全 文 ：植物资源与环境学报　2010, 19(1):80-85
JournalofPlantResourcesandEnvironment
铁线莲品种 `Multi-Blue不定根的诱导
培养及其发生过程的解剖学观察
张启香 1, 2 , 胡恒康 3 , 方炎明 1, ①
(1.南京林业大学森林资源与环境学院 , 江苏 南京 210037;
2.浙江林学院林业与生物技术学院 , 浙江 临安 311300;3.江西农业大学园林与艺术学院 , 江西南昌 330045)
摘要:对适宜于铁线莲品种 `Multi-Blue (Clematis` Multi-Blue )不定芽生根培养的基本培养基进行了筛选 ,并采
用 L9(32)正交实验设计对生根培养基中 NAA和 IBA质量浓度进行了比较分析 , 对不定根形成过程中解剖结构的
变化也进行了观察。接种在 1/2MS培养基上的铁线莲品种`Multi-Blue不定芽的生根率极显著高于改良 1/2MS、
MS和 WPM培养基(P<0.01),生根率达 66.97%;在 1/2MS培养基中添加 0.05 mg· L-1 NAA,不定芽的生根效果
最好 ,生根率达 69.34%,极显著高于其他处理组(P<0.01)。研究结果表明 , 添加 0.05 mg· L-1 NAA的 1/2MS培
养基(含 30g· L-1蔗糖和 8 g· L-1琼脂 , pH5.8)为铁线莲品种`Multi-Blue 不定芽生根培养的最佳培养基。在
不定芽的茎横切面上未见潜伏根原基存在;而在接种约 1周后 ,不定芽茎基部皮层的薄壁细胞逐渐恢复分生能力 ,
出现胞质变浓 、核质增加 、液泡缩小及细胞排列紧密等变化 ,细胞开始分裂并形成分生细胞团;接种后约 2周 , 根原
基发端细胞不断分裂并逐渐形成体积较小 、染色较深的一群分生细胞 , 并出现明显的分层结构;接种后约 3周 , 细
胞继续进行平周分裂和垂周分裂 , 并分化出球形或楔形的不定根根原基;根原基在皮层中常发生弯曲或分支 , 且皮
层处的不定根加粗生长 , 最终突破皮孔并形成独立的不定根。观察结果表明 , 铁线莲品种`Multi-Blue 不定芽基
部形成的不定根根原基为诱生根原基。
关键词:铁线莲品种`Multi-Blue ;不定根;基本培养基类型;NAA;解剖结构
中图分类号:Q943.1;S685.99　　文献标志码:A　　文章编号:1674-7895(2010)01-0080-06
InductioncultureandanatomicalobservationoforganogenesisofadventitiousrootofClematis
`Multi-Blue 　ZHANGQi-xiang1, 2 , HUHeng-kang3 , FANGYan-ming1, ① (1.ColegeofForestResourcesandEnvironment, NanjingForestryUniversity, Nanjing210037, China;2.SchoolofForestryandBiotechnology, ZhejiangForestryUniversity, Lin an311300, China;3.ColegeofLandscapeandArt, JiangxiAgriculturalUniversity, Nanchang330045, China), J.PlantResour.＆Environ.2010 , 19
(1):80-85
Abstract:ThesuitablebasicmediumforrootingofadventitiousbudsofClematis` Multi-Blue hadbeen
selected, andconcentrationsofNAAandIBAinrootingmediumwerecomparativelyanalyzedbyL9(32)orthogonalexperimentaldesign.Alsoanatomicalstructurechangeoforganogenesisofadventitiousrootwasobserved.RootingrateofadventitiousbudsofClematis`Multi-Blue inoculatedin1/2MSmediumisvery
significantlyhigher, withavalueof66.97%, thanthatinmodified1/2MS, MSandWPMmedia(P<0.
