0
67-66-91-0-0
50-16-65-0-0
9-6-14-0-0
7-4-13-0-0
253-176-217-0-0
156-182-204-0-0
55-128-97-0-0
15-10-22-0-0
5-3-12-0-0
相对发芽率
0.849 5
0.616 7
0.419 5
0.082 4
0.038 3
0.828 7
0.579 9
0.213 3
0.064 2
0.035 9
0.813 7
0.577 7
0.360 6
0.153 1
0.047 7
0.852 8
0.623 2
0.386 8
0.160 7
0.086 7
0.808 2
0.620 2
0.369 3
0.052 3
0.032 1
0.591 7
0.510 3
0.167 7
0.047 3
0.024 1
0.257 0
0.328 1
0.113 3
0.026 8
0.028 8
0.304 8
0.372 1
0.197 8
0.044 3
0.025 9
萌发生长指数
1.784 1
1.784 9
2.070 2
1.938 8
1.863 6
2.268 5
2.229 1
2.133 0
2.224 1
2.200 0
2.447 0
2.511 8
2.604 5
2.601 4
2.666 7
2.301 0
2.428 6
2.538 5
2.596 3
2.611 1
1.760 9
1.771 5
2.041 9
1.907 0
1.809 5
2.250 0
2.169 4
2.136 9
2.153 8
2.136 4
2.321 9
2.375 0
2.450 4
2.413 8
2.500 0
2.224 5
2.337 6
2.478 6
2.553 2
2.550 0
生具有可选择性。 大多数兰科植物种子没有胚乳,
种胚中储存的养分有限, 在种子起始萌发时期,种
胚能够利用自身养分,但萌发后期如果种胚得不到
养分的供给就会死亡,倘若在种胚自身养分消耗殆
尽前能够从某种途径及时得到养分的补给,种胚将
进入后续发育阶段。 种胚产生假根是种胚发育过程
中对养分的一种需求反应,种胚在突破种皮前产生
假根, 说明种胚自身养分只能维持短暂的时间,此
时急需外界养分的补给。 两种萌发情况说明种子萌
发过程中除假根为种胚运输外界养分的同时还存
在其他途径供给养分。 许多研究报道指出,兰科种
子的萌发需要共生菌的参与,这种需求主要是共生
菌起着养分传递的角色[16,17]。
种子成熟的过程是种子生理和结构变化的过
2080
第 9 期
图 7 种子储存方式对种子萌发生长指数的影响
表 4 单因素分析种子储存萌发方式对种子萌发影响结果
指标
相对
发芽率
萌发生长
指数
死亡率
成熟度
DAP125
DAP190
DAP160
DAP219
DAP125
DAP160
DAP190
DAP219
DAP125
DAP160
DAP190
DAP219
变异来源
组间
组间
组间
组间
组间
组间
组间
组间
组间
组间
组间
组间
SS
0.000 0
0.008 0
0.067 0
0.080 0
0.002 0
0.004 0
0.059 0
0.011 0
0.000 0
0.005 0
0.037 0
0.049 0
df
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
MS
0.000 0
0.008 0
0.067 0
0.080 0
0.002 0
0.004 0
0.059 0
0.011 0
0.000 0
0.005 0
0.037 0
0.049 0
F
0.002 0
0.078 0
0.971 0
1.142 0
0.161 0
1.835 0
9.751 0
0.585 0
0.000 0
0.134 0
1.148 0
1.269 0
显著性
0.965 0
0.788 0
0.353 0
0.316 0
0.699 0
0.213 0
0.014 0
0.466 0
0.989 0
0.724 0
0.315 0
0.293 0
表 3 单因素分析种子成熟度对种子萌发的影响
指标
相对发芽率
萌发生长指数
死亡率
变异来源
组间
组间
组间
SS
0.016 0
1.128 0
0.016 0
df
3
3
3
MS
0.0050
0.3760
0.0050
F
0.0490
34.0750
0.1910
显著性
0.9850
0.0000
0.9010
图 5 种子成熟度对种子死亡率的影响
程,许多兰科植物种子在成熟的过程中在生理上将
形成休眠机制, 在结构上形成一层被称为“Cara-
pace”的不渗透结构 [3,16,18],成熟种子成熟过程中这
种变化将阻碍种子的萌发 [15,19,20]。 成熟度低的种子
由于未形成完善的休眠机制而易于启动种子萌发。
但在 4 ℃储存后,DAP190、DAP219 种子相对发芽率
提高, 并且高于 4 ℃储存 DAP125、DAP160 种子的
相对发芽率,这可能是低温冷藏打破了种子休眠的
结果[3,15,16,18-21],成熟种子的休眠机制被打破后,将发
挥成熟度高的潜在优势。
成熟度高的种子同时具有利于萌发后生长的
优势。 无论是常温储存还是 4 ℃储存,DAP125 种子
萌发生长指数显著低于 DAP160 种子萌发生长指
数,DAP160 种子萌发生长指数又显著低于处于相
近水平的 DAP190、DAP219 种子萌发生长指数。 且
这种优势在 4 ℃冷藏后显得更明显 , 尤其是
DAP190 种子,4 ℃冷藏显著提高其萌发生长指数,
并且高于 DAP219 种子萌发生长指数, 说明在一定
成熟度范围内,种子成熟度的提高利于已萌发种子
更好地适应环境和后续的生长发育。
独蒜兰种子自然萌发过程中与其他兰科植物
同样面临的一个尖锐问题就是种子死亡率高。 此次
统计分析发现,种子死亡主要出现在种子萌发至第
二阶段原球茎时期, 主要死亡形式是种胚变色、种
1.0000
0.8000
0.6000
0.4000
0.2000
0





