全 文 ：2. 6　回收率试验　精密称取已知栀子苷的样品 5份 (批号
0749-200007), 分别加入一定量的栀子苷对照品 , 按供试品
处理方法处理后进样 10 μL测定 , 计算栀子苷回收率 ,结果
见表 1。
表 1　 样品回收率试验结果
编号 样品含量(m g)
加入量
(m g)
测得量
(mg)
回收率
( )
平均回收
( )
RSD
( )
1 5. 95 3. 2 9. 12 99. 06
2 5. 48 3. 6 9. 12 101. 1
3 4. 83 4. 1 9. 02 102. 2 100. 3 1. 2
4 5. 76 5. 3 11. 04 99. 8
5 5. 37 5. 1 10. 39 99. 2
2. 7　供试品溶液的制备和测定　
2. 7. 1　供试品溶液的制备　称取特木仁— 5汤 1 g精密称
定重量置于 60 m L索氏提取器中 , 加石油醚 (沸程 60 ～
90 ℃)-氯仿(3∶1)40 m L于水浴锅上加热脱脂 4 h, 放冷 ,
弃去石油醚-氯仿混合液 , 药渣挥干。加甲醇 50 m L同法提
取 10 h,取甲醇提取液置 50 mL量瓶加甲醇稀释至刻度。将
上述提取液取 2 mL, 蒸干 ,通过中性氧化铝柱(3 g, 100 ～ 150
目 , 内径 10 ～ 15 mm, 干法上柱)以甲醇-水(1∶1)洗脱置 25
mL量瓶中至刻度 ,摇匀 ,即得。
2. 7. 2　供试品溶液的测定　精密吸取供试品液 10 μL, 注
入液相色谱仪 , 测定峰面积 ,计算含量 ,结果见表 3。
表 2　 特木仁— 5汤中栀子苷的含量(n=3)
批号 含量( ) RSD( )
附属医院 1. 36 0. 41
蒙药股份公司 1. 43 0. 58
自制样品 1. 22 0. 21
3　讨论
3. 1　栀子为特木仁— 5汤中的主药之一 , 占组方的 25 ,栀
子苷为其主要活性成分之一。为提高药品质量确保疗效 ,我
们采用 HPLC对特木仁— 5汤进行了栀子苷的含量测定 , 该
H PLC法不经分离 , 直接测定其中栀子苷的含量 , 方法简便
快速 ,经加样回收试验及精密度试验 ,认为结果可靠 , 为提高
药品质量 ,该试验为特木仁— 5汤的质量标准研究奠定了良
好基础。
3. 2　特木仁— 5汤由 5味药组成 , 本试验采用索氏提取器 ,
用石油醚-氯仿回流提取纯化样品 , 能使样品中的栀子苷得
到良好分离。此法简便 , 易于操作 , 为蒙成药的质量分析提
供了简便易行的方法。
3. 3　栀子苷的测定 , 文献报道 [ 2] ,以水-甲醇(75∶25)(加入
0. 1 mo l L- 1磷酸)为流动相测定. 但此法经试验 , 不适于特
木仁— 5汤中栀子苷的测定。经反复摸索 , 以乙腈 - 0. 1
的磷酸水溶液(15∶85)为流动相 , 可使样品中栀子苷的分
离度大大提高 ,峰形尖锐 ,故本试验流动相较为适用。
参考文献:
[ 1] 　内蒙古自治区卫生厅编 ,内蒙古蒙成药标准 [ S] .赤峰:内蒙古
科学技术出版社. 1984, 268.
[ 2] 　王喜军.高效液相色谱法在中药研究室中的应用 [M ] . 哈尔
宾:黑龙江科学技术出版社. 1994, 97.
