全 文 ：·生物技术· 北方园艺２０１６（１９）：１２４～１２８
第一作者简介：吴彦秋（１９９２－），女，硕士，研究方向为植物生物技
术与次生物质代谢。Ｅ－ｍａｉｌ：７３７０８０５３８＠ｑｑ．ｃｏｍ．
责任作者：张明生（１９６３－），男，博士，教授，博士生导师，现主要从
事植物生理生化与生物技术等研究工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｍｓｚｈａｎｇ＠ｇｕｚ．
ｅｄｕ．ｃｎ．
基金项目：国家自然科学基金资助项目（８１３６０６１３）；贵州省高层次
创新型人才培养计划资助项目（黔科合人才［２０１５］４０３１号）；贵州
大学研究生创新基金资助项目（研农２０１６００４）。
收稿日期：２０１６－０７－２１
ＤＯＩ：１０．１１９３７／ｂｆｙｙ．２０１６１９０３１
杜鹃兰原球茎增殖培养条件
吴 彦 秋，吕 享，李 小 兰，高 晓 峰，刘 剑 东，张 明 生
（贵州大学 生命科学学院，山地植物资源保护与种质创新省部共建教育部重点实验室，贵州 贵阳５５００２５）
摘 要：以杜鹃兰种子萌发的原球茎为试材，研究不同培养基、不同植物生长调节物质（６－ＢＡ、
ＮＡＡ和ＩＢＡ）、活性炭、温度及光照强度对杜鹃兰原球茎增殖的影响。结果表明：１／２ＭＳ培养基
为适于原球茎增殖的基本培养基；添加一定浓度的６－ＢＡ、ＮＡＡ和ＩＢＡ均有利于原球茎的增殖，
ＩＢＡ的浓度为１．０ｍｇ·Ｌ－１时，原球茎增殖率较高，４０ｄ可达１７０．０７％；适量添加活性炭对原球茎
增殖有促进作用；温度及光照强度的控制对原球茎增殖是必需的。杜鹃兰原球茎增殖的适宜培
养条件为１／２ＭＳ＋１．０ｍｇ·Ｌ－１ ６－ＢＡ＋１．０ｍｇ·Ｌ－１ ＩＢＡ＋０．５ｇ·Ｌ－１活性炭，温度为１５℃，光
照强度为２ ０００ｌｘ。
关键词：杜鹃兰；原球茎；增殖培养
中图分类号：Ｒ ２８２．７１ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１－０００９（２０１６）１９－０１２４－０５
杜鹃兰（Ｃｒｅｍａｓｔｒａ ａｐｐｅｎｄｉｃｕｌａｔａ（Ｄ．Ｄｏｎ．）Ｍａｋｉ－
ｎｏ）属兰科（Ｏｒｃｈｉｄａｃｅａｅ）杜鹃兰属（Ｃｒｅｍａｓｔｒａ）多年生珍
稀药用植物，内用具有抗肝癌、乳腺癌、子宫癌等功效，
外用可治疮毒、蛇虫咬伤、皮肤烫伤或烧伤等［１］。由于
人们长期过度采挖，导致野生资源严重枯竭［２］。杜鹃兰
种子在自然条件下几乎不能萌发，假鳞茎是其主要的繁
殖器官，但因其繁殖系数低而无法实现规模化生产。利
用组培快繁技术，有望解决杜鹃兰繁殖系数极低的问
题，而原球茎增殖是该技术成功的关键环节。目前，虽
有少数学者在杜鹃兰组织培养方面做了一些工作［３－８］，
但仍未解决原球茎增殖周期长、增殖速率低等问题。现
以人工授粉获得的杜鹃兰种子萌发的原球茎为试材，系
统研究原球茎增殖的适宜培养基及培养条件，以期为杜
鹃兰人工种植所需种苗的规模化繁育奠定技术基础。
１ 材料与方法
１．１ 试验材料
供试的杜鹃兰采自贵州省黔东南州境内，盆栽后
Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ ｏｆ Ｐｌａｎｔ Ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ ｆｏｒ Ｆｏｕｒ Ｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｕｍｍｏｒｉｆｏｌｉｕｍ
ＬＩ Ｊｉｎｔｏｎｇ１，ＷＵ Ｙａｎｉ １，ＤＩＮＧ Ｂｉｎｇ１，ＱＩ Ｘｕｅｊｕｎ２，ＺＨＡＮＧ Ｙａｎｇ１，ＸＩＥ Ｌｉｎａｎ１
（１．Ｃｏｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｎｏｒｔｈｅａｓｔ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｒｂｉｎ，Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ １５００４０；２．Ｌｉａｏｎｉｎｇ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，
