全 文 ：湖北中医学院学报
Journal of H ubei Colleg e of TCM
2006 年 6 月第 8 卷第 2 期
June. 2006 , Vol. 8 , No. 2
取没食子酸完全 , 并除去大量干扰成分 , 效果理想。 比较了
Reliasil C18(4. 6mm×250mm , 5μm)柱与 Agilent Zorbax SB-C18
柱 ,结果表明:Agilent Zo rbax SB-C18柱分离效果良好。 对流动
相水-甲醇-冰乙酸的多种比例进行了比较 , 认为水-甲醇-冰乙酸
(81∶18∶1)较理想 ,可使供试品中没食子酸达到理想分离。
该方法简便灵敏 ,结果准确 , 可用于咽宁含片制剂中没食子
酸的含量测定。
参考文献:
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研究[ J] .湖北中医学院学报 , 2002 , 4(3):36-38.
(收稿日期:2005 - 10- 10　　编辑:郑晓屏)
　　基金项目:湖北省科技厅资助项目 , [ 2001AA304A] 。
　　作者简介:王光忠(1965-),男 ,湖北中医学院药学院副研究员。 *通讯作者:刘焱文 ,湖北中医学院教授 ,博士生导师。电话:027- 88920834。
高效液相色谱法测定菝葜中白藜芦醇的含量
王光忠 , 李秋怡 , 徐淑珍 , 干国平 , 刘焱文*
(湖北中医学院药学院 , 湖北 武汉 430061)
　　摘要:目的　建立高效液相色谱法测定菝葜中白藜芦醇含量的方法。方法　采用 KromasilTM C18(200mm× 4. 6mm ,
5μm)色谱柱;流动相:甲醇-水(40∶60);流速:0. 8ml /min;检测波长:303nm。结果　线性范围为 0. 0772 ～ 1. 2352μg ,
r=0. 9998 ,平均回收率为 100. 49%, RSD=1. 03%。结论　该法简便 、快速 、灵敏 、重现性好 ,适用于菝葜药材的质量控制。
　　关键词:菝葜;白藜芦醇;高效液相色谱法;含量测定;质量控制
　　中图分类号:R284. 1　　　　　文献标识码:A　　　　　　文章编号:1008 - 987X(2006)02 - 0032 - 02
Determination of Resveratrol in Smilax China L. by HPLC
(School of Pha rmacy , Hubei Co llege o f T raditional Chinese Medicine ,Wuhan 430061)
WANG Guang-zhong , LI Q iu-yi , XU Shu-zhen , et al
　　Abstract:　Objectiv e:To establish a HPLC method for the determina tion of resv erat rol in smilax china L. . Methods:
RP-H PLC was used to quantitative analy sis. The K romasilTM C18 column (200mm ×4. 6mm , 5μm) w as used , and mobile
phase w as composed of methanol-w ater(40 ∶60). Detection waveleng th w as at 303nm , the flow rate w as 0. 8ml /min.
Results:The linea r range o f resver atro l w as 0. 0772 ～ 1. 2352μg , r=0. 9998. The ave rage recovery of resver atro l w as 100.
49%, RSD=1. 03%. Conclusion:The method is proved to be simple , rapid , accura te , reproducible , and suitable fo r content
determina tion of the smilax china L .
　　Key words:Smila x china L. ;Resve ratro l;H PLC;Determina tion;Quality contro l
　　菝葜又名金刚藤 , 来源于百合科菝葜属植物菝葜 Smila x
china L .的干燥根茎 , 具有袪风利湿 ,解毒散瘀之功效 ,临床上用
于筋骨酸痛 ,小便淋漓 , 带下量多 , 疔疮痈肿等症[ 1] 。金刚藤中
含有皂苷 、黄酮及白黎芦醇等多种成分[ 2] 。薯蓣皂苷元含量测
定方法文献报道较多[ 3] ,但菝葜中白藜芦醇的含量测定方法未
见报道。笔者采用高效液相色谱法测定了菝葜中白藜芦醇的含
量 ,方法简便 、快速 、灵敏 、重现性好 , 可用于菝契药材的质量
控制。
1　仪器与试剂
高效液相色谱仪:Agilent 1100 系统;超声波清洗机;白藜芦
醇对照品由湖北中医学院中药资源与中药化学省级重点实验室
提供 ,纯度 98. 4%, 甲醇为色谱纯 , 水为双蒸水。菝葜药材分别
采自湖北麻城 、通城 、大冶。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件