薄层扫描法测定肝乐胶囊中菝葜皂苷元的含量
许杨彪
(广西食品药品检验所 ,广西 南宁 530021)
收稿日期:2005-03-02
作者简介:许杨彪(1963～ ),男 ,广西南宁市人 ,主管药师 ,从事药品质量检验与质量标准研究 ,电话:0771-2611940。
关键词:肝乐胶囊;菝葜皂苷元;薄层扫描法
中图分类号:R927. 2　　　　　文献标识码:B　　　　　文章编号:1001-1528(2005)10-1235-02
　　肝乐胶囊由田鸡黄 、知母 、垂盆草 、连翘 、淡竹叶 、贯众 、
黄芪 、桑寄生等组成 ,具有清热解毒 , 利湿退黄 ,活血祛瘀 , 改
善肝功能 , 降酶及提高机体免疫功能。 对于湿热所致的黄
疸 , 胁痛 ,纳呆腹胀 , 口干而苦 , 恶心呕吐 , 神疲乏力 , 小便黄
短 , 急 、慢性肝炎所致的肝功能损害等症 , 经临床验证 ,疗效
显著。
本品为复方中药制剂 , 方中君药田鸡黄中的槲皮素因空
白有干扰 , 而臣药知母的主要化学成分是菝葜皂苷元 [ 1] ,故
选用知母中菝葜皂苷元作为含测指标 , 目前菝葜皂苷元的含
量测定方法有:薄层扫描法 [ 2] 、高效液相色谱法 [ 3] 、气相色
谱法 [ 4]等。本研究用薄层扫描法测定菝葜皂苷元 ,建立质量
控制指标。
1　试验仪器及试剂
日本岛津 CS-9301PC型双波长薄层扫描仪;939薄层制
1235
2005年 10月
第 27卷　第 10期
中 成 药
Chine se T raditiona l PatentM ed icine
Octobe r 2005
Vo.l 27　No. 10
板器。定量毛细管(美国产);菝葜皂苷元对照品(744-9904)
由中国药品生物制品检定所提供;所用试剂均为分析纯。
2　方法与结果
2. 1　对照品溶液的制备
精密称取菝葜皂苷元对照品 , 加苯制成浓度为 0. 5 m g
mL - 1的溶液 ,作为对照品溶液。
2. 2　供试品溶液的制备
取本品 50粒的内容物 , 精密称定 , 研细 , 取约 8 g, 精密
称定 , 置锥形瓶中 , 精密加乙醇 25 m L, 称定重量 , 加热回流
40 m in, 放冷 ,再称定重量 , 用乙醇补足减失的重量 , 摇匀 , 滤
过 , 精密量取续滤液 10 m L, 加盐酸 1 mL, 置水浴上缓慢回流
1 h, 放冷 ,滴加 40 氢氧化钠溶液至中性 , 移至 25 m L量瓶
中 , 用乙醇洗涤容器 , 洗液并入量瓶中 ,用乙醇稀释至刻度 ,
摇匀 , 滤过 ,精密量取续滤液 15 mL,置蒸发皿中 , 加水 5 mL,
置水浴上蒸至无醇味 ,移至分液漏斗中 , 蒸发皿用 70 乙醇
2 m L洗涤 ,洗液并入分液漏斗 , 再用苯 15 mL分次洗涤 , 洗
液并入分液漏斗中 , 振摇提取 , 分取苯液 , 水层再用苯提取 3
次 , 每次 10 m L, 合并苯提取液 ,用水洗涤 3次 , 每次 20 mL,
弃去水液 , 苯液置蒸发皿中 ,置水浴上蒸干 ,残渣精密加入苯
1 m L使溶解 , 作为供试品溶液。
2. 3　层析及扫描条件
取供试品溶液 5 μL, 对照品溶液 4 μL与 6 μL, 分别交
叉点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶 G薄层板
上 , 以苯-丙酮(9∶1)为展开剂 , 展开 , 取出 , 晾干 , 喷以显色
剂 [甲液:取水 25 mL,缓慢加硫酸 50 mL,放冷后 , 再加乙醇
25 mL, 摇匀;乙液:8 香草醛无水乙醇溶液。用时将甲液 5
份与乙液 1份混合 ]后 ,在 70 ℃加热 7 ～ 10 m in, 至斑点显色
清晰 , 取出 ,在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板 ,周围用胶布
固定 , 避光放置 20 m in, 供试品色谱中 ,在与对照品色谱相应
位置上 , 显相同颜色斑点。阴性对照液同时层析 , 在相同位
置上无干扰斑点检出 。见图 1。
图 1　菝葜皂苷元薄层扫描图谱
1菝葜皂苷元对照品;2供试品;3阴性对照液
　　将对照品溶液与供试品溶液点于同一薄层板上 ,依法展
开 , 与菝葜皂苷元斑点中心 ,在 400 nm ～ 700 nm波长范围内
进行扫描 , 结果对照品斑点与相对应的供试品斑点在 446 nm
处有最大吸收 , 故选择 λ=446 nm。
2. 4　标准曲线绘制