Ｓｈｅｎｙａｎｇ，Ｌｉａｏｎｉｎｇ １１０１６１）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｉｓ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｗａｓ ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ ｔｏ ｃｏｎｓｔｒｕｃｔ ａ ｈｉｇｈ ｅｆｉｃｉｅｎｔ ａｎｄ ｓｔａｂｌｅ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ ｂｙ ａｄｄｉｎｇ ｄｉｆｅｒｅｎｔ
ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ６－ＢＡ ａｎｄ ＮＡＡ ｔｏ ｔｈｅ ｂａｓｉｃ ＭＳ ｍｅｄｉｕｍ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｌｅａｆｓ ｅｘｐｌａｎｔ ｏｆ ｆｏｕｒ ｋｉｎｄｓ ｏｆ Ｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｕｍ
ｍｏｒｉｆｏｌｉｕｍ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ‘Ｄｏｎｇｌｉｎｒｕｉｘｕｅ’‘Ｄｕｏｍｕｍａｎａｏ’‘Ｈｕａｎｇｊｉｎｚｈａｎ’ａｎｄ‘Ｊｉｎｂｕｈｕａｎ’．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ
ｏｐｔｉｍｕｍ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ＮＡＡ ａｎｄ ６－ＢＡ ｆｏｒ‘Ｄｏｎｌｉｎｒｕｉｘｕｅ’ｗａｓ ＭＳ＋０．５ｍｇ·Ｌ－１ ＮＡＡ＋１．５ｍｇ·Ｌ－１
６－ＢＡ；ｆｏｒ‘Ｄｕｏｍｕｍａｎａｏ’ｗａｓ ＭＳ＋１．０ｍｇ·Ｌ－１ ６－ＢＡ＋２．０ｍｇ·Ｌ－１ ＮＡＡ；‘Ｈｕａｎｇｊｉｎｚｈａｎ’ｗａｓ ＭＳ＋０．５ｍｇ·Ｌ－１
６－ＢＡ＋１．０ｍｇ·Ｌ－１ ＮＡＡ；‘Ｊｉｎｂｕｈｕａｎ’ｗａｓ ＭＳ＋１．０ｍｇ·Ｌ－１ ６－ＢＡ＋１．５ｍｇ·Ｌ－１ ＮＡＡ；ａｎｄ ｔｈｅ ｒｏｏｔｉｎｇ ｍｅｄｉｕｍ ｏｆ
ａｌ ｔｈｅ ｆｏｕｒ ｋｉｎｄｓ ｏｆ Ｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｕｍ ｍｏｒｉｆｏｌｉｕｍｗａｓ １／２ＭＳ ｍｅｄｉｕｍ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｕｍ ｍｏｒｉｆｏｌｉｕｍ；ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ；６－ＢＡ；ＮＡＡ
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北方园艺２０１６（１９）：１２４～１２８ ·生物技术·
通过人工授粉获得种子，将种子经培养基无菌萌发得到
原球茎，为供试材料。
１．２ 试验方法
１．２．１ 原球茎增殖培养基筛选 选择 ＭＳ、１／２ＭＳ、
ＶＷ、ＫＣ ４种培养基［９－１０］，均附加６－ＢＡ １．０ｍｇ·Ｌ－１、
ＮＡＡ ０．２ｍｇ·Ｌ－１和活性炭０．２ｇ·Ｌ－１，以筛选适于原
球茎增殖的基本培养基；以１／２ＭＳ＋活性炭０．２ｇ·Ｌ－１
为基本培养基，以不同浓度的６－ＢＡ（０、０．５、１．０、１．５、
２．０ｍｇ·Ｌ－１）、ＮＡＡ（０、０．２、０．５、１．０、１．５ｍｇ·Ｌ－１）、
