全 文 ：J TCVM
年第 6 期2011
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收稿日期：2011-08-17
基金项目：自选项目
作者简介：林 洁（1989-），女，本科在读，E-mail：tinajiejiewa@yahoo.com.cn
通讯作者：杨 敏，实验师，E-mail：yangmin_1957@163.com；刘 娟，教授，
E-mail:liujuanb@163.com
大叶斑鸠菊药效学初探
林 洁 1，杨 敏 1，刘 娟 1，2，崔大棚 1，吕 雪 1，杜林林 1
（1.西南大学荣昌校区动物医学系，重庆 402460；2.重庆市药效评价工程技术研究中心）
摘 要：目的：初探大叶斑鸠菊的药效。方法：将大叶斑鸠菊制成浓度为 1 g 生药/mL 的提取液，通过抑菌试
验、利尿试验及对鸡肾肿的治疗试验，考察其药效。结果：大叶斑鸠菊提取液对大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌有
一定抑制作用，最小抑菌浓度均为 0.25 g/mL，对金黄色葡萄球菌无抑制效果；有一定利尿作用；饲喂 0.4、
0.5、0.6 g/mL 不同剂量大叶斑鸠菊提取液，2 次/d，鸡肾肿明显减轻，鸡的存活率提高，分别为 42.86%、71.43%和
85.71%。结论：大叶斑鸠菊具有一定抑菌作用、利尿作用，对鸡肾肿有较好的治疗效果。
关键词：大叶斑鸠菊提取液；抑菌；利尿；鸡肾肿
中图分类号：S853.74 文献标识码：A 文章编号：1000- 6354（2011）06- 0016- 04
大叶斑鸠菊[Vernonia volkameriifolia（Wall.）DC.]又名
大叶鸡菊花、当毫温（《新华本草纲要》），为双子叶植物药
菊科、斑鸠菊属植物大叶斑鸠菊的茎和根。其中化学成分
有木质茎含 α-香树脂醇乙酸酯、羽扇豆醇乙酸酯（lupeol
acetate）、无羁萜、表无羁萜醇、α-香树脂醇、豆甾醇等 [1]。
具有散风除湿、利水通淋作用，主治风湿性关节炎、关节疼
痛、血淋、石淋等。主要分布于云南西部及中部以南地区、
贵州、广西、西藏等地，生于海拔 300-1600 m 的山谷灌丛
或杂木林中。由于其地理位置特殊，故研究较少。本实验室
自制大叶斑鸠菊提取液，初步研究其抑菌、利尿作用及对
鸡肾肿的治疗效果。
1 材料与方法
1.1 动物
雏鸡，9 日龄，健康；家兔，体重 1.5-2 kg，均购于西南
大学荣昌校区动物房。
1.2 药品与仪器
药品：大叶斑鸠菊（广东产），生理盐水，硫酸庆大霉素
注射液（购于重庆市方通动物药业有限公司，批号：
20090801），龙胆碳酸氢钠片（购于重庆市天龙动物药业有
限公司，批号：20091020），乙醇，二甲苯，石蜡，苏木素和伊
红染液等。仪器：RE5298A 旋转蒸发器（上海亚荣仪器
厂），B203LEDR 生物显微镜（重庆奥特光学仪器有限公
司），YP1200 型电子天平（上海精科试验仪器有限公司），
9011 切片机（上海医疗器械模具厂），ECLTPSE TE2000-S
倒置显微镜（Nikon），DHG 型电热恒温鼓风干燥箱（上海
精宏实验设备有限公司），牛津杯，染缸，烧杯，注射器，手
术器械等。
1.3 菌株
大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、巴氏杆菌均从猪
场分离获得，经西南大学荣昌校区微生物教研室鉴定保存。
1.4 菌株活化及菌悬液的制备
上述供试菌种均用适宜的培养基平板活化，扩大培
养，用无菌肉汤配制成 1.0×105 cfu/mL 菌液，备用。
1.5 大叶斑鸠菊提取液的制备
参考文献 [2]，取大叶斑鸠菊根、茎共 500 g，用水浸泡
30 min，加水没过药面 1 cm，煎煮 3 次，合并滤液，加入等体
