全 文 :报契有效部位对
爹寺发性血刀】飞板减少性集癣
动物模型的亥验研究
介巍曙蒸粉 编痴 豁、 终鄂粼绷黝户彝肇采警罐 巍瓤漏耀黝缪哪髻轰篡纂蒸缈黔瓣瞬翼磷黔耀蓦
华中科技大学同济医学院附属协和 医院 华小黎 陈东生
目的 研究菠葵有效部位对特发性血小板减少性紫瘫 (IT P) 的治疗作用 。 方法 采
用免疫法建立 IT 尸模型 , 设模型对照组 、 拔莫有效部位低剂量组 、 高剂量组 、 泼
尼松组 。 观察拨葵有效部位对 lT 尸 小鼠血小板数 、 胸腺与脾脏以及巨核细胞等的
影响 。 结果 孩葵有效部位组小鼠与模型组比较 , 血小板数明显增多 , 骨髓细胞
成熟障碍减轻 , 巨核细胞数恢复正常 , 产板巨核细胞显著增多 , 脾脏指数降低 。
结论 援葵有效部位对 IT PI }、鼠有一定的治疗作用 , 尤其以升高血小板数的作用最为
明显 。
菠葵 ; 有效部位 ;
熟岁 瘫兹渗犷蒸撰蛋豁
特发性血小板减少性紫瘫
缭 兹熟粼 鳃 漆 喂 梦妙瓣瓤 蒸众潺枷粉 资尹链释}戮罐豁准粼料爵畜燕攀黔事螂鑫黔万纂瓢黔耀舞黝瓤彝榔
毅 葵系百合科拨葵属植物 , 其根茎具有抗菌消炎 、 抗肿瘤等功效 。文献报道用于祛风湿 、 利小便 、 消肿毒 、 治关节痛 、 水肿 、 疗疮等1[J , 其制剂用于妇科附件炎治疗取得较好疗效 。 本课题组曾对菠葵三种
不同提取物包括水煎液 、 正丁醇萃取液及正丁醇萃取剩余物的药理作用进行
了深入的对比研究 , 发现除正丁醇萃取剩余物之外 , 其余两组均有抗炎 、 活
血化癖 、 免疫调节及类雌激素等作用 12 一 4] , 实验结果显示正丁醇萃取物组活性
显著 , 且主要成分为粗总皂昔 。 在此基础上 , 作者对提取方法作进一步改
进和工艺放大 , 以乙醇提取药材 , 所得浸膏加蒸馏水溶解滤去残渣后 , 再
{中图分类号 I R 2 8 5 . 5
l文献标识码 } A
l文章编号 1 2 () 7 2一 9 2 8 8 ( 2 ( ) 0 6 ) ( )2
12 3一 〔)3
巨
加入乙醚和正丁醇依次萃取 , 通过旋
转蒸发和真空干燥 , 得到拨莫的有效
部位 。 有关拨葵有效部位治疗特发性
血小板减少性紫瘫 ( IT )P作用的进一步研
究 , 报道如 下 。
材料与方法
) 动物
B A L B /C z」、 鼠 , 雌雄各半 , 体重 (2 2 士 2 )g , 由华
中科技大学同济医学院实验动物中心提供 。
第一次腹腔注射 A尸5 2 41 1、时后分别以生理盐水 、 或拔葵
有效部位高剂量或低剂量 、 或泼尼松灌胃 。 一日 1 次 ,
连续给药 10 天 。 第 1 天麻醉后摘眼球取血 , 摘取并分
离胸腺及脾脏 , 称重 , 计算脏器指数 。 取血测血常规 ,
取胸骨做骨髓涂片 W igr ht’ s 染色镜检 , 油镜下计数巨核
细胞并分类 。
) 药品及仪器
药材拨葵采自湖北省大悟县 (武汉协和医院中药鉴定室
鉴定 ); 抗血小板抗血清 (A P S , 上海赛伦生物技术有限
公司 ) ; 泼尼松 (西北第二合成制药厂 ) ; 全自动血细胞计
数仪 ; L0 4 一 Z A 型离心机 (北京医用离心机厂 )。
) 统计方法
所有实验参数以S P S sl , . 5软件包进行统计学处理 ,
数据以 x 士 s 表示 , 各组之间比较采用两样本均数间的 t
检验统计方法 。
}) 动物分组及剂量
取 B A LB/ C 小鼠 4 0 只 , 随机分为 4 组 : 模型对照
组 , 孩葵有效部位低剂量和高剂量各一组 , 泼尼松组 。
拨葵有效部位以蒸馏水调制 , 日剂量 0 . 4 79 /k g定为低剂
量组 、 0 . 9 4 g/ k g 为高剂量组 , 泼尼松日剂量为 0 . 4 9k/ g 。
模型对照组给予等量生理盐水 。
结果
) 获莫有效部位对 lT 尸小鼠血小板数的影响
取试验小鼠血样 , 用血细胞计数仪测定其血小板
数 , 结果见表 , 。 援葵有效部位高剂量 、 低剂量组小鼠
血小板明显增多 , 与模型组相比有显著性差异 (P< 0 . 01 )。
) 模型制备及检测指标
BA LB/ C 小鼠分别腹腔注射 A尸(S 1 : 6 稀释 )。 每次