99 120 180 250 307
播种时间//d
图 3 种子成熟度对种子相对发芽率的影响
DAP125
DAP160
DAP190
DAP219
3.0000
2.5000
2.0000
1.5000
1.0000
0.5000
0






99 120 180 250 307
播种时间//d
图 4 种子成熟度对种子萌发生长指数的影响
DAP125
DAP160
DAP190
DAP219



99 120 180 250 307
播种时间//d
DAP125
DAP160
DAP190
DAP219
播种时间//d
1.0000
0.8000
0.6000
0.4000
0.2000
0





99 12
0
18
0
25
0
30
7 99 12
0
18
0
25
0
30
7 99 12
0
18
0
25
0
30
7 99 12
0
18
0
25
0
30
7
DAP125 DAP160 DAP190 DAP219
图 6 种子储存方式对种子相对发芽率的影响
常温储存
4℃储存
播种时间//d
99 12
0
18
0
25
0
30
7 99 12
0
18
0
25
0
30
7 99 12
0
18
0
25
0
30
7 99 12
0
18
0
25
0
30
7
DAP125 DAP160 DAP190 DAP219
常温储存
4℃储存
3.0000
2.5000
2.0000
1.5000
1.0000
0.5000
0






1.00
0.80
0.60
0.40
0.20
0
图 8 种子储存方式对种子死亡率的影响
1.0000
0.8000
0.6000
0.4000
0.2000
0
播种时间//d
99 12
0
18
0
25
0
30
7 99 12
0
18
0
25
0
30
7 99 12
0
18
0
25
0
30
7 99 12
0
18
0
25
0
30
7
DAP125 DAP160 DAP190 DAP219
常温储存
4℃储存