积 95％无水乙醇，静置 24 h，抽滤，滤液旋转蒸馏至无醇味，
浓缩至每毫升含生药 1.0 g，过滤除菌，4 ℃保存备用。
1.6 最小抑菌浓度（MIC）测定
参考文献 [3]，采用试管二倍稀释法测定大叶斑鸠菊提
取液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、巴氏杆菌的
MIC，重复 3 次。
1.7 对家兔利尿的影响
参考文献 [4]，用 3%戊巴比妥钠生理盐水溶液注射麻
醉家兔，经手术完成输尿管插管。家兔随机分为对照组与
试验组，每组 8只。对照组用胃导管灌胃生理盐水 10 mL/只，
试验组灌服大叶斑鸠菊提取液 5 mL/只。记录各组家兔灌
服前 30 min 和灌服后 60、90、120 min 的尿滴数。每次记
录 5 min 尿滴数，比较前后两次观察结果，判断大叶斑鸠
菊提取液的利尿效果。
1.8 对鸡肾肿的影响
1.8.1 鸡肾肿模型建立 参照文献 [5 -7]，除空白组外，各
组雏鸡肌肉注射庆大霉素 0.2 mL，1次/d，连续注射 3 d，观
察雏鸡的生长情况。雏鸡出现精神萎靡不振、食欲降低、
羽毛蓬乱、排石灰渣样或水样稀粪等临床症状时，病理
剖解可见肾脏明显肿胀，色泽变淡，肾小管及输尿管内
积聚大量尿酸盐，呈典型“花斑肾”。严重者肾包膜外有
白色石灰样尿酸盐沉积，腹腔内有少量淡黄色腹水，证
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DOI:10.13823/j.cnki.jtcvm.2011.06.006
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明造模成功。
1.8.2 试验分组与处理 将雏鸡随机分为 6 组：空白组
（灌胃等量生理盐水），模型组（灌胃等量生理盐水），阳性
对照组（每组日粮 70 g 中添加 1%龙胆碳酸氢钠片 [8]），大
叶斑鸠菊提取液低、中、高剂量组，剂量分别为 0.4 g/mL、0.5
g/mL 和 0.6 g/mL，灌服，2 次/d，连续治疗 1 周，观察各组
雏鸡的死亡率与保护率。
1.8.3 鸡肾脏组织切片 参考文献[9，10]，最后一次给药 24 h
后处死试验动物，剖开胸腹腔，快速分离肾脏进行肉眼观
察，并进行记录，然后取出肾脏，于 10%福尔马林保存液
中固定保存。固定样本在实验室经洗涤、脱水、透明、浸
蜡、包埋等处理后，在室温下制成 3 μm 蜡片，经 H.E 染
色，中性树胶封片，生物显微镜下观察组织形态学变化。
2 结果
2.1 最小抑菌浓度测定结果
试验结果显示，大叶斑鸠菊提取液对大肠杆菌、沙门氏
菌、巴氏杆菌有一定抑菌作用，最小抑菌浓度均为 0.25 g/mL，
对金黄色葡萄球菌无抑菌效果。详见表 1。
表 1 大叶斑鸠菊提取液最小抑菌浓度（MIC）
Table 1 Minimum antibacterial concentration（MIC）of Vern-
onia volkameriifolia extract against bacteria
2.2 利尿试验
试验结果显示，与对照组相比，试验组家兔灌服大叶
斑鸠菊液后排尿量明显增加，给药前后 5 min 内的尿量差
异明显，尤其在 90 min 效果最明显。在用药 120 min 时，
尿量依然维持在较高水平，结果详见表 2。
表 2 大叶斑鸠菊提取液对家兔尿量的影响/ mL·30 min -1
Table 2 Effect of Vernonia volkameriifolia extract on urine
volume of rabbit /mL·30 min-1
注：与对照组比较 *P＜0.05，**P＜0.01。
Notes: Compared with the control，* meant P＜0.05，** meant P＜0.01.