1 0 0 件L , 隔日 1 次 , 连续 g 天 , 制备 IT 尸模型 。 并从
) 菠莫有效部位对 lT 尸小鼠胸腺与脾脏的作用
模型组小鼠脾脏显著增大 ,脾脏指数 (m g勺)增高而给
药组小鼠脾脏均减小 (P< 0 . 0 5 ) , 与模型组相比均有差异
图
(尸 < 0.5 0)。 月匈腺指数 , 各组间无显著
性差异 (尸> 0 . 0 5 ) , 见表 2 。
) 菠莫有效部位对 IT p 小鼠骨髓
巨核细胞的影响
被葵有效部位高剂量和低剂量组
lT 户小鼠给药后 , 骨髓巨核细胞数恢复
* : 尸 < 0 . 0 5 , 与模型组比较
正常 , 尤其是产板巨核细胞数显著增多 , 与模型组相比
有差异 (P< O . O )I , 见表 3 。
讨论
结合 , 可激活补体 , 补体固定于血小板上 , 导致血小板
的血管外破坏 。 由以上实验结果可初步推测菠莫有效部
位升高血小板数的机制可能与减少血小板被吞噬破坏 ,
对抗 A尸S 的作用 , 促进抗体清除等有关 , 具体作用机
制有待进一步研究探讨 。
) 特发性血小板减少性紫瘫 ( IT )P
IT p是临床上常见的出血性疾病之一 。 由于体内存在
抗血小板自身抗体 , 通过网状内皮系统对血小板的破
坏 , 造成血小板减少 , 因此又称免疫性血小板减少性紫
瘫 。 其主要表现为皮肤钻膜紫瘫 , 血小板计数低下 , 骨
髓巨核细胞增多或正常 , 伴有成熟障碍 。 从本实验结果
可以看出 , 被葵有效部位对 IT p小鼠有明显的治疗作用 ,
表现为血小板明显增多 , 骨髓细胞成熟障碍减轻 , 巨核
细胞数恢复正常 , 产板巨核细胞显著增多 , 脾脏指数降
低 。 其中尤其以升高血小板的作用最为明显 。
) !下尸血小板破坏主要途径
①由脾脏等器官产生的抗血小板抗体 (尸AI g G , 尸lA gA,
p IA g M )的 Fa匕片段与血小板膜上的相应抗原特异性结合 ,
抗体分子 F c片段暴露并与巨噬细胞的 F c 受体结合导致血
小板在脾脏被网状内皮细胞吞噬破坏 。 ②血小板结合的
抗体量多时可形成 lg G 双体 , 或结合的是 gj M 抗体 , 则
可激活补体 C l q , 随之补体系统中各成分相继激活 , 被
覆抗体的血小板在补体参与下可通过经典途径引起血小板
在血管内破坏或经过非经典途径使血小板在血管外破坏 。
③通过免疫复合物抗体分子上 cF 片段与血小板上 cF 受体
) IT P 属中医血证之范畴
中医认为本病为本虚标实证 。 虚为气 、 阴 、 血 ;
实为气 、 火 、 癖 , 只是在疾病的不同阶段 , 表现的侧
重点不同。 故既要降火降逆以宁血止血 , 又要活血补
虚 , 以消痕补血6[] 。 本实验中拨莫有效部位对 IT 户小鼠
血小板数有提升作用 , 对 IT 尸有明显疗效 。 同时中药治
疗 IT p 具有不良反应小 、 可长期应用等优点 。 但中药治
疗本病的机制及相关的实验报道较少 。 故对援莫的进一
步开发研究具有实际意义 。舜 ,
参考文献
1
. 江苏新医学院编 . 中药大辞典 (下册 ) . 上海 : 上海科技出版社 , 19 97 . 13 90 一13 91
2
. 陈东生 吕永宁 王 杰 . 接卖的抗炎作用 . 中国医院药学杂志 , 20 。。 , 2。 (:9) 5 4 -
54 6
3
. 吕永宁 , 陈东生 , 付 磊 , 等 . 菠羹三种提取物活血化淤药理作用研究 中国药科大
学学报 , 2 00 1 32 ( 6): 4 4 8一 45 0
4
. 吕永宁 , 陈东生 , 邓俊刚 , 等 拔葵对小鼠佐剂性关节炎作用的研究 . 中药材 , 2 00 3 ,
26 (5 ): 3 34 一 3 36
5
. 杨宇飞 , 周霭祥 , 麻 柔 . 免疫性血小板减少性紫瘤动物模型的建立 , 中华血液学
杂志 , 19 9 4 , 1 5 (3 ): 160 一 16 2
6
. 胡晓梅 , 邓成珊 . 治疗特发性血小板减少性紫瘫的经验 . 山西 中医 , 2。。 0, 16 (3 :)
6一 8
l习交稿 日期 : 2( )( 5一 1 2一 1 6 }
巨