吸取菝葜皂苷元对照品溶液 (0. 48 m g mL - 1)2, 4, 6,
8, 10μL分别点于同一硅胶 G薄层板上 , 按上述条件层析 ,
扫描 ,结果表明:菝葜皂苷元在 0. 96 ～ 4. 80 μg之间 , 积分值
与点样量间线性关系良好。 回归方程为 Y =1 140. 776X -
61. 63, r=0. 999 7。
2. 5　稳定性试验
吸取供试品溶液 5 μL, 点于硅胶 G薄层板上 , 依法操
作 ,测定吸收度积分值 , 斑点扫描一次后 ,隔 20, 40, 60, 120,
180 m in重复扫描一次 ,结果斑点在 20 m in至 3 h内稳定 , 平
均吸收度积分值为 3 435. 2, RSD为 0. 78 (n =6)。
2. 6　精密度考察
2. 6. 1　同板精密度:吸取供试品溶液 5 μL, 分别于同一薄
层板上点 5个点 ,扫描测定峰面积 , 结果 RSD 为 1. 27 , (n
=5)。
2. 6. 2　异板精密度:吸取同一供试液 5μL, 分别点于 5块薄
层板上 ,扫描测定峰面积 ,结果 RSD为 1. 77 (n=5)。
2. 7　重复性试验
取同一批号的样品 , 按含量测定方法制备 5份供试液 ,
分别点于 5块薄层板上 , 测定其含量 , 平均值为 0. 111 m g /
粒 , RSD为 2. 50 (n=5)。
2. 8　回收率试验
精密称取已知含量的样品(0. 299 m g g- 1), 平行称取
5份 , 分别准确加菝葜皂苷元对照品 1. 2 mg, 按含量测定项
下供试液制备方法操作 , 制成加样供试液。按含量测定方法
试验 ,测定含量 , 计算回收率 ,结果见表 1。
表 1　 加样回收率试验结果
称样量
(g)
菝葜皂苷
元含量(m g)
菝葜皂苷元
加入量(m g)
测得量
(m g)
回收率
( )
X
( )
RSD
( )
3. 723 5 1. 11 1. 24 2. 30 96. 0
3. 563 3 1. 06 1. 32 2. 33 96. 2
3. 652 8 1. 09 1. 27 2. 34 98. 4 96. 5 1. 2
3. 804 6 1. 14 1. 24 2. 32 95. 2
3. 435 3 1. 03 1. 27 2. 26 96. 9
2. 9　样品含量测定
取 3批样品 ,分别按 2. 2项处理后 , 按 2. 3项测定条件
进行测定 ,含量测定结果见表 2。
表 2　样品中菝葜皂苷元含量测定结果(mg /粒)(n=3)
批号 1 2 3 平均 RSD( )
20030425 0. 112 0. 120 0. 116 0. 116 3. 4
20030510 0. 123 0. 119 0. 125 0. 122 2. 5
20030530 0. 113 0. 118 0. 115 0. 115 2. 2
3　讨论
3. 1　肝乐胶囊是复方制剂 , 成分复杂 ,本法经加样回收实验
及精密度实验 ,认为结果可靠 ,可作为本品的质量控制指标。
建议本品每粒含知母按菝葜皂苷元(C27H44O3)计 , 不得少于
0, 080 m g。
3. 2　在制备供试液时 , 为消除背景干扰 ,曾进行以下纯化试
验:供试品溶液过大孔树脂柱 , 用 70 乙醇洗脱 , 收集洗脱
液 ,蒸干 , 残渣加苯 1 mL使溶解 , 点样。另外取供试品溶液
过硅胶层析柱(100 ～ 200目 , 5 g, 20 mm ×200 mm), 用苯-丙
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酮(9∶1)洗脱 , 收集洗脱液 , 蒸干 ,残渣加苯 1 m L使溶解 , 点
样。结果背景均较浅 , 但斑点也较过柱前浅 , 说明吸附剂对
菝葜皂苷元有吸附作用。故选取本文方法 , 虽有浅条状背
景 , 但可用仪器背景校正功能将背景消除 , 结果满意。
参考文献:
[ 1] 　江苏新医学院编.中药大辞典(上)[M ] .上海:上海科技出版
社. 1985, 1368.
[ 2] 　陈廷清 ,曾燕林.抗病毒片的质量标准研究 [ J] .中成药 , 2000,
22(10):731-734.
[ 3] 　杨宁莲 ,杨文远.知母及制剂中菝葜皂苷元的反相高效液相色
谱测定 [ J] .分析测试技术与仪器 , 1995, 1(4):12-15.
[ 4] 　李长秀 ,张铁垣.芦笋根中菝葜皂苷元的气相色谱测定 [ J] .分
析测试学报 , 1995, 14(1):61-65.
