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菝葜治疗大鼠慢性盆腔炎有效部位的初步筛选



全 文 :菝葜治疗大鼠慢性盆腔炎有效部位的初步筛选
黄嗣航 ,赵 洁 ,张 明 ,侯连兵 (南方医科大学 ,广州 510515)
摘 要:目的 筛选出菝葜的有效部位 , 并进行药效学研究。方法 菝葜生药经醇提后 ,以聚酰胺收集黄酮 ,大孔树脂收集皂
苷 , 然后分别给慢性盆腔炎模型大鼠灌胃 , 给药两周后取血检验黏度和血常规 , 取子宫称重 ,评价子宫炎症程度。结果 皂苷
组对全血黏度的各项指标均较模型组有明显改善 ,同时在抑制子宫炎症上也有明显的效果。 黄酮组则对各项指标的改善并
不明显。结论 皂苷是菝葜治疗慢性盆腔炎的有效部位之一。
关键词:菝葜;药效学;慢性盆腔炎 ;山奈素;薯蓣皂苷元
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1673-4610(2006)02-0051-03
作者简介:黄嗣航(1979-), 男 ,本科 , 从事中药新制剂的开发工作。
EfectiveIngredientsofSmilaxChinaL.forTreatingChronicPelvicIn-
flammation
HUANGSi-hang, ZHAOJie, ZHANGMing, HOULian-bing
(SouthernMedicalUniversity, Guangzhou510515)
Abstract:Objective ToscreenefectiveingredientsextractedfromSmilaxChinaL.andstudyitspharmacodynamic.Method  Fla-
vonesandsaponinswereseparatedfromSmilaxChinaL.bypolyamidechromatographyandmacroporousresin.Themodelratwithchro-
nicpelvicinflammationweretreatedwiththeseextractedsubstancesfor2 weeksig.Afterthat, wecolectedperipheralbloodtotest,
weigheduterusandevaluatedthedegreeofuterusinflammation.Result  Alofhemorheologyindexesanduterusinflammationwere
significantlyimprovedaftergivensaponins, whereasratweregivenflavones.Conclusion  Saponinsisoneoftheactiveprincipleof
SmilaxChinaL.ontherapychronicpelvicinflammation.
Keywords:SmilaxChinaL.;pharmacodynamics;chronicpelvicinfection;kaempferide;diosyenin
  菝葜 ,又名金刚藤 ,为百合科植物菝葜 Smilax
chinaL.的干燥根茎。临床上用于治疗各种炎症性
疾病 ,如妇科盆腔炎及炎症性包块 、前列腺炎 、类风
湿性关节炎等 ,均取得较好的疗效 [ 1 -2] 。因此 ,含菝
葜的各种剂型纷纷被开发并应用于临床 ,如金刚藤
糖浆 、金刚藤胶囊等等 。但由于有关菝葜的研究并
不深入 ,其起作用的有效部位尚不清楚 ,导致了作为
控制菝葜制剂的质量指标尚未统一 ,有以黄酮中的
山奈素为指标 ,也有以皂苷中的薯蓣皂苷元为指标 。
有鉴于
此 ,本文对菝葜的总皂苷和总黄酮分别进行了
分离提取和鉴定 ,并以大鼠慢性盆腔炎模型对上述