蓝家望等:独蒜兰种子自然萌发特性分析 2081
湖 北 农 业 科 学 2013 年
(责任编辑 王晓芳)
胚消解。 种子萌发至第二阶段原球茎后急剧死亡是
导致种子发芽率急剧下降的主要原因,因此解决独
蒜兰第二阶段原球茎到第三阶段原球茎的过渡问
题尤其关键,比如调查种子变色、消解的生理机制;
调查原球茎发育各阶段共生真菌特异性及进一步
调查种子萌发的生理生态特性等。
独蒜兰种子发芽率、萌发生长指数同时受到多
种因素的交互影响。 试验结果表明,独蒜兰种子成
熟度、 储存方式均在一定程度上影响种子的萌发、
生长。 DAP190 种子能够更好地接受低温的刺激打
破种子的休眠发挥自身优势,具有较佳的萌发及生
长优势,因此深入调查独蒜兰原生地的优势因子显
得极其必要。
参考文献:
[1] 文 林,亓 晶 . 丽江山慈菇的功用[J].中国民族民间医药杂
志,2003(3):180-181.
[2] RASMUSSEN H N, WHIGHAM D F. Seed ecology of dust
seeds in situ: A new study technique and its application in
terrestrial orchids[J]. American Journal of Botany,1993,80(12):
1374-1378.
[3] VAN DER KINNDEREN G. Observations on in situ germina-
tion of Epipactis helleborine (L.) Crantz[J]. Lindleyana,1995,
10(4):223-231.
[4] BATTY A L, DIXON K W,SIVASITHAMPARAM K. Soil seed
bank dynamics of terrestrial orchids[J]. Lindleyana,2000,15(4):
227-236.
[5] MCKENDRICK S L, LEAKE J R, TAYLOR D L, et al.
Symbiotic germination and development of mycoheterotrophic
plants in nature: Ontogeny of Corallorhiza trifida and charac-
terisation of its mycorrhizal fungi [J]. New Phytologist,2000,
145:523-537.
[6] BONNIE W A, DONALD K, MARIO B, et al. In situ devel-
opment of western prairie fringed orchid seeds, protocorms,
and seedlings in grazed and non-grazed prairie habitat [J].The
Prairie Naturalist,2010,42:49-54.
[7] JOHN H, CAROLYN H S, MICHAEL B. Spatial and temporal
optimization in habitat placement for a threatened plant: The
case of the western prairie fringed orchid[J]. Ecological Mod-
elling,1999,115(1):61-75.
[8] BATTY A L, DIXON K W, BRUNDRETT M, et al. Con-
straints to symbiotic germination of terrestrial orchid seed in a
mediterranean bushland [J]. New Phytologist,2001,152 (3):
511-520.
[9] BRUNDRETT M C, SCADE A, BATTY A L, et al. Develop-
ment of in situ and ex situ seed baiting techniques to detect
mycorrhizal fungi from terrestrial orchid habitats [J]. Mycologi-
cal Research,2003,107(10):1210-1220.
[10] KEEL B G, ZETTLER L W, KAPLIN B A. Seed germina-
tion of Habenaria repens (Orchidaceae) in situ beyond its
range and its potential for assisted migration imposed by cli-
mate change[J]. Castanea,2011,76(1):43-54.
[11] SWARTS N D, SINCLAIR E A, FRANCIS A, et al. Ecolog-
ical specialization in mycorrhizal symbiosis leads to rarity in
an endangered orchid [J]. Molecular Ecology,2010,19 (15):
3236-3242.
[12] MIYOSHI K, MII M. Enhancement of seed germination of
Calanthe izu-insularis[J]. Journal of the Japanese Society for
Horticultural Science,1981,50:332-333.
[13] OTERO J T, ACKERMAN J D, BAYMAN P. Differences in
mycorrhizal preferences between two tropical orchids [J].
Molecular Ecology,2004,13(8):2393-2404.
[14] MIYOSHI K, MII M. Enhancement of seed germination and
protocorm formation in Calanthe discolor (Orchidaceae) by
NaOCl and polyphenol absorbent treatments [J]. Plant Tissue
Culture Letters, 1995, 12:267-272.
[15] YAMAZAKI J, MIYOSHI K. In vitro asymbiotic germination
of immature seed and formation of protocorm by Cephalan-
thera falcata(Orchidaceae)[J]. Annals of Botany,2006,98(6):
1197-1206.
[16] RASMUSSEN H N. Terrestrial orchids: From seed to my-
cotrophic plant [M]. United Kingdom: Cambridge University
Press,1995.
[17] WARCUP J H. Symbiotic germination of some Australian ter-
restrial orchids[J]. New Phytologist,1973,72(2):387-392.
[18] YEUNG E, ZEE S Y, YE X L. Embryology of Cymbidium
sinense:Embryo development[J]. Annals of Botany,1996,78(1):
105-110.
[19] ARDITTI J, MICHAUD J D, OLIVA A P. Practical germina-
tion of North American and related orchids: Epipactis a-
trorubens, E. gigantea and E. helleborine [J]. American Or-
chid Society Bulletin,1982,51(2):162-171.
[20] LEE Y I, LEE N, YEUNG E C, et al. Embryo development
of Cypripedium formosanum in relation to seed germination in
vitro [J]. Journal of the American Society for Horticultural
Science,2005,130(5):747-753.
[21] SHIMURA H, KODA Y. Enhanced symbiotic seed germina-
tion of Cypripedium macranthos var. rebunense following in-
oculation after cold treatment[J]. Physiologia Plantarum,2005,
123(3):281-287.
2082