乙肝解毒胶囊质量标准的研究
林桂涛 , 　刘　新 , 　盛华刚
(山东中医药大学中药学院 山东 济南 250014)
收稿日期:2004-03-31
作者简介:林桂涛(1963～ ),男 ,山东省栖霞市人,副教授 ,研究方向:中药药剂学 ,电话:0531-82614357。
关键词:乙肝解毒胶囊;黄芩苷;HPLC
中图分类号:R927. 2　　　　　文献标识码:B　　　　　文章编号:1001-1528(2005)10-1237-02
　　乙肝解毒胶囊为《卫生部药品标准中药成方制剂》十三
册收载的品种。处方由黄柏 、拳参 、黄芩 、大黄 、胡黄连 、土茯
苓 、黑矾 、绵马贯众组成。因本处方中含有黄柏 、黄芩 、大黄 、
黑矾 、成分之间发生反应形成难溶性的产物 , 使其质量控制
较困难 , 因此原质量标准仅对土茯苓进行了显微鉴别。 为了
较好的控制其质量 , 并为其他含有黄柏 、黄芩 、大黄处方制剂
质量标准的制定提供参考 , 对乙肝解毒胶囊进行了鉴别和含
量测定的研究。
1　仪器与试药
1. 1　试验仪器　岛津 LC-10A高效液相色谱仪。色谱柱:
K romasilC
18
(5 μm , 4. 6 mm ×25 cm)。
1. 2　药品与试剂　对照品及对照药材购于中国药品生物制
品检定所;所用试剂均为分析纯或色谱纯。乙肝解毒胶囊 ,
自制。
2　薄层鉴别:
2. 1　黄柏的鉴别 [ 1] 　取本品内容物 1 g,加 5 氢氧化钠溶
液 2 mL, 混匀 ,加氯仿 20 mL, 超声处理 30 m in,滤过 , 滤液蒸
干 , 残渣加 2 m L甲醇溶解 , 作为供试品溶液。另取黄柏对照
药材 0. 1 g,加甲醇 10 m L, 超声处理 10 m in,滤过 ,滤液作为
对照药材溶液。 再取盐酸小檗碱对照品 , 加甲醇制成每 1
mL含 0. 5 m g的溶液 , 作为对照品溶液。取阴性对照品(缺
黄柏)内容物 1 g, 同供试品溶液的制法制成阴性对照溶液。
吸取上述 4种溶液各 6 μL, 分别点于同一以羧甲基纤维素
钠为黏合剂的硅胶 G薄层板上 , 以苯-醋酸乙酯-甲醇-异丙
醇-浓氨试液(6∶3∶1. 5∶1. 5∶1)为展开剂 , 置氨蒸气饱和
的层析缸内 , 展开 , 取出 , 晾干 , 置紫外光 (365 nm)灯下检
视。供试品色谱中 , 在与对照药材色谱 、对照品色谱相应的
位置上 ,显相同颜色的荧光斑点 ,而阴性对照无相应的斑点。
结果见图 1。
图 1　黄柏的鉴别
　 1黄柏对照药材
　 2盐酸小檗碱
　 3供试品
　 4阴性对照
2. 2　大黄的鉴别 [ 1]　取本品内容物 1 g, 加甲醇 20 mL, 超
声处理 10 m in, 滤过 ,滤液蒸干 , 残渣加水 10 m L使溶解 , 再
加盐酸 1 m L,置水浴中加热 30 m in,冷却 , 用乙醚提取 3次 ,
每次 20 mL, 合并乙醚液 ,蒸干 , 残渣加氯仿 1 m L使溶解 ,作
为供试品溶液。另取大黄对照药材 0. 1 g, 同供试品溶液的
制法 ,制成对照药材溶液 。取阴性对照品(缺大黄 )内容物 1
g,同供试品溶液的制法制成阴性对照溶液。吸取上述 3种
溶液各 6μL, 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的
硅胶 G薄层板上 , 以石油醚(30 ～ 60℃)-醋酸乙酯-甲酸(15
∶5∶1)为展开剂 , 展开 , 取出 , 晾干 , 以氨气熏。供试品色谱
中 ,在与对照药材色谱相应的位置上 , 显相同颜色的斑点。
阴性对照无相应的斑点。结果见图 2。
2. 3　胡黄连的鉴别 [ 2]　取本品内容物 1 g,加无水乙醇 20
m L, 超声处理 30 m in,滤过 ,滤液蒸干 , 残渣加水 10 m L,使溶
解 ,再加盐酸 1 mL混匀 ,用乙醚提取 3次 , 每次 20 mL, 合并
乙醚液 ,蒸干 , 残渣加甲醇 2 m L使溶解 , 作为供试品溶液。
另取胡黄连对照药材 0. 5g, 同供试品溶液的制法制成对照
1237
2005年 10月
第 27卷　第 10期
中 成 药
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Vo.l 27　No. 10