全 文 ：＊重瓣铁线莲组织培养研究
周　琼 , 张丽琼 , 屈国胜 , 廖咸康
(安康学院 , 陕西 安康　725000)
提　要:利用重瓣铁线莲的茎段作为外植体研究重瓣铁线莲愈伤组织的诱导 ,结果表明:在本试验条件下 , 诱
导出的愈伤组织为致密型愈伤组织 ,故在增殖培养中需提高植物生长物质的浓度;在 MS+BA1.0 mg/ l+2 ,
4-D0.8mg/ l+IAA0.2 mg/ l培养基上诱导重瓣铁线莲的愈伤组织速度较快 , 诱导率高达 90%;在重瓣铁线
莲愈伤组织的诱导中 ,植物生长物质 BA 、2 , 4-D、IAA 适宜的比例为 5:4:1。
关键词:重瓣铁线莲;茎段;愈伤组织;诱导;分化
　　重瓣铁线莲属于毛茛科植物 , 因其适应性
强 ,抗旱耐寒 ,花期长 ,成为现代园林中进行垂直
绿化的优良植材 ,国外园林中应用甚多 ,在园林中
多用于花篱 、花架 、拱门 、绿廊等园林小品装饰。
盆栽可布置阳台 、窗台和室内盆架 ,或者悬挂栽
培。由于重瓣铁线莲雄蕊全部成花瓣状[ 1] ,无法
按照常规的方式产生种子用于播种 ,只能用压条 、
扦插等无性繁殖方式来繁殖种苗 ,但是其繁殖系
数低 。试验以重瓣铁线莲茎段为材料 ,研究了不
同浓度6-BA和 2 ,4-D配合使用时对重瓣铁线
莲愈伤组织诱导的效应 ,为现代生物技术开发利
用这一植物提供参考 。
表 1　不同处理的培养基
处理 培养基(mg/ l)
1 MS+BA 0.5 mg/ l+2 , 4-D 0.1 mg/ l+IAA0.2 mg/ l
2 MS+BA 0.5 mg/ l+2 , 4-D 0.2 mg/ l+IAA0.2 mg/ l
3 MS+BA 0.5 mg/ l+2 , 4-D 0.4 mg/ l+IAA0.2 mg/ l
4 MS+BA 0.5 mg/ l+2 , 4-D 0.6 mg/ l+IAA0.2 mg/ l
5 MS+BA 0.5 mg/ l+2 , 4-D 0.8 mg/ l+IAA0.2 mg/ l
6 MS+BA 0.5 mg/ l+2 , 4-D 1.0 mg/ l+IAA0.2 mg/ l
7 MS+BA 1.0 mg/ l+2 , 4-D 0.1 mg/ l+IAA0.2 mg/ l
8 MS+BA 1.0 mg/ l+2 , 4-D 0.2 mg/ l+IAA0.2 mg/ l
9 MS+BA 1.0 mg/ l+2 , 4-D 0.4 mg/ l+IAA0.2 mg/ l
10 MS+BA 1.0 mg/ l+2 , 4-D 0.6 mg/ l+IAA0.2 mg/ l
11 MS+BA 1.0 mg/ l+2 , 4-D 0.8 mg/ l+IAA0.2 mg/ l
12 MS+BA 1.0 mg/ l+2 , 4-D 1.0 mg/ l+IAA0.2 mg/ l
13 MS+BA 1.5 mg/ l+2 , 4-D 0.1 mg/ l+IAA0.2 mg/ l
14 MS+BA 1.5 mg/ l+2 , 4-D 0.2 mg/ l+IAA0.2 mg/ l
15 MS+BA 1.5 mg/ l+2 , 4-D 0.4 mg/ l+IAA0.2 mg/ l
16 MS+BA 1.5 mg/ l+2 , 4-D 0.6 mg/ l+IAA0.2 mg/ l
17 MS+BA 1.5 mg/ l+2 , 4-D 0.8 mg/ l+IAA0.2 mg/ l
18 MS+BA 1.5 mg/ l+2 , 4-D 1.0 mg/ l+IAA0.2 mg/ l
19 MS+BA 2.0 mg/ l+2 , 4-D 0.1 mg/ l+IAA0.2 mg/ l
20 MS+BA 2.0 mg/ l+2 , 4-D 0.2 mg/ l+IAA0.2 mg/ l
21 MS+BA 2.0 mg/ l+2 , 4-D 0.4 mg/ l+IAA0.2 mg/ l
22 MS+BA 2.0 mg/ l+2 , 4-D 0.6 mg/ l+IAA0.2 mg/ l
23 MS+BA 2.0 mg/ l+2 , 4-D 0.8 mg/ l+IAA0.2 mg/ l
24 MS+BA 2.0 mg/ l+2 , 4-D 1.0 mg/ l+IAA0.2 mg/ l
·92· 陕　西　农　业　科　学 2008(5)
＊收稿日期:2008-07-07
　基金项目:安康学院科研启动专项经费项目(项目编号 A YQDZ R200631)。
　作者简介:周琼 ,女 ,主要从事食品生物技术研究。
1　材料和方法
1.1　试验材料
安康市本地品种绿花重瓣铁线莲的幼茎 。