ＩＢＡ（０、０．５、１．０、１．５、２．０ｍｇ·Ｌ－１）设置单因素试验；以
１／２ＭＳ＋１．０ｍｇ·Ｌ－１ ６－ＢＡ＋１．０ｍｇ·Ｌ－１ ＩＢＡ为基本
培养基，以不同浓度的活性炭（０、０．２、０．５、１．０、１．５ｇ·Ｌ－１）
设置单因素试验，最终获得原球茎增殖的适宜培养基。
上述 培 养 基 中 均 添 加 蔗 糖 ３０ｇ·Ｌ－１ 和 琼 脂
５．５ｇ·Ｌ－１，ｐＨ ５．８～６．０，培养温度为（２５±２）℃，光照
强度２ ０００ｌｘ，光照时间１２ｈ·ｄ－１。将原球茎接种于以
上培养基中，每个处理接种３瓶，每瓶接种５个原球茎，
重复３次，每隔１０ｄ观察记录１次原球茎的生长情况，
接种４０ｄ后统计其增殖结果。增殖率（％）＝（培养后原
球茎数目－接种原球茎数目）／接种原球茎数目×１００。
１．２．２ 培养条件的筛选 温度和光照强度对杜鹃兰的生
长发育影响较大［１１－１３］。以１／２ＭＳ＋１．０ｍｇ·Ｌ－１ ６－ＢＡ＋
１．０ｍｇ·Ｌ－１ ＩＢＡ＋０．５ｇ·Ｌ－１活性炭＋３０ｇ·Ｌ－１蔗
糖＋５．５ｇ·Ｌ－１琼脂为试验培养基，ｐＨ ５．８～６．０，光照
时间１２ｈ·ｄ－１。设置不同温度梯度（１５、２５、３０℃）和光
照强度（５００、１ ０００、２ ０００、３ ０００、４ ０００ｌｘ），每处理接种
３瓶，每瓶接种５个原球茎，重复３次，每隔１０ｄ观察记
录１次原球茎的生长情况，培养４０ｄ后统计其增殖结果。
１．３ 数据分析
运用Ｅｘｃｅｌ ２００７和ＳＰＳＳ １７．０软件对试验结果进行
统计学分析。
２ 结果与分析
２．１ 培养基组分对原球茎增殖的影响
不同类型基本培养基对杜鹃兰原球茎增殖及生长
情况有显著影响。由图１、２可知，接种于１／２ＭＳ培养
基的原球茎增殖速度快，长势较好，原球茎呈绿色（图１
Ｂ），增殖率达１２０．００％；接种于 ＭＳ培养基的原球茎增
殖速度及长势稍次于１／２ＭＳ，原球茎呈淡绿色（图１
Ａ），少数出现褐化现象，增殖率达９５．４５％；接种于ＶＷ
和ＫＣ培养基的材料部分呈白色，出现水渍状或褐化，少
数死亡（图１Ｃ、Ｄ）。杜鹃兰原球茎接种１０ｄ后，１／２ＭＳ
培养基中的原球茎颜色由白色转为浅绿色，接种２０ｄ
后，原球茎明显增大，３０ｄ后有少数原球茎开始增殖，颜
色呈黄绿色，４０ｄ时培养基中的原球茎多数已形成丛生
型原球茎，颜色转为绿色。上述结果可能是由于 ＭＳ培
养基成分种类丰富，无机盐浓度高［１４］；ＶＷ和ＫＣ培养
基只含有大量矿质元素，缺少有机元素和微量元素，无
法满足原球茎正常生长的需要；１／２ＭＳ较ＭＳ培养基无
机盐浓度低。由此可知，杜鹃兰原球茎生长增殖需要适
量的无机盐、种类丰富的微量元素和有机元素，故接种
于１／２ＭＳ培养基中的原球茎增殖率及长势显著高于其
它处理。
注：Ａ．ＭＳ；Ｂ．１／２ＭＳ；Ｃ．ＶＷ；Ｄ．ＫＣ。
图１ 培养基组分对原球茎长势的影响
Ｆｉｇ．１ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｍｅｄｉａ ｏｎ ｐｒｏｔｏｃｏｒｍｓ ｇｒｏｗｔｈ ｓｉｔｕａｔｉｏｎ
２．２ 植物生长调节物质对原球茎增殖的影响
不同种类及浓度的植物生长调节物质对杜鹃兰原
球茎增殖均有不同程度的促进作用。由表１中６－ＢＡ的
作用效果可知，当６－ＢＡ浓度为１．０ｍｇ·Ｌ－１时，形成的
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注：图中不同小写字母表示差异显著 （Ｐ＜０．０５）。下同。
Ｎｏｔｅ：Ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｌｏｗｅｒｃａｓｅ ｌｅｔｔｅｒｓ ｉｎｄｉｃａｔｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ ａｔ ０．０５
ｌｅｖｅｌ．Ｔｈｅ ｓａｍｅ ｂｅｌｏｗ．
图２ 培养基组分对原球茎增殖的影响