01).Rootingefectofadventitiousbudsin1/2MSmediumadded0.05mg·L-1 NAAisthebest, witharootingrateof69.34%, whichisverysignificantlyhigherthanthatofothertreatmentgroups(P<0.01).ItissuggestedthattheoptimalmediumforrootingofadventitiousbudsofClematis` Multi-Blue is1/
2MSmedium(containing30g·L-1 sucroseand8 g·L-1 agar, pH5.8)added0.05mg· L-1 NAA.
Theobservationresultofanatomicalstructureshowsthatthelatentrootprimordiumisnotfoundintransversesectionofstemofadventitiousbud.Afterinoculatedaboutoneweek, theparenchymacelsin
收稿日期:2009-08-10
基金项目:浙江林学院博士启动基金项目(2008FR021);南京林业大学 “十·五 ”人才工程项目
作者简介:张启香(1975—),女 ,江苏南京人 ,博士 ,讲师 ,主要从事植物发育生物学的研究与教学工作。
①通信作者 E-mail:afang200202@yahoo.com.cn
cortexofstembaseofadventitiousbudrecovermeristematicabilitygradualywithsomechangesofcytoplasmthickening, nucleoplasmincreasing, vacuoleshrinkingandcelsarrangingclosely, andthecelsbegindevisingandformingmeristematiccelmass.Afterinoculatedabouttwoweeks, rootprimordiuminitialcelsdeviseconstantlytoformagroupofmeristematiccelswithsmalvolumeand
stainingdeepercolor, andalsotoformobviouslayerstructure.Afterinoculatedaboutthreeweeks, thecelsproceedpericlinaldivisionandanticlinaldivision, anddiferentiatetoglobalorwedgedadventitiousrootprimordium.Therootprimordiaoftenbendorbranchincortex, andadventitiousrootsincortexbeginthickeninggrowth, finalybreakthroughlenticelandform toindependentadventitiousroots.Itis
concludedthatadventitiousrootprimordiuminbaseofadventitiousbudsofClematis`Multi-Blue istheinducedrootprimordium.
Keywords:Clematis`Multi-Blue ;adventitiousroot;basicmediumtype;NAA;anatomicalstructure
　　铁线莲属(ClematisL.)植物是世界著名的观赏
植物 ,大多数种类具有攀援的特点 ,而且花色鲜艳丰
富 、花型多变 。作为垂直绿化材料 ,铁线莲属植物在
一百多年前就已被西方人喜爱并广泛使用 ,而其育种
工作则更早 。据记载 ,早在 1569年人们就在南欧发
现第 1个铁线莲属种类 ClematisviticelaL.,随后在欧
洲又陆续发现许多种类 , 并在 1853年通过对 C.
viticela和 C.integrifoliaL.的杂交育成第 1个铁线莲
杂交品种[ 1] 。铁线莲品种`Multi-Blue是铁线莲品
种 `Thepresident的变异类型 ,于 1983年在荷兰注册
为正式品种 ,该品种的花蓝紫色 、雄蕊瓣化 ,观赏价值
较高。由于铁线莲品种 `Multi-Blue难以结出可育
