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黄花铁线莲乙酸乙酯组分的抗炎作用研究



全 文 :黄花铁线莲乙酸乙酯组分的抗炎作用研究
杨晓军1,高 芬2,涂院海2,宋延平3
(1.延安大学化学与化工学院,陕西延安 716000;2.延安大学附属医院,陕西延安 716000;3.陕西中医学院药物研究所,陕西咸阳 712064)
摘要 [目的]研究黄花铁线莲乙酸乙酯组分的抗炎作用。[方法]将试验动物随机分为 4 组,每组 10只,分别为模型对照组、复方七叶
皂苷钠凝胶组和黄花铁线莲高、低剂量组( 0. 08和 0. 04 g /kg),连续外涂给药 7 d,采用二甲苯诱发小鼠耳肿胀法和交叉菜胶诱发大鼠足
跖肿胀观察抗炎作用。[结果]黄花铁线莲乙酸乙酯组分可以明显抑制二甲苯诱发小鼠耳肿胀和交叉菜胶诱发大鼠足跖肿胀。[结论]
黄花铁线莲乙酸乙酯组分具有良好的抗炎活性。
关键词 黄花铁线莲;抗炎作用
中图分类号 S567; R285. 5 文献标识码 A 文章编号 0517 -6611( 2012) 29 -14231 -01
Study on Anti-inflammatory Effect of Ethylacetate Extract from Clematis intricata Bunge
YANG Xiao-jun et al ( College of Chemistry and Chemical Engineering,Yanan University,Yan’an,Shaanxi 716000)
Abstract [Objective]To study the anti-inflammatory effect of ethylacetate extract from Clematis intricata Bunge. [Method]The animals were
randomly divided into four groups,ten each group,including the control group,compound sodium aescinate gel group,low and high dose of
Clematis intricata Bunge group( at doses of 0. 08 and 0. 04 g /kg accordingly) for 7 days. Model of ear swelling in mice and model of paw edema
in rats were adopted to observe the anti-inflammatory effect. [Result]The ethylacetate extract from Clematis intricata Bunge could significantly
decrease the raw edema and inhibit the ear edema. [Conclusion]Ethylacetate extract from Clematis intricata Bunge has obvious anti-inflamma-
tion.
Key words Clematis intricata Bunge; Anti-inflammation effect
基金项目 陕西省教育厅自然科学基金资助项目( No. 2010JK912) 。
作者简介 杨晓军( 1975 - ) ,男,陕西绥德人,讲师,从事天然产物的研
究,E-mail: yangxiaojun2002@ 126. com。
收稿日期 2012-07-02
黄花铁线莲(Clematis intricata Bunge)是我国北方各省
普遍生长的毛莨科(Ranunculaceae)铁线莲属(Clematis)野生
本草植物,别名狗豆蔓、萝萝蔓,商品名透骨草,具有祛风除
湿和活血止痛的作用[1 -2]。民间常将其鲜草捣烂外敷治疗
关节和软组织肿痛。目前,有关黄花铁线莲药效学方面的研
究鲜有报道。为此,课题组采用现代药理学方法对其提取物
的乙酸乙酯组分进行了抗炎活性初步研究,以期为其进入临
床应用研究奠定理论基础。
1 材料与方法
1. 1 材料
1. 1. 1 研究对象。黄花铁线莲,采集于陕西省志丹县,由延
安大学生命科学院刘世鹏老师鉴定为 Clematis intricata
Bunge。
1. 1. 2 主要仪器。1012-P电子分析天平,购自北京赛多利
斯仪器系统有限公司;YLS-7A足趾容积测量仪和 YLS-Q4耳
肿打耳器,由山东医科大学提供。
1. 1. 3 主要试剂。复方七叶皂苷钠凝胶阳性对照组(批号:
20100953) ,购自山东绿叶制药有限公司;交叉菜胶,购自美
国 Sigma公司;二甲苯,购自北京益利精细化学有限公司。
1. 1. 4 试验动物。ICR小鼠,体重 18 ~ 22 g;CD 大鼠,体重
90 ~110 g,均由西安交通大学实验动物中心提供,合格证号
NO:0003240,许可证号:SCXK(陕)2007-001。
1. 2 方法
1. 2. 1 黄花铁线莲提取物的制备。将采摘的黄花铁线莲,
自然晒干至恒重,粉碎,在超声波辐射下用浓度 70%乙醇提
取,提取液减压浓缩得暗褐色浸膏;将浸膏在超声波辐射下
分散于一定量的水中,再用乙酸乙酯萃取,萃取液经减压浓
缩得乙酸乙酯组分(240. 0 g)。