2.3 肾脏剖检病变观察结果
剖检正常组雏鸡，可见其肾脏位于腰荐骨两旁和髂骨
的肾窝内，前端达最后椎肋骨。肾外无脂肪囊包裹，仅垫以
腹气囊的肾憩室。肾呈红褐色，长豆荚状，分为前、中、后
三部，详见图 1。剖检模型组雏鸡，可见肾脏明显肿胀，色
泽变淡，呈典型的深红色和淡黄色相间的“花斑肾”，被膜
紧张，腹腔内有少量淡黄色腹水，详见图 2。
图 1 正常组雏鸡肾脏
Figure 1 Chicken kidney in normal group
图 2 模型组雏鸡肾脏明显肿胀
Figure 2 Markedly swollen kidney in model group chicken
2.4 大叶斑鸠菊提取液对肾肿模型鸡的保护作用
试验显示，经药物治疗后各组鸡肾肿均有好转，低、
中、高剂量药物组雏鸡存活率分别为 42.86%、71.43%和
85.71%，其中，高剂量组治疗效果最佳，中、高剂量存活率
均高于阳性对照组。详见表 3。
表 3 大叶斑鸠菊对鸡肾肿的保护作用
Table 3 Protection of Vernonia volkameriifolia on chicken
renal swelling
1
0.5
0.25
0.125
浓度/g·mL-1
最小抑菌浓度
大肠杆菌 沙门氏菌 金黄色葡萄球菌 巴氏杆菌
- - + -
- - + -
+ + + +
+ + + +
对照组 0.7
试验组 0.8
组别
给药后不同时间尿量
60 min 90 min 120 min
3.2 6.1 5.1
4.7* 9.6** 5.9*
给药前 30 min
尿量
组别 动物数/只 死亡率/% 存活率/%
空白组
模型组
阳性对照组
低剂量组
中剂量组
高剂量组
7
7
7
7
7
7
0
100
42.86
57.14
28.57
14.29
100
0
57.14
42.86
71.43
85.71
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2.5 鸡肾脏组织切片观察
空白组雏鸡肾脏组织切片在显微镜下观察，其肾小管
管腔小且不规则，管壁由椎体形细胞或单层立方细胞构
成，细胞界限不清。胞核大而圆，着色淡，偏于基底部，为
正常肾脏的组织细胞结构，详见图 3 。模型组雏鸡肾脏组
织切片观察，肾脏固有结构模糊，肾小管管腔增大空虚，间
质中结缔组织显著增多，肾小管上皮细胞变性、坏死。有的
上皮细胞胞体变小，胞质浓缩，细胞核核仁消失，染色质浓
缩边集于核膜下，形成典型的新月状等，详见图 4。阳性对
照组和大叶斑鸠菊提取液高剂量组鸡肾脏的组织切片观
察，其肾脏结构的肾小管管腔小且不规则，胞核大而圆，着
色淡，偏于基底部，为正常肾脏的组织细胞结构，同空白组
肾脏基本相似，详见图 5、6。
图 3 肾脏组织结构（空白组）H.E 10×40
Figure 3 Kidney tissue slice（blank group）H.E 10×40
图 4 肾脏组织结构（模型组）H.E 10×40
Figure 4 Kidney tissue slice（model group）H.E 10×40
图 5 肾脏组织结构（阳性对照组）H.E 10×40
Figure 5 Kidney tissue slice（positive control group） H.E 10×40
图 6 肾脏组织结构（高剂量组）H.E 10×40
Figure 6 Kidney tissue slice（high dosage group）H.E 10×40
3 讨论
3.1 大叶斑鸠菊具有散风除湿、利水通淋的功效，对风湿
性关节炎、关节疼痛、血淋、石淋等有治疗作用。本试验显
示大叶斑鸠菊对大肠杆菌、沙门氏菌和巴氏杆菌均有抑制
作用，但对金黄色葡萄球菌无抑菌作用；且具有一定的利
尿作用，对人工模型鸡肾肿有一定治疗作用，其药理试验
结果与其功效相一致。
3.2 本试验显示，模型组病鸡严重脱水，被毛松乱无光
泽，爪干枯、皮下干燥。剖检可见肾脏明显肿胀，色泽变
淡，呈典型的深红色和淡黄色相间的“花斑肾”，被膜紧
张，腹腔内有少量淡黄色腹水。显微镜下观察到其肾脏固
有结构模糊，肾小管管腔增大空虚，间质中结缔组织显著
增多，肾小管上皮细胞变性、坏死。有的上皮细胞胞体变
小，胞质浓缩，细胞核核仁消失，染色质浓缩边集于核膜
下，形成典型的新月状等。而大叶斑鸠菊组相关症状明显
减轻，证明大叶斑鸠菊具有保护肾脏组织的作用。
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Primary exploration on the pharmacodynamics of Vernonia volkameriifolia（Wall.）DC.
LIN Jie，YANG Min，LIU Juan，CUI Da-peng，LV Xue，DU Lin-lin
（Department of Veterinary Medicine，Rongchang Campus of Southwest University，Chongqing 402460，China）
Abstract: Objective: Primary disscussion on the pharmacodynamics of Vernonia volkameriifolia. Methods: Vernonia
volkameriifolia was made into extraction solution with a concentration of 1 g/mL. Then bacteriostatic test，diuretic test and
treatment test for the renal swelling of chickens were carried out. Results: The minimal inhibitory concentration of Vernonia
volkameriifolia against Escherichia coli，Salmonella and Pasteurella was 0.25 g/mL，but it had no inhibitory effect on
Staphylococcus aureus. Moreover， Vernonia volkameriifolia had certain diuretic effect. The renal swelling of chicken
significantly declined when they were fed with 0.4 g/mL，0.5 g/mL and 0.6 g/mL of Vernonia volkameriifolia extract twice
daily，and the survival rate reached 42.86%，71.43% and 85.71% . Conclusion: Vernonia volkameriifolia had certain
bacteriostasis and diuresis effect，as well as it could inhibit renal swelling on chickens.
Key words: Vernonia volkameriifolia extract; bacteriostasis; diuretic effect; chicken renal swelling
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