种子 ,因而在实际生产栽培过程中通常以扦插或组织
培养方式进行繁殖 ,但生根率较低 ,难以满足规模化
生产的需要 。
作者以铁线莲品种 `Multi-Blue的健壮组培不
定芽为供试材料进行生根培养研究 ,并对不定根发生
过程进行详细的解剖学观察 ,以期对铁线莲品种
`Multi-Blue组培苗不定根发生的培养时间和培养
条件进行精准定位 , 进而为铁线莲品种 `Multi-
Blue的快繁研究和推广应用提供良好的技术支持 。
1　材料和方法
1.1　材料
以铁线莲品种`Multi-Blue的茎尖为外植体进
行增殖培养 ,继代 3次(每月继代 1次)后 ,取生长健
壮的不定芽切成单苗接入不同生根培养基中进行生
根培养 。
1.2　方法
1.2.1　不定芽的生根培养 　以 MS、 1/2MS、改良
1 /2MS和 WPM培养基为基本培养基 ,研究不同类型
基本培养基对铁线莲品种 `Multi-Blue不定芽生根
的影响。其中 ,改良 1/2MS培养基中铁盐的添加量
为 1 /2MS培养基的 2倍 ,其余配方均与 1/2MS培养
基相同。培养过程:选择生长健壮的不定芽分别接
种到不同的基本培养基(含 0.05mg· L-1NAA、 30
g·L-1蔗糖和 8g·L-1琼脂 , pH5.8)上 ,然后置于温
度(25±2)℃、光照时间 16 h· d-1、光照度 2 400 lx
的条件下进行生根培养 ,每瓶接种 5个不定芽 ,每处
理 5瓶 ,各 3次重复 。接种 6周后统计不定芽的生根
率 ,培养期间注意观察不定芽的生根情况。
采用 L9(32)正交实验设计研究培养基中 NAA
和 IBA的质量浓度及配比对铁线莲品种 `Multi-
Blue不定芽生根的影响 , 其中 , NAA设置 0.00、
0.05和 0.10 mg·L-1 3个质量浓度梯度 , IBA设置
0.00、0.05和 0.10 mg· L-1 3个质量浓度梯度 。培
养过程:选择生长健壮的不定芽接种在添加不同激素
组合的 1/2MS培养基(含 30 g·L-1蔗糖和 8 g· L-1
琼脂 , pH5.8)上 ,然后置于温度(25±2)℃、光照时
间 16 h· d-1 、光照度 2 400 lx的条件下进行生根培
养 ,每瓶接种 5个不定芽 ,每处理 5瓶 ,各 3次重复 。
接种 6周后统计不定芽的生根数和生根率 ,并测量根
长 。
1.2.2　不定根发生的解剖学观察　从接种当天开始
直至肉眼能看到不定根为止 ,每隔 3天均于同一时间
在试管苗茎基部约 0.5cm处取样 ,每次取 3个样 ,立
即用 FAA(用体积分数 50%乙醇配制)固定液 [ 2]固
定 。采用常规石蜡切片法制片 ,使用 Leica全自动轮
转切片机切片后 ,置于 OlympusBX51显微镜下进行
观察和拍照。
1.3　数据处理
生根率和平均生根数的计算公式为:生根率 =
(生根的不定芽数 /接种的不定芽数)×100%;平均
81　第 1期　　　　　　　张启香等:铁线莲品种`Multi-Blue 不定根的诱导培养及其发生过程的解剖学观察
生根数 =不定芽的生根总数 /接种的不定芽数 。
采用 Excel统计分析程序和 SigmaPlot8.0系统
软件对实验数据进行统计和分析 ,实验数据均为 3次
重复的平均值。
2　结果和分析
2.1　铁线莲品种 `Multi-Blue不定芽生根培养的
影响因素分析
2.1.1　不同类型基本培养基对不定芽生根的影响
在不同类型的基本培养基上培养 6周后铁线莲品种
`Multi-Blue不定芽的生根率见表 1,根的生长状况
见图 1。
表 1的数据显示 ,在 1 /2MS培养基中 ,铁线莲品
种 `Multi-Blue不定芽的生根率最高 , 平均达到
66.97%,且生根速度较快 ,直接从不定芽的基部生
根 ,根的数目较多 ,根健壮 ,移栽成活率高(图 1-2)。
在 MS、改良 1/2MS和 WPM培养基中 ,不定芽的生根
率均较低 ,分别仅有 35.63%、30.20%和 24.40%,且
生根所需时间较长;在改良 1/2MS培养基中 ,大多数
不定芽的基部产生白色愈伤组织(图 1 -3, 4);在
MS培养基中不定芽的基部有少量褐色愈伤组织产生
(图 1-5),部分不定芽生根后不久就出现褐化现象;
在 WPM培养基中 ,不定芽的基部产生褐色的不定根
(图 1-6),移栽成活率较低 。
方差分析和多重比较结果显示 ,接种在 1/2MS
培养基上的铁线莲品种 `Multi-Blue不定芽的生根
率最高 ,与其他培养基间存在极显著差异 (P<0.