两类成分进行了动物药效学研究 ,以期阐明药物作
用的有效部位 ,并为菝葜制剂质控指标的进一步完
善提供参考 。
1 材料
SD大鼠 ,雌性 ,体重 180 ~ 220 g,南方医院实验
动物中心提供。 SYSMEXKX21三分类血常规仪
(希森美康), MVIS-2030全自动血液流变分析系
统。
菝葜生药(购自湖北省药材公司 ,经南方医院
中药库鉴定为百合科植物菝葜的根茎);D101大孔
树脂(天津农药股份有限公司树脂分公司 ,批号:
02/04/07);聚酰胺(柱层析);戊巴比妥钠(中国医
药上海化学试剂公司 批号:F20020405);乙醇 、盐
酸 、三氯化铁 、三氯化铝 、镁粉 、香兰素 、高氯酸均为
分析纯。
2 方法
2.1 菝葜总黄酮的制备
菝葜生药 500g以 1000 ml的 75%乙醇水浴回
流 2 h,收集醇提液 。经 3次醇提后 ,合并醇提液。
回收乙醇后上聚酰胺柱 ,流速约 5 BV(聚酰胺的体
积)h-1。以蒸馏水洗柱 ,并收集水洗液 。然后以
95%乙醇 ,流速约 2.5 BVh-1冲洗聚酰胺柱 ,收集洗
脱液 ,经旋转蒸发仪回收乙醇得到 500 ml总黄酮(1
ml相当于 1g原生药)。经盐酸 -镁粉反应检测 ,显橙
·51·现代食品与药品杂志 2006年第 16卷第 2期
红色;三氯化铁试验显墨绿色;在试纸上滴加三氯化
铝 ,斑点显持久的亮黄色 ,紫外灯下见蓝色荧光。
2.2 菝葜总皂苷的制备
依据舒孝顺等的方法 [ 3] ,将上述收集的水洗液
调酸碱度至 pH4 ~ 5,加氯化钠至 1.5 mol/L,上大
孔树脂柱 ,水洗至洗出液至中性 。以 75%乙醇 ,流
速约 2.5 BV(树脂床层体积)h-1冲洗 ,收集洗脱液 ,
经旋转蒸发仪回收乙醇得到 500 ml总皂苷(1 ml相
当于 1 g原生药)。取 1 ~ 2滴皂苷溶液 ,水浴蒸干 ,
0.5%香草醛冰醋酸溶液 0.2 ml,高氯酸 0.8 ml,水
浴加热 1 min。溶液颜色由黄变红紫。
2.3 菝葜提取液的制备
500g生药以 1000 ml的 75%乙醇提取 2 h,收
集醇提液。经 3次醇提后 ,合并醇提液。回收乙醇
得到 500 ml菝葜提取液(1ml相当于 1 g原生药)。
2.4 慢性盆腔炎模型的建立
参照陈颖异等的方法 [ 4] :以液化苯酚 5 ml,西
黄耆胶 1 g,甘油 4ml,加蒸馏水至 20 ml,配成 25%
的苯酚胶浆 。大鼠按 30 mg/kg腹腔注射麻醉 ,腹部
常规消毒 ,在下腹正中切口 3 cm,暴露子宫 ,用 4号
针头在大鼠子宫右侧进针 ,向卵巢方向注入苯酚胶
浆 0.05 ml,最后分层缝合腹壁及皮肤。
2.5 分组与给药
造模 7 d后将 40只模型大鼠按体重随机分为
生理盐水组 、菝葜提取液组 、皂苷组 、黄酮组 ,每组
10只。分别以生理盐水 、菝葜提取液(10 g(原生
药)/kg)、总皂苷(10 g(原生药)/kg)、总黄酮(10 g
(原生药)/kg)灌胃 ,每日 1次 ,时间在每天早上 8:
00 ~ 9:30,连续 14 d。正常对照组给予等量生理盐
水 ,其他条件与前面 4组一致 。第 15天 ,腹主静脉
取血 ,送南方医院检测全血黏度及血常规三分类 ,处
死大鼠取其子宫 ,除去脂肪 ,左右两侧子宫分别用分
析天平称重。
2.6 统计方法
所有数据用 x±s表示 ,全血黏度和血常规采用
单因素方差分析 ,两两比较用 q检验;评价大鼠子宫
炎症采用自身配对 t检验 。
3 结果
3.1 对实验大鼠全血黏度的影响
表 1 菝葜对大鼠全血黏度的影响( x±s)
组别 n 全血高切(200mpa/s)
全血中切
(100 mpa/s)
全血中切
(30 mpa/s)
全血低切
(3 mpa/s)
正常对照组 10 6.06±0.54** 6.80±0.62** 8.29±0.81** 12.13±1.33**