Ｆｉｇ．２ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｍｅｄｉａ ｏｎ ｐｒｏｔｏｃｏｒｍｓ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ
丛生型原球茎较多，增殖率达１４２．２２％，显著高于其它
处理组；６－ＢＡ浓度为０．５ｍｇ·Ｌ－１时，增殖率仅次于
６－ＢＡ １．０ｍｇ·Ｌ－１处理，但部分原球茎开始分化；不添
加６－ＢＡ时原球茎也有较高增殖率，但不及６－ＢＡ ０．５、
１．０ｍｇ·Ｌ－１处理；６－ＢＡ浓度升高至１．５ｍｇ·Ｌ－１以上
时，增殖率急剧下降，部分原球茎颜色变黄死亡。ＮＡＡ、
ＩＢＡ对原球茎增殖的影响效果显著（图３），ＮＡＡ浓度为
０．２ｍｇ·Ｌ－１时，形成的原球茎较多，呈绿色，表面长有
许多白色毛状物，增殖率显著高于其它处理组，为
１４０．２９％；随ＩＢＡ浓度增加，原球茎增殖率不断变化，
ＩＢＡ浓度为１．０ｍｇ·Ｌ－１时，增殖率最高，达１７０．０７％，
原球茎的颜色呈绿色且生长健壮未分化，浓度高于
１．０ｍｇ·Ｌ－１时，原球茎的增殖率随浓度升高而下降。
表１ ６－ＢＡ对原球茎增殖的影响
Ｔａｂｌｅ １ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ６－ＢＡ ｏｎ ｐｒｏｔｏｃｏｒｍｓ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ
处理
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
６－ＢＡ
／（ｍｇ·Ｌ－１）
增殖率
Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｒａｔｅ／％
原球茎生长情况
Ｐｒｏｔｏｃｏｒｍｓ ｇｒｏｗｔｈ ｓｉｔｕａｔｉｏｎ
１ ０ ８１．０９±２０．０１ａｂ ＋，白色
２ ０．５ １０１．９４±２５．１２ａｂ ＋＋，浅绿
３ １．０ １４２．２２±３５．０５ａ ＋＋＋，绿色
４ １．５ ７１．８８±１７．７１ｂ ＋＋，浅绿
５ ２．０ ４３．１３±１６．６３ｂ ＋，褐色
图３ ＮＡＡ和ＩＢＡ对原球茎增殖的影响
Ｆｉｇ．３ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ＮＡＡ ａｎｄ ＩＢＡ ｏｎ ｐｒｏｔｏｃｏｒｍｓ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ
２．３ 活性炭对原球茎增殖的影响
适量的活性炭对杜鹃兰原球茎增殖有益（表２）。活
性炭浓度为０．５ｇ·Ｌ－１时，原球茎的增殖效果相对较
好，呈绿色，在原球茎表面长有许多白色毛状物，适合继
代增殖培养，增殖率达１５１．１７％，与其它处理组相比差
异显著；活性炭浓度为０．２ｇ·Ｌ－１时，原球茎增殖相对
较快，但不及０．５ｇ·Ｌ－１的活性炭；活性炭浓度增加到
１．５ｇ·Ｌ－１时，原球茎增殖生长较差，大部分原球茎呈白
色；在不添加活性炭的处理中，增殖缓慢，原球茎褐化率
高，易分化。活性炭作为培养基中的吸附剂，既可以吸
附原球茎生长过程中释放的酚类化合物，抑制褐变的
发生，有利于原球茎的生长，也可吸附培养基中的生长
调节物质，阻滞原球茎不能摄入过多的生长素类物质
而使其缓慢、健壮生长。因此，适宜浓度的活性炭既能
提高原球茎的增殖，也能大大降低原球茎的褐化死
亡率。
表２ 活性炭对原球茎增殖的影响
Ｔａｂｌｅ ２ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ａｃｔｉｖｅ ｃａｒｂｏｎ ｏｎ ｐｒｏｔｏｃｏｒｍｓ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ
处理
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
活性炭
ＡＣ／（ｇ·Ｌ－１）
增殖率
Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｒａｔｅ／％
原球茎生长情况
Ｐｒｏｔｏｃｏｒｍｓ ｇｒｏｗｔｈ ｓｉｔｕａｔｉｏｎ
１ ０ ８５．５３±１６．７９ｂ ＋，浅绿
２ ０．２ １０２．６７±２０．５０ａｂ ＋＋，黄绿
３ ０．５ １５１．１７±３０．０４ａ ＋＋＋，绿色
４ １．０ ９５．４９±１８．３７ａｂ ＋，白色
５ １．５ ６９．４２±１３．７９ｂ ＋，白色
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２．４ 光照强度和温度对原球茎增殖的影响
一定的光照强度对杜鹃兰原球茎的增殖有促进作
用（表３）。当光照强度为３ ０００ｌｘ时，原球茎的增殖率明
显高于其它处理组，为１６２．５４％，原球茎呈绿色且表面
长有许多白色毛状物，但部分原球茎开始分化；光照强
度为２ ０００ｌｘ时，增殖率仅次于３ ０００ｌｘ处理，原球茎呈
黄绿色且未分化；光照强度为１ ０００ｌｘ时，原球茎增殖率
也相对较高，但不如２ ０００、３ ０００ｌｘ处理；光照强度为
４ ０００ｌｘ和５００ｌｘ时，原球茎增殖率显著下降，部分原球
茎褐化，说明过强或过弱的光照均不利于原球茎
增殖［１３］。
表３ 光照强度对原球茎增殖的影响
Ｔａｂｌｅ ３ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｌｉｇｈｔ ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ ｏｎ ｐｒｏｔｏｃｏｒｍｓ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ
处理 光照强度 增殖率 原球茎生长情况
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ Ｌｉｇｈｔ ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ／ｌｘ Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｒａｔｅ／％ Ｐｒｏｔｏｃｏｒｍｓ ｇｒｏｗｔｈ ｓｉｔｕａｔｉｏｎ
１ ５００ ６１．０９±１２．７５ｂ ＋，褐白
２ １ ０００ １０９．８４±２３．０１ａｂ ＋，浅绿
３ ２ ０００ １４１．１８±２９．８９ａｂ ＋＋，黄绿
４ ３ ０００ １６２．５４±３３．８１ａ ＋＋＋，绿色
５ ４ ０００ ８２．６７±１７．５２ｂ ＋＋，褐色
温度对原球茎增殖也有显著影响（图４、５）。１５℃
下，原球茎长势旺，呈绿色，无褐化现象（图４Ａ），增殖率
显著高于其它处理组，可达１７７．１１％。随着温度的升
高，原球茎增殖率显著下降，温度达３０℃时，原球茎褐
化现象严重，长势差，甚至出现死亡，这正好体现了杜鹃
兰适于低温生境的生物学特性。
注：Ａ．１５℃；Ｂ．２５℃；Ｃ．３０℃。
图４ 温度对原球茎长势的影响
Ｆｉｇ．４ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｏｎ ｐｒｏｔｏｃｏｒｍｓ ｇｒｏｗｔｈ ｓｉｔｕａｔｉｏｎ
图５ 温度对原球茎增殖的影响
Ｆｉｇ．５ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｏｎ ｐｒｏｔｏｃｏｒｍｓ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ
３ 讨论
杜鹃兰自然繁殖系数低，采用组培快繁技术是获得
大量优良种苗的途径之一［１５－１７］。目前关于杜鹃兰组培
快繁的研究表明，原球茎增殖是杜鹃兰快速增殖的关
键［３－４］，而影响杜鹃兰原球茎增殖的因素有很多，其中植
物生长调节物质的种类、浓度及其比例是最关键的因素
之一［１８］。廖婷婷等［１９］发现ＮＡＡ对山慈菇组织芽块的