01),因而 ,适宜于铁线莲品种 `Multi-Blue不定芽
生根培养的基本培养基是 1/2MS培养基 。
表 1　在不同基本培养基上铁线莲品种 `Multi-Blue不定芽生根率
的比较( X±SE)1)
Table1　ComparisonofrootingrateofadventitiousbudsofClematis
`Multi-Blue indifferentbasicmedia( X±SE)1)
基本培养基
Basicmedium
生根率 /%
Rootingrate
MS 35.63±1.41Bb
1/2MS 66.97±3.41Aa
Modified1/2MS 30.20±0.91BCbc
WPM 24.40±1.99Cc
1)同列中不同的大写和小写字母分别表示在 0.01和 0.05水平上差异
显著 Diferentcapitalsandsmalletersinsamecolumnindicatethesignificantdiferencesat0.01and0.05levels, respectively.
1.示接入生根培养基的不定芽 Showingadventitiousbudsinoculatedinrootingmedium;2.示直接从不定芽基部长出的不定根(1/2MS培养基)
Showingadventitiousrootsdevelopedfromthebaseofadventitiousbud(1 /2MSmedium);3.示不定芽基部长出的白色愈伤组织(改良 1/2MS培养基)
Showingwhitecalusdevelopedfromthebaseofadventitiousbud(modified1/2MSmedium);4.示从愈伤组织中长出的不定根(改良 1/2MS培养基)
Showingadventitiousrootsdevelopedfromcalus(modified1 /2MSmedium);5.示不定芽基部形成的褐色愈伤组织(MS培养基)Showingbrowncalus
developedfromthebaseofadventitiousbud(MSmedium);6.示不定芽基部长出的褐色不定根(WPM培养基)Showingbrownadventitiousroots
developedfromthebaseofadventitiousbud(WPMmedium).
图 1　在不同类型基本培养基上铁线莲品种 `Multi-Blue的生根状况
Fig.1　RootingstatusofClematis` Multi-Blue indiferenttypesofbasicmedia
82 　　　　　　　　　　植 物 资 源 与 环 境 学 报　　　　　　　　　　　　　　　　　　第 19卷　
2.1.2　不同质量浓度 NAA和 IBA对不定芽生根的
影响 　在基本培养基优化筛选的基础上 , 采用 L9
(32)正交实验设计研究了 1 /2MS培养基中添加不同
质量浓度 NAA和 IBA对铁线莲品种 `Multi-Blue不
定芽生根的影响 ,实验结果见表 2。结果表明 ,在仅添
加 0.05mg·L-1 NAA的 1/2MS培养基上 ,铁线莲品
种 `Multi-Blue不定芽的生根效果最好 ,生根率最
高 ,达到 69.34%,而且根数和根长都优于其他处理
组 ,且与其他处理组间存在极显著差异(P<0.01)。
方差分析和多重比较结果显示 ,在添加不同质量
浓度 NAA的培养基中铁线莲品种 `Multi-Blue不定
芽的生根率存在极显著差异(P<0.01)。在添加 0.
05 mg· L-1NAA的 3组培养基上 ,不定芽的平均生根
率 最 高 , 达 到 65.97%; 培 养 基 中 NAA
质量浓度较高 (0.10 mg· L-1)时 ,不定芽基部易
产生愈伤组织。方差分析结果还表明 ,在添加不同质
量浓度 IBA的培养基中 ,铁线莲品种 `Multi-Blue不
定芽的生根率差异不显著 。因此 ,在 1 /2MS培养基中
添加 0.05 mg·L-1 NAA对铁线莲品种 `Multi-Blue
不定芽的生根培养是较为适宜的。
表 2　在添加不同质量浓度 NAA和 IBA的 1 /2MS培养基上铁线莲品
种 `Multi-Blue不定芽生根状况的比较 1)
Table2　ComparisonofrootingstatusofadventitiousbudsofClematis
`Multi-Blue in 1 /2MSmedium addeddiferentconcentrationsof
NAAandIBA1)
编号
No.