1. 2. 2 小鼠耳肿胀试验[3 -4]。按文献方法,取 40 只健康
ICR小鼠,体重 18 ~ 22 g,雌雄各半,随机分为 4 组,每组 10
只,分别为模型对照组、阳性对照组(0. 005 g /kg)和黄花铁线
莲乙酸乙酯组分为高、低剂量组(分别为 0. 08 和 0. 04
g /kg)。阳性对照组和黄花铁线莲高、低剂量组每日外涂给
药 1次,连续给药 7 d,末次给药 1 h后,给 4组小鼠右耳前后
两面涂 50 μl二甲苯,左耳作正常对照;致炎 1 h后,将小鼠
脱颈椎处死,沿耳廓基线剪下 2耳,用 9 mm打孔器在左右耳
同一位置打孔,立即用电子天平上称重,右耳重量减去左耳
重量为肿胀度[5],计算抑制率。
抑制率(%)=(模型组肿胀度 -给药组肿胀度)/ 模型
组肿胀度 ×100
1. 2. 3 大鼠足跖肿胀试验[6]。按文献方法,取 40 只 SD 大
鼠,体重 90 ~110 g,雌雄各半,随机分为 4 组,每组 10 只,分
别为模型对照组、阳性对照组(0. 005 g /kg)和黄花铁线莲乙
酸乙酯组分为高、低剂量组(分别为 0. 08和 0. 04 g /kg)。阳
性对照组和黄花铁线莲高、低剂量组每日外涂给药 1 次,连
续给药 7 d,末次给药 1 h后,用容积测量法测量给药前右后
肢的容积[7],作为致炎前正常值,然后分别在大鼠右后肢足
跖皮下注射 0. 1 ml浓度 1%的角叉菜胶混悬液使其致炎;致
炎后,每隔 1 h用以上方法测右后肢足跖容积,共测量 5 次,
计算肿胀度和抑制率。
肿胀度(%)=(给药后足容积 -给药前足容积)/ 给药
前足容积 ×100;
肿胀抑制率(%)=(模型对照组足跖肿胀度 -试验组
足跖肿胀度)/模型对照组足跖肿胀度 ×100
( 下转第 14262页)
安徽农业科学,Journal of Anhui Agri. Sci. 2012,40(29):14231,14262 责任编辑 石金友 责任校对 李岩
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2004.
( 上接第 14231页)
1. 2. 4 统计学处理。应用 SPSS统计软件包分析,数据以“珋x
± S”表示,各组试验数据用 t 检验,P < 0. 05 表明有统计学
意义。
2 结果与分析
2. 1 黄花铁线莲乙酸乙酯组分对二甲苯所致小鼠耳肿胀度
的影响 由表 1 可知,与模型组比较,阳性对照组和黄花铁
线莲的乙酸乙酯组分的高、低剂量组均能够明显抑制由二甲
苯所致小鼠的耳肿胀(P < 0. 05) ,抑制率分别为 41. 6%、
48. 8%和 33. 5%。
2. 2 黄花铁线莲乙酸乙酯组分对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀
的影响 由表 2 可知,与模型对照组比较,阳性对照组和黄
花铁线莲乙酸乙酯组分的高、低剂量组均能明显抑制角叉菜
胶致大鼠足跖肿胀,而且抑制程度与复方七叶皂苷钠凝胶基
本相当。
表 1 黄花铁线莲乙酸乙酯组分对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响(珚X ±
S,n =10)
组别 剂量∥g /kg 肿胀百分率∥% 抑制率∥%
模型对照组 - 47. 11 ±3. 93 -
阳性对照组 0. 005 27. 49 ±7. 55** 41. 6
乙酸乙酯组 0. 080 24. 11 ±4. 25** 48. 8
0. 040 31. 32 ±3. 44** 33. 5
注:与对照组比较,* 为 P <0. 05,**为 P <0. 01(表 2同)。
表 2 黄花铁线莲乙酸乙酯组分对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀的影响(珚X ± S,n =10)
组别
剂量
g /kg
肿胀度∥ml
1 h 2 h 3 h 4 h 5 h
模型对照组 - 0. 53 ±0. 16 0. 89 ±0. 22 0. 85 ±0. 23 0. 88 ±0. 32 0. 84 ±0. 36
阳性对照组 0. 005 0. 27 ±0. 15** 0. 53 ±0. 13** 0. 54 ±0. 22** 0. 52 ±0. 23** 0. 34 ±0. 19**
乙酸乙酯组 0. 080 0. 34 ±0. 15* 0. 33 ±0. 10** 0. 44 ±0. 11** 0. 47 ±0. 16** 0. 48 ±0. 13**
0. 040 0. 38 ±0. 14* 0. 42 ±0. 12** 0. 56 ±0. 10** 0. 63 ±0. 14* 0. 56 ±0. 10*
3 讨论
试验二甲苯和交叉菜胶分别建立了小鼠耳肿胀模型和
足跖肿胀模型。试验结果表明,黄花铁线莲乙酸乙酯组分的
高、低剂量组能够有效抑制二甲苯引起耳肿作用,也能够抑
制角叉菜胶所致大鼠足肿胀,说明黄花铁线莲的乙酸乙酯组
分对炎症有抑制作用。
据文献报道,黄花铁线莲的化学成分主要有香豆素、黄
酮和有机酸等类成分[8 -11]。许多研究表明[12 -13],香豆素和
黄酮具有良好的抗炎作用。因此,可以推测黄花铁线莲中具
有抗炎作用的成分很可能是由乙酸乙酯萃取的低极性成分。
参考文献
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26241 安徽农业科学 2012 年