增殖优于ＩＡＡ，ＮＡＡ ０．０７５ｍｇ·Ｌ－１时，４５ｄ原球茎的
增重率为４８．９３％。该试验发现，ＩＢＡ对杜鹃兰原球茎
的增殖效果明显好于ＮＡＡ，在ＩＢＡ １．０ｍｇ·Ｌ－１时，４０ｄ
原球茎增殖率可达１７０．０７％，与廖婷婷等［１９］的研究结果
不同，可能与选择的试验方法不同有关。由于不同植物
生长调节物质并不是孤立的发挥作用，它们之间存在着
交互作用，因此，有关植物生长调节物质对杜鹃兰原球
茎增殖的交互作用还需进一步做多因素组合试验
研究。
温度和光照强度也是影响植物生长的一个重要因
素。该研究表明，杜鹃兰原球茎增殖的适宜温度为１５℃，
这一研究结果与张丽霞［１２］发现杜鹃兰主要分布区自然
条件下年平均气温为１５．３℃相似，说明组培条件与植
物的野外生存环境有着密切的关系；光照强度２ ０００ｌｘ
比光强３ ０００ｌｘ的原球茎增殖率低，但原球茎分化程度
较小，综合考虑光强２ ０００ｌｘ适宜原球茎的增殖。但该
研究主要是从宏观方面去观察温度及光照强度对原球
茎增殖的影响，至于不同温度及光照强度对杜鹃兰的生
理代谢的影响，需要继续研究。
７２１
·生物技术· 北方园艺２０１６（１９）：１２４～１２８
此外，在原球茎的增殖过程中出现了不同程度的芽
分化现象，这对后期的种苗工厂化生产不利。该研究通
过添加适宜浓度的活性炭在一定程度上起到抑制芽分
化的作用，这与谢利等［２０］的研究结果一致。通过调整适
宜植物生长调节物质比例对抑制芽分化有一定的效
果［２０］，该研究结果发现，适宜比例的植物生长调节物质
可有效抑制芽分化，与上述研究结果一致。至于能否通
过缩短生长周期、切割材料等手段进行增殖过程中芽分
化的控制，从而达到工厂化生产种苗标准，还有待进一
步研究。
参考文献
［１］ ＺＨＡＮＧ Ｍ Ｓ，ＷＵ Ｓ Ｊ，ＪＩＥ Ｘ Ｊ，ｅｔ ａｌ．Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｅｎｄｏｐｈｙｔｅ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｎ
ｍｉｃｒｏ ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｒｅｍａｓｔｒａ ａｐｐｅｎｄｉｃｕｌａｔａ （Ｄ．Ｄｏｎ．）Ｍａｋｉｎｏ（Ｏｒｃｈｉ－
ｄａｃｅａｅ）［Ｊ］．Ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｏｆ Ｏｒｎａｍｅｎｔａｌ Ｐｌａｎｔｓ，２００６，６（２）：８３－８９．
［２］ 田昌海，王世清．山慈菇的研究进展［Ｊ］．现代医药卫生，２００８，２４（７）：
１００９－１０１０．
［３］ 毛堂芬，丁映．杜鹃兰的组织培养与植株再生［Ｊ］．植物生理学通讯，
２００４，４０（６）：７１６－７１６．
［４］ 毛堂芬，刘涛，刘作易，等．杜鹃兰离体快繁技术研究［Ｊ］．中药材，
２００７，３０（９）：１０５７－１０５９．
［５］ 张明生，戚金亮，刘志，等．药用兰科植物杜鹃兰的组织培养与快速
繁殖［Ｊ］．种子，２００５，２４（８）：８２．
［６］ 张明生，彭斯文，杨小蕊，等．杜鹃兰人工种子技术研究［Ｊ］．中国中药
杂志，２００９，３４（１５）：１８９４－１８９７．
［７］ ＭＵＫＨＯＰＡＤＨＹＡＹ Ｍ Ｊ，ＭＵＫＨＯＰＡＤＨＹＡＹ Ｓ，ＳＥＮ Ｓ．Ｉｎ ｖｉｔｒｏ
ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｏｆ Ｉｐｈｉｇｅｎｉａ ｉｎｄｉｃａ，ａｎ ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ ｓｏｕｒｃｅ ｏｆ ｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ
Ｃｅｌ Ｔｉｓｓｕｅ ａｎｄ Ｏｒｇａｎ Ｃｕｌｔｕｒｅ，２００２，６９：１０１－１０４．
