全 文 ：不同炮制方法对虎耳草有效成分含量的影响
龙庆徳 ,张 旭 ,袁春杰　(贵阳医学院药学院 ,贵州贵阳 550004)
摘要　 [目的]考察不同炮制方法对虎耳草(SaxifragastoloniferaMeerb.)中有效成分含量的影响。 [方法]用酒制、酒炒、醋制、醋蒸、清
炒、盐制、蜜制和姜制等 15种炮制方法炮制虎耳草 ,并设对照。采用HPLC法分别测定不同炮制方法炮制后虎耳草中有效成分的含量。
[结果]与对照相比 ,醋制 1(100g药材中加入 30g米醋 ,加热至 80℃,炮制时间 15min)炮制的虎耳草样品中岩白菜素的含量最高;醋
制 2(100g药材中加入 40g米醋 ,加热至 100℃,炮制时间 30min)炮制的虎耳草样品中原儿茶酸的含量最高;醋制 3(100g药材中加入
20g米醋 ,加热至 80℃,炮制时间 15min)炮制的虎耳草样品中槲皮素的含量最高。综合各种不同的炮制方法 ,醋制优于其他炮制方
法 ,且以醋制 1的效果最好。 [结论]该研究可为稳定虎耳草的炮制工艺提供依据。
关键词　虎耳草;炮制方法;岩白菜素;原儿茶酸;槲皮素
中图分类号　S567　　文献标识码　A　　文章编号　0517-6611(2010)33-18749-03
EfectsofDiferentMethodsProcessingSaxifragastoloniferaMeerb.onItsContentsofActiveIngredients
LONGQing-deetal　(SchoolofPharmacology, GuiyangMedicalColege, Guizhou, Guiyang550004)
Abstract　[Objective] TheresearchaimedtoinvestigatethediferentmethodsprocessingSaxifragastoloniferaMeerb.onitscontentsofactivein-
gredients.[ Method] 15kindsofmethods, wineroasted, winefried, vinegarroasted, vinegarsteamed, fried, saltfried, honeyfried, andgingerfried,
wereusedtoprocessSaxifragastoloniferaMeerb., andcontrolwasdesigned.ThenthethecontentsofactiveingredientsweremeasuredbyHPLC.
[ Result] Theresultsshowedthatcomparingtocontrol,thebergenincontentwasthemostinSaxifragastoloniferaMeerb.sampleprocessedbyvin-
egarroasted1(30gvinegaraddingto100gSaxifragastoloniferaMeerb., heatingupto80℃, processingtime15min), theprotocatechuicacid
contentwasthemostinSaxifragastoloniferaMeerb.sampleprocessedbyvinegarroasted2(40gvinegaraddingto100 gSaxifragastolonifera
Meerb., heatingupto100℃, processingtime30min), andthequercetincontentwasthemostinSaxifragastoloniferaMeerb.sampleprocessed
byvinegarroasted3(20gvinegaraddingto100gSaxifragastoloniferaMeerb., heatingupto80℃, processingtime15min).Comprehensively
analyzingdifferentkindsofprocessingmethods, vinegarroasted1wasthebest, itwasmeantthatthebestprocessingmethodofSaxifragastolonif-
eraMeerb.was30gvinegaraddingto100gSaxifragastoloniferaMeerb., heatingupto80℃, processingtime15min.[Conclusion] Thestudy
canprovidethebasisforstabilitingtheprocessingtechnologytoSaxifragastoloniferaMeerb..