模型组 10 6.97±0.40■ 7.94±0.49■ 9.96±0.72■■ 15.40±1.49■■
菝葜提取液组 10 6.10±0.34** 6.84±0.42** 8.39±0.59** 12.36±1.14**
黄酮组 10 6.96±0.65■ 7.83±0.74■ 9.61±0.92■ 14.20±1.42
皂苷组 10 6.36±0.49* 7.16±0.56* 8.80±0.69** 13.08±1.08**
与模型组比较 **P<0.01, *P<0.05;与皂苷组比较 ■■ P<0.01, ■P<0.05
表 2 菝葜对大鼠血细胞的影响( x±s)
组别 白细胞总数 红细胞总数 红细胞比容 红细胞平均容积 平均血小板容积 大型血小板比值
正常对照组 7.29±2.35 6.28±0.38 0.36±0.018 58.12±2.01 7.02±0.42 6.36±2.26
模型组 7.94±2.88 7.37±1.06■ 0.40±0.055■ 54.66±1.79■ 6.58±0.26■ 4.86±1.36■
菝葜提取液组 6.93±2.44 6.74±0.54 0.37±0.024 55.59±2.61 6.51±0.16 4.39±0.83
黄酮组 4.97±1.62* 6.71±0.96 0.37±0.058 55.48±1.51 6.88±0.27 5.66±1.11
皂苷组 9.71±4.19 7.77±0.66 0.43±0.031 54.90±1.45 7.16±0.94* 5.39±1.61
与正常组比较 ■P<0.05;与模型组比较 *P<0.05
  从表 1可见 ,模型组与正常对照组比较全血高
切 、中切 、低切均有明显上升(P<0.01)。菝葜提取
液组和皂苷组的大鼠经治疗 ,与模型组比较 ,血瘀状
态得到明显改善 ,各项指标均有下降 ,并有统计学意
义;黄酮组的全血黏度指标与模型组比较 ,无明显改
善;而黄酮组与皂苷组之间除全血低切 ,其余 3项指
标的差异均有统计学意义(P<0.05),说明两者在
改善血瘀状态上有明显差异。
3.2 对实验大鼠血细胞的影响
从表 2可见 ,模型组在各项指标 (除白细胞总
数外),与正常对照组均有明显差异。其中红细胞
总数与红细胞比容有所上升 。红细胞平均容积 、平
均血小板容积以及大型血小板比值均下降。
3.3 对大鼠子宫炎症的影响
模型组与黄酮组的各实验大鼠 ,右侧子宫(致
炎)的重量明显大于左侧子宫(未致炎)的重量 ,经
配对 t检验处理 ,其差异有统计学意义(P<0.05);
其余各组差异并不明显 。
·52· 现代食品与药品杂志 2006年第 16卷第 2期
表 3 菝葜大鼠子宫炎症的影响( x±s)
组别 n 子宫重量(g) P
正常对照组 10 左侧子宫:0.3886±0.1031右侧子宫:0.3890±0.1010 0.862
模型组 10 左侧子宫:0.3892±0.0490右侧子宫:0.4283±0.0570 0.003
菝葜提取液组 10 左侧子宫:0.4494±0.1426右侧子宫:0.5105±0.1582 0.129
黄酮组 10 左侧子宫:0.3753±0.0801右侧子宫:0.4061±0.0960 0.010
皂苷组 10 左侧子宫:0.3914±0.0875右侧子宫:0.4167±0.1021 0.154
4 讨论
慢性盆腔炎多数是在急性期治疗的不及时或不
彻底而延续下来的 ,一旦形成 ,治疗起来相当棘手 。
而菝葜在治疗妇女慢性盆腔炎方面 ,经多年验证 ,疗
效确切 。因此 ,本文选择慢性盆腔炎模型作为筛选
菝葜有效部位的工具 。
目前 ,建立盆腔炎模型的方法一般分为两种:化
学性烧伤致炎和生物性因子致炎。化学性烧伤致炎
一般采用苯酚胶浆 ,生物性因子致炎一般采用大肠
杆菌。本实验选择化学性烧伤致炎的造模方法 。其