［８］ ＪＩＡＮＧ Ｗ Ｍ，ＺＨＡＯ Ｍ Ｓ，ＦＵ Ｃ Ｘ．Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ
ｃｏｍｐｅｔｅｎｃｅ ｏｆ ｐｓｅｕｄｏｂｕｌｂ ｃｕｌｔｕｒｅｓ ｉｎ Ｃｈａｎｇｎｉｅｎｉａ ａｍｏｅｎａ Ｃｈｉｅｎ［Ｊ］．Ｃｈｉｎｅｓｅ
Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｂｕｌｅｔｉｎ，２０１１，５６：２５８０－２５８５．
［９］ 廖婷婷．山慈菇（杜鹃兰）快速繁殖技术体系的建立［Ｄ］．成都：西南
交通大学，２０１２．
［１０］冯沛春．山慈菇（杜鹃兰）快速繁殖技术优化及铁皮石斛叶文库的构
建［Ｄ］．成都：西南交通大学，２０１４．
［１１］吴根良，何勇，王永传，等．不同光照强度下卡特兰和蝴蝶兰光合作
用和叶绿素荧光参数日变化［Ｊ］．浙江林学院学报，２００８，２５（６）：７３３－７３８．
［１２］张丽霞．杜鹃兰重要生理特性和生态适应性研究［Ｄ］．贵阳：贵州大
学，２００８．
［１３］徐步青，崔永一，郭岑，等．不同光照强度和培养时间下铁皮石斛类
原球茎生物量、多糖和生物碱量的动态变化［Ｊ］．中草药，２０１２，４３（２）：３５５－
３５９．
［１４］吴华芬，刘南祥，诸葛华，等．百合组织培养快速繁殖技术［Ｊ］．中国科
技信息，２００８（１９）：７３－７５．
［１５］李洪林，付志惠，杨波．独蒜兰的离体快速繁殖［Ｊ］．植物生理学通讯，
２００５，４１（５）：６３２．
［１６］汪杰，刘小青，钱森和．不同激素水平对石斛兰组织培养的影响［Ｊ］．
湖南农业科学，２００９（１２）：２１－２３．
［１７］陈丽静，齐欣，王玉坤．北五味子快繁体系的建立［Ｊ］．中草药，２０１１，
４２（３）：５７５－５７８．
［１８］张桂芳，关杰敏，黄松，等．铁皮石斛原球茎的诱导与增殖影响因素
研究［Ｊ］．中草药，２０１１，３４（８）：１１７２－１１７７．
［１９］廖婷婷，邹嘉欣，王万军．山慈菇快速繁殖体系的建立［Ｊ］．北方园艺，
２０１２（９）：１２１－１２５．
［２０］谢利，马晓娟，郭和蓉，等．杂交兰类原球茎增殖中芽分化的控制和
快速繁殖［Ｊ］．植物生理学报，２０１４，５０（２）：２０９－２１３．
Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｏｃｏｒｍｓ Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｒｅｍａｓｔｒａ ａｐｐｅｎｄｉｃｕｌａｔａ
ＷＵ Ｙａｎｑｉｕ，ＬＹＵ Ｘｉａｎｇ，ＬＩ Ｘｉａｏｌａｎ，ＧＡＯ Ｘｉａｏｆｅｎｇ，ＬＩＵ Ｊｉａｎｄｏｎｇ，ＺＨＡＮＧ Ｍｉｎｇｓｈｅｎｇ
（Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｇｕｉｚｈｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ／Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｐｌａｎｔ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｇｅｒｍｐｌａｓｍ Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ ｉｎ Ｍｏｕｎｔａｉｎｏｕｓ
Ｒｅｇｉｏｎ（Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ），Ｇｕｉｙａｎｇ，Ｇｕｉｚｈｏｕ ５５００２５）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｐｒｏｔｏｃｏｒｍｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｒｅｍａｓｔｒａ ａｐｐｅｎｄｉｃｕｌａｔａ ｓｅｅｄ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ａｓ ｔｅｓｔ ｍａｔｅｒｉａｌｓ ｔｏ
ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｅｆｅｃｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｍｅｄｉａ，ｇｒｏｗｔｈ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ（６－ＢＡ，ＮＡＡ ａｎｄ ＩＢＡ），ａｃｔｉｖｅ ｃａｒｂｏｎ（ＡＣ），ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ａｎｄ ｌｉｇｈｔ
ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ ｏｎ ｐｒｏｔｏｃｏｒｍｓ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃ．ａｐｐｅｎｄｉｃｕｌａｔａ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ １／２ＭＳ ｍｅｄｉｕｍ ｗａｓ ｔｈｅ ａｐｐｒｏｐｒｉａｔｅ
ｂａｓｉｃ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ｐｒｏｔｏｃｏｒｍｓ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ．Ａｄｄｉｎｇ ６－ＢＡ，ＮＡＡ ａｎｄ ＩＢＡ ｉｎｔｏ １／２ ＭＳ ｍｅｄｉｕｍ ｗａｓ ｂｅｎｅｆｉｃｉａｌ ｔｏ
ｐｒｏｔｏｃｏｒｍｓ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｒｅａｃｈｅｄ ｔｏ １７０．０７％ａｆｔｅｒ ４０ｄａｙｓ ｗｈｉｌｅ ａｄｄｉｎｇ １．０ｍｇ·Ｌ－１ ＩＢＡ，ａｎｄ
ａｄｄｉｎｇ ｃｅｒｔａｉｎ ａｍｏｕｎｔ ｏｆ ＡＣ ｃｏｕｌｄ ｐｒｏｍｏｔｅ ｔｈｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ．Ｉｎ ａｄｄｉｔｉｏｎ，ｔｈｅ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ａｎｄ ｌｉｇｈｔ ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ ｗｅｒｅ ａｌｓｏ
ｎｅｃｅｓｓａｒｙ ｔｏ ｔｈｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ．Ｉｎ ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ，ｔｈｅ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｆｏｒ ｐｒｏｔｏｃｏｒｍｓ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃ．ａｐｐｅｎｄｉｃｕｌａｔａ
ｗａｓ １／２ＭＳ ａｄｄｉｎｇ １．０ｍｇ·Ｌ－１ ６－ＢＡ，１．０ｍｇ·Ｌ－１ ＩＢＡ ａｎｄ ０．５ｇ·Ｌ－１ ＡＣ ｗｉｔｈ １５℃ａｎｄ ２ ０００ｌｘ ｌｉｇｈｔ ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｃｒｅｍａｓｔｒａ ａｐｐｅｎｄｉｃｕｌａｔａ（Ｄ．Ｄｏｎ．）Ｍａｋｉｎｏ；ｐｒｏｔｏｃｏｒｍｓ；ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｃｕｌｔｕｒｅ
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