质量浓度 /mg· L-1
Concentration
NAA IBA
根长 /cm
Root
length
平均生根数
Average
number
ofroot
生根率 /%
Rooting
rate
1 0.00 0.00 0.12 1.30 0.97Df
2 0.00 0.05 0.13 1.20 1.10Df
3 0.00 0.10 0.10 1.20 0.92Df
4 0.05 0.00 2.24 4.04 69.34Aa
5 0.05 0.05 2.06 3.82 65.76Bb
6 0.05 0.10 2.00 3.74 62.80Bc
7 0.10 0.00 1.08 2.48 44.42Cd
8 0.10 0.05 1.00 2.00 42.36Cde
9 0.10 0.10 0.86 1.86 40.78Ce
1)同列中不同的大写和小写字母分别表示在 0.01和 0.05水平上差异
显著 Differentcapitalsandsmalletersinsamecolumnindicatethe
significantdiferencesat0.01and0.05levels, respectively.
2.2　铁线莲品种 `Multi-Blue不定根形成过程中
的解剖学特征
2.2.1　茎横切面的解剖结构特征 　铁线莲品种
`Multi-Blue不定芽茎横切面的解剖结构见图 2 -
1。在不定芽茎横切面上未见潜伏根原基存在 ,茎的
初生结构从外至内由表皮 、皮层和维管柱 3个部分组
成。维管柱包括中柱鞘 、初生木质部 、初生韧皮部和
髓 ,初生木质部属六原型。表皮外被角质层 ,表皮以
内是皮层 ,由数层薄壁细胞组成 ,皮层细胞排列较疏
松 ,细胞间有较大的空隙 ,并且细胞大多呈圆形 ,含有
大量可见的晶体 。在皮层的薄壁组织中 ,有时能观察
到枝迹或叶迹维管组织 ,通过连续切片可观察到与髓
相连的部分维管组织在茎中与原维管组织发生移位 ,
并形成独立的维管系统。皮层以内为维管柱 ,初生韧
皮纤维细胞呈束状排列 ,细胞体积小 、壁厚 ,细胞腔狭
小;初生木质部主要由大的螺纹导管分子 、木薄壁细
胞和木纤维分子组成 。髓位于茎的中心部位 ,形状不
规则 ,由薄壁组织构成 ,细胞呈多角形 、大小不一 、排
列紧密 ,无细胞间隙 ,染色较浅 。
2.2.2　不定根发生的解剖结构特征　在铁线莲品种
`Multi-Blue不定根形成过程中 ,部分不定芽茎基部
的皮层或初生韧皮部的部分细胞恢复分裂能力并产
生愈伤组织 ,这些愈伤组织由薄壁细胞组成 ,细胞呈
圆形 、排列较疏松 ,细胞核不明显。愈伤组织最初起
源于不定芽基部斜切面附近的皮层细胞 ,随着愈伤组
织的发展 ,部分韧皮薄壁细胞也可参与形成愈伤组
织。通过大量的切片观察 ,未发现从愈伤组织中分化
出根原基。
不同培养条件对铁线莲品种 `Multi-Blue不定
芽的生根有较明显的影响。在没有添加 NAA的培养
基中 ,细胞脱分化时间较晚;而在 NAA质量浓度为 0.