1.2　试验方法
将材料用自来水冲洗 20 m in后 ,在无菌操作
台上用 70%酒精浸处理 5 s ,再用 0.1%的升汞消
毒 8 min ,无菌水冲洗 3-4次 ,将茎切成 1 cm 左
右小段接种于培养基上培养[ 2-3] 。
1.3　培养基及培养条件
1.3.1　培养基　以 MS 培养基作为基本培养
基 ,蔗糖浓度为 0.3%,琼脂 0.7%, pH 5.8。在
此基础上分别添加不同水平的 6-BA(0.5 、1.0 、
1.5 、2.0mg/ l)、2 ,4-D(0.1 、0.2 、0.4 、0.6 、0.8 、
1.0 mg/ l)、IAA(0.2 mg/ l)共计 24个处理 ,各处
理配方见表 1。
1.3.2 　培养条件 　温度为 25 ℃, 光照强度
1 500-2 000 lx ,光照 12 h/d ,湿度 60%。
2　结果与分析
2.1　试验结果
培养 7 d后茎段开始膨大 , 10 d后在茎段切
口部位形成较致密的颗粒状愈伤组织 ,呈淡黄色。
培养 30 d后除处理 5 、处理 9 、处理 11 、处理 14 、
处理 19的愈伤组织诱导率较高外(见表 2),其余
各处理的愈伤组织诱导率均较低。
表 2　不同处理对愈伤组织的诱导
处理 接种茎段(个)
诱导愈伤数
(个)
诱导率
(%)
5 20 10 50.0
9 20 13 65.0
11 20 18 90.0
14 20 14 70.0
19 20 11 55.0
2.2　结果分析
各处理诱导出的愈伤组织均为致密型的愈伤
组织 ,而致密型的愈伤组织内部由管状细胞组成
维管组织 ,细胞间有果胶质紧密地粘连 ,细胞为高
度液泡化的细胞 ,很少进行分裂分化 ,故需要加入
高浓度的植物生长物质使其转变为松脆型的愈伤
组织 ,才有利于进一步分化诱导形成完整的植株。
这说明试验所设计的各处理激素浓度偏低 ,故在
增殖培养中需进一步提高植物生长物质的浓度。
从各处理愈伤组织的诱导率来看 ,在愈伤组
织诱导率较高的 5个处理中 ,处理 11的诱导效果
最好 ,不仅形成的愈伤组织量多 ,而且诱导率高达
90%,其次是处理 14 ,达到 70%,其余各处理的诱
导率依次为处理 9>处理 19>处理 5。这说明在
各处理中 ,培养基 MS +BA 1.0 mg/ l+2 , 4-D
0.8 mg/ l +IAA0.2 mg/ l 最利于重瓣铁线莲茎
段愈伤组织的诱导。
在植物的组织培养中 ,细胞分裂素与生长素
的比例影响着外植体的器官分化及愈伤组织的形
成 ,比例过高 ,促进长芽 ,过低则促进生根 ,只有比
例适中时才能诱导愈伤组织的形成 。
3　小结
由结果分析可知 ,重瓣铁线莲茎段愈伤组织
的诱导适宜的培养基为 MS+BA 1.0 mg/ l+2 ,
4-D 0.8 mg/ l +IAA0.2 mg/ l ,但其诱导出的愈
伤组织为致密型愈伤组织 ,在增殖培养中需提高
植物生长物质的浓度 。
当植物生长物质 BA 、2 , 4-D 、IAA 配合使
用 ,诱导重瓣铁线莲茎段愈伤组织时 ,适宜的比例
为 BA∶2 ,4-D∶IAA=5∶4∶1。
参 考 文 献:
[ 1] 中国科学院植物志编辑委员会编.中国植物志.(第二
十八卷)[ M] .北京:科学出版社 , 1980.
[ 2] 刘庆昌 , 吴国良 主编.植物细胞组织培养[ M] .北京:
中国农业大学出版社 , 2002.
[ 3] 谭文澄 , 戴测刚.观赏植物组织培养技术[ M] .北京:
中国林业出版社.1991.
(上接第 83页)
者之间含量在水平方向上存在显著的相关性 ,说
明三种重金属之间随水平方向的延伸 ,其相互之
间存在相互的促进或制约的关系。
参 考 文 献:
[ 1] 陈怀满.土壤植物系统中的重金属污染[ J] .北京:科
学出版社 , 1996.
[ 2] 马旭英.吴云海.杨凤.土壤重金属污染的探讨[ J] .环
境科学与管理 , 2006 , 31(5):52-54.
[ 3] CH ENHM , ZHENGCR , TUC , etal.H eavy metal po l-
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[ J].Ambio , 1999 , 28(2):130-134.
[ 4] KUMARPBAN , DUSH EAKOWV ,M OTTOH.Pho to
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·93·周　琼等:重瓣铁线莲组织培养研究