全 文 ：铁线莲组培快繁技术研究
李丽容，金开正 (杭州万向职业技术学院，浙江杭州 310023)
摘要 ［目的］研究不同激素浓度对铁线莲诱导、增殖和生根的影响，建立铁线莲组培快繁技术。［方法］以铁线莲茎段为外植体，在 MS
培养基中加入不同浓度的 6 － BA、NAA和 IBA，研究不同激素浓度对其腋芽诱导分化、诱导芽增殖和继代苗生根的影响。［结果］铁线莲
腋芽诱导效果以 MS +6 － BA 1． 0 mg /L + NAA 0． 2 mg /L为最佳;增殖培养以 MS +6 － BA 1． 5 mg /L + NAA 0． 50 mg /L为最佳;继代苗生
根培养以 MS +6 － BA 1． 5 mg /L + IBA 2． 0 mg /L最佳。［结论］建立了铁线莲组培快繁技术体系，为其规模化生产提供理论依据。
关键词 铁线莲;组织培养;诱导;增殖;生根
中图分类号 S604． 3 + 3 文献标识码 A 文章编号 0517 －6611(2016)15 －138 －02
Study on the Tissue Culture Ｒapid Propagation Technique of Clematis florida
LI Li-rong，JIN Kai-zheng (Hangzhou Wangxiang Polytechnic，Hangzhou，Zhejiang 310023)
Abstract ［Objective］The aim was to study effects of different hormone concentration on induction，proliferation and rooting of Clematis flori-
da，to establish tissue culture rapid propagation technique of Clematis florida． ［Method］With Clematis florida stem segments as explants，adding
different concentrations of 6-BA，NAA，IBA growth hormone in MS culture medium，effects of different hormone concentration on induction dif-
ferentiation，bud proliferation，and rooting culture of successive seedling were studied． ［Ｒesult］Clematis florida axillary bud induction effects in
MS + 6-BA 1． 0mg 0． 2 mg /L way was the best;proliferation cultured in MS + 6-BA 1． 5 mg /L + NAA 0． 5 mg / L treatment was the best;suc-
cessive generation of rooting culture in process S3:MS +6-BA 1． 5 mg /L + IBA 2． 0 mg /L was the best． ［Conclusion］The tissue culture rapid
propagation technique system of Clematis florida is established，which can provide theoretical basis for large-scale production．
Key words Clematis florida;Tissue culture;Induction;Proliferation;Ｒooting
作者简介 李丽容(1983 － ) ，女，浙江温州人，实验师，从事植物遗传育
种和植物配置方面的研究。
收稿日期 2016-04-16
铁线莲(Clematis florida Thunb．) ，别名铁线牡丹，为毛茛
科铁线莲属植物，多数为落叶或常绿草质藤本，享有“藤本花
卉皇后”之美称，花期 4 ～9月，是一种近 2年国内新兴花卉，
因其花色繁多、千姿百态、繁花似锦而深受人们喜爱，成为庭
院、阳台装饰中造型造景不可缺乏的新元素［1］。目前，铁线
莲常见的繁殖方式有播种、压条、嫁接、分株或扦插，但由于
播种、压条、扦插等繁殖成活率低且繁殖系数小，难以实现工
厂化生产。随着科学技术水平的提高，植物组培繁殖是较理
想的繁殖方式，因材料来自单一的个体，遗传性状一致且繁
殖系数大，能够迅速满足市场需求。笔者研究了不同激素浓
度对铁线莲腋芽诱导、增殖、生根培养等的影响，以期为铁线
莲的大规模生产提供理论依据。
1 材料与方法
1． 1 试验材料及处理 外植体选择铁线莲茎段(半木质
化)［2］。将采集后的铁线莲茎段，剪去多余的叶片，剩余的茎
段具有隐芽，放入玻璃器皿中，用少量洗衣粉冲洗 20 min后，
用流水冲洗 1 ～2 h［3］，置于超净工作台上备用。
1． 2 培养基 试验培养基是在 MS培养基中加入不同浓度