10mg· L-1的培养基中 ,根原基与愈伤组织相连 ,但
多数不定根的维管组织不能与茎直接相连 ,导致再生
植株出现假活现象。
在添加 0.05 mg·L-1 NAA的 1 /2MS培养基中 ,
铁线莲品种 `Multi-Blue不定芽的生根状况较好 。
从茎基部的横切面看 ,接种约 1周 ,皮层的薄壁细胞
就逐渐恢复分生能力 ,细胞出现胞质变浓 、核质增加 、
液泡缩小及细胞排列紧密等变化 ,并开始进行细胞分
裂 ,形成细胞核较大 、排列紧密并与周围细胞有明显
区别的分生细胞团(图 2-2)。通过对连续切片的观
察 ,发现该分生细胞团从先端开始不断分裂 ,并向根
发端细胞发育方向伸展 ,分化出几个细胞核较大 、细
胞质较浓 、染色质红色的根原基发端细胞或根原基位
点细胞;木质部细胞没有脱分化;根原基发端细胞及
其附近的部分韧皮部细胞表现出较强的分裂能力 ,细
胞染色较深。随着培养时间的持续(约为接种后 2
83　第 1期　　　　　　　张启香等:铁线莲品种`Multi-Blue 不定根的诱导培养及其发生过程的解剖学观察
周),根原基发端细胞不断分裂 ,逐渐形成体积较小 、
染色较深的一群分生细胞 ,形成分生组织团块 ,且分
生组织团块分裂区逐渐被推向顶端 ,形成较明显的分
层结构(图 2-3)。此后(约为接种后 3周),细胞继
续进行平周分裂和垂周分裂 ,逐渐分化出原始的生长
点 ,其中位于最先端的几层细胞包裹在生长点的外
面 ,成为类似根冠功能的结构 ,进而分化出呈球形或
楔形的不定根根原基(图 2-4, 5)。根原基在形成及
发育过程中 ,很少能够顺利通过韧皮部 ,在通过韧皮
部时 ,有的根原基在皮层中发生弯曲或分支。穿过韧
皮部的不定根部位较窄 ,而在皮层处的不定根则加粗
生长并突破皮孔 ,最终形成独立的不定根。在不定根
突破表皮之前 ,根原基内部已出现明显的分层现象 ,
分化成具有根冠区 、分生区及伸长区的不定根 。不定
根突出表皮后 ,维管系统分化完成 ,根部的维管组织
与茎的维管组织相连(图 2-6)。
1.示不定芽的茎横切面结构 Showingstructureofstemtransectionofadventitiousbud;2.示起源于皮层薄壁细胞的根原基原始细胞 Showingroot
primordiuminitialcelsoriginatedfromcortexparenchymacels;3.示分生组织团块Showingconglomerationofmeristem;4.示球形根原基 Showingglobal
rootprimordium;5.示楔形根原基 Showingwedgedrootprimordium;6.示不定根伸出皮孔且结构发生分化 Showingadventitiousrootextendingfrom
lenticelandhavingastructuraldiferentiation.
图 2　铁线莲品种 `Multi-Blue不定芽茎和不定根的解剖结构
Fig.2　AnatomicalstructureofstemofadventitiousbudandadventitiousrootofClematis` Multi-Blue
3　讨论和结论
在植物的组织培养过程中 ,生根培养是建立植物
快繁体系的重要步骤之一 ,其中基本培养基类型的选
择至关重要 ,不同植物的生根过程对基本培养基的要
求存在较大差异 。研究结果显示:MS培养基为孝顺
竹 〔Bambusamultiplex(Lour.)RaeuschelexJ.A.etJ.