色谱柱:KromasilTM C18(200mm×4. 6mm , 5μm);流动相:甲醇-
水(40∶60);检测波长 :303nm;流速:0.8ml /min;柱温:30℃。
2. 2　对照品溶液的制备
精密称取白藜芦醇对照品适量 , 加甲醇制成 0. 015mg /ml的
对照品溶液。
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June. 2006 , Vo l. 8 , No. 2 湖北中医学院学报Journal of H ubei Colleg e of TCM
2. 3　供试品溶液的制备
取菝葜药材粉末约 0. 5g ,精密称定 , 置 50ml量瓶中 ,加入甲
醇 40ml , 超声处理 40min , 放置至室温 , 加甲醇至刻度 , 摇匀 , 滤
过 ,取续滤液作为供试品溶液。
2. 4　系统适用性考察
取供试品溶液依法测定 , 记录色谱图 , 结果白藜芦醇的保留
时间为 14. 50min , 理论板数大于 5000 , 与相邻峰的分离度大于
1. 5 , 见图 1。
A-对照品　　　B-供试品
图 1　供试品溶液的高效液相色谱图
2. 5　线性关系的考察
精密称取白藜芦醇对照品 3. 86 mg ,置 25ml量瓶中 , 用甲醇
溶解 ,并定容至刻度 , 摇匀 ,备用。精密吸取此溶液0. 5 , 1. 0 , 2. 0 ,
4.0 ,8. 0ml置 10ml量瓶中 ,用甲醇稀释至刻度,摇匀 ,制成待测对照
品溶液。精密吸取上述不同浓度对照品溶液各 10μl , 注入高效液相
色谱仪中 ,按上述色谱条件测定峰面积。以对照品进样量为横坐标,
色谱峰面积为纵坐标, 绘制标准曲线。经线性回归 , 白藜芦醇的回
归方程式为:Y=7576. 13X - 51. 72 r=0. 9998 , 白藜芦醇在 0. 0772 ～
1.2352μg范围内线性关系良好。
2. 6　精密度试验
取白藜芦醇对照品溶液 ,按上述色谱条件进行测定。重复进
样 5 次 ,测定白藜芦醇峰面积 , 结果 RSD 为 1. 11%, 表明仪器精
密度良好。
2. 7　稳定性试验
取供试品溶液 ,按上述色谱条件分别置 0、2、4 、6 、8h 测定 ,结
果 RSD为 0. 96%, 表明样品溶液制备后 8h 内稳定。
2. 8　重复性试验
精密称取同一样品 5 份 , 依样品测定方法测定 , 结果样品
中白藜芦醇的含量为 2. 8896mg /g , RSD为1. 44%。
2. 9　加样回收率试验
精密称取已知白藜芦醇含量的样品 5 份 ,按上述样品溶液制
备方法制备供试品溶液 , 测定。 结果平均加样回收率为
100. 49%, RSD为 1. 03%, 见表 1。
表 1　回收率试验结果
编号 样品中含有量(mg)
对照品加
入量(mg)
测得总量
(mg)
回收率
(%)
平均
(%)
RSD
(%)
1 1. 4824 1. 544 3. 0468 101. 32
2 1. 4688 1. 544 3. 0164 100. 24
3 1. 4858 1. 544 3. 0284 99. 91 100. 49 1. 03
4 1. 4341 1. 544 2. 9661 99. 22
5 1. 4199 1. 544 2. 9910 101. 75
2. 10　样品中白藜芦醇的测定
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 10μl , 注入高效
液相色谱仪 , 记录色谱图 , 以峰面积按外标法计算 ,结果见表 2。
表 2　样品中白藜芦醇测定结果(n=3)
样品来源 含量(%) RSD(%)
湖北麻城 0. 29 1. 03
湖北通城 0. 17 1. 26
湖北大冶 0. 08 1. 39
3　讨论
3. 1　提取溶媒的选择
分别采用甲醇 、乙醇 、70%乙醇提取制备供试液。测定结果
表明:用甲醇提取白藜芦醇的含量较高 , 且杂质少。
3. 2　提取方法的选择
分别采用甲醇加热回流提取及超声提取 , 提取时间均为
40min。测定结果表明:采用超声提取 , 样品中白黎芦醇含量略
高 , 且操作方便 ,故选用超声提取的方法。
3. 3　提取时间的确定
比较了不同提取时间(20 , 40 , 60min)对样品中白藜芦醇提
取率的影响。结果表明:超声提取 40 min 后 , 白藜芦醇已提取
完全。
我国菝葜植物分布广泛 , 同时各地使用的菝葜种类十分混
乱 , 其原植物来源多达 14种[ 4] , 品质差异较大 , 因此 ,建立菝契药
材中白藜芦醇的含量测定方法 , 对于控制菝葜药材的质量具有
十分重要意义 。
参考文献:
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京:化学工业出版社 , 2005. 216.
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[ 4] 　吕翼 ,芦金清 ,裴学军. 药用金刚藤名实考证[ J] . 湖北中医杂志 ,
2002 , 24(5):47-48.
(收稿日期:2005 - 11- 11　　编辑:郑晓屏)
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