原因是:一 ,孙慧谨[ 5]等在其研究中曾报道:盆腔炎
患者无论急性还是慢性 ,其血液均处于高凝状态 。
我们从预实验结果来看 ,以苯酚胶浆致炎 ,大鼠在全
血黏度各项指标的改变均较大肠杆菌致炎的大鼠更
为明显 。二 ,治疗慢性盆腔炎目前一般采用中西医
结合或者物理化学结合的方法 。这是因为盆腔慢性
炎症导致组织增厚 ,疤痕黏连 ,阻碍了抗生素的进
入 ,不能彻底消灭残余的致病菌 ,令病情反复 ,难以
根治 [ 6] 。作为中药 ,菝葜的作用应该在于软化组织 ,
减轻黏连及包块 ,使抗生素能顺利进入病灶 ,消灭致
病菌 。因此 ,选择化学性烧伤致炎所致的大鼠盆腔
水肿 、黏连更适合用于筛选菝葜的有效部位 。
菝葜中主要含甾体皂苷元及其苷和黄酮类等成
分[ 7] 。本实验从菝葜中提取分离了总黄酮和总皂
苷。从实验结果来看 ,总皂苷对降低血液高凝状态 ,
降低子宫炎症程度均有明显的作用。而总黄酮在抗
炎和影响大鼠血液流变学方面 ,作用效果均不明显。
因此认为:皂苷是菝葜治疗慢性盆腔炎的有效部位
之一 。这一结果将为菝葜制剂的开发利用 ,以及质
量标准的建立提供实验依据 。
参考文献:
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志 , 2000, 20(9):544-545.
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-33.
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流变学影响的实验研究 [ J] .中国中医药科技 , 2003, 10
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[ 5]孙慧谨 ,江 芹 , 吴德霞.盆腔炎患者血液流变学变化的
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[ 6] 陈秀娟 ,郑丽君.金刚藤糖浆佐治 60例慢性盆腔炎报告
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Smilaxofficinalis[ J] .phytochemistry, 1996, 43(2):465.
(收稿:2005-12-27;修回:2006-03-03)
异烟肼与吡嗪酰胺联合抗结核治疗对肝功能的影响
张 玲 ,周 英 ,李凌华 ,郭凤霞 (广州市第八人民医院 ,广州 510060)
摘 要:目的 了解异烟肼与吡嗪酰胺联合抗结核治疗对肝功能的影响。方法 将 81例因结核病化学治疗导致的药物性肝
炎分为异烟肼(H)、利福平(R)、吡嗪酰胺(Z)联合化疗组与 HR化疗组 , 分析比较两组的临床特点。结果 HRZ联合化疗组
暴发型肝炎的发生率为 31%(16/51),死亡率为 22%(11/51);HR化疗组暴发型肝炎的发生率及死亡率较低 , 分别为 20%(6/
30)、17%(5/30),但两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。肝功能指标比较 , HRZ联合化疗组肝功能损害程度明显大于
HR化疗组:血清白蛋白(ALB)及凝血酶原活动度(PTA)两组比较差异有显著性(P<0.05)。结论 异烟肼与吡嗪酰胺均有
明显的肝脏毒性 , 联合用药可增加肝功能损害 , 一旦引起暴发型肝炎病死率极高 ,值得临床重视。
关键词:抗结核药;肝炎
中图分类号:R969.4 文献标识码:A 文章编号:1673-4610(2006)02-0053-03
作者简介:张 玲(1955-), 女 ,本科 , 副主任药师 ,从事病毒性肝炎相关疾病研究工作 。
·53·现代食品与药品杂志 2006年第 16卷第 2期