H.Schult.〕植株再生过程中生根培养的最佳基本培
养基[ 3] ;核桃 (JuglansregiaL.)品种试管嫩茎生根的
最佳基本培养基为 DKW培养基 [ 4] ;对樟子松(Pinus
sylvestrisL.var.mongolicaLitv.)不定根诱导的最佳
基本 培 养 基 为 1/4MS培 养 基 [ 5] ;西 洋 杜 鹃
(RhododendronhybridumHort.)生根的最佳基本培养
基为 Read培养基 [ 6] ;姜洪波等[ 7]认为 ,以 1/2MS培
养基为基本培养基对威灵仙 (Clematischinensis
Osbeck)增殖苗进行生根培养 ,培养 20 d左右生根率
达 100%;Leifert等[ 8] 也认为 , 对绣球藤 (Clematis
montana`Rubens )进行培养 ,应以 1/2MS培养基为
基本培养基 。作者的研究结果显示 ,与 MS培养基 、改
良 1/2MS培养基和 WPM培养基相比 ,以 1/2MS培养
基为基本培养基 ,铁线莲品种`Multi-Blue不定芽的
生根效果最佳 ,生根率达到 66.97%,并且该条件下形
成的不定根色泽淡黄 、幼茎基部无愈伤组织产生 。表
明盐分浓度较低的培养基有利于铁线莲品种 `Multi-
Blue不定根的形成 。
生长调节物质可改变植物体内源激素的水平 ,通
过调节内源激素水平进而对细胞分化和发育产生作
84 　　　　　　　　　　植 物 资 源 与 环 境 学 报　　　　　　　　　　　　　　　　　　第 19卷　
用;生长素具有调节细胞分裂周期 、实现细胞有序分
裂的作用 ,与根原基发端密切相关 ,通常用于不定根
诱导的生长素类物质有 NAA和 IBA等。本研究结果
表明 ,不同生长素类物质对铁线莲品种 `Multi-Blue
不 定芽生根的效应不同 , 较低质量浓度(0.05
mg·L-1)的 NAA和 IBA有利于铁线莲品种 `Multi-
Blue不定芽的生根 ,且作者前期的研究结果也表明 ,
在铁线莲不定芽生根过程中 , NAA对不定芽的诱导效
应是 IBA的 2倍;而 NAA和 IBA质量浓度较高则易
引起不定芽基部形成愈伤组织 ,且 NAA的诱导效应
是 IBA的 2 ～ 4倍 。这一研究结果与李明军等[ 9]的研
究结果较一致。
不同植物种类的不定根根原基的起源部位不尽
相同 ,在木射线薄壁细胞 、维管形成层 、皮层 、髓薄壁
组织及愈伤组织等处均可形成根原基[ 10-11] 。不定根
是由根原基发育而来的 ,一般插穗的不定根根原基按
形成时间可分为潜伏根原基(或先生根原基)和诱生
根原基 ,其中 ,潜伏根原基是在原株发育早期产生的 ,
形成后一直处于休眠状态 ,直至扦插到适宜环境条件
下才继续发育形成不定根;而诱生根原基是在扦插后
形成的 。在不定根发生过程中 ,根原基的形成至关重
要 ,其中包括薄壁细胞脱分化 、细胞再分化 、分裂及扩
大形成分生组织 、不定根形成等过程 [ 12] 。在铁线莲
品种`Multi-Blue的不定芽生根过程中 ,不定芽幼茎
中不存在根原基;接种约 1周后细胞开始脱分化 ,位
于皮层或初生韧皮部某一位置的薄壁细胞的细胞核
变大 、细胞质浓缩 ,并恢复分裂能力直接形成根原基 ,
继而发育成不定根 ,且形成的不定根通过皮孔伸出茎
外 ,该过程与柃木 (EuryajaponicaThunb.)[ 13] 扦插生
根的过程较相似。因此 ,可以认为铁线莲品种 `Multi
-Blue不定芽形成的不定根根原基为诱生根原基 。
铁线莲品种 `Multi-Blue不定根诱导培养与不
定根发生的解剖观察结果具有高度的一致性。在添
加 0.05 mg·L-1 NAA的 1/2MS培养基中 ,生长 1周
的铁线莲品种`Multi-Blue不定芽幼茎基部皮层的
薄壁细胞恢复分裂能力 , 2周后根原基发端细胞不断
分裂并形成较明显的分层结构 , 3周左右分化出球形
或楔形的不定根根原基 ,且不定芽的生根率最高(达
到 69.34%),而且根数和根长等指标也都优于其他
培养基 ,因此 ,添加了 0.05 mg·L-1NAA的 1/2MS培
养基(含 30 g·L-1蔗糖和 8 g· L-1琼脂 , pH5.8)是
铁线莲品种 `Multi-Blue茎尖不定芽生根培养的最
佳培养基。
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85　第 1期　　　　　　　张启香等:铁线莲品种`Multi-Blue 不定根的诱导培养及其发生过程的解剖学观察