Keywords　SaxifragastoloniferaMeerb.;Processingmethods;Bergenin;Protocatechuicacid;Quercetin
基金项目　贵州省中药现代化专项 [黔科合中药专字(2007)5016号 ] 。
作者简介　龙庆德(1963-),男,贵州天柱人 ,讲师 ,从事药用植物学与
生药学方面的研究。
收稿日期　2010-07-13
　　虎耳草系虎耳草科植物虎耳草(Saxifragastolonifera
Meerb.)的全草 ,具有消炎 、解毒之功能 ,用于治疗急性中耳
炎 、风热咳嗽等疾病 ,外治大泡性鼓膜炎和风疹瘙痒 [ 1] 。其
主要成分有岩白菜素 、槲皮素-3-鼠李糖苷 、槲皮素 、原儿茶
酸 、没食子酸 、琥珀酸和反甲基丁烯二酸等 [ 2] 。其中岩白菜
素具有良好的镇咳和治疗肠胃道疾病如胃溃疡 、腹泻及便秘
的作用 [ 3] ;此外 ,还有良好的抗炎 、抗心律失常 、抗病毒和护
肝的作用 [ 4] 。 《中国药典 》(2005年版)将其收为镇咳祛痰
药 ,用于治疗慢性支气管炎 [ 5] 。虎耳草亦为贵州省少数民族
用药。因此 ,建立快速 、高效 、简单地提取虎耳草中有效成分
的工艺具有重要的现实意义。目前 ,关于加工炮制方法对虎
耳草有效成分的影响还未见报道。为此 ,笔者采用甲醇热回
流提取法分别提取各种炮制品 ,并采用高效液相色谱法比较
了不同炮制方法对虎耳草中岩白菜素 、原儿茶酸和槲皮素含
量的影响 ,以期为优化虎耳草炮制工艺和阐明炮制机理奠定
基础。
1　材料与方法
1.1　材料
1.1.1　供试药材 。虎耳草干燥药材 ,采自贵州省遵义市药
材市场 ,经覃容贵副教授鉴定为虎耳草正品(Saxifragastolo-
niferaMeerb.)。
1.1.2　主要试剂。岩白菜素 、槲皮素 、原儿茶酸 ,均由中国
药品与生物制品检定所提供;乙醇为分析纯;甲醇为分析纯;
蒸馏水;其他试剂均为分析纯 。
1.1.3　主要仪器 。LC210A岛津高效液相色谱仪 ,附 Symme-
tryC18柱 ,由美国 Waters公司生产;KW-2A水浴控温仪 ,由北
京长源实验设备厂生产;电子分析天平 ,由大连依利特科学
仪器有限公司生产;101-A型电热恒温鼓风干燥箱 ,由上海路
达实验仪器有限公司生产;JPT-02药物架盘天平 ,由慈溪市
天东衡器厂生产;100 g手提式高速中药粉碎机 ,由温岭市大
德中药机械有限公司生产。
1.2　方法
1.2.1　样品的制备。
1.2.1.1　酒制。取干燥虎耳草药材 ,除去杂质和细小的药
材 ,称取 100 g,用适量黄酒浸润 5min,待黄酒基本上溶入虎
耳草中后 ,按表 1中不同的酒炙工艺处理虎耳草 ,取出 ,晾
干 ,过滤 ,去掉细小药材和杂质。然后装入标本袋中 ,备用。
表 1　酒制工艺筛选
Table1　Wineroastedtechnologyscreening
组别
Group
黄酒重量∥g
Weight
ofricewine
炮制时间∥min
Processing
time
炮制温度∥℃
Processing
temperature
1 40 30 60
2 20 15 80
3 30 15 80
4 40 15 80
5 40 30 100
6 10 15 100
1.2.1.2　酒炒。取干燥虎耳草药材 ,除去杂质和细小的药
材 ,称取 100 g,用 10g黄酒浸润 5min,待黄酒基本上溶入虎
安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2010, 38(33):18749-18751 责任编辑　姜丽　责任校对　况玲玲
耳草中后放入炒锅 ,调至 100 ℃,用手以 15次 /min的速度翻
炒 15min,过滤 ,去掉细小药材和残渣 ,冷却。然后装入标本
袋中 ,写上标签 ,备用。
1.2.1.3　醋制。取干燥虎耳草药材 ,除去杂质和细小的药
材 ,称取 100g,用适量米醋浸润 5 min,待米醋基本上溶入虎
耳草中后 ,按表 2中不同的醋制工艺处理虎耳草 ,过滤 ,去掉
细小药材和残渣 ,冷却。然后装入标本袋中 ,备用。
表 2　醋制工艺筛选
Table2　Vinegarroastedtechnologyscreening
组别
Group
黄酒重量∥g
Weight
ofricewine
炮制时间∥min
Processing
time
炮制温度∥ ℃
Processing
temperature
1 30 15 80
2 40 30 100
3 20 15 80
1.2.1.4　醋蒸 。取干燥虎耳草药材 ,除去杂质和细小的药