的 6 － BA、NAA、IBA及蔗糖 30 g /L、琼脂粉 6． 8 g /L，pH 5． 8，
灭菌后备用［4］。
1． 3 试验方法
1． 3． 1 腋芽诱导培养。培养基设 Y1:MS +6 － BA 1． 0 mg /L
+ NAA 0． 1 mg /L，Y2:MS + 6 － BA 1． 0 mg /L + NAA 0． 2
mg /L，Y3:MS +6 － BA 1． 0 mg /L + NAA 0． 5 mg /L，Y4:MS +
6 － BA 1． 5 mg /L + NAA 0． 1 mg /L，Y5:MS +6 － BA 1． 5 mg /L
+ NAA 0． 2 mg /L，Y6:MS + 6 － BA 1． 5 mg /L + NAA
0． 5 mg /L，Y7:MS + 6 － BA 2． 0 mg /L + NAA 0． 1 mg /L，Y8:
MS + 6 － BA 2． 0 mg /L + NAA 0． 2 mg /L，Y9:MS + 6 － BA
2． 0 mg /L + NAA 0． 5 mg /L，共 9 种处理，每种处理接种外植
体 30个，定期观察腋芽的诱导情况。
诱导率 =诱导数 /接种数 ×100%
1． 3． 2 增殖培养。培养基设 Z1:MS +6 －BA 1． 5 mg /L +NAA
0． 1 mg /L，Z2:MS +6 －BA 1． 5 mg /L +NAA 0． 2 mg /L，Z3:MS +
6 －BA 1． 5 mg /L +NAA 0． 5 mg /L，Z4:MS +6 －BA 2． 0 mg /L +
NAA 0． 1 mg /L，Z5:MS +6 －BA 2． 0 mg /L +NAA 0． 2 mg /L，Z6:
MS +6 －BA 2． 0 mg /L +NAA 0． 5 mg /L，共 6种处理，每种处理
接种诱导芽 30个，定期观察腋芽的增殖情况。
1． 3． 3 生根培养。将在继代培养中的铁线莲壮苗分别接种
至附加不同浓度 6 － BA、NAA 的 MS 培养基上进行生根培
养，30 d后观察增殖情况。
生根培养培养基设 S1:MS + 6 － BA 1． 5 mg /L + IBA
0． 5 mg /L，S2:MS +6 － BA 1． 5 mg /L + IBA 1． 0 mg /L，S3:MS
+ 6 － BA 1． 5 mg /L + IBA 2． 0 mg /L，共3种处理，每种处理接
种壮苗 30株，定期观察壮苗的生根情况。
1． 4 培养条件 光照时间 12 h /d，温度(25 ± 2)℃，相对湿
度 60% ，光照强度 1 000 lx。
2 结果与分析
2． 1 不同激素浓度对腋芽诱导的影响 将铁线莲外植体用
75%乙醇 30 s +0． 1%氯化汞 8 min +吐温 2 滴消毒后［5］，分
别接种至腋芽诱导的 9 种培养基中，接种 14 d后，观察其腋
芽诱导情况［6］，结果见表 1。由表 1 可知，处理 Y2、Y3、Y4、
Y5对铁线莲的诱导分化有较强的促进作用;处理 Y1、Y6、Y9
对铁线莲的诱导分化作用较弱;而处理 Y7和 Y8对铁线莲的
诱导分化表现出一定的抑制作用。方差分析结果表明，处理
Y2对铁线莲腋芽的诱导分化较其他 8个处理有极显著的促
进作用;处理 Y3、Y4 对铁线莲腋芽的诱导分化较处理 Y5、
责任编辑 李占东 责任校对 李岩安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2016，44(15):138 － 139
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2016.15.048
Y1、Y6、Y7、Y8、Y9 具有极显著的促进作用;Y5、Y1、Y6、Y7、
Y8、Y9处理对铁线莲腋芽的诱导分化有一定差异，但未达显
著水平。
表 1 不同激素浓度对腋芽诱导的影响
Table 1 Effects of different hormone concentration on induction of
Clematis florida axillary buds
处理
Treatment
接种数
Inoculation
quantity
诱导腋芽数
Induction
axillary buds
诱导率
Induction
rate∥%
Y1 30 33． 0cdC 110． 0
Y2 30 51． 7aA 172． 2
Y3 30 45． 7bB 152． 2
Y4 30 42． 0bB 140． 0
Y5 30 34． 0cC 113． 3
Y6 30 33． 0cdC 110． 0
Y7 30 29． 3dC 97． 8
Y8 30 29． 70dC 98． 9
Y9 30 31． 0cdC 103． 3
注:同列不同小写字母表示处理间差异显著(P ＜ 0． 05) ，不同大写字
母表示处理间差异极显著(P ＜0． 01)。
Note:Different lowercases in the same column stand for significant differ-
ence(P ＜0． 05) ，different capital letters stand for extremely signifi-
cant difference among treatments(P ＜0． 01)．
2． 2 不同激素浓度对增殖培养的影响 将在诱导培养基中
诱导出的不定芽分别接种至不同浓度 6 － BA、NAA的 MS培
养基上进行增殖培养，30 d后观察增殖情况［7］，结果见表 2。
由表2可知，处理 Z2和 Z3对铁线莲不定芽的增殖有较强的
促进作用;其他处理 Z1、Z4、Z5、Z6对铁线莲不定芽的增殖有
较强的抑制作用。方差分析结果表明，处理 Z2和 Z3较其他
4个处理对铁线莲不定芽的增殖有极显著的促进作用;处理
Z4与 Z1、Z5差异未达极显著水平，但与处理 Z6 差异达极显
著水平;处理 Z1、Z5、Z6 对铁线莲不定芽增殖的影响差异不
显著。
表 2 不同激素浓度对增殖培养的影响
Table 2 Effects of different hormone concentration on proliferation
culture
处理
Treatment
接种数
Inoculation
quantity
增殖个数
Proliferation number
增殖率
Proliferation rate∥%
Z1 30 24． 0bcBC 80． 0
Z2 30 38． 3aA 127． 8
Z3 30 40． 3aA 134． 4
Z4 30 27． 0bB 90． 0
Z5 30 23． 3cBC 77． 8
Z6 30 22． 0cC 73． 3
注:同列不同小写字母表示处理间差异显著(P ＜ 0． 05) ，不同大写字
母表示处理间差异极显著(P ＜0． 01)。
Note:Different lowercases in the same column stand for significant differ-
ence(P ＜0． 05) ，different capital letters stand for extremely signifi-
cant difference among treatments(P ＜0． 01)．
2． 3 不同激素浓度对生根培养的影响 将在继代培养中的
壮苗分别接种至附加不同浓度 6 － BA、IBA 的 MS培养基上
进行生根培养，30 d后观察增殖情况，结果见表 3。由表 3可
知，处理 S3和 S2对铁线莲的生根有较强的促作用，处理 S3、
S2的生根率分别达 83． 3%和 70． 0%。方差分析结果表明，
处理 S3与 S1差异极显著，与 S2差异显著。
2． 4 驯化移栽 将培养室的铁线莲试管苗转移至半遮阴的
自然光下进行锻炼，铁线莲试管苗在自然光下恢复植物体内
叶绿体的光合作用，并打开培养瓶的瓶盖注入少量的水使幼
苗逐渐降低温度，慢慢转向有菌，这样幼苗周围的环境逐步
与自然环境相似。
表 3 不同激素浓度对生根培养的影响
Table 3 Effects of different hormone concentration on rooting culture
处理
Treatment
接种数
Inoculation
quantity
生根数
Ｒooting number
生根率
Ｒooting rate∥%
S1 30 17． 3 57． 8
S2 30 21． 0 70． 0
S3 30 25． 0 83． 3
在移栽过程中应着重考虑栽培基质，是铁线莲组培苗能
否存活、正常生长的关键。适宜的基质应是保水性和透气性
均较好，使用树皮、泥炭土与珍珠岩混合基质，以 1∶ 2∶ 1最为
适宜［8］。
3 结论
3． 1 不同激素浓度对铁线莲芽诱导分化的影响 该试验结
果表明，在 MS培养基中加入不大于 1． 5 mg /L 6 － BA 和不
大于 0． 5 mg /L NAA处理组合对铁线莲的芽诱导具有较强的
促进作用，其中，以 MS + 6 － BA 1． 0 mg /L + NAA 0． 2 mg /L
(Y2)的诱导效果最佳，其次为 MS + 6 － BA 1． 0 mg /L + NAA
0． 5 mg /L(Y3) ;而 2． 0 mg /L 6 － BA处理对铁线莲的诱导分
化表现出一定的抑制作用。
3． 2 不同激素浓度对铁线莲不定芽增殖生长的影响 该试
验结果表明，对铁线莲不定芽增殖有较强促进作用的处理方
式以 MS +6 － BA 1． 5 mg /L + NAA 0． 5 mg /L(Z3)为最佳，其
次为 MS + 6 － BA 1． 5 mg /L + NAA 0． 2 mg /L(Z2)。而 Z1、
Z4、Z5、Z6处理对铁线莲不定芽的增殖有较强的抑制作用。
3． 3 不同激素浓度对铁线莲继代苗生根的影响 该试验结
果表明，MS +6 － BA 1． 5 mg /L + IBA 2． 0 mg /L(S3)对铁线莲
继代苗生根的促进作用最佳，其次为 MS + 6 － BA 1． 5 mg /L
+ IBA 1． 0 mg /L(S2)。
参考文献
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93144 卷 15 期 李丽容等 铁线莲组培快繁技术研究