材 ,称取 100g,用 20g米醋浸润 5 min,待米醋基本上溶入虎
耳草中后 ,放入蒸锅 ,蒸 1h。待虎耳草的颜色变成黑色时取
出虎耳草 ,晾干 。然后装入标本袋中 ,备用。
1.2.1.5　清炒。取干燥虎耳草药材 ,除去杂质和细小的药
材 ,称取 100g,放入炒锅中 , 100 ℃下炒至鼓起 ,表面呈紫褐
色 ,取出 ,冷却。然后装入标本袋中 ,备用 。
1.2.1.6　盐制。取干燥虎耳草药材 ,除去杂质和细小的药
材 ,称取 100g。取 2g食盐 ,放入烧杯中 ,加入 80ml水溶解 ,
浸润虎耳草干药材 5 min,待盐水基本上溶入虎耳草后放入
炒锅 ,调至 100 ℃,用手以 15次 /min的速度翻炒 30 min,过
滤 ,去掉细小药材和残渣 ,冷却。然后装入标本袋中 ,备用。
1.2.1.7　蜜制 。取干燥虎耳草药材 ,除去杂质和细小的药
材 ,称取 100g;将蜂蜜放入炒锅中 ,在 80 ℃下提炼。取炼蜜
25 g,用适量开水稀释后与虎耳草混匀 ,浸润 5 min,待炼蜜基
本上溶入虎耳草中后 ,用 100 ℃文火加热 ,炒至不黏手为度 ,
取出放凉 。然后装入标本袋中 ,备用。
1.2.1.8　姜制 。取干燥虎耳草药材 ,除去杂质和细小的药
材 ,称取 100g;取干姜 3 g,加入一定量的水 ,煮 15 min,榨取
姜汁 ,重复 1次。将姜汁与虎耳草混匀 ,浸润 5 min,待姜汁
基本上溶入虎耳草中后放入炒锅 ,调至 100 ℃,用手以
15次 /min的速度翻炒 15min,过滤 ,去掉细小的药材和残渣 ,
冷却。然后装入标本袋中 ,备用。
1.2.1.9　对照 。取干燥虎耳草药材 ,除去杂质和细小的药
材 ,称取 100g。然后装入标本袋中 ,备用。
1.2.2　岩白菜素 ,原儿茶酸和槲皮素含量的测定。
1.2.2.1　色谱条件与系统性试验。色谱柱为 AgilentEclipse
XDB-C18(4.6 mm×150.0 mm, 5 μm);流动相为甲醇 -0.1
mol/LH3PO4水溶液(13∶87, V/V);检测波长为 260 nm;柱温
为 35 ℃;流速为 1.0 ml/min;进样量为 5 μl。理论板数按岩
白菜素峰计算应不低于 7 600,按原儿茶酸计算应不低于
7 800。
1.2.2.2　对照品溶液的配制。精密称取岩白菜素和原儿茶
酸对照品适量 ,加入 50%甲醇配制成浓度依次为 0.096 0、
0.007 6 mg/ml的溶液 ,即得。
1.2.2.3　供试品溶液的配制。取供试品粉末(过 40目筛)
约 1g,精密称定 ,置于 100 ml平底烧瓶中 ,精密加入 75%甲
醇 25 ml,称定重量(精确至 0.000 1 g);回流提取 1 h,放冷 ,
称重;用 75%甲醇补足减失的重量 ,摇匀 ,过滤 ,取上清液 ,用
0.45μm微孔滤膜过滤 ,取续滤液 ,即得 。
1.2.2.4　样品测定。分别吸取对照品溶液与供试品溶液各
5 μl,注入液相色谱仪 ,按 “1.2.2.1”的色谱条件测定 ,即得。
1.2.3　槲皮素含量的测定。
1.2.3.1　色谱条件与系统适用性试验。色谱柱为 AgilentE-
clipseXDB-C18(4.6 mm×150.0 mm, 5μm);流动相为甲醇 -
0.1 mol/LH3PO4水溶液(37∶63, V/V);检测波长为 350 nm;
柱温为 35℃;流速为 1.0ml/min;进样量为 5 μl。理论板数
按槲皮苷峰计算应不低于 6 700。
1.2.3.2　对照品溶液的配制。精密称取槲皮苷对照品适量 ,
加入 50%甲醇制成浓度为 0.026 mg/ml的溶液 ,即得。
1.2.3.3　供试品溶液的配制。取供试品粉末(过 40目筛)
约 1g,精密称定 ,置于 100 ml平底烧瓶中 ,精密加入 75%甲
醇 25 ml,称定重量(精确至 0.000 1 g);回流提取 1 h,放冷 ,
称重;用 75%甲醇补足减失的重量 ,摇匀 ,过滤 ,取上清液 ,用
0.45μm微孔滤膜过滤 ,取续滤液 ,即得 。
1.2.3.4　样品测定。分别吸取对照品溶液与供试品溶液各
5 μl,注入液相色谱仪 ,按 “1.2.3.1”的色谱条件测定 ,即得。
2　结果与分析
2.1　不同炮制方法对虎耳草中岩白菜素含量的影响　由图
1可知 , 16种炮制方法制备的虎耳草样品中 ,岩白菜素的含
量存在一定的差异 ,大小顺序依次为:醋制 1(0.390 0%)>
醋制 3(0.278 0%)>清炒(0.221 0%)>对照(0.188 00%)
>酒制 3(0.182 0%)>酒制 2 (0.172 0%)>蜜制
(0.159 0%)>酒制 6(0.145 0%)>酒炒(0.138 0%)>醋蒸
(0.124 0%)>盐制(0.123 0%)>酒制 4(0.115 0%)>酒制
1(0.104 0%)=醋制 2(0.104 0%)>酒制 5(0.102 0%)>
姜制(0.015 5%)。其中 ,醋制 1炮制的虎耳草样品中岩白菜
素含量最高 ,醋制 3其次 ,清炒再次之 ,均超过 0.200 0%,且
均大于对照 ,其他炮制方法制备的虎耳草样品中岩白菜素含
量均小于对照。因此 ,以岩白菜素含量为考察指标 ,相对于
其他的炮制方法 ,醋制 1、醋制 3和清炒较适合虎耳草的
炮制。
2.2　不同炮制方法对虎耳草中原儿茶酸含量的影响　由图
2可知 , 16种炮制方法制备的虎耳草样品中 ,原儿茶酸的含
量存在一定的差异 ,大小顺序依次为:醋制 2(0.042 8%)>
酒制 5(0.037 2%)>酒制 6(0.025 4%)>醋制 1
(0.023 2%)>酒炒(0.022 6%)>盐制(0.021 5%)>醋蒸
(0.021 3%)>醋制 3(0.018 5%)>酒制 1(0.017 5%)>酒
制 4(0.014 8%)>酒制 3(0.010 6%)>清炒(0.009 4%)>
对照(0.008 9%)>酒制 2(0.008 6%)>姜制(0.008 3%)>
蜜制(0.006 3%)。其中 ,醋制 2和酒制 5炮制的虎耳草样品
中原儿茶酸含量相对较高 ,均超过 0.030 0%,且大于对照。
因此 ,以原儿茶酸含量为考察指标 ,相对于其他的炮制方法 ,
醋制 2和酒制 5较适合虎耳草的炮制 。
18750 　　　　　　　　　　安徽农业科学　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　2010年
图 1　不同炮制方法制备的虎耳草样品中岩白菜素含量
Fig.1　BergenincontentinSaxifragastoloniferaMeerb.samples
processedbydifferentmethods
图 2　不同炮制方法制备的虎耳草样品中原儿茶酸含量
Fig.2　ProtocatechuicacidcontentinSaxifragastolonifera
Meerb.samplesprocessedbydiferentmethods
2.3　不同炮制方法对虎耳草中槲皮素含量的影响　由图 3
可知 , 16种炮制方法制备的虎耳草样品中 ,原儿茶酸的含量
存在一定的差异 ,大小顺序依次为:醋制 3(0.050 0%)>酒
制 6(0.048 4%)>酒炒(0.042 6%)>醋制 1(0.041 9%)>
清炒(0.038 5%)>酒制 5(0.036 7%)>醋制 2(0.034 2%)
>酒制 1(0.033 8%)>盐制(0.032 4%)>对照(0.031 7%)
>醋蒸(0.024 3%)>姜制(0.024 2%)>酒制 3(0.022 6%)
>酒制 4(0.017 8%)>蜜制 (0.016 3%)>酒制 2
(0.014 6%)。其中 ,醋制 3、酒制 6、酒炒和醋制 1炮制的虎
耳草样品中槲皮素的含量相对较高 ,均超过 0.040 0%,且大
于对照。因此 ,以槲皮素含量为考察指标 ,相对于其他的炮
制方法 ,醋制 3、酒制 6、酒炒和醋制 1较适合虎耳草的炮制。
图 3　不同炮制方法制备的虎耳草样品中槲皮素含量
Fig.3　QuercetincontentinSaxifragastoloniferaMeerb.samples
processedbydiferentmethods
3　结论与讨论
该研究结果表明 ,经炮制后 ,虎耳草中有效成分岩白菜
素 、原儿茶酸和槲皮素成分的含量均有不同程度的变化。与
对照相比 ,醋制 1炮制的虎耳草样品中岩白菜素的含量最
高 ,醋制 3其次 ,清炒再次之;醋制 2炮制的虎耳草样品中原
儿茶酸的含量最高 ,酒制 5其次 ,酒制 6再次之;醋制 3炮制
的虎耳草样品中槲皮素的含量最高 ,酒制 6其次 ,酒炒再次
之 。综合各种不同的炮制方法 ,醋制优于其他炮制方法。
3种醋制炮制方法炮制的虎耳草样品中 ,岩白菜素的含
量:醋制 1>醋制 3>醋制 2,原儿茶酸的含量:醋制 2>醋制
1>醋制 3,槲皮素的含量为:醋制 3>醋制 1>醋制 2。因此
以醋制 1的效果最好 ,即虎耳草的最佳炮制方法为:100 g药
材中加入 30 g米醋 ,加热至 80 ℃,炮